實(shí)驗(yàn)三逆境對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害電導(dǎo)法2知識(shí)分享

實(shí)驗(yàn)三

不同植物離體葉片抗逆性比較一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、認(rèn)識(shí)植物在逆境或者其他損傷的情況下，細(xì)胞受傷害原理以及測(cè)量方法2、掌握電導(dǎo)率的測(cè)定方法3、學(xué)會(huì)運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，對(duì)不同植物在冷害后其細(xì)胞損傷程度進(jìn)行比較和分析。二、實(shí)驗(yàn)原理植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境和正常的代謝起著重要的作用。細(xì)胞膜不僅是分隔細(xì)胞質(zhì)和胞外環(huán)境的屏障，而且也是細(xì)胞與環(huán)境發(fā)生物質(zhì)交換的主要通道，又是細(xì)胞感受環(huán)境變化刺激的部位。細(xì)胞膜的選擇透性是其維持生理功能的最重要的條件之一。當(dāng)質(zhì)膜的選擇透性因逆境傷害而明顯改變或喪失時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)(尤其是電解質(zhì))大量外滲，從而引起組織浸泡液的電導(dǎo)率發(fā)生變化，通過(guò)測(cè)定外滲液電導(dǎo)率的變化，就可反映出質(zhì)膜的傷害程度和所測(cè)材料抗逆性的大小。膜透性增大的程度與逆境脅迫強(qiáng)度有關(guān)，也與植物抗逆性的強(qiáng)弱有關(guān)。因此，比較不同植物或同一植物不同品種在相同脅迫溫度下膜透性的增大程度，即可比較植物間或品種間的抗逆性強(qiáng)弱。電導(dǎo)儀電導(dǎo)率是物質(zhì)傳送電流的能力，是電阻率的倒數(shù)。在液體中常以電阻的倒數(shù)――電導(dǎo)來(lái)衡量其導(dǎo)電能力的大小。電導(dǎo)率--電阻率的倒數(shù)即稱之為電導(dǎo)率L。電導(dǎo)L的計(jì)算式如下式所示：L=l/R=S/l電導(dǎo)的單位用姆歐又稱西門(mén)子(S)。用S表示，由于S單位太大。常采用毫西門(mén)子，微西門(mén)子單位1S=103mS=106μS。一般用當(dāng)量電導(dǎo)來(lái)表示電導(dǎo)率。電導(dǎo)率L的單位是(μS/cm)電導(dǎo)儀的用法DDS－307型電導(dǎo)率儀機(jī)箱鍵盤(pán)顯示器多功能電極架電極電導(dǎo)電極溫度電極電導(dǎo)率：0.00ＵS/cm-100mS/cmTDS:溶解性總固體,衡量水中所有離子的總含量（ppm)0.00mg/L-1000mg/L溫度：0－99.9度使用過(guò)程：（1）將多功能電極插入電極插座中，用蒸溜水清洗電極，并將電極浸泡在雙蒸水中。（2）打開(kāi)電源，儀器進(jìn)入測(cè)量狀態(tài)，預(yù)熱30min（3）按壓“電導(dǎo)率/TDS”為切換鍵。（4)如果插上溫度電極，則電導(dǎo)顯示為25度的電導(dǎo)率值，如果不插溫度電極，則需要測(cè)量當(dāng)前液體溫度，然后將溫度調(diào)至當(dāng)前溫度。（5）將被測(cè)液用玻棒攪均勻；用雙蒸水沖洗電導(dǎo)電極，將電極浸入被測(cè)液中，讀取顯示器上的數(shù)據(jù)，為當(dāng)前被測(cè)液的電導(dǎo)率值（us/cm).三、實(shí)驗(yàn)材料1、材料處理采集所研究植物的莖葉4－8枝（10cm左右），分別做如下處理（用紙分包，并寫(xiě)好標(biāo)鑒)。（1）對(duì)照（無(wú)寒冷處理）（2）4度寒冷處理30min（3）0度寒冷處理30min（3）－20度冷害處理30min2、儀器和藥品：雙蒸水、水浴鍋、電導(dǎo)儀各組需要：電爐1臺(tái)、塑料杯12個(gè)、大小燒杯各2只、試管12支，試管夾2－3個(gè)四、實(shí)驗(yàn)方法（浸泡法）1、取材每處理取大小相當(dāng)?shù)闹参锶~片若干片(盡量保證葉片的完整性，少含莖節(jié))，用自來(lái)水洗凈后再用蒸餾水沖洗3次，用濾紙吸干表面水分，將葉片剪成小片(避開(kāi)主脈)；每種處理下快速稱取鮮樣3份（三個(gè)重復(fù)），每份0．1g，分別置于10m1去離子水的試管中，用玻棒攪動(dòng)。使樣品浸入水中。蓋上蓋子置于室溫下浸泡處理12h。（每1植物有4個(gè)處理，3個(gè)重復(fù)，共12個(gè)試管）。貼上標(biāo)鑒。2、電導(dǎo)率的測(cè)定

（1）先測(cè)量空白電導(dǎo)率（蒸溜水的電導(dǎo)）（2）用電導(dǎo)儀測(cè)定浸泡后的浸提液電導(dǎo)(S1)；（3）然后用沸水浴加熱1Omin，冷卻至室溫后搖勻，再次測(cè)定煮沸后浸提液電導(dǎo)(S2)。五．計(jì)算按下式計(jì)算相對(duì)電導(dǎo)率值：相對(duì)電導(dǎo)率（L）=（S1-空白電導(dǎo)率）/（S2-空白電導(dǎo)率）

S1:煮前的電導(dǎo)率

S2:煮后的電導(dǎo)率空白電導(dǎo)率:蒸餾水的電導(dǎo)率單位：us/cm相對(duì)電導(dǎo)度的大小表示細(xì)胞膜受傷害的程度

由于室溫對(duì)照也有少量電解質(zhì)外滲，故按下式計(jì)算由于低溫或高溫脅迫而產(chǎn)生的外滲，稱為傷害度（或傷害性外滲）。

傷害度（%）=式中Lt—處理葉片的相對(duì)電導(dǎo)度；

Lck—對(duì)照葉片的相對(duì)電導(dǎo)度。計(jì)算每一寒冷脅迫下，葉的傷害度（4度、0度、－20度）

1.比較不同植物經(jīng)不同寒冷處理后葉片細(xì)胞透性的變化情況，并加解釋。2.計(jì)算相對(duì)電導(dǎo)率值，列表寫(xiě)上各植物不同處理下的相對(duì)電導(dǎo)率值和傷害率。3.比較不同植物的抗逆性。六、分析與討論

[注意事項(xiàng)]

1.整個(gè)過(guò)程中，葉片接觸的用具必須絕對(duì)潔凈（全部器皿要洗凈），也不要用手直接接觸葉片，以免污染。

2.測(cè)定前電極要用雙蒸水清洗，用后電極要用蒸溜水清洗干凈。（不能用其它藥品清洗）實(shí)驗(yàn)時(shí)間安排