2025年人教五四新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教五四新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、實驗室進行酵母菌的純培養(yǎng)；結果如圖所示，下列敘述不正確的是（）

A.倒平板后需在水平桌面上劇烈晃動以保證表面平整B.第一次劃線后，灼燒接種環(huán)待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線，重復操作進行第三次劃線C.將一個未接種的平板倒置培養(yǎng)作為對照，以檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底D.圖中I、II區(qū)的酵母菌數量均太多，應從III區(qū)挑取單菌落2、下列關于細胞產物的工廠化生產的敘述，錯誤的是（）A.細胞產物的工廠化生產是植物細胞工程的重要用途之一B.培養(yǎng)過程中需要脫分化形成愈傷組織，然后懸浮培養(yǎng)愈傷組織細胞C.培養(yǎng)的愈傷組織需要經過再分化產生特定的組織細胞后才能產生特定的細胞產物D.培養(yǎng)的細胞收集后一般要破碎提取有效成分3、下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是（）A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、葡萄糖、瓊脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、尿素、瓊脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4．7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水4、下圖為單克隆抗體制備過程的示意圖。下列相關敘述，正確的是（）

A.每個脾B淋巴細胞可產生多種抗體B.細胞融合可使用滅活病毒，滅活病毒的抗原結構依然存在C.細胞篩選和細胞融合時所用的培養(yǎng)液在成分上相同D.克隆化培養(yǎng)過程中雜交瘤細胞會出現接觸抑制的現象5、2017年；我國科學家培育出轟動世界的體細胞克隆猴“中中”和“華華”，下圖為其培育流程。下列敘述錯誤的是（）

A.過程①是將成纖維細胞注射到去核的卵母細胞中B.過程②通常需在液體培養(yǎng)基中加入血清等天然成分C.圖中過程需用到體外受精、細胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術D.克隆猴用于醫(yī)學研究可最大限度排除基因差異的干擾6、下列防止生物武器的措施，不正確的是（）A.通過立法，禁止生物武器的生產和擴散B.捕殺敵人投放的帶菌的小動物C.大力發(fā)展生物武器，以牙還牙D.根據生物武器的類型采取相應措施7、制備纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基的正確步驟是（）A.計算→稱量→溶化→滅菌B.計算→稱量→滅菌→溶化C.計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板D.稱量→計算→溶化→滅菌8、據下圖分析，下列有關基因工程的說法不正確的是（）

A.為防止目的基因與質粒任意結合而影響基因的表達，應用限制酶Ⅰ、Ⅱ同時切割二者B.DNA聚合酶、DNA連接酶的作用部位都是磷酸二酯鍵C.與啟動子結合的是RNA聚合酶D.能夠檢測到標記基因表達產物的受體細胞中，也一定會有目的基因的表達產物評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、胎牛血清(FBS)是天然的培養(yǎng)基；能夠在多種動物卵母細胞的成熟過程中提供足夠的營養(yǎng)物質，起到非常好的促進效果。下表是后期胚胎培養(yǎng)液(CR2后液）中添加不同濃度FBS對牛核移植胚胎發(fā)育的影響情況，下列敘述正確的是。

血清的不同濃度水平對牛核移植胚胎發(fā)育的影響。組別培養(yǎng)液卵裂率/%囊胚率/%對照組CR2前液+CR2后液59.17±1.3413.53±2.04試驗組1CR2前液+10%FBSCR2后液62.14+1.7813.78±2.77試驗組2CR2前液+20%FBSCR2后液68.95±4.1526.09±2.20試驗組3CR2前液+30%FBSCR2后液62.02±8.648.78±3.20A.囊胚中內細胞團發(fā)育成胎膜和胎盤B.添加20%FBS是促進核移植胚胎發(fā)育的最適濃度C.從卵巢采集的卵母細胞需在體外培育成熟D.添加不同濃度的FBS對卵裂率和囊胚率均有促進作用10、生物技術安全性和倫理問題是社會關注的熱點。下列相關敘述正確的是（）A.應嚴格選擇轉基因植物的目的基因，避免產生對人類有害的物質B.當今社會的普遍觀點是禁止克隆人的實驗，但不反對治療性克隆C.反對設計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術選擇性設計嬰兒D.生物武器用微生物、毒素，干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力11、抗生素可由微生物產生，具有抑菌作用，能在瓊脂培養(yǎng)基中擴散。在篩選產生抗生素的菌種時，先在瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種從土壤中獲得的甲菌，在27℃下培養(yǎng)3天，形成菌落。然后接種乙、丙、丁三種致病菌（圖a），繼續(xù)在同樣條件下培養(yǎng)3天，結果如圖b。分析結果；可得出的結論是。

A.甲菌產生了抗生素B.丙菌的生長被乙菌產生的抗生素抑制C.乙菌的生長被甲菌產生的抗生素抑制D.丁菌產生的抗生素抑制了丙菌的生長12、下圖表示利用細胞融合技術進行基因定位的過程，在人-鼠雜種細胞中人的染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產物進行基因定位?，F檢測細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合B.細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細胞C.芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上D.胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上13、以純化鑒定后的重組大腸桿菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾細胞及骨髓瘤細胞（2n=62-68），篩選雜交瘤細胞，制備抗RecQ解旋酶單克隆抗體（mAb），相關檢測結果如圖A、B所示。有關說法正確的是（）

圖A雜交瘤細胞染色體數目圖B不同濃度mAb對RecQ蛋白結合DNA活性的影響A.重組大腸桿菌RecQ解旋酶可刺激相應B淋巴細胞增殖分化B.單克隆抗體的制備過程中需要進行2次篩選和2次抗原檢測C.雜交瘤細胞在融合的過程中可能會發(fā)生染色體數目的丟失D.該mAb能特異性與RecQ解旋酶結合，在稀釋度為1/800時可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結合14、2019年，中國科學院神經科學研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術，用基因敲除的猴的體細胞通過克隆技術培育出5只克隆疾病猴。下列相關敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾B.受精卵經基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物D.可以運用該基因編輯技術進行生殖性克隆人的研究評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。16、通過統計平板上的________________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在_________________________的平板進行計數。17、生態(tài)工程的設計所依據的是______和______原理18、蛋白質工程在生物制藥上有廣泛的應用。如果已經確認某種新蛋白質可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經確認，如何通過蛋白質工程生產這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯網查找答案。_____19、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結構和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進入人體后容易失效。嘗試根據本節(jié)課所學知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。20、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()21、基因表達載體的組成及其作用。

一個基因表達載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________22、科學家采用定點誘變的方法構建T4溶菌酶的新蛋白質，發(fā)現其中一種新蛋白質的第9和第164位氨基酸殘基被轉換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術的要點是什么？_________評卷人得分四、判斷題(共4題，共36分)23、釀酒酵母的最適生長溫度為30度。()A.正確B.錯誤24、胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。()A.正確B.錯誤25、胚胎發(fā)育早期，細胞的數量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯誤26、生殖性克隆是指通過克隆技術產生獨立生存的新個體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共16分)27、單克隆抗體技術在生物工程中有著廣泛的應用；下圖1是單克隆抗體制備流程圖，下圖2是我國科研人員為了準確篩選沒有明顯表型特征的某種微生物所采用的流程圖，圖3是某雙特異性抗體作用示意圖，雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結合。

（1）據圖2分析，科研人員利用目標微生物編碼膜蛋白的基因序列，構建____________________，并導入用__________處理的大腸桿菌細胞中；獲取大量膜蛋白。

（2）已知細胞合成DNA有“D途徑”和“S途徑”兩條途徑，其中“D途徑”能被氨基嘌呤阻斷。兔子的已免疫的淋巴細胞有上述兩種途徑，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤細胞中只有“D途徑”，但能不斷分裂增殖。據此，圖1所示的__________（填“HAT培養(yǎng)基”或“多孔板”）中添加氨基嘌呤可以達到篩選目的，其原理是______________________________。

（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，目的是______________________________。

（4）與直接使用抗腫瘤藥物相比，將抗腫瘤藥物與雙特異性單克隆抗體結合后給藥，對人體的副作用更小，原因是________________________________________，體現的是雙特異性單克隆抗體在__________方面的用途。28、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結構，使蛋白質變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結構，使蛋白質變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比較了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：

實驗測定結果如下（表中OD260反映溶液中核酸的濃度；OD280反映溶液中蛋白質的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請回答下列問題。

（1）與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質等雜質可溶于氯仿一異戊醇，實驗過程中加入氯仿一異戊醇離心后，應?、賍_____加異丙醇（異丙醇與水互溶）并離心進行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________。

（3）兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是_______。

II：某研究組對玉米開展了組織培養(yǎng)及相關研究；A；B、C、D表示以親本植物為材料進行的四種人工繁殖過程，請據圖回答下列問題：

（1）植物組織培養(yǎng)過程中，外植體需要進行消毒處理。利用圖中的部分葉片進行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用________消毒30s后；用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈傷組織的誘導，對形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的濃度。當玉米愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，出現具有分生能力的綠色芽點，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加____________；以促進苗形成。

（3）研究中用顯微鏡可以觀察到的現象是_______（填下列序號）。

①綠色芽點細胞排列松散②剛融合的雜交細胞發(fā)生質壁分離。

③胚狀體細胞中有葉綠體④分化的愈傷組織的各細胞的形態(tài)大小一致29、化合物S被廣泛應用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)、用菌株C可生產S，S的產量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產量的影響，結果見表。碳源細胞干重（g/L）S產量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18

回答下列問題。

(1)通常在實驗室分離純化培養(yǎng)微生物時，需要設置對照實驗，如果自變量設為培養(yǎng)基不同，則是檢測____________________________。如果自變量設為_________________；則是檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底。

(2)由實驗結果可知，菌株C生長的最適碳源是______；用菌株C生產S的最適碳源是______。菌株C的生長除需要碳源外，還需要______（答出2點即可）等營養(yǎng)物質。

(3)由實驗結果可知，碳源為淀粉時菌株C不能生長，其根本原因是______。

(4)若以制糖廢液作為碳源，為進一步確定生產S的最適碳源濃度，某同學進行了相關實驗。請簡要寫出實驗思路：______。

(5)為測定菌株C的含量，常用_________________進行接種，統計的菌落數往往比活菌的實際數目少，原因是_____________。30、隨著游泳運動的普及；游泳池水質安全問題越來越受到人們的重視。在游泳池池水凈化中，常用的方法是用氯或含有效氯化合物進行氯化消毒。氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，但游離性余氯含量過高會影響人體健康。國家標準規(guī)定的人工游泳池水質指標衛(wèi)生標準包括游離性余氯0.3~1.0mg/L；菌落形成單位不得超過200個/mL等指標。研究人員對某地學校、酒店、健身會所、社區(qū)等場所游泳池水進行抽樣監(jiān)測，其中，對游泳池水活細菌總數進行檢測的實驗步驟如下：

①采樣瓶的預處理：在采樣瓶中加入適量的Na2S2O3溶液后對采樣瓶進行滅菌處理。

②采樣：在客流高峰時段進行采樣。采集位置在水下30cm左右；取水500mL。

③接種：用滅菌吸管吸取水樣1mL；注入滅菌培養(yǎng)皿中。將熔化并冷卻至45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內，每皿15mL。立即旋搖培養(yǎng)皿，使水樣和培養(yǎng)基充分混勻。平行重復若干實驗組。

④計數：待瓊脂凝固后翻轉培養(yǎng)皿；置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統計各組平板上菌落數，并求平均值。

回答下列問題：

(1)檢測游泳池活細菌總數時，不宜用細菌計數板在顯微鏡下直接計數，原因是_____________

(2)Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯。據此分析步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液，對檢測的意義是_____________。

(3)步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應在____________附近進行。為使實驗數據更準確，應至少設置____________個實驗組。步驟③中還應增加對照組，下列不宜作為對照組的是______________。

a．15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

b．1m無菌水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

c．1mL蒸餾水+15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

(4)步驟④中，統計的菌落數往往比活菌的實際數目少，這是因為_____________。若觀察到培養(yǎng)后的培養(yǎng)皿中的菌落連成一片，則該培養(yǎng)皿不宜計數。出現成片的菌落的原因可能步驟③中_____________操作不妥當造成的。

(5)不同季度微生物檢測結果如下表所示，第三季度合格率下降的可能原因包括____________。

a．氣溫升高b．客流量增加。

c．檢測的場館數多d．泳池氯化時間過長。季度檢測場館數合格場館數合格率（%）一3434100.0二403895.0三39932982.5四3636100.0

根據檢測結果，要進一步加強第三季度的場館管理。下列屬于提升游泳池水質安全性的合理建議有____________。

a．強制要求個人淋浴后入池b．增加游泳池水質監(jiān)測的頻次。

c．游泳池裝設水循環(huán)過濾裝置d．每日在臨近開館前氯化消毒評卷人得分六、綜合題(共4題，共20分)31、下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過程和克隆羊培育過程示意圖；請據圖回答下列問題：

（1）圖甲和圖乙所示的過程中，都必須用到的動物細胞工程技術手段是______________。

（2）淋巴細胞能與骨髓瘤細胞融合成一個細胞，②過程常用___________________作為誘導劑，所形成的細胞（僅考慮兩兩融合）有_____________種，從中得到的所需細胞的特點是_______________________。

（3）若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎?原因是_______________________。32、某實驗小組利用轉基因技術培育耐鹽水稻；圖A表示含有耐鹽基因的外源DNA分子，圖B表示質粒，其上含有BamHI；SmaI和HindⅢ三種限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

（1）分析上圖可知，欲構建重組DNA分子，應選用________________兩種限制酶切割質粒和外源DNA分子，使用兩種不同的限制酶切割目的基因的優(yōu)點是________________________。

（2）題（1）中不使用另外一種限制酶切割的原因是______________________，題（1）中構建成功的重組質粒若用該酶切割能產生____________種不同的DNA片段。

（3）質粒中的抗性基因的作用是____________。成功導入了目的基因的受體細胞（受體細胞本身不含四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因），不能在含____________（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。33、干擾素是人體T細胞產生的淋巴因子；幾乎對一切病毒有效且可用于癌癥治療。下圖表示早期利用大腸桿菌生產人干擾素的流程（強啟動子替換普通啟動子有加強基因表達的作用）。此過程生產的干擾素沒有糖鏈，但糖鏈對蛋白質的穩(wěn)定性和半衰期有影響，所以后期需對干擾素進行體外加工?；卮鹣铝袉栴}：

（1）過程①表示通過逆轉錄法獲取目的基因。首先從提取的三種RNA中針對性擴增mRNA，已知真核生物基因的mRNA在5'端通過甲基化保護頭部，3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸序列）保護尾部不被降解。為了針對性擴增mRNA堿基序列，該如何設計逆轉錄第一步時的DNA引物?________________________。

（2）過程③形成的重組質?？赡転榉聪蜻B接，可利用過程④PCR技術進行鑒別。如圖所示，分析已知堿基序列后，設計一對引物b和c（或者引物a和d）進行PCR擴增，如果實驗結果是____________則為正向連接，如果結果是____________則為反向連接。

（3）將基因表達載體導入大腸桿菌時，應使大腸桿菌處于____________態(tài)；以提高轉化效率。

（4）提取產品需破碎大腸桿菌，原因是________________________。

（5）大腸桿菌不能生成糖基化的干擾素，原因是________________________。

（6）生產干擾素的檢測除核酸分子檢測和蛋白質分子檢測外，還需要進行____________。34、下圖為哺乳動物的胚胎干細胞及其分化的示意圖。請據圖回答下列問題：

（1）胚胎干細胞是從動物胚胎發(fā)育至________期的內細胞團等中分離得到的一類細胞。

（2）圖中分化程度最低的干細胞是__________。在體外培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)液中加入________因子；可誘導該種干細胞向不同類型的組織細胞分化。

（3）在機體內，皮膚干細胞分化成皮膚細胞是機體細胞中基因________的結果。

（4）某患者不能產生正常的白細胞，通過骨髓移植可以達到治療的目的。骨髓移植的實質是將上圖中的__________細胞移植到患者體內。

（5）若要克隆某種哺乳動物，從理論上分析，上述紅細胞、白細胞、皮膚細胞、神經細胞中不能作為供體的細胞是成熟的________，其原因是_________________________________________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、A【分析】【分析】

平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

【詳解】

A；倒平板時需左三圈；右三圈的輕輕晃動，以保證表面平整，A錯誤；

B；第一次劃線后；灼燒接種環(huán)待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線，以保證第二次劃線時的菌種來自第一次劃線的末端，重復操作進行第三次劃線，B正確；

C；將一個未接種的平板倒置培養(yǎng)作為對照；以檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，若未接種的培養(yǎng)基上也有菌體生長，說明滅菌不徹底，C正確；

D；圖中I、II區(qū)的酵母菌數量均太多；不能分離到單個菌體，故應從III區(qū)挑取單菌落，D正確。

故選A。2、C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官；組織或細胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體．植物組織培養(yǎng)依據的原理是植物細胞的全能性．愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞．

植物細胞工程技術的應用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖；作物脫毒；人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產．

【詳解】

A；細胞產物的工廠化生產是植物細胞工程的重要用途之一；A正確；

B；培養(yǎng)過程中需要脫分化形成愈傷組織；然后懸浮培養(yǎng)愈傷組織細胞，B正確；

C；培養(yǎng)的愈傷組織不需要再分化就能產生特定的細胞產物；C錯誤；

D；培養(yǎng)的細胞收集后一般要破碎提取有效成分；D正確；

故選C。3、A【分析】【分析】

絕大多數微生物都能利用葡萄糖；但只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此，在分離分解尿素的細菌實驗中，使用的培養(yǎng)基配方除了無機鹽；水和瓊脂，還應該有作為碳源的葡萄糖、作為氮源且起到選擇作用的尿素。

【詳解】

A；該培養(yǎng)基中既有尿素作為唯一氮源；又有其他各種營養(yǎng)成分，該培養(yǎng)基可以選擇出分解尿素的細菌，A正確；

B；該培養(yǎng)基中沒有氮源；分解尿素的細菌無法生長，B錯誤；

C；該培養(yǎng)基中缺少碳源；尿素分解菌不能生長，C錯誤；

D；該培養(yǎng)基中缺少尿素作為唯一氮源；但牛肉膏、蛋白胨可提供氮源，該培養(yǎng)基起不到選擇作用，能利用尿素或牛肉膏、蛋白胨的細菌都能生長，D錯誤。

故選A。4、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞，誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞，進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；脾B淋巴細胞只能產生針對相應抗原的抗體；每個脾B淋巴細胞只能產生一種抗體，A錯誤；

B；滅活病毒誘導細胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用；使細胞互相凝聚，故滅活病毒的抗原結構依然存在，B正確；

C；細胞篩選時獲得雜交瘤細胞需要在選擇培養(yǎng)基上篩選；細胞融合時所用的培養(yǎng)液需要再加入誘導劑，兩者的成分上有差異，C正確；

D；雜交瘤細胞具有無限增殖的特點；無接觸抑制現象，因此該細胞克隆化培養(yǎng)過程中不會出現接觸抑制，D錯誤。

故選B。5、C【分析】【分析】

圖示的是動物細胞核移植技術；①代表利用顯微注射將成纖維細胞注射到去核的卵母細胞中，②代表體外早期胚胎培養(yǎng)，③代表胚胎移植。

【詳解】

A；圖示的是動物細胞核移植技術；①代表利用顯微注射將成纖維細胞注射到去核的卵母細胞中，A正確；

B；進行體外動物細胞培養(yǎng)需要在培養(yǎng)基中添加血清等天然成分；B正確；

C；圖中過程需用到細胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術；沒用到體外受精技術，C錯誤；

D；圖示兩只克隆猴的基因完全相同；因此用于醫(yī)學研究可最大限度排除基因差異的干擾，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

生物武器的特點：1；單位面積效應大；2、有特定的傷害對象；3、具有傳染性；4、危害時間久；5、不易被發(fā)現和鑒定；6、使用者本身易受傷害；7、生物武器造價低；技術難度不大，隱秘性強，可以在任何地方研制和生產。

生物武器的局限性：1；生物武器主要指病原微生物；所以它們的生存、繁殖、死亡易受環(huán)境條件（如溫度）的影響。2、還受地形、風向等多種條件影響。3、生物武器使用時不易控制，使用不當可危害本方安全。

【詳解】

生物武器是多種多樣的；對于不同的生物武器應用不同的防治方法，但總的原則是禁止生物武器的生產和擴散，因此ABD正確，C錯誤。

故選C。7、A【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是指根據某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學；物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基；使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率。

【詳解】

制備固體培養(yǎng)基的基本過程為計算；稱量、溶化、滅菌、倒平板；纖維素選擇培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，沒有倒平板這一步，BCD錯誤，A正確。

故選A。8、D【分析】【分析】

基因表達載體的構建：1；過程：用同一種限制酶切割目的基因和運載體；再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。2、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達和發(fā)揮作用。3、基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因。（1）啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結合位點，能控制著轉錄的開始；（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉錄的結束；（3）標記基因便于目的基因的鑒定和篩選。

【詳解】

A；限制酶Ⅰ和酶Ⅱ識別的核苷酸序列不同；所以用限制酶Ⅰ和酶Ⅱ同時切割目的基因和質?？煞乐苟呷我饨Y合，A正確；

B；DNA聚合酶、DNA連接酶的作用部位都是磷酸二酯鍵；前者是連接單個的脫氧核苷酸，后者是連接DNA片段，B正確；

C；啟動子和終止子都是一段有特殊結構的DNA片段；其中啟動子是RNA聚合酶的結合位點，能啟動轉錄過程，而終止子能終止轉錄過程，C正確；

D；重組DNA分子上的抗性基因可用于目的基因的檢測與鑒定；但是有目的基因也不一定成功表達，D錯誤。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)9、C【分析】囊胚中內細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，A錯誤；表中信息顯示：添加20%FBS的試驗組2，其卵裂率和囊胚率都高于對照組和其它試驗組，說明促進核移植胚胎發(fā)育的最適濃度范圍在為20%FBS左右，但20%FBS不一定是最適濃度，B錯誤；從卵巢采集的卵母細胞不具有受精能力，需在體外培育成熟后，才能與獲能的精子受精，C正確；表中信息顯示：各試驗組的卵裂率均高于對照組，說明添加不同濃度的FBS對卵裂率均有促進作用，試驗組1、2的囊胚率高于對照組，試驗組3的囊胚率低于對照組，說明在一定濃度范圍內，隨添加的FBS濃度的升高對囊胚率均有促進作用，但超過該濃度范圍卻起抑制作用，D錯誤。10、A:B:C【分析】【分析】

（1）生物技術安全性問題包括食物安全；生物安全、環(huán)境安全三個方面。

（2）倫理問題主要在克隆人的問題上出現爭議。

【詳解】

A；轉基因植物合成的某些新蛋白質；可能會成為過敏原而引起少數人過敏，A正確；

B；治療性克隆是為了從胚胎中取出干細胞用于醫(yī)學研究和治療；生殖性克隆就是將人的體細胞移植到去核的卵中，然后將其在體外形成的胚胎移植到母體子言中，最終經足懷胎后生下的嬰兒就是克隆人，當今社會的大多數人對克隆人的研究持否定態(tài)度，但不反對治療性克隆，B正確；

C；反對設計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術選擇性設計嬰兒；C正確；

D；生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經過基因重組的致病菌等，這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷效果，干擾是動物或人體細胞受到病毒侵染后產生的一種糖蛋白，它是一種抗病毒的特效藥，D錯誤。

故選ABC。11、A:C【分析】【分析】

【詳解】

分析培養(yǎng)結果（圖b）可知，乙、丙、丁三種致病菌不會產生抗生素，否則靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生長。進一步由b圖可知；乙菌的生長被抑制，最可能的原因是甲菌產生了抗生素，此種抗生素只能抑制乙菌的生長，而對丙；丁兩種菌沒有影響，AC正確。

故選AC。12、A:C:D【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號染色體；Ⅱ保留2、11號染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號染色體上。

【詳解】

A；動物細胞融合過程中；可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導劑促進細胞融合，A正確；

B；細胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號染色體；故不會是鼠-鼠融合細胞，B錯誤；

CD；根據分析可知；芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上，胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD。13、A:C:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞(體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；重組大腸桿菌RecQ解旋酶相當于抗原；能刺激機體產生相應的體液免疫應答，則在人體內可刺激B細胞增殖分化為漿細胞和記憶B細胞，A正確；

B；單克隆抗體的制備過程中需要進行2次篩選和1次抗原檢測；第一次是用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；第二次是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，進一步篩選出能產生人們所需要抗體的雜交瘤細胞，B錯誤；

C；據圖1分析；染色體數目有為80-93的細胞，免疫小鼠中B淋巴細胞染色體數目為40，骨髓瘤細胞染色體數目為62-68，兩者之和大于80-93，故雜交瘤細胞在融合的過程中可能會發(fā)生染色體數目的丟失，C正確；

D、據圖2分析，單抗稀釋度為1/800時RecQ解旋酶結合DNA活性最低，可知mAb能特異性與RecQ解旋酶結合可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結合；D正確。

故選ACD。14、B:D【分析】【分析】

動物細胞核移植技術是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細胞通過克隆技術（屬于無性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾，A正確；

B；經基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物；C正確；

D；不能利用該技術進行克隆人的研究；D錯誤。

故選BD。

【點睛】三、填空題(共8題，共16分)15、略

【解析】①.胚胎細胞②.體細胞16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數30～30017、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】生態(tài)學工程學18、略

【分析】【詳解】

蛋白質工程的基本途徑：從預期的蛋白質功能出發(fā)，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進行。該蛋白質的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質工程，生產該蛋白質新藥的基本過程為：根據已知的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質新藥基因→將獲得的目的基因與質粒構建形成基因表達載體→將重組質粒導入受體菌→獲得工程菌→生產該蛋白質新藥?！窘馕觥扛鶕阎陌被嵝蛄小业较鄬拿撗鹾塑账嵝蛄小铣稍摰鞍踪|新藥基因→將獲得的目的基因與質粒構建形成基因表達載體→將重組質粒導入受體菌→獲得工程菌→生產該蛋白質新藥19、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質工程技術替換少數氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|工程技術替換少數氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質。20、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤。【解析】錯誤21、略

【分析】略【解析】目的基因標記基因啟動子終止子啟動子上游RNA聚合酶終止子下游轉錄標記22、略

【分析】【詳解】

蛋白質形成二硫鍵，使蛋白質的結構更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術屬于蛋白質工程技術，其步驟為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術屬于蛋白質工程技術，該技術的要點是從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。四、判斷題(共4題，共36分)23、B【分析】【詳解】

釀酒酵母的最適生長溫度是28℃；但在發(fā)酵過程中，一般將溫度控制在18-30℃，這是因為果皮表面附著的野生酵母菌可能有多種（有多種酵母菌參與了發(fā)酵過程），從實踐的角度看，大致控制溫度范圍比較簡單易行。

故本說法錯誤。24、A【分析】【分析】

早期胚胎發(fā)育從受精卵開始；當卵裂分裂到16-32個細胞時，卵裂產生的子細胞逐漸形成致密的細胞團，形似桑葚時，這時的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞。胚胎進一步發(fā)育，細胞開始出現分化，形成內細胞團；滋養(yǎng)層；隨著胚胎進一步發(fā)育，胚胎內部出現了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個時期的胚胎叫做囊胚。胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時期聚集在胚胎一端的細胞形成內細胞團，將來發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內壁拓展和排列的細胞，稱為滋養(yǎng)層細胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營養(yǎng)，故“胚胎發(fā)育至囊胚期時，細胞逐漸分化表述”正確。25、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細胞數量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。26、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說的克隆人，通過克隆技術產生獨立生存的新個體，即通常所說的克隆人，該說法正確。五、實驗題(共4題，共16分)27、略

【分析】【分析】

單克隆抗體制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）

據圖分析，科研人員利用基因工程將目標微生物編碼膜蛋白的基因序列，構建基因表達載體，并導入用CaCl2處理的大腸桿菌細胞中；使目的基因增殖并表達可獲取大量膜蛋白。

（2）

雜交瘤細胞由淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成；其合成DNA有“D途徑”和“S途徑”兩條途徑?！癏AT培養(yǎng)基”有篩選作用，在添加了氨基喋吟的HAT培養(yǎng)基中，雜交瘤細胞“D途徑”雖然被氨基嘌呤阻斷，但可通過“S途徑”合成DNA，不斷分裂增殖；而淋巴細胞和淋巴細胞自身融合細胞因缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力，而不能在HAT培養(yǎng)基中生長；骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞自身融合細胞在HAT培養(yǎng)基中因DNA合成途徑被氨基嘌呤阻斷而不能進行DNA復制，也不生長。

（3）

帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合；可起到標記目標微生物的作用。

（4）

雙特異性單克隆抗體借助單克隆抗體的導向作用；能將藥物定向帶到癌細胞所在的位置，在原位殺死癌細胞，這樣既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量。體現的是雙特異性單克隆抗體在治療疾病方面起到運載藥物的用途。

【點睛】

本題考查單克隆抗體的制備過程和動物細胞的培養(yǎng)，意在考查學生對所學知識的理解與掌握程度，培養(yǎng)了學生分析圖示、獲取信息、解決問題的綜合應用的能力?！窘馕觥浚?）基因的表達載體Ca2+或CaCl2

（2）HAT培養(yǎng)基淋巴細胞和淋巴細胞自身融合細胞因缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力；故不能在HAT培養(yǎng)基中生長；骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞自身融合細胞在HAT培養(yǎng)基中因DNA合成途徑被氨基嘌呤阻斷而不能進行DNA復制，而不生長。

（3）標記目標微生物。

（4）雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物定向帶到腫瘤細胞所在位置，在原位殺死癌細胞治療疾病（運載藥物）28、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有機體中的重要成分；在生物體中核酸常與蛋白質結合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）兩大類，在真核細胞中，前者主要存在于細胞核中，后者主要存在于細胞質及核仁里。在制備核酸時，通過研磨破壞細胞壁和細胞膜，使核蛋白被釋放出來。提取DNA有有多種方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有區(qū)別又有聯系。

II：題圖分析：A表示利用生殖細胞得到單倍體植株；B表示通過胚狀體進行無性繁殖；其中①為脫分化；再分化；C為植物組織培養(yǎng)；D表示植物體細胞雜交，其中②是誘導原生質體融合。

【詳解】

I：（1）液氮溫度低，液氮中研磨會研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量。

（2）氯仿-異戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-異戊醇，離心后，氯仿-異戊醇位于試管的底部，DNA溶于上清液中，所以離心后應該取上清液；含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物，說明DNA不溶于異丙醇，而雜質能溶于異丙醇。

（3）從表中數據可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA較多，根據CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物組織培養(yǎng)過程中；整個過程應嚴格無菌無毒，利用圖中的部分葉片進行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用體積分數為70%的酒精消毒30s后，用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。

（2）為促進愈傷組織再分化；在配制分化培養(yǎng)基時需降低2，4-D的濃度。當玉米愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時，出現具有分生能力的綠色芽點，但要繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加適量的生長素，以促進苗形成。

（3）①芽是植物體中具有分生能力的組織；細胞排列緊密，①錯誤；

②剛融合的植物體細胞沒有成熟的大液泡；無法構成滲透系統，不能發(fā)生質壁分離現象，②錯誤；

③胚狀體細胞出現具有分生能力的綠色芽；因此其細胞內有葉綠體，③正確；

④分化的愈傷組織的結果形成了具有根和芽的胚狀體；細胞的形態(tài)發(fā)生了變化，④錯誤。

故選③。

【點睛】

本題主要考查DNA提取原理、操作過程及實驗結果的分析以及植物組織培養(yǎng)技術，意在考查學生讀圖能力和分析應用能力。【解析】研磨充分，低溫抑制酶活性抑制DNA酶的活性，減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質能溶于異丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNA（體積分數為70-75%）酒精降低（適量的）生長素③29、略

【分析】【分析】

微生物的接種方法包括稀釋涂布平板法和平板劃線法，二者都可以用于篩選單菌落，但是前者可以用于計數，后者不行。培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質，是進行微生物培養(yǎng)的物質基礎。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無機鹽等營養(yǎng)物質，此外還要滿足微生物對特殊營養(yǎng)物質，pH和O2的需求。稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。利用稀釋涂布平板法得到數值往往偏小，因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

【詳解】

（1）在實驗室分離純化培養(yǎng)微生物時；常見的對照實驗有兩種，當用不同的培養(yǎng)基作為自變量進行對照實驗時，常用來檢測所配制的培養(yǎng)基是否具有選擇作用，例如以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進行對照實驗，可以后者篩選分解尿素的微生物，驗證其起到選擇培養(yǎng)基的作用；當用同一種培養(yǎng)基進行接種和不接種微生物的對照實驗時，則可檢驗培養(yǎng)基滅菌是否合格，若未接種的空白培養(yǎng)基上生長出部分菌落，說明該培養(yǎng)基滅菌不合格。

（2）由實驗結果可知；當碳源為葡萄糖時，菌株C的細胞干重最大，為3.12g/L，因此，菌株C生長的最適碳源是葡萄糖。當碳源為制糖廢液時，S產量最大，為0.18g/L，因此菌株C生產S的最適碳源是制糖廢液。

微生物生長所需的營養(yǎng)物質包括碳源；氮源、無機鹽、水等。

（3）碳源為淀粉時菌株C細胞干重為0.01g/L；幾乎不能生長，其直接原因是該菌細胞內不含有分解淀粉的酶，因此無法分解淀粉作為碳源，根本原因是菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

（4）若要探究生產S的最適制糖廢液的濃度；則實驗自變量為不同濃度的制糖廢液，因變量為S產量，因此需要配制一系列不同濃度梯度的制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基，接種菌株C，然后將其置于相同且適宜的環(huán)境中進行培養(yǎng)，一段時間后，測定并比較不同濃度制糖廢液中的S產量，S產量最高時對應的制糖廢液濃度即為生產S的最適碳源濃度。

（5）微生物接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者可以用于計數，前者不行，在進行稀釋涂布平板法計數微生物時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此該計數方法得到的菌落數往往比活菌的實際數目少?！窘馕觥?1)選擇培養(yǎng)基是否具有選擇性接種與不接種。

(2)葡萄糖制糖廢液氮源；無機鹽、水。

(3)菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

(4)分別配制一系列不同濃度梯度的以制糖廢液為唯一碳源的培養(yǎng)基；培養(yǎng)菌株C，其他條件相同且適宜，一段時間后，測定并比較不同濃度制糖廢液中的S的產量，S產量最高時對應的制糖廢液濃度即為生產S的最適碳源濃度。

(5)稀釋涂布平板法當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落30、略

【分析】【分析】

統計菌落數目的方法：（1）顯微鏡直接計數法①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法：用計數板計數；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計數法（活菌計數法）①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

（1）

測定培養(yǎng)液中游泳池活細菌總數可以使用稀釋涂布平板法進行計數；而顯微鏡直接計數獲得的結果包含活菌和死菌的總數。

（2）

氯化消毒后池水中的游離性余氯可保證持續(xù)消毒效果，Na2S2O3具有還原性，可消除水樣中的殘余氯，對游泳池水活細菌總數進行檢測，步驟①中在采樣瓶中添加Na2S2O3溶液；可以避免殘留氯殺菌。

（3）

微生物培養(yǎng)時應注意無菌操作；故步驟③中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿時，應在酒精燈火焰附近進行；為使實驗數據更準確，應至少設置3個實驗組；微生物培養(yǎng)時應注意避免雜菌污染，由于蒸餾水中含有較多的雜質和微生物，故不宜用作對照組，故選c。

（4）

步驟④中；用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；出現成片的菌落的原因可能是水樣與培養(yǎng)基沒有混勻，是步驟③中旋搖操作不充分造成的。

（5）

a；氣溫升高會導致微生物繁殖加快；導致合格率降低，a正確；

b、客流量增加，攜帶的微生物增多，導致合格率降低，b正確；

c；由于不同場館分別計數；故檢測的場館數多不是導致合格率降低的原因，c錯誤；

d；泳池氯化時間過長會殺滅更多的微生物；不是導致合格率降低的原因，d錯誤。

故選ab。

根據檢測結果，要進一步加強第三季度的場館管理，可增加游泳池水質監(jiān)測的頻次、游泳池裝設水循環(huán)過濾裝置，強制要求個人淋浴后入池不現實，每日在臨近開館前氯化消毒，余氯含量過高會影響人體健康，故選bc?！窘馕觥?1)顯微鏡直接計數獲得的結果包含活菌和死菌的總數。

(2)避免余氯殺菌。

(3)酒精燈火焰3c

(4)當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落旋搖

(5)abbc

六、綜合題(共4題，共20分)31、略

【分析】【分析】

圖甲為單克隆抗體制備過程，圖中①表示給小鼠注射特定的抗原，②表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，③表示篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，④表示雜交瘤細胞的體內培養(yǎng)。圖乙表示克隆羊培育過程，圖中a表示細胞核移植，b表示胚胎移植技術。

【詳解】

（1）圖甲單克隆抗體制備過程；圖乙克隆羊培育過程，都必須用到的動物細胞工程技術手段是動物細胞培養(yǎng)。

（2）②表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合；該過程常在聚乙二醇誘導下完成，所形成的細胞（僅考慮兩兩融合）有3種，分別為2個B淋巴細胞融合，2個骨髓瘤細胞融合和1個B淋巴細胞和1個骨髓瘤細胞融合。從中得到的所需細胞為能分泌特定抗體的雜交瘤細胞，該細胞的特點是既能迅速大量增殖，又能產生專一的抗體。

（3）克隆羊細胞核的遺傳物質來自于白面綿羊；細胞質的遺傳物質來自于黑面綿羊的卵母細胞，克隆羊的性狀并不與白面綿羊完全相同，原因是卵母細胞細胞質的遺傳物質也能控制某些性狀。

【點睛】

本題具有一定的綜合性，屬于考綱中識記、理解層次的要求，考查了單克隆抗體制備過程、應用，動物細胞培養(yǎng)，核移植的過程和應用等知識，要求考生就一定的獲取圖示信息能力、審題能力以及分析能力。【解析】①.動物細胞培養(yǎng)②.聚乙二醇③.3④.