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文檔簡介
《有機(jī)污染場地土壤生物修復(fù)技術(shù)規(guī)范
微生物固定化生物炭載體》
(征求意見稿)
編制說明
《有機(jī)污染場地土壤生物修復(fù)技術(shù)規(guī)范微生物固定化生物炭載體》編制組
二〇二四年一月
1工作概況
1.1任務(wù)來源
伴隨著工業(yè)發(fā)展,石油等天然有機(jī)物化工成為社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要基礎(chǔ),但
天然有機(jī)物產(chǎn)品在開采、冶煉、運(yùn)輸和使用過程中往往產(chǎn)生大量有機(jī)污染物,如
多環(huán)芳烴(PAHs)、多氯聯(lián)苯(PCBs)、多溴聯(lián)苯醚(PBDEs)并排放到周邊環(huán)
境中,造成土壤、水體、空氣嚴(yán)重污染。當(dāng)下土壤有機(jī)物污染問題日益嚴(yán)重,不
僅破壞了生態(tài)平衡,還長期、持續(xù)地威脅著人類健康及動植物的生長繁殖。我國
的土壤污染主要集中于農(nóng)業(yè)發(fā)展及工業(yè)建設(shè)領(lǐng)域,主要表現(xiàn)在經(jīng)濟(jì)發(fā)展較優(yōu)的區(qū)
域,但呈現(xiàn)出由城市向農(nóng)村、局部向整體的擴(kuò)散趨勢,對人民的安全構(gòu)成潛在的
威脅,對國民經(jīng)濟(jì)造成直接或間接的影響。為加強(qiáng)土壤污染防治,2016年5月
28日,國務(wù)院于印發(fā)《土壤污染防治行動計劃》,將治理土壤污染確定為向污染
宣戰(zhàn)的三大行動計劃之一。2021年11月2日,《中共中央、國務(wù)院關(guān)于深入打
好污染防治攻堅戰(zhàn)的意見》明確要求以更高標(biāo)準(zhǔn)“打好凈土保衛(wèi)戰(zhàn)”。污染土壤
修復(fù)是當(dāng)今環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域技術(shù)發(fā)展的熱點(diǎn)領(lǐng)域,也是最具挑戰(zhàn)的研究方向之一。
目前,土壤有機(jī)污染修復(fù)技術(shù)發(fā)展快速,微生物修復(fù)技術(shù)因其高效、低成本、
無二次污染的優(yōu)點(diǎn)得到廣泛應(yīng)用,已成為主要的有機(jī)污染修復(fù)技術(shù)之一。其中固
定化微生物技術(shù)是推進(jìn)微生物修復(fù)的一種重要方法,該技術(shù)將游離的微生物限定
在載體材料內(nèi),在保持生物活性的條件下使其高度密集,為其提供適宜的生存環(huán)
境條件,能夠讓固定化微生物迅速增殖。與傳統(tǒng)未進(jìn)行固定化的游離、懸浮微生
物,處理技術(shù)相比,微生物固定化技術(shù)能夠保持微生物的生物活性,增加微生物
的數(shù)量,并且載體材料提供的微環(huán)境能夠使固定的微生物具有很好的重復(fù)利用性。
因此,微生物固定化技術(shù)在污染土壤修復(fù)領(lǐng)域具有極大的發(fā)展?jié)摿蛻?yīng)用前景。
微生物固定化技術(shù)的研發(fā),將有效遏制土壤中有機(jī)污染物的污染情況,如何
推進(jìn)技術(shù)研發(fā)與相關(guān)體系建設(shè),既是當(dāng)前土地生態(tài)保護(hù)的核心問題,也是區(qū)域可
持續(xù)發(fā)展的重大戰(zhàn)略問題。
2020年國家重點(diǎn)研發(fā)計劃“場地土壤污染成因與治理技術(shù)”專項中“中低濃
度典型有機(jī)污染場地生物修復(fù)關(guān)鍵材料與技術(shù)”項目的“長效廣譜生物修復(fù)載體
1
與固定化菌劑制備技術(shù)”(2020YFC1808802)課題,針對有機(jī)污染土壤場地修復(fù)
過程中生物載體材料存在的時效短、效率低及國外同類產(chǎn)品成本高等共性問題,
課題旨在瞄準(zhǔn)典型有機(jī)污染場地近自然、低成本與高效修復(fù)的研究前沿,提出應(yīng)
用于有機(jī)污染土壤微生物修復(fù)的配套工藝與技術(shù)規(guī)范。
在上述現(xiàn)狀和背景下,本文件作為課題指標(biāo)之一,由華南理工大學(xué)牽頭,針
對微生物固定化技術(shù)和污染場地修復(fù)行業(yè)現(xiàn)狀,結(jié)合國家相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)和
規(guī)范的要求,本文件規(guī)定了用于有機(jī)污染土壤生物修復(fù)的微生物固定化生物炭載
體的適用范圍、術(shù)語和定義、產(chǎn)品要求、檢測方法、檢驗規(guī)則、包裝、標(biāo)識、運(yùn)
輸和貯存等相關(guān)要求。
1.2目的、意義及必要性
微生物固定化生物炭載體與微生物固定化技術(shù)結(jié)合在一起,用于制備生物炭
固定化菌劑,該技術(shù)能克服投加到修復(fù)現(xiàn)場中的游離高效降解微生物與土著菌的
惡性競爭或難以適應(yīng)環(huán)境的問題,并延長微生物的存活時間且保持一定的活性,
達(dá)到長效廣譜的效果。因此,在有機(jī)污染土壤修復(fù)領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景。理想
的微生物固定化生物炭載體的主要作用是提供微生物生存的微環(huán)境,載體材料的
比表面積、孔道結(jié)構(gòu)、機(jī)械強(qiáng)度等因素均會顯著影響微生物的固定化過程,品質(zhì)
良好的微生物固定化生物炭載體與優(yōu)勢降解菌制備成的菌劑才能獲得良好的土
壤修復(fù)效果。
目前國內(nèi)沒有明確的關(guān)于微生物固定化生物炭載體的標(biāo)準(zhǔn),在相關(guān)領(lǐng)域中,
主要有關(guān)于菌劑本身的標(biāo)準(zhǔn),例如:GB20287農(nóng)用微生物菌劑,一些載體材料
方面的標(biāo)準(zhǔn)適用范圍并非針對微生物固定化方面;國外標(biāo)準(zhǔn)中對于微生物固定化
方面較多的為海藻酸鈉凝膠、藻酸鹽凝膠體等固定或封裝活細(xì)胞或組織的標(biāo)準(zhǔn)指
南,例如:ASTMF2315系列標(biāo)準(zhǔn),同樣并非針對微生物固定化載體方面。
為了推動微生物固定化生物炭載體產(chǎn)品及有機(jī)污染土壤生物修復(fù)的規(guī)范化,
本文件編制以現(xiàn)有研究現(xiàn)狀和技術(shù)水平為基礎(chǔ),以相關(guān)法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)為指導(dǎo),制定微
生物固定化生物炭載體產(chǎn)品要求。標(biāo)準(zhǔn)的制定使微生物固定化生物炭載體產(chǎn)品的
技術(shù)要求和檢測方法有章可循,形成統(tǒng)一、規(guī)范、有效的工作流程,為相關(guān)專家
部門對產(chǎn)品的應(yīng)用提供科學(xué)的管理依據(jù),還有望對提高有機(jī)污染土壤修復(fù)效果起
2
到推進(jìn)作用,具有綠色、環(huán)境友好的特點(diǎn)。
1.3編制單位及人員
本文件起草單位:華南理工大學(xué)、上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)、北京建筑大學(xué)、浙江
科峰生物技術(shù)有限公司、北京寶樹農(nóng)業(yè)科技集團(tuán)有限公司、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)
技術(shù)推廣中心、貴州英冠農(nóng)業(yè)生態(tài)科技有限公司、湖南大三湘茶油股份有限公司、
廣州市綠風(fēng)生物技術(shù)有限公司、新疆維吾爾自治區(qū)霍爾果斯市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。
本文件主要起草人:浦躍武、李法云、高大文、章亭洲、陳肖曉、許盼、李
凱、張寶河、胡樹文、陶樹明、程文紅、蒙嶸、周乘風(fēng)、高正、田華、楊友志、
劉新魯、阮燕珠、代鎮(zhèn)、娜地葉·庫爾班。
1.4主要編制過程
1.4.1起草階段
2022年6月-11月:華南理工大學(xué)等起草單位成立了本文件編制工作起草小
組,組織標(biāo)準(zhǔn)編制工作。標(biāo)準(zhǔn)起草工作組制定了標(biāo)準(zhǔn)編制工作計劃、編寫大綱、
任務(wù)分工及各階段進(jìn)度時間。同時,標(biāo)準(zhǔn)起草工作組成員認(rèn)真學(xué)習(xí)了GB/T1.1—
2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則》,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)制定工作
程序的各個環(huán)節(jié),進(jìn)行了探討和研究。
標(biāo)準(zhǔn)起草工作組經(jīng)過技術(shù)調(diào)研、咨詢,收集、消化有關(guān)資料,對當(dāng)前國外先
進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的情況以及國內(nèi)微生物固定化生物炭載體的生產(chǎn)使用現(xiàn)狀進(jìn)行討論,確定
標(biāo)準(zhǔn)起草的總體框架和主要內(nèi)容;結(jié)合微生物固定化生物炭載體的研制技術(shù)、應(yīng)
用現(xiàn)狀及技術(shù)發(fā)展趨勢,以微生物固定化生物炭載體的生產(chǎn)及應(yīng)用為主要參考依
據(jù),于2022年10月編寫完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《中低有機(jī)污染土壤微生物修復(fù)技術(shù)規(guī)范
微生物固定化生物炭載體》初版草案稿。
1.4.2討論階段
2022年11月4日:參加“長效廣譜生物修復(fù)載體與固定化菌劑制備技術(shù)”
技術(shù)規(guī)范指南立項申請指導(dǎo)會議,會后形成修改稿;
3
2023年1月13日-18日:參加“長效廣譜生物修復(fù)載體與固定化菌劑制備
技術(shù)”技術(shù)規(guī)范指南專家咨詢會和課題組內(nèi)討論會議,會后形成第二版修改稿;
2023年6月30日:收到中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會反饋技術(shù)指南專家修改意見,根
據(jù)專家意見對草案進(jìn)行修改;
2023年7月17日:參加課題組內(nèi)技術(shù)規(guī)范指南修改討論會,會后對草案進(jìn)
行進(jìn)一步修改;
2023年8月16日-19日:參加課題技術(shù)規(guī)范指南立項準(zhǔn)備會議及修改討論
會,會后形成第三版修改草案稿。
1.4.3立項階段
2023年8月26日:參加中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會召開的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項論證會,經(jīng)
專家審批后同意立項,并根據(jù)會議專家給出意見在會后對草案進(jìn)行詳細(xì)修改。
2023年9月16日:參加課題技術(shù)規(guī)范指南推進(jìn)修改討論會,會后對草案進(jìn)
行修改,形成征求意見稿。
2023年12月29日:參加中國環(huán)境科學(xué)學(xué)會召開的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿技
術(shù)審查會,經(jīng)專家審批后同意修改完善后公開征求意見,并根據(jù)會議專家給出意
見在會后對征求意見稿進(jìn)行進(jìn)一步修改。
2制定原則
本文件的制定工作遵循“統(tǒng)一性、協(xié)調(diào)性、適用性、一致性、規(guī)范性”的原
則,本著先進(jìn)性、科學(xué)性、合理性和可操作性的原則,按照GB/T1.1—2020給出
的規(guī)定起草。
本文件的編制充分考慮了現(xiàn)有法規(guī)政策及相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求,規(guī)
定的采集標(biāo)準(zhǔn)定義清晰,并結(jié)合微生物固定化生物炭載體的研制技術(shù)、應(yīng)用現(xiàn)狀
及技術(shù)發(fā)展趨勢,借鑒了實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用過程中的相關(guān)技術(shù)指標(biāo),使標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容符合
實(shí)際應(yīng)用。
4
3編制依據(jù)
3.1技術(shù)依據(jù)
生物炭是一種碳質(zhì)固體材料,在限氧條件下生物質(zhì)的高溫裂解過程中產(chǎn)生,
原料中木質(zhì)素、纖維素和半纖維素由于溫度升高引起熱解,大分子裂解成小分子,
從而產(chǎn)生生物質(zhì)油、生物炭和可燃性氣體。高溫裂解有助于提高原料的比表面積
和孔隙率,形成多孔結(jié)構(gòu),從而改變生物炭的性質(zhì)。
生物炭結(jié)構(gòu)疏松多孔,比表面積大,富含活性官能團(tuán),電荷密度高,能夠吸
持大量水分與養(yǎng)分,既對微生物有良好的固定作用,又對土壤中的優(yōu)勢降解菌形
成保護(hù)環(huán)境,更好發(fā)揮降解作用,還可改變土壤的理化性質(zhì),顯著提高土壤養(yǎng)分
保持力和有效性、土壤陽離子交換能力、土壤保水能力及結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。
對于應(yīng)用于固定化菌劑制備的微生物固定化生物炭載體,其指標(biāo)如碳含量、
機(jī)械強(qiáng)度、比表面積、pH等均可能影響載體自身的固定化性能,有效固菌容量
則是產(chǎn)品的核心指標(biāo),直接反映了載體的固定化能力。此外,載體體現(xiàn)的長效廣
譜的效果為載體保質(zhì)期大于180天、能固定2種或2種以上用于土壤修復(fù)的優(yōu)勢
微生物。
3.2法律法規(guī)依據(jù)
本文件依據(jù)的法律法規(guī)及政策主要有:《中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法》、《中
華人民共和國土壤污染防治法》、《土壤污染防治行動計劃》、《污染地塊土壤環(huán)境
管理辦法》、《農(nóng)用地土壤環(huán)境管理辦法(試行)》等。
3.3標(biāo)準(zhǔn)文件依據(jù)
本文件引用下列標(biāo)準(zhǔn)成為本文件的條款,所涉及內(nèi)容符合國家對微生物固定
化生物炭載體等產(chǎn)品的要求,與相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范無沖突:
GB4789.2食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定
GB/T7702.20煤質(zhì)顆?;钚蕴吭囼灧椒兹莘e和比表面積的測定
GB/T8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定
GB/T12496.2木質(zhì)活性炭試驗方法粒度分布的測定
GB/T12496.3木質(zhì)活性炭試驗方法灰分含量的測定
5
GB/T12496.4木質(zhì)活性炭試驗方法水分含量的測定
GB/T12496.6木質(zhì)活性炭試驗方法強(qiáng)度的測定
GB/T12496.7木質(zhì)活性炭試驗方法pH值的測定
GB/T23349肥料中砷、鎘、鉻、鉛、汞含量的測定
NY/T883農(nóng)用微生物菌劑生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程
SN/T3005有機(jī)化學(xué)品中碳、氫、氮、硫含量的元素分析儀測定方法
3.4組內(nèi)前期研究依據(jù)
3.4.1生物炭固定化微生物對石油烴污染土壤的修復(fù)研究
本研究選取遼河油田采油區(qū)場地石油烴污染土壤為研究對象,土壤總石油烴
含量為9.62g/kg,pH值為8.92,有機(jī)碳含量為22.43g/kg。
生物炭原料為玉米秸稈、蘆葦秸稈、松針,依次制得三種不同生物炭:灰分
含量分別為8.12%、6.7%、12.4%,碳含量均高于60%、其中蘆葦生物炭的碳含
量為80.14%,比表面積分別為75.66、93.47、10.27m2/g,pH值分別為8.41、7.95、
9.37,粒徑為60目。
用蘆葦生物炭固定化石油烴降解混合菌劑(組成:放線菌47.30%,綠彎菌
19.83%,變形菌14.67%,酸桿菌7.83%)投入兩個石油烴土壤修復(fù)試驗,實(shí)驗
一:制備接種量2%(以石油烴降解菌/生物炭的比值表示)的生物炭固定化菌劑,
實(shí)驗為期40d,分為3組:對照組(Ta)、添加蘆葦生物炭組(Tb)、添加蘆葦生
物炭固定化菌劑組(Tc);實(shí)驗二:分別用粒徑1.5、10、60目的蘆葦生物炭制備
接種量1%、2%、3%的生物炭固定化菌劑,實(shí)驗為期60d。
實(shí)驗一中,40d后總石油烴去除率由高到底為:Tc(55.01%)>Tb(45.82%)>Ta
(24.83%)。生物炭對污染土壤中石油烴類污染物質(zhì)具有明顯去除效果,生物炭
固定化微生物可以有效強(qiáng)化石油烴污染土壤修復(fù)效率。實(shí)驗二中,在微生物接種
量均為3%的情況下,1.5目蘆葦生物炭組在60d后的修復(fù)效果最好,總石油烴
去除率為62.59%,10目蘆葦生物炭組的總石油烴去除率為50.03%,40目蘆葦
生物炭組的總石油烴去除率為54.35%;在生物炭粒徑均為1.5目的情況下,接種
量由1%増加至2%時,總石油烴的去除率從46.70%顯著提高至55.68%。當(dāng)微生
物接種量為3%時,總石油烴的去除率提升為62.59%。
6
3.4.2高效菌群共代謝及生物炭促進(jìn)多環(huán)芳物烴降解研究
生物炭原料為橡膠枝、花生殼、煙桿、小麥秸稈,經(jīng)500℃熱裂解制得四種
不同生物炭:碳含量依次為83.54%、71.53%、74.92%、64.38%,比表面積依次
為2.433、6.023、8.692、26.746m2/g,孔容依次為0.004、0.014、0.016、0.032m3/g,
平均孔徑依次為6.549、3.057、3.410、5.620nm,pH值依次為8.08、9.37、9.39、
9.78,粒徑為40目。
用上述四種生物炭固定化高效菲降解混合菌群(主要由Pseudomonas、
exiguobacterium、brevundimonas組成),投入芘降解實(shí)驗:以1g/L生物炭和10%
(v/v)重懸菌液(OD600=1)比例制備生物炭固定化菌劑,對MSM培養(yǎng)基中
10mg/L芘進(jìn)行為期6d的降解實(shí)驗,分為6組:空白組(T1)、添加混合菌群組
(T2)、分別添加橡膠枝、花生殼、煙桿、小麥秸稈生物炭固定化菌劑組(T3、
T4、T5、T6)。
實(shí)驗中,6d后芘去除率由高到底為:T6(57.68%)>T5(37.55%)>T4
(27.63%)>T3(20.91%)>T2(12.43%),小麥秸稈生物炭固定化菌劑對芘的降
解率提升最高,在各實(shí)驗樣本中有著最豐富的微生物種類和最高的微生物豐度。
3.4.3其他實(shí)驗
(1)玉米秸稈碎屑經(jīng)熱裂解得到玉米秸稈生物炭,與營養(yǎng)物質(zhì)聯(lián)合處理組
(生物炭添加比例為5%)在營養(yǎng)物為NH4NO3和K2HPO4、調(diào)節(jié)土壤碳氮磷比
為100:10:1的條件下進(jìn)行石油烴污染土壤修復(fù),90d后總石油烴去除率達(dá)到
50.53%,且土壤微生物數(shù)量達(dá)到7.24×107CFU/g,說明生物炭能為土壤中優(yōu)勢微
生物的生存和繁殖提供有利環(huán)境。
(2)農(nóng)業(yè)廢棄物向日葵秸稈在300、500、700℃分別熱裂解得到不同種類
向日葵秸稈生物炭BC300、BC500、BC700,同時在500℃條件下制備KOH改
性生物炭A-BC500,四種生物炭的灰分依次為23.1%、29.18%、31.88%、35.79%,
pH值依次為9.88、10.16、10.62、11.05,碳含量依次為45.27%、51.69%、55.30%、
42.71%,比表面積依次為19.72、93.26、523.57、529.14m2/g,元素組成中C、
H、N含量降低,O含量增加,表面結(jié)構(gòu)的粗糙程度增加并形成明顯的孔洞結(jié)構(gòu),
7
可為微生物固定化提供良好環(huán)境,同時生物炭對菲有明顯的吸附效果,有利于固
定化微生物對污染物的降解。
(3)玉米秸稈經(jīng)550℃熱裂解得到玉米秸稈生物炭,粒徑為60目,碳含量
為76.86%,比表面積為145.18m2/g,孔容為0.02cm3/g,該生物炭與P摻雜的
g-C3N4粉末混合吸附并重新煅燒后可制成玉米秸稈生物炭負(fù)載P摻雜的g-C3N4
復(fù)合光催化劑,對石油烴等有機(jī)污染物的降解起到促進(jìn)作用。
3.5同領(lǐng)域其他研究依據(jù)
3.5.1生物炭固定化多環(huán)芳烴高效降解菌劑制備及土壤修復(fù)
土壤采自天津某石化場地污染土壤及上海某郊區(qū)土壤,后者進(jìn)行人工染毒,
土壤污染物均主要為PAHs中的菲和蒽。
生物炭原料選用稻殼和棉桿,制得的稻殼生物炭和棉桿生物炭粒徑分布在
30~80目,比表面積分別為51.34、25.22m2/g,孔容積分別為0.032、0.018m3/g,
孔徑分別為3.92、4.16nm,pH值分別為8.08、7.25,Zeta電位分別為-19.2、-36mV。
任靜等在該研究中用稻殼生物炭和棉桿生物炭固定一株中度嗜鹽菌
Martelellasp.AD-3,以3%LB為固定化培養(yǎng)基、接種量為2.9×108CFU/mL、固
定化2d制備的生物炭固定化菌劑的固定化效果和去除效果最好,其中棉桿生
物炭固定化菌劑對溶液體系中PAHs降解率可達(dá)到95.85%。將生物炭固定化菌
劑投入到實(shí)驗中,各自分為四組:空白對照組、僅添加生物炭組、僅添加游離菌、
添加生物炭固定化菌劑組,對土壤中PAHs進(jìn)行42d降解實(shí)驗。
在人工染毒土壤的PAHs降解實(shí)驗中,游離菌組前14d對菲降解率為10%、
對蒽降解率為4.7%,14d后基本不再降解;棉桿固定化菌劑組對菲降解率為
39.94%、對蒽降解率為29.47%;稻殼生物炭固定化菌劑對菲降解率為29.11%、
對蒽降解率為23.54%。在石化場地污染土壤的PAHs降解實(shí)驗中,游離菌組前
14d對菲降解率為13.48%、對蒽降解率為8.96%,14d后基本不再降解;棉桿固
定化菌劑組對菲降解率為41.54%、對蒽降解率為18.33%;稻殼生物炭固定化菌
劑對菲降解率為31.59%、對蒽降解率為17.59%。
8
3.5.2焦化廠周邊污染土壤的微生物修復(fù)研究
焦化廠是以煤作為主要原料生產(chǎn)冶金焦炭和其他化工副產(chǎn)品的工廠,生產(chǎn)的
化工產(chǎn)品達(dá)40余種,其周邊土壤主要受到菲、苊、苯并熒蒽、砷、銅、吡啶等
物質(zhì)的污染,這些污染物主要來自于焦化廠煉焦和熄焦階段產(chǎn)生的廢氣、煙塵和
煙霧。該焦化廠周邊土壤中吡啶含量最大值比荷蘭《土壤修復(fù)通令》中的干預(yù)值
高54.55%,確定吡啶為目標(biāo)污染物。
生物炭原料為椰殼炭(立澤環(huán)??萍继帲?,經(jīng)高溫碳化及水蒸氣活化制得椰
殼生物炭,pH值為9.83,比表面積為888.3314m2/g,孔容積為0.4742m3/g,平均
孔徑為2.1492nm,對微生物的吸附效果遠(yuǎn)大于實(shí)驗中制備的其他生物炭。
張圳等在該研究中用椰殼生物炭固定兩株吡啶降解功能菌的混合菌(均為紅
球菌屬:Rhodococcusaetherivorans和Rhodococcuspyridinivorans,從污染土壤中
篩出),最佳固定化時間為36h。
在800mg/L吡啶去除實(shí)驗中,相較于游離菌24h時達(dá)去除63.42%,固定化
微生物對吡啶的去除效果更優(yōu)于游離菌,30h時對吡啶的去除率達(dá)到96.83%,
48h時去除率達(dá)到100%。向200mg/kg的吡啶模擬污染土壤中投加椰殼生物炭
固定化微生物,7d時對土壤中吡啶的去除率在47.66%以上,同時土壤中有機(jī)質(zhì)、
速效鉀和有效磷含量分別至少提高了40.89g/kg、13.00mg/kg和2.13mg/kg。
3.5.3污泥生物炭固定化微生物強(qiáng)化石油污染土壤修復(fù)
生物炭原料為取自某污泥處理廠經(jīng)好氧堆肥處理后的污泥,制備的污泥生物
炭產(chǎn)率為61.35%、灰分為38.40%,比表面積為17.7504m2/g,孔容積為
0.065316m3/g,平均孔徑為18.76nm,pH值為7.37,對菌群的固定率最高可達(dá)到
65.29%,遠(yuǎn)高于污泥對菌群的固定率。
張秀霞等在該研究中用污泥生物炭固定化一個由實(shí)驗室構(gòu)建的石油烴高效
降解菌群(CH,由產(chǎn)堿菌菌株(Alcaligenesaquatilisstrain05-101)和芽孢桿菌
(KP728957.1:4-1425Bacillussp.FJAT-22505)按體積比1:1復(fù)配發(fā)酵而得)并投
入實(shí)驗,以總石油烴為目標(biāo)污染物進(jìn)行4組花盆土壤修復(fù)實(shí)驗:空白對照組(CK)、
僅添加污泥生物炭組(BC)、污泥生物炭+游離菌組(BCB)和污泥生物炭固定
9
化微生物組(BCIB),為期90d,期間通過添加尿素和KH2PO4調(diào)節(jié)土壤C、N、
P的質(zhì)量比為100:5:1,修復(fù)過程中調(diào)節(jié)含水率保持在15%左右,每隔7d翻土
一次。
石油污染土壤經(jīng)90d的修復(fù)后,CK、BC、BCB和BCIB修復(fù)土壤中總石油
烴降解率分別為3.02%、45.14%、25.07%和58.80%,其中BCIB總石油烴降解率
最高。
3.5.4改性海帶渣生物炭固載降解菌在PAHs污染土壤修復(fù)中的應(yīng)用
土壤采集自遼寧省大連市甘井子區(qū)某建筑工地的表層土壤,為受PAHs污染
的工業(yè)土壤,其中苯并[a]芘的濃度為4.96mg/kg。
生物炭原料為海帶渣粉末(來自青島海興源生物科技有限公司),制得氯化
鐵溶液改性海帶渣生物炭。改性與未改性海帶渣生物炭比表面積分別為11.7279、
4.9476m2/g,孔容積分別為0.048768、0.021081m3/g,平均孔徑分別為14.5915、
36.1854nm,粒徑為80目,Zeta電位分別為29.77(±2.04)、-28.97(±1.15)mV;
其中改性海帶渣生物炭對菌群固定化最高可達(dá)7.0×1011cfu/g。
李明旭等在該研究中用未改性和改性海帶渣生物炭分別固定化苯并[a]芘降
解菌群(來源為土壤,鑒定為黃單胞菌屬、芽孢桿菌屬和蒼白桿菌屬的混合降解
菌)投入土壤修復(fù)實(shí)驗,共4組實(shí)驗處理:空白對照組(CK)、只添加游離菌組
(B)、添加未改性海帶渣生物炭固定化菌群組(KBC)、添加改性海帶渣生物炭
固定化菌群組(KBMC),為期14d。
各實(shí)驗組中KBMC的土壤苯并[a]芘降解率達(dá)到86.98%,高于KBC苯并[a]
芘降解率76.07%,比游離菌組更高出27.98%,可見改性生物炭對苯并[a]芘降解
率有較大幅度提高。此外,KBC和KBMC固定化降解菌施入后的PAHs污染的
土壤中細(xì)菌群落多樣性指數(shù)較低,說明土壤微生物結(jié)構(gòu)變得簡單,多樣性降低,
但與去除土壤中苯并[a]芘相關(guān)的優(yōu)勢菌種比例增加。
4標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容
本文件編制依據(jù)行業(yè)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),編寫格式嚴(yán)格參照GB/T1.12020標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范
標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則的規(guī)定進(jìn)行編制。
10
4.1標(biāo)準(zhǔn)適用范圍的說明
本文件規(guī)定了微生物固定化生物炭載體的術(shù)語和定義、產(chǎn)品要求、檢測方法、
檢驗規(guī)則、包裝、標(biāo)識、運(yùn)輸和貯存。
本文件適用于我國有機(jī)污染土壤微生物修復(fù)的微生物固定化生物炭載體,所
制成的微生物固定化生物炭載體主要應(yīng)用于相關(guān)固定化菌劑的制備。
本文件主要適用于微生物固定化生物炭載體生產(chǎn)商。
4.2規(guī)范性引用文件
共引用標(biāo)準(zhǔn)文件11項,見3.3。
4.3術(shù)語和定義
對“微生物固定化”、“生物炭”、“生物炭載體”這三個本文件核心術(shù)語進(jìn)行
了定義?!拔⑸锕潭ɑ敝笧槭菍⑻剡x的微生物固定在特定的載體上,使其高
度密集并保持生物活性,在適宜條件下能夠快速、大量增殖的一種生物技術(shù)?!吧?/p>
物炭”是生物質(zhì)在缺氧或者無氧的條件下發(fā)生熱化學(xué)轉(zhuǎn)化而產(chǎn)生的富碳固體物質(zhì)。
“生物炭載體”指將生物炭用作微生物固定化過程中為微生物提供附著及增殖空
間的材料。
4.4產(chǎn)品要求
對微生物固定化生物炭載體的原料選擇、感官特征、技術(shù)指標(biāo)作出規(guī)范。
原料通常為農(nóng)林廢棄物、農(nóng)林生物質(zhì),來源廣泛,種類繁多,獲取成本低廉,
對于農(nóng)林廢棄物的再利用可減少就地燃燒秸稈等方式帶來的環(huán)境污染。
感官特征應(yīng)用于對產(chǎn)品做出第一判斷,感官特征不符合規(guī)定的產(chǎn)品可直接判
定為不合格。
技術(shù)指標(biāo)包括碳含量、灰分含量、機(jī)械強(qiáng)度、比表面積、孔容、粒度、水分
含量、pH值、有效固菌容量、重金屬含量,這些質(zhì)量指標(biāo)是為了檢測微生物固
定化生物炭載體的物理化學(xué)性質(zhì)、生物相容性和可持續(xù)性,合格的載體材料才可
以提高對制備的固定化菌劑的穩(wěn)定性和活性。在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行
調(diào)整和優(yōu)化,以確保最佳的固定化效果和產(chǎn)品性能。
產(chǎn)品保質(zhì)期為180天,可體現(xiàn)其長效性。通常非必要情況下可不對保質(zhì)期進(jìn)
11
行檢測。
4.4.1碳含量
生物炭的碳含量可反映出其碳、氮、氧等元素之間的比例及其烷基結(jié)構(gòu)和芳
香結(jié)構(gòu)的占比,從而反映出生物炭的穩(wěn)定性,尤其是生物炭中不易分解的碳含量
越高,其壽命越長。生物炭的總碳含量包括固定碳含量和灰分含量。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)DB21/T—3321《生物炭分級與檢測技術(shù)規(guī)范》第4章節(jié)規(guī)定的生
物炭分級標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)和DB21/T3318—2020《設(shè)施果蔬(櫻桃番茄、薄皮甜瓜)生
物炭與微生物菌劑協(xié)同應(yīng)用技術(shù)規(guī)程》第4章節(jié)規(guī)定的生物炭技術(shù)指標(biāo)要求,I
級和II級生物炭總碳含量分別為≥60%和≥30%;參考實(shí)驗文獻(xiàn)及綜述文獻(xiàn),以
《生物炭主要類型、理化性質(zhì)及其研究展望》和《不同原料及熱解條件下農(nóng)業(yè)廢
棄物生物炭的特性》等為代表,農(nóng)林廢棄物等生物質(zhì)為原料制備的生物炭碳含量
平均在40%以上。故選取微生物固定化生物炭載體的碳含量指標(biāo)為≥40%。
4.4.2灰分
生物炭灰分指的是生物質(zhì)燃燒后剩余的無機(jī)鹽、礦物組分、有機(jī)物等,其存
在影響生物炭中極性官能團(tuán)的空間分布,有助于極性官能團(tuán)在生物炭表面的向外
暴露;一般灰分越低,生物炭的芳香性會增強(qiáng),表面積、微孔、介孔及大孔數(shù)目
也會增加,以提供更多的吸附位點(diǎn)。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)DB21/T—3321《生物炭分級與檢測技術(shù)規(guī)范》第4章節(jié)規(guī)定的生
物炭分級標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)和DB21/T3318—2020《設(shè)施果蔬(櫻桃番茄、薄皮甜瓜)生
物炭與微生物菌劑協(xié)同應(yīng)用技術(shù)規(guī)程》第4章節(jié)規(guī)定的生物炭技術(shù)指標(biāo)要求,I
級和II級生物炭固定碳含量分別為≥50%和≥25%,可得I級和II級生物炭灰分含
量分別為<10%和<5%,選取微生物固定化生物炭載體的灰分含量指標(biāo)為<10%。
4.4.3機(jī)械強(qiáng)度
生物炭的機(jī)械強(qiáng)度(即硬度)直接反應(yīng)出其在壓縮、磨損和摩擦等力的作用
下的抗破壞能力,直接影響其使用壽命和吸附能力。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB/T7701.2—2008《煤質(zhì)顆粒活性炭凈化水用煤質(zhì)顆?;钚蕴俊?/p>
4.2.2章節(jié)規(guī)定的技術(shù)指標(biāo)和GB/T13803.2—1999《木質(zhì)凈水用活性炭》3.3章節(jié)
12
規(guī)定的質(zhì)量指標(biāo),活性炭強(qiáng)度應(yīng)≥85%,選取該指標(biāo)作為微生物固定化生物炭載
體的機(jī)械強(qiáng)度。
4.4.4比表面積、孔容
生物炭的表面積大小、孔容指標(biāo)與載體的吸附能力、固定化效果密切相關(guān),
尤其是表面積這一指標(biāo),比表面積越大,吸附能力就越強(qiáng)。而在平均孔徑較小的
情況下,孔容較大的生物炭固定化載體,其比表面積越大,越有利于微生物的固
定化。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)DB12/T1144—2022《旱田土壤4種長殘效除草劑污染生物炭原
位鈍化修復(fù)技術(shù)規(guī)程》4.1章節(jié)規(guī)定用于土壤修復(fù)的生物炭比表面積≥20m2/g,平
均孔隙體積≥0.02cm3/g;同時參考眾多研究文獻(xiàn)中的用于固定化的生物炭載體比
表面積參數(shù)(部分見表1)。選取微生物固定化生物炭載體的比表面積指標(biāo)為≥150
m2/g、孔容指標(biāo)為≥0.02cm3/g。
表1生物炭載體比表面積參數(shù)
來源研究(文獻(xiàn))比表面積參數(shù)(m2/g)
混合白腐真菌的固定化及其在治理鉛污染
332.89±4.23
廢水中的應(yīng)用
物炭固定化菌復(fù)合材料在環(huán)境修復(fù)中的應(yīng)
51.34
用研究進(jìn)展
菌糠炭與微生物協(xié)同吸附-降解石油烴類
109.2691
污染物
微生物固定化生物炭對水體銨態(tài)氮去除效
186.16
果的研究
生物炭基好氧反硝化細(xì)菌固定及去除水中
191.3
硝態(tài)氮
化學(xué)老化對Mg改性生物炭礦物結(jié)構(gòu)及
169.00、104.00
Pb2+吸附的影響
生物炭固定化微生物技術(shù)對鎘污染土壤的
358.817、243.211
穩(wěn)定化效果及其影響因素研究
13
(續(xù))表1生物炭載體比表面積參數(shù)
來源研究(文獻(xiàn))比表面積參數(shù)(m2/g)
生物炭固定耐鎘菌群對水體中鎘的吸附性
71.02
能研究
生物炭基固定化微生物及對石油污染土壤
157.11、256.03、312.30、208.65
的修復(fù)研究
高溫裂解生物炭固定化微生物去除水中全
388.383、473.833、568.514
氟丁磺酸研究
Enhancedremediationofphenanthrenein
waterandsoilbynovelbiochar-immobilized407
bacterialmicrospheres
Removalofchlortetracyclinefromwaterby
immobilizedBacillussubtilisonhoneysuckle132.110、95.423
residue-derivedbiochar
Effectsofbiocharadditiononanaerobicco-
digestionofsewagesludgeandswinemanure:
765.2
copperimmobilizationanddigestion
performance
Nitratesorptionanddesorptioninbiochars
513±21、456±15、582±23
fromfastpyrolysis
4.4.5粒度
生物炭粒度的大小除了也能與上述比表面積等指標(biāo)共同影響載體的吸附和
固定化效果外,還與其使用效果有關(guān)。粒徑較大的生物炭容易在使用過程中造成
流通阻力,影響了傳質(zhì)和傳熱效果,進(jìn)而影響有機(jī)污染場地的修復(fù)效果。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)DB21/T2398—2015《生物炭基肥料》4.2章節(jié)規(guī)定的生物炭基肥
料成分,主要分布范圍均為1.0~4.8mm和3.35~5.6mm,該范圍的粒度為90%;
標(biāo)準(zhǔn)NY/T3041—2016《生物炭基肥料》4.2章節(jié)規(guī)定的生物炭基肥料產(chǎn)品技術(shù)
指標(biāo)要求,主要分布范圍均為1.0~4.75mm和3.35~5.6mm,該范圍的粒度為80%。
14
根據(jù)微生物固定化載體的需求,選取粒度指標(biāo)見表2。
表2微生物固定化生物炭載體粒度指標(biāo)
粒度范圍指標(biāo)(%)
<100nm≤5
100~560nm≥90
>560nm≤5
4.4.6水分含量
生物炭的水分含量會影響其吸附其他物質(zhì)的能力,水含量越多,其吸附能力
就越弱,進(jìn)而影響載體對微生物的固定化效果和應(yīng)用于有機(jī)污染場地修復(fù)時對污
染物的吸附效果。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)DB21/T2398—2015《生物炭基肥料》4.2章節(jié)規(guī)定的生物炭基肥
料成分,其水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.0%~5.0%,選取微生物固定化生物炭載體的水分含
量指標(biāo)為<5%。
4.4.7pH值
生物炭的pH值應(yīng)限制在弱酸性到弱堿性的范圍內(nèi),其一是為了避免對多數(shù)
非耐強(qiáng)酸、強(qiáng)堿性的微生物細(xì)胞造成破壞,其二是為了避免在后續(xù)投入有機(jī)污染
場地時進(jìn)一步加劇場地自身的酸性或堿性而影響修復(fù)效果及對環(huán)境可能造成的
負(fù)面影響。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB202875—2006《農(nóng)用微生物菌劑》5.3.1章節(jié)規(guī)定的農(nóng)用微生物
產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)和NY/T798—2015《復(fù)合微生物肥料》4.3章節(jié)規(guī)定的復(fù)合微生物
肥料產(chǎn)品,兩文件規(guī)定的顆粒劑型pH值均為5.5~8.5,選取該指標(biāo)作為微生物固
定化生物炭載體的pH值。
4.4.8有效固菌容量
微生物固定化生物炭載體用于制備復(fù)合固定化菌劑,載體的有效固菌容量即
為制備出菌劑的有效活菌數(shù),該指標(biāo)直接反映了載體的固定化能力,是產(chǎn)品的核
心指標(biāo),直接決定了載體能否投入有機(jī)污染場地生物修復(fù)的應(yīng)用。此外,微生物
15
固定化生物炭載體能固定2種或2種以上優(yōu)勢菌種可體現(xiàn)其廣譜性。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)GB202875—2006《農(nóng)用微生物菌劑》5.3.1章節(jié)規(guī)定的農(nóng)用微生物
產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo),顆粒劑型有效活菌數(shù)≥1.0億/g,選取該指標(biāo)并記作1.0×108CFU/g
作為微生物固定化生物炭載體的有效固菌容量。
4.4.9重金屬含量
重金屬含量指標(biāo)包括砷、隔、鉛、鉻、汞的含量,為了確保后續(xù)制成的固定
化菌劑產(chǎn)品在使用過程中不會對環(huán)境造成進(jìn)一步的污染,有助于保證產(chǎn)品符合無
害化要求,并最大限度地降低對土壤和環(huán)境的潛在風(fēng)險。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)NY525—2021《有機(jī)肥料》中4.2.3章節(jié)規(guī)定的限量指標(biāo)和NY/T
798—2015《復(fù)合微生物肥料》4.4章節(jié)規(guī)定的復(fù)合微生物肥料產(chǎn)品無害化指標(biāo)要
求,選取其中重金屬含量指標(biāo)(見表3)作為微生物固定化生物炭載體的重金屬
含量指標(biāo)參數(shù),制備出的生物炭應(yīng)用于土壤修復(fù)后,被修復(fù)土壤的重金屬含量符
合我國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),被修復(fù)土壤后續(xù)可用作農(nóng)業(yè)土壤用地及該標(biāo)準(zhǔn)以下的土壤
用地。
表3重金屬含量指標(biāo)
重金屬種類指標(biāo)(mg/kg)
砷(As)≤15
鎘(Cd)≤3
鉛(Pb)≤50
鉻(Cr)≤150
汞(Hg)≤2
4.5檢測方法
主要對4.4中載體各技術(shù)指標(biāo)的檢測方法進(jìn)行規(guī)定,所涉及的指標(biāo)檢測方與
對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)范文件如下:
碳含量:SN/T3005
灰分含量:GB/T12496.3
16
機(jī)械強(qiáng)度:GB/T12496.6
比表面積、孔容:GB/T7702.20
粒度:GBT12496.2
水分含量:GB/T12496.4
pH值檢測:GB/T12496.7
有效固菌容量:NY/T883、GB4789.2
重金屬含量:GB/T23349
4.6檢驗規(guī)則
為遵循微生物固定化生物炭載體的科學(xué)系統(tǒng)的評價原則,首先在樣品的選擇
和取樣規(guī)則上應(yīng)具有代表性,在樣品檢驗的程序設(shè)計上應(yīng)合理,在判定規(guī)則的要
求上應(yīng)適應(yīng)微生物固定化生物炭載體的特點(diǎn)。因此,在標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)立了抽樣規(guī)則、
檢驗分類和判定規(guī)則等方面的內(nèi)容,對上述指標(biāo)的測定相應(yīng)執(zhí)行。
4.7包裝、標(biāo)志、運(yùn)輸和貯存
為落實(shí)微生物固定化生物炭載體的應(yīng)用性原則,對微生物固定化生物炭載體
的包裝、貯存和運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)內(nèi)容做出了規(guī)定。
5國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)情況
目前國內(nèi)外均沒有針對生物炭在微生物固定化載體方面的本文件,本文件的
制定過程中,為達(dá)到行業(yè)市場需求與技術(shù)指標(biāo)合理性、先進(jìn)性,填補(bǔ)國內(nèi)應(yīng)用于
有機(jī)污染場地生物修復(fù)的微生物固定化生物炭載體的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的空白,本文件對
如下國內(nèi)外與生物炭產(chǎn)品、相關(guān)領(lǐng)域相近類型產(chǎn)品及應(yīng)用的相關(guān)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行參
考:
5.1國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)
GB/T7701.2—2008煤質(zhì)顆粒活性炭凈化水用煤質(zhì)顆?;钚蕴?/p>
GB/T13803.2—1999木質(zhì)凈水用活性炭
GB202875—2006農(nóng)用微生物菌劑
DB12/T1144—2022旱田土壤4種長殘效除草劑污染生物炭原位鈍化修復(fù)
17
技術(shù)規(guī)程
DB21/T2398—2015生物炭基肥料
DB21/T3321—2020生物炭分級與檢測技術(shù)規(guī)范
DB21/T3318—2020設(shè)施果蔬(櫻桃番茄、薄皮甜瓜)生物炭與微生物菌
劑協(xié)同應(yīng)用技術(shù)規(guī)程
NY525—2021有機(jī)肥料
NY/T798—2015復(fù)合微生物肥料
NY/T3041—2016生物炭基肥料
NY/T4159—2022生物炭
5.2國外標(biāo)準(zhǔn)
CRCKE21710-2013BiocharandSoilBiota(生物炭與土壤生物)(美國)
CRCKE26367-2015Biochar:ProductionCharacterizationandApplications
(生物炭:生產(chǎn)、表征和應(yīng)用)(美國)
OENORMS2211-2016Pflanzenkohle-Ausgangsmaterialien,
QualitatsanforderungenundUntersuchungsmethoden(植物生物炭.原料、質(zhì)量要
求和試驗方法)(奧地利)
6與有關(guān)現(xiàn)行法律、法規(guī)、強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系
本文件在行業(yè)內(nèi)屬于首次制定,與本行業(yè)現(xiàn)有其他標(biāo)準(zhǔn)配套協(xié)調(diào)。本文件引
用3.2和3.3所述的國家法律法規(guī)及規(guī)范標(biāo)準(zhǔn),所涉及內(nèi)容完全符合國家對固定
化載體等產(chǎn)品的要求,與相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范無沖突,積極符合國家對碳
中和及可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略的要求。
7標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的預(yù)期效益
本文件明確了微生物固定化生物炭載體的產(chǎn)品要求,有利于微生物固定化生
物炭載體生產(chǎn)過程中的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化,有利于微生物固定化生物炭載體及復(fù)合
固定化菌劑在有機(jī)污染土壤生物修復(fù)和治理中的推廣應(yīng)用。
本文件的發(fā)布,有利于土壤環(huán)境污染治理,有利于提高自然資源利用率,有
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利于進(jìn)一步推進(jìn)有機(jī)污染土壤的修復(fù),有利于突破土壤修復(fù)后再利用的困難制約,
有利于促進(jìn)社會與生態(tài)和諧發(fā)展。同時,生物炭原料來源廣泛、價格低廉,相較
其他治理方式進(jìn)一步降低了有機(jī)污染土壤修復(fù)的成本。
8標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施建議
本文件與《有機(jī)污染場地生物修復(fù)技術(shù)規(guī)范復(fù)合固定化菌劑制備》為同系
列標(biāo)準(zhǔn),推薦配套使用。
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