2025年人教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年人教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷127考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、番茄葉片受害蟲的損傷后；葉肉細(xì)胞迅速合成蛋白酶抑制劑，抑制害蟲的消化作用。人們嘗試將番茄的蛋白酶抑制劑基因?qū)擞衩?，以?duì)付獵獗的玉米螟。下圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的流程圖，下列敘述正確的是（）

A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割番茄的DNA得到的產(chǎn)物就是蛋白酶抑制劑基因B.用氯化鈣處理玉米受體細(xì)胞，有利于含目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入C.重組Ti質(zhì)粒應(yīng)有DNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以啟動(dòng)蛋白酶抑制劑基因的轉(zhuǎn)錄D.若將目的基因?qū)攵扼w玉米的花粉細(xì)胞，通過(guò)花藥離體培養(yǎng)，再用秋水仙素處理單倍體植株，可獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因玉米2、下列關(guān)于基因工程中操作工具的敘述，不正確的是（）A.限制性內(nèi)切酶識(shí)別并在特定位置斷開(kāi)磷酸二酯鍵B.處理載體和處理目的基因的限制酶通常是相同的C.載體中常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因D.HIV病毒可以直接作為基因工程的載體3、關(guān)于微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和菌種保存的敘述，正確的是（）A.平板劃線法和稀釋涂布平板法分別用的接種工具是涂布器和接種環(huán)B.若液體培養(yǎng)基需震蕩培養(yǎng)，其目的是使微生物分布均勻以便涂布C.長(zhǎng)期保存的菌種，需放在-20℃的冷凍箱中保存D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物，可以長(zhǎng)期保存菌種4、CRISPR基因編輯技術(shù)；是利用CRISPR工具特異性對(duì)DNA分子進(jìn)行編輯的技術(shù)。如圖所示，利用定制的RNA序列特異性識(shí)別目標(biāo)DNA，再由Cas9蛋白將目標(biāo)DNA進(jìn)行剪切。這樣便可以對(duì)其進(jìn)行拼接與編輯。下列有關(guān)CRISPR基因編輯技術(shù)的敘述錯(cuò)誤的是（）

A.該技術(shù)利用了堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理B.定制RNA序列可識(shí)別、切割DNA上的目標(biāo)位點(diǎn)C.Cas9蛋白相當(dāng)于--種限制性核酸內(nèi)切酶D.運(yùn)用該技術(shù)也可以使基因沉默（不再表達(dá)）5、下列有關(guān)菊花組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.菊花組織培養(yǎng)的全過(guò)程都要在有光條件下進(jìn)行B.為防止雜菌污染，所用器械需滅菌，實(shí)驗(yàn)人員需進(jìn)行無(wú)菌操作C.切取幼嫩的菊花莖段，因?yàn)樵摬课蝗菀渍T導(dǎo)形成愈傷組織D.實(shí)驗(yàn)中，用酒精和次氯酸鈉溶液對(duì)外植體消毒6、下圖表示核移植與克隆動(dòng)物的相關(guān)圖解，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.用于核移植的供體細(xì)胞①一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞B.選用去核卵母細(xì)胞的主要原因是其細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核的全能性表達(dá)C.采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到的②時(shí)期表示減數(shù)第二次分裂中期D.圖示過(guò)程說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞仍具有發(fā)育的全能性評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)7、2019年，中國(guó)科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物D.可以運(yùn)用該基因編輯技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人的研究8、下列有關(guān)生殖細(xì)胞的發(fā)生和受精過(guò)程的敘述正確的是（）A.雄原核形成的同時(shí)，卵子完成減數(shù)第二次分裂B.透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障C.精子與卵細(xì)胞膜相互融合，精子入卵D.卵子是從動(dòng)物的初情期開(kāi)始，經(jīng)過(guò)MⅠ和MⅡ兩次連續(xù)分裂形成的9、科研人員利用甲、乙兩種植物的各自優(yōu)勢(shì)，通過(guò)植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物的過(guò)程中，相關(guān)操作不合理的是（）A.利用胰蛋白酶分別處理甲、乙植物以獲得原生質(zhì)體B.利用電激或滅活的病毒誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體的融合C.利用秋水仙素誘導(dǎo)組織培養(yǎng)中愈傷組織細(xì)胞壁再生D.將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株10、RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增的技術(shù)稱為RT－PCR，過(guò)程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.過(guò)程①需要RN逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、核糖核苷酸等條件B.真核細(xì)胞的mRNA經(jīng)過(guò)程①②獲得的DNA無(wú)內(nèi)含子片段C.過(guò)程③PCR擴(kuò)增時(shí)引物中的CG含量會(huì)影響退火溫度D.RT－PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸檢測(cè)11、利用膠體金檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)抗原最常用的是雙抗夾心法。雙抗夾心法需要準(zhǔn)備待測(cè)抗原的配對(duì)抗體；一個(gè)抗體用膠體金標(biāo)記（即膠體金標(biāo)記抗體）并固定在結(jié)合墊上，另一個(gè)抗體固定在NC膜的檢測(cè)線（T線）上。另外，還需要準(zhǔn)備能與金標(biāo)抗體特異性結(jié)合的二抗并固定于NC膜的控制線（C線）上，如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.樣品中含有待測(cè)抗原時(shí)，T線和C線均會(huì)顯色B.圖中的抗體都需要與抗原結(jié)合C.結(jié)合墊是為了固定金標(biāo)抗體D.若T線不顯色說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果無(wú)效12、下列關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述正確的是（）A.從酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素說(shuō)明相應(yīng)的目的基因完成了在受體細(xì)胞中的表達(dá)B.在植物細(xì)胞與組織培養(yǎng)中，花藥不能作為組織培養(yǎng)的材料C.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞D.多種顯微操作和處理技術(shù)使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能13、下列關(guān)于試管嬰兒和克隆猴的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.受精過(guò)程中，透明帶和卵細(xì)胞膜的反應(yīng)保證了受精卵染色體數(shù)目的正常B.克隆猴的性狀表現(xiàn)與細(xì)胞核供體的一模一樣，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性C.試管嬰兒的生殖方式屬于無(wú)性生殖，克隆猴的生殖方式屬于有性生殖D.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”在操作上唯一的區(qū)別是前者需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)14、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有______能力的_____。15、目的基因是指：______16、純化DNA，去除雜質(zhì)有________________個(gè)方案。17、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。18、在我國(guó)市場(chǎng)上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問(wèn)題，進(jìn)行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對(duì)該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認(rèn)同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為：目前我國(guó)市場(chǎng)上根本沒(méi)有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點(diǎn)是什么_____？19、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共18分)20、制備單克隆抗體時(shí)，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯(cuò)誤21、要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終必須通過(guò)改造氨基酸序列來(lái)完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共32分)22、為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個(gè)堿基對(duì)），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見(jiàn)下圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因前；需先獲得細(xì)菌的_________。

（2）為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是________________。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定，下列選項(xiàng)中_______的設(shè)定與引物有關(guān)，________的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。（填序號(hào)）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時(shí)間⑤退火時(shí)間⑥延伸時(shí)間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含___個(gè)密碼子；如虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測(cè)定酶活性，結(jié)果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對(duì)活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為_(kāi)_____。23、廚余垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對(duì)較少，存在發(fā)酵周期長(zhǎng)、效率低等缺點(diǎn)，極易對(duì)環(huán)境造成污染。

（1）為探究圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌處理某廚余垃圾廢液的最佳接種量比；用于制備微生物菌劑，研究者做了如下實(shí)驗(yàn)：

①將兩種菌液進(jìn)行不同配比分組處理；如下表所示：

。編號(hào)R0R1R2R3圓褐固氮菌∶巨大芽孢桿菌1∶00∶11∶12∶1將等量上表菌液分別接種于100mL_____中進(jìn)行震蕩培養(yǎng)。本實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組的處理應(yīng)為_(kāi)____。

②培養(yǎng)3天后測(cè)定活菌數(shù)。取各組菌液采用_____法接種于基本培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后選取菌落數(shù)在_____范圍內(nèi)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)；并依據(jù)菌落的形態(tài)特征對(duì)兩種菌進(jìn)行區(qū)分，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖。

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，兩種菌混合接種時(shí)有效菌落數(shù)均大于單獨(dú)接種，從代謝產(chǎn)物角度分析，原因可能是______________。接種量比例為_(kāi)____________時(shí)；廢液中兩菌的有效活菌數(shù)最多。

（2）為進(jìn)一步探究菌種比例對(duì)該廚余垃圾廢液中蛋白質(zhì)；脂肪等有機(jī)物的降解效果；測(cè)得15天內(nèi)廢液中蛋白質(zhì)、脂肪的含量變化如下圖所示：

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，對(duì)該廚余垃圾廢液中蛋白質(zhì)、脂肪的降解效果最好的兩種菌接種比分別為_(kāi)____、_____。

（3）固態(tài)廚余垃圾因富含粗纖維、蛋白質(zhì)、淀粉等物質(zhì)，可以通過(guò)蒸發(fā)、碾磨、干燥等方式進(jìn)行加工，使加工后的產(chǎn)物在微生物的作用下形成有機(jī)復(fù)合肥等肥料；收集微生物處理后的廚余垃圾殘?jiān)?，?jīng)晾曬干后制成蛋白飼料；通過(guò)以上處理可實(shí)現(xiàn)_____（選填選項(xiàng)前的符號(hào)）。

A．物質(zhì)循環(huán)再生B．能量多級(jí)利用C．提高能量傳遞效率24、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能。科研人員成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對(duì)沒(méi)有分化的_______團(tuán)，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。25、番茄果實(shí)在成熟的過(guò)程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮?？茖W(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問(wèn)題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過(guò)抑制PG基因的_____過(guò)程；使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱為_(kāi)____。要檢測(cè)感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過(guò)程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：

分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；用限制性核酸內(nèi)切酶切割番茄的DNA得到的產(chǎn)物不一定是蛋白酶抑制劑基因；需要進(jìn)行篩選，A錯(cuò)誤；

B；將番茄的蛋白酶抑制基因轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞時(shí)；最常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，氯化鈣用于處理微生物，B錯(cuò)誤；

C；重組Ti質(zhì)粒應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位；即啟動(dòng)子，以啟動(dòng)蛋白酶抑制劑基因的轉(zhuǎn)錄，C錯(cuò)誤；

D；若將目的基因?qū)胗衩谆ǚ奂?xì)胞；通過(guò)花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理可獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因玉米，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

基因工程的操作工具有限制酶；DNA連接酶和運(yùn)載體。

【詳解】

A；一種限制酶只能識(shí)別特定的DNA序列；且在特定的位點(diǎn)打開(kāi)磷酸二酯鍵，A正確；

B；常用同種限制酶處理載體和目的基因；以產(chǎn)生相同的黏性末端，B正確；

C；載體中常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因；在培養(yǎng)基中添加相應(yīng)的抗生素以篩選含目的基因的細(xì)胞，C正確；

D；HIV病毒需要經(jīng)過(guò)改造才能作為基因工程的載體；D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、C【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

菌種保藏的原理：是為了達(dá)到長(zhǎng)期保持菌種的優(yōu)良特性；核心問(wèn)題是必須降低菌種變異率，而菌種的變異主要發(fā)生于微生物旺盛生長(zhǎng)；繁殖過(guò)程，因此必須創(chuàng)造一種環(huán)境，使微生物處于新陳代謝最低水平，生長(zhǎng)繁殖不活躍狀態(tài)；常用的方法有臨時(shí)保存法和甘油管藏法。

【詳解】

A；平板劃線法的接種工具是接種環(huán)；稀釋涂布平板法的接種工具是涂布器，A錯(cuò)誤；

B；若液體培養(yǎng)基需震蕩培養(yǎng)；其目的是增加培養(yǎng)液的溶氧，為微生物呼吸作用提供充足的氧氣，B錯(cuò)誤；

C；長(zhǎng)期保存的菌種；采用甘油管藏的方法，需放在-20℃的冷凍箱中保存，C正確；

D；斜面培養(yǎng)基保存菌種的方式是臨時(shí)保存的；菌種容易發(fā)生突變，所以不能長(zhǎng)期保存菌種，D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶是可以識(shí)別并附著特定的核苷酸序列；并對(duì)每條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類酶，簡(jiǎn)稱限制酶。

【詳解】

A、該技術(shù)能利用RNA與目標(biāo)DNA相互識(shí)別，利用了RNA與DNA的堿基互補(bǔ)配對(duì)，A正確；

B、利用定制的RNA序列特異性識(shí)別目標(biāo)DNA，再由Cas9蛋白將目標(biāo)DNA進(jìn)行剪切，B錯(cuò)誤；

C、Cas9蛋白能對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行剪切，相當(dāng)于一種限制性核酸內(nèi)切酶，C正確；

D、如果對(duì)目標(biāo)基因的啟動(dòng)子序列進(jìn)行編輯，當(dāng)然有可能使其無(wú)法轉(zhuǎn)錄表達(dá)，D正確。

故選B。5、A【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的過(guò)程為：離體的植物組織；器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化（需光）過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株。

【詳解】

A；對(duì)于菊花的組織培養(yǎng)來(lái)說(shuō)；在外植體脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中不需要光照，A錯(cuò)誤；

B；無(wú)菌技術(shù)包括消毒和滅菌；植物組織培養(yǎng)需要無(wú)菌操作，防止雜菌污染，所用器械需滅菌，實(shí)驗(yàn)人員需消毒操作，B正確；

C；菊花組織培養(yǎng)時(shí)；切取幼嫩的菊花莖段，因此這部分分裂能力強(qiáng)，容易誘導(dǎo)形成愈傷組織，C正確；

D；對(duì)外植體消毒所用的試劑是體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液；D正確。

故選A。6、D【分析】【分析】

全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。每個(gè)細(xì)胞都含有該個(gè)體的整個(gè)基因組；這是細(xì)胞具有全能性的基礎(chǔ)。選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)。

【詳解】

A；用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞；原因是10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，A正確；

B；在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下；還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體，而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，因?yàn)槁鸭?xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞細(xì)胞核全能性得到表達(dá)，B正確；

C；體外受精時(shí)精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理；采集的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到②減數(shù)第二次分裂中期，才具有受精能力，C正確；

D；供體細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中；能發(fā)育成有克隆動(dòng)物，這說(shuō)明分化的動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，D錯(cuò)誤。

故選D。二、多選題(共7題，共14分)7、B:D【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細(xì)胞通過(guò)克隆技術(shù)（屬于無(wú)性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯(cuò)誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)藥物；C正確；

D；不能利用該技術(shù)進(jìn)行克隆人的研究；D錯(cuò)誤。

故選BD。

【點(diǎn)睛】8、A:B:C【分析】【分析】

在受精作用過(guò)程中；精子頭部的頂體首先釋放頂體酶，發(fā)生頂體反應(yīng)；然后精子穿越放射冠和透明帶，此時(shí)透明帶發(fā)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精入卵的第一道屏障；接著精子進(jìn)入卵黃膜，此時(shí)會(huì)發(fā)生卵黃膜封閉作用；此時(shí)卵細(xì)胞才真正完成減數(shù)分裂，并釋放第二極體；精子的細(xì)胞核和卵細(xì)胞的細(xì)胞核分別形成雄原核和雌原核，即雌；雄原核的形成；最后核膜消失，雌、雄原核融合，標(biāo)志著受精作用的完成。

【詳解】

A；雄原核形成與卵子完成減數(shù)第二次分裂是同時(shí)進(jìn)行的；A正確；

B；精子觸及卵黃膜的瞬間；發(fā)生透明帶反應(yīng)，阻止其他精子進(jìn)入，是防止多精入卵受精的第一道屏障，B正確；

C；精子的細(xì)胞膜與卵黃膜融合后；精子入卵，C正確；

D；卵子的發(fā)生開(kāi)始于胎兒期性別分化之后；減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂是不連續(xù)的，D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】9、A:B:C【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程：在融合前需要使用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除植物的細(xì)胞壁；再用化學(xué)法（聚乙二醇）或物理法（振動(dòng)；離心、電刺激）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，需要注意的是誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合時(shí)不用生物方法（滅活的病毒）；細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是融合細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁；獲得融合細(xì)胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株，故植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。

【詳解】

A；由于植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠；根據(jù)酶的專一性特點(diǎn)，應(yīng)利用纖維素酶和果膠酶處理甲乙植物以獲得原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；

B；滅活的病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法；不能用于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合，B錯(cuò)誤；

C；秋水仙素可以抑制紡錘體的形成從而誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目加倍；不能用于誘導(dǎo)愈傷組織細(xì)胞壁的再生，C錯(cuò)誤；

D；因本操作的目的是培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物；故將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株，屬于個(gè)體生物學(xué)水平的檢測(cè)，D正確。

故選ABC。10、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）5、過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；過(guò)程①是由mRNA形成單鏈DNA的過(guò)程；表示逆轉(zhuǎn)錄，需要RNA、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物、脫氧核苷酸等條件，A錯(cuò)誤；

B；真核細(xì)胞中DNA的外顯子部分轉(zhuǎn)錄的RNA拼接形成mRNA；因此真核細(xì)胞的mRNA經(jīng)過(guò)程①②逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲得的DNA無(wú)內(nèi)含子片段，B正確；

C；CG含量越高；氫鍵越多，結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定，因此過(guò)程③PCR擴(kuò)增時(shí)引物中的CG含量會(huì)影響退火溫度，C正確；

D；新冠病毒遺傳物質(zhì)是RNA；RT-PCR技術(shù)可應(yīng)用于新冠病毒的核酸檢測(cè)，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】11、B:D【分析】【分析】

T線和C線處同時(shí)顯示橫杠；即陽(yáng)性，若樣品中不含病毒，樣品經(jīng)過(guò)結(jié)合墊時(shí)由于不存在病毒抗原，則不存在抗原抗體特異性結(jié)合，顯色組分仍會(huì)隨樣品繼續(xù)向前運(yùn)動(dòng)，由于不存在病毒抗原，抗體不能與待測(cè)抗原結(jié)合，故在T線不會(huì)顯色。

【詳解】

A；分析題圖可知；若有抗原存在，T線上的抗體能夠結(jié)合抗原（該抗體經(jīng)過(guò)結(jié)合墊時(shí)已經(jīng)與膠體金抗體結(jié)合），則T線顯色，過(guò)量的膠體金抗體會(huì)移動(dòng)到C線處與二抗結(jié)合，C線也會(huì)顯色，故樣品中含有待測(cè)抗原時(shí)，兩條線均會(huì)顯色，A正確；

B；題圖中過(guò)量的膠體金抗體沒(méi)有結(jié)合抗原；而是與二抗結(jié)合，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)題意可知；樣本中含有某種抗原，就會(huì)首先被結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合，形成“抗原—金標(biāo)抗體”復(fù)合物，所以結(jié)合墊中固定了金標(biāo)抗體，C正確；

D；若T線不顯色；說(shuō)明樣品中沒(méi)有抗原，D錯(cuò)誤。

故選BD。12、A:C:D【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞--制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2；胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。

【詳解】

A；干擾素是人體的蛋白質(zhì)；故從酵母菌細(xì)胞中提取到人的干擾素，說(shuō)明目的基因已經(jīng)完成了在受體細(xì)胞中的表達(dá)，A正確；

B；在植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)中；花藥可以進(jìn)行離體培養(yǎng)成單倍體植株，B錯(cuò)誤；

C；使用酶解法可以獲得單個(gè)細(xì)胞；故在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞，C正確；

D；對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能，D正確。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】13、B:C:D【分析】【分析】

1；“試管嬰兒”是利用體外授精和胚胎移植的方法；解決不孕夫婦的生育問(wèn)題。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒概念：是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前；根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個(gè)細(xì)胞取出，進(jìn)行某些設(shè)計(jì)，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合人們需要時(shí)，再把胚胎植入母體孕育。

【詳解】

A；透明帶和卵細(xì)胞膜的反應(yīng)可以防止多精入卵；從而保證受精卵染色體數(shù)目的正常，A正確；

B；由于細(xì)胞質(zhì)中也存在基因控制生物性狀；所以克隆猴的性狀不完全與細(xì)胞核供體的相同，B錯(cuò)誤；

C；試管嬰兒技術(shù)與正常的生殖過(guò)程相比僅僅是受精和早期胚胎發(fā)育的場(chǎng)所不同；實(shí)質(zhì)沒(méi)有變化，屬于有性生殖；而克隆猴是將動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞后發(fā)育成的新個(gè)體，屬于無(wú)性生殖的范疇，C錯(cuò)誤；

D；設(shè)計(jì)試管嬰兒與試管嬰兒的主要區(qū)別是前者在胚胎植入前需進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；設(shè)計(jì)試管嬰兒有時(shí)除體外受精、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植外還需要借助其它技術(shù)，D錯(cuò)誤。

故選BCD。三、填空題(共6題，共12分)14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】317、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺18、略

【分析】【詳解】

目前我國(guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來(lái)源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國(guó)市場(chǎng)上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈?guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來(lái)源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。19、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。【解析】采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共18分)20、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時(shí)，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，故正確。21、B【分析】【詳解】

要對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，最終必須通過(guò)改造基因中的堿基序列來(lái)完成，因?yàn)榛蚰苤笇?dǎo)蛋白質(zhì)的生物合成，故說(shuō)法錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共32分)22、略

【分析】【分析】據(jù)圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過(guò)程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后將目的基因?qū)氪竽c桿菌，接著對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)與鑒定，最后利用工程菌培養(yǎng)獲得大量的α-淀粉酶產(chǎn)品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來(lái)自于海洋細(xì)菌；因此為了利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因，必須先獲得細(xì)菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運(yùn)載體結(jié)合前需要用限制酶對(duì)兩者進(jìn)行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點(diǎn)，且為了使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān)，延伸時(shí)間的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。

（4）根據(jù)題意分析；虛線框內(nèi)mRNA片段內(nèi)含有24個(gè)堿基，每3個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)密碼子，因此包含24÷3=8個(gè)密碼子；構(gòu)成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對(duì)活性為99.5%，活性最高。

【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是基因工程的四個(gè)基本步驟以及PCR技術(shù)的過(guò)程、條件，回憶相關(guān)知識(shí)點(diǎn)和注意事項(xiàng)，結(jié)合提示分析答題?！窘馕觥炕蚪MDNA5’使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl23、略

【分析】【分析】

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

【詳解】

（1）①要探究圓褐固氨菌和巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液的最佳接種量比；故需要將不同配比的菌液接種在100mL某餐廚垃圾廢液中，為了保證氧氣供應(yīng)及目的菌與培養(yǎng)液充分接觸，需要進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。另外為了減小誤差，還需要設(shè)置對(duì)照組，接種等量無(wú)菌水，在相同的條件下培養(yǎng)。

②測(cè)定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時(shí)故需要取一定量菌液進(jìn)行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。可以根據(jù)菌落的形態(tài)區(qū)分兩種菌，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，兩種菌混合接種時(shí)有效菌落數(shù)均大于單獨(dú)接種，從代謝產(chǎn)物角度分析，原因可能是兩種菌可以相互利用對(duì)方的代謝產(chǎn)物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。當(dāng)兩菌種接種量比例為1：1時(shí)，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

（2）由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，R3接種組隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，蛋白質(zhì)的含量下降最明顯；R1接種組隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)；脂肪的含量下降最明顯，即脂肪的降解效果最好。

（3）固態(tài)廚余垃圾因富含粗纖維；蛋白質(zhì)、淀粉等物質(zhì)；可加工形成有機(jī)復(fù)合肥、蛋白飼料等，利用了物質(zhì)循環(huán)再生、能量多級(jí)利用的生態(tài)工程的原理，AB正確。故選AB。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖形和表格，主要考查微生物的分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生掌握稀釋涂布平板法的操作流程，識(shí)記微生物計(jì)數(shù)的方法，能結(jié)合所學(xué)知識(shí)和圖形信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥磕硰N余垃圾廢液加入等量無(wú)菌水稀釋涂布平板法30~300兩種菌可以相互利用對(duì)方的代謝產(chǎn)物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（一種菌的代謝產(chǎn)物是另一種菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB24、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)；能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄；如將強(qiáng)啟動(dòng)子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會(huì)破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織