《植物源性食品中 12 種農(nóng)藥殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》征求意見稿

1T/XMSSAL0135—2024植物源性食品中12種農(nóng)藥殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法本文件規(guī)定了植物源性食品中12種農(nóng)藥殘留量的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定方法。本文件適用于蔬菜、水果、食用菌等植物源性食品中聯(lián)苯吡菌胺、環(huán)氧蟲啶、乙唑螨腈、多果定、丁蟲腈、氟醚菌酰胺、氟吡呋喃酮、氯氟醚菌唑、哌蟲啶、四氯蟲酰胺、氯啶菌酯、嗪氨靈殘留量的測定，其他植物源性食品可參照執(zhí)行。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2763食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB5009.295食品安全國家標準化學分析方法驗證通則GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語與定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理試樣中的農(nóng)藥用乙腈提取，提取液經(jīng)基質(zhì)分散固相萃?。≦uEChERS）凈化，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測，外標法定量。5試劑和材料除非另有說明，所用試劑均為分析純，水符合GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1試劑5.1.1乙腈(CH3CN，CAS號：75-05-8)：色譜純。5.1.2甲醇(CH2OH，CAS號：67-56-1)：色譜純。5.1.3乙酸鈉(CH2COONa，CAS號：127-09-3)。5.1.4無水硫酸鎂(MgSO4，CAS號：7487-88-9)。5.1.5甲酸(HCOOH，CAS號：64-18-6)：色譜純。5.1.6乙酸銨(CH3COONH4，CAS號：631-61-8)：色譜純。5.2溶液配制5.2.1乙酸銨-甲酸水溶液(5mmol/L)：稱取0.3854g乙酸銨(5.1.6)，用0.1%甲酸水溶液溶解并稀釋至1000mL，搖勻。5.3標準品12種農(nóng)藥標準品，見附錄A，純度≥95%，或選用持證的農(nóng)藥標準溶液。5.4標準溶液配制5.4.1標準儲備溶液(1000mg/L)：準確稱取約10mg（精確至0.1mg）各農(nóng)藥標準品，根據(jù)標準品的溶解性和測定需要選用乙腈（5.1.1）或甲醇（5.1.2）等溶劑溶解并分別定容至10mL，混勻，避光-18℃及以下條件保存。2T/XMSSAL0135—20245.4.2混合標準溶液(10mg/L)：吸取一定量的農(nóng)藥標準溶液于容量瓶中用乙腈(5.1.1)定容至刻度，混勻，避光-18℃及以下條件保存。5.4.3混合標準工作溶液(1mg/L)：吸取一定量的混合標準溶液(5.4.1)于容量瓶中，用乙腈(5.1.1)定容至刻度，混勻，避光-18℃及以下條件保存，有效期2個月。5.5材料5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠(PSA)：粒徑40μm～60μm。5.5.2石墨化炭黑(GCB)：粒徑40μm～120μm。5.5.3陶瓷均質(zhì)子：2cm(長)×1cm(外徑)，或相當者。5.5.4微孔濾膜(有機相)：13mm×0.22μm，或相當者。6儀器6.1液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源(ESI)。6.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。6.3離心機：轉(zhuǎn)速不低于4200r/min。6.4組織搗碎機。6.5渦旋混合器。7試樣制備7.1試樣制備樣品測定部位按照GB2763附錄A的規(guī)定執(zhí)行。蔬菜、水果、食用菌隨機取樣1kg。對于個體較小的樣品，取樣后全部處理；對于個體較大的基本均勻樣品，可在對稱軸或?qū)ΨQ面上分割或切成小塊后處理；對于細長、扁平或組分含量在各部分有差異的樣品，可在不同部位切取小片或截成小段后處理；取后的樣品將其切碎，充分混勻，用四分法取一部分或全部用組織搗碎機勻漿后，放入聚乙烯瓶中。7.2試樣貯存將制備好的試樣分成2份，作為檢測樣和留樣，分別于-18℃及以下條件密封保存。8分析步驟8.1前處理稱取10g（精確至0.01g）試樣于50mL塑料離心管中，加入10mL乙腈及1顆陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1min，加入6g無水硫酸鎂、1.5g乙酸鈉，劇烈振蕩1min后，4200r/min離心5min。定量吸取上清液至內(nèi)含除水劑和凈化材料的塑料離心管中（每毫升提取液使用150mg無水硫酸鎂、15mgPSA對于顏色較深的試樣，離心管中另加入GCB（每毫升提取液使用4mg），渦旋混勻1min。4200r/min離心5min，吸取上清液過微孔濾膜（5.5.4），待測定。8.2測定8.2.1液相色譜參考條件a)色譜柱：HSST3，2.1mm(內(nèi)徑)×100mm，粒徑1.8μm，或相當者；b)流動相：A相為乙酸銨-甲酸水溶液(5.2.1)，B相為甲醇(5.1.2)。流動相梯度條件見表1；表1流動相梯度洗脫程序（VA+VB）時間（min）0223T/XMSSAL0135—20242222c)流速：0.3mL/min；d)柱溫：35℃;e)進樣量：2μL。8.2.2質(zhì)譜參考條件a)離子源類型：電噴霧離子源；b)掃描方式：正離子和負離子掃描；c)電噴霧電壓：正離子3500V，負離子-3200V；d)離子源溫度：320℃;e)霧化氣：35Arb；f)輔助加熱氣：15Arb；g)多反應(yīng)監(jiān)測：每種農(nóng)藥分別選擇至少2個子離子。每種農(nóng)藥的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)，參見附錄B。8.2.3基質(zhì)匹配標準工作曲線選擇與被測樣品性質(zhì)相同或相似的空白樣品按照8.1部分進行前處理，得到空白基質(zhì)溶液。精確吸取一定量的混合標準溶液，逐級用空白基質(zhì)溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L和0.2mg/L的基質(zhì)匹配標準工作溶液，根據(jù)儀器性能和檢測需要選擇不少于5個濃度點，供液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀測定。以農(nóng)藥定量用子離子的質(zhì)量色譜圖峰面積為縱坐標，相對應(yīng)的基質(zhì)匹配標準工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標，繪制基質(zhì)匹配標準工作曲線。8.2.4定性及定量8.2.4.1保留時間被測試樣中目標農(nóng)藥色譜峰的保留時間與相應(yīng)標準色譜峰的保留時間相比較，相對誤差應(yīng)在±2.5%之內(nèi)。8.2.4.2離子豐度比在相同實驗條件下進行樣品測定時，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，目標化合物選擇的子離子均出現(xiàn)，而且同一檢測批次，對同一化合物，樣品中目標化合物的離子豐度比與質(zhì)量濃度相當?shù)幕|(zhì)標準溶液相比，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在目標農(nóng)藥。表2定性時離子豐度比的最大允許偏差離子豐度比/%>50>20～50>10～20本方法的標準物質(zhì)LC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測質(zhì)量色譜圖參見附錄C。8.2.4.3定量外標法定量。8.3試樣溶液的測定將基質(zhì)匹配標準工作溶液和試樣溶液依次注入液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀中，保留時間和離子豐度比定性，測得定量用子離子的質(zhì)量色譜圖峰面積，待測樣液中農(nóng)藥的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測的定量測定線性范圍之內(nèi)，超過線性范圍時應(yīng)根據(jù)測定濃度進行適當倍數(shù)稀釋后再進行分析。8.4平行試驗按以上步驟對同一試樣進行平行試驗測定。8.5空白試驗4T/XMSSAL0135—2024除不加試樣外，采用完全相同的測定步驟進行平行操作。9結(jié)果計算試樣中各農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分數(shù)計，單位為毫克每千克(mg/kg)，按公式(1)或公式(2)計算。式中：w——試樣中被測物殘留量的數(shù)值，單位為毫克每千克(mg/kg)；P1——基質(zhì)匹配標準工作溶液中被測物的質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為毫克每升(mg/L)；P2——從基質(zhì)匹配標準工作曲線中得到的試樣溶液中被測物的質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為毫克每升A——試樣溶液中被測物的質(zhì)量色譜圖峰面積；As——基質(zhì)匹配標準工作溶液中被測物的質(zhì)量色譜圖峰面積；V——提取液體積的數(shù)值，單位為毫升(mL)；m——試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克(g)；注：測定結(jié)果用平行試驗的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字，含量超過1mg/kg時，保留3位有效數(shù)字。10精密度10.1在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率），應(yīng)符合GB5009.295-2023的要求，見附錄D.1。10.2在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值與其算術(shù)平均值的比值（百分率），應(yīng)符合GB5009.295-2023的要求，見附錄D.2。本方法的定量限均為：0.01mg/kg。5T/XMSSAL0135—2024（資料性）12種農(nóng)藥中文英文名稱對照索引A.112種農(nóng)藥中文英文名稱對照索引(按英文字母順序)見表A.1。表A.112種農(nóng)藥中文英文名稱對照索引(按英文字母順序)農(nóng)藥英文名CAS號1C18H12Cl2F3N3O2C14H15ClN4O33C24H31N3O24C15H33N3O25C16H10Cl2F6N4OS6C15H8ClF7N2O27C12H11ClF2N2O28C18H15ClF3N3O29C17H23ClN4O3C17H10BrCl4N5O2C15H13Cl3N2O4C10H14Cl6N4O26T/XMSSAL0135—2024（資料性）12種農(nóng)藥的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)B.112種農(nóng)藥的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)見表B.1。表B.112種農(nóng)藥的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)農(nóng)藥中文名農(nóng)藥英文名定性離子對1正2正3正4正5正6正7正8正9正負正正7T/XMSSAL0135—202412種農(nóng)藥多反應(yīng)監(jiān)測(MRM