2025年牛津譯林版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年牛津譯林版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、如圖質(zhì)粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點，如同時用酶I和酶IV切割圖中質(zhì)粒A，產(chǎn)生1．8kb和8．2kb的兩種片段（1kb＝1000對堿基對），如用四種酶同時切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生0．6kb和8．2kb兩種片段；那么同時用酶II和IV切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生的片段有（）

A.1．2kb和8．8kbB.1．8kb和8．2kbC.0．6kb和8．2kbD.1．8kb和0．6kb2、下列有關(guān)細(xì)胞全能性的敘述正確的是（）A.植物組織培養(yǎng)繁育花卉的原理是植物細(xì)胞具有全能性B.動物克隆技術(shù)說明動物體細(xì)胞具有全能性C.用植物的種子繁殖后代說明植物細(xì)胞具有全能性D.細(xì)胞分化程度越高，全能性越高，分裂能力越強3、為避免航天器在執(zhí)行載人航天任務(wù)時出現(xiàn)微生物污染風(fēng)險，需要對航天器及潔凈的組裝車間進(jìn)行環(huán)境微生物檢測。下列敘述錯誤的是（）A.航天器上存在適應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物B.細(xì)菌形成菌膜粘附于航天器設(shè)備表面產(chǎn)生生物腐蝕C.在組裝車間地面和設(shè)備表面采集環(huán)境微生物樣品D.采用平板劃線法等分離培養(yǎng)微生物，觀察菌落特征4、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全問題的敘述，錯誤的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產(chǎn)生二次污染B.雜草化的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物，可能會影響植物基因庫的遺傳結(jié)構(gòu)C.若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題D.重視轉(zhuǎn)基因技術(shù)研發(fā)的同時，應(yīng)重視轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的安全性評價和管理5、如圖表示獲得細(xì)胞膜上乙酰膽堿(一種神經(jīng)遞質(zhì))受體基因cDNA的操作過程；下列相關(guān)分析正確的是（）

A.獲得該mRNA的最佳材料是心肌細(xì)胞B.構(gòu)建基因表達(dá)載體最常用的載體是腺病毒C.完成過程①、②必不可少的酶分別是逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶D.探針篩選的目的是淘汰被感染的細(xì)菌，獲得未被感染的細(xì)菌評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)6、下列屬于生物武器的是（）A.致病菌B.病毒C.抗生素D.生化毒劑7、某實驗室做了下圖所示的實驗研究；有關(guān)敘述正確的是（）

A.與纖維母細(xì)胞相比，過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較高B.過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞中基因選擇性表達(dá)的結(jié)果C.過程③得到的Z細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選D.圖中的肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及Y細(xì)胞具有相同的基因組成8、多種實驗材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定，用香蕉也可以取得較好的實驗效果。下列敘述錯誤的是（）A.將粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNAB.冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可以溶解某些蛋白質(zhì)，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸餾水并研磨，以釋放核DNAD.將DNA溶于NaCl溶液后加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后會出現(xiàn)藍(lán)色9、研究人員用無機鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從被石油污染的土壤中篩選出了一種石油降解菌，下列相關(guān)表述正確的是（）A.培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對微生物的生長越有利B.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基C.利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤D.相對于未被污染的土壤，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌10、剛果紅是一種染料，可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)紅色復(fù)合物中的纖維素被分解后紅色消失。表中是篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基，利用此培養(yǎng)基可從土壤中篩選纖維素分解菌，結(jié)果如圖。下列說法正確的是（）。培養(yǎng)基的成分：纖維素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g剛果紅適量MgSO40．5g瓊脂20g定容1L

A.培養(yǎng)基中纖維素和尿素分別提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pHC.將土壤稀釋液接種在平板上的方法為稀釋涂布平板法D.平板上5個菌落都有透明圈，說明5個菌落都能分解纖維素11、GAL4基因的表達(dá)產(chǎn)物能識別啟動子中的UAS序列，從而驅(qū)動UAS序列下游基因的表達(dá)。野生型雌雄果蠅均為無色翅，且基因組中無GAL4基因和含UAS序列的啟動子?？蒲腥藛T利用基因工程在雄果蠅的一條Ⅲ號染色體上插入GAL4基因，雌果蠅的某條染色體上插入基因M（含有UAS序列啟動子的綠色熒光蛋白基因），利用雜交實驗對雌果蠅中基因M插入的位置進(jìn)行判斷：將上述雌雄果蠅雜交得到F1，讓F1中綠色翅雌雄果蠅隨機交配，觀察并統(tǒng)計F2個表型和比例。下列說法正確的是（）A.同時含有GAL4基因和基因M的果蠅才能表現(xiàn)出綠色性狀B.若F1中綠色翅：無色翅為1：3，則基因M插入Ⅲ號染色體上C.若F2中綠色翅：無色翅=9：7，則基因M插入Ⅲ號以外的其他常染色體上D.若F2中綠雌：無雌：綠雄：無雄=6：2：3：5，則基因M插入X染色體上評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)12、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。13、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。14、第一步：______15、PCR技術(shù)的DNA體外復(fù)制環(huán)境有DNA解旋酶、耐熱DNA聚合酶、DNA母鏈、4種脫氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能夠從引物的________端開始連接脫氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物長度通常為____個核苷酸。16、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。17、對于DNA的粗提取而言，就是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在__________方面的差異，提取DNA，去除雜質(zhì)。（人教P54）18、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過______，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_____，或制造一種______，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

19、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()20、我國政府同樣禁止進(jìn)行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()評卷人得分四、判斷題(共4題，共28分)21、轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡（______）A.正確B.錯誤22、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯誤23、我國對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯誤24、蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程，主要是因為蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共16分)25、如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）將發(fā)酵裝置放在18～25℃環(huán)境中，每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量________。裝置中d處設(shè)計成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性條件下的________對從出料口c取樣的物質(zhì)進(jìn)行檢驗，若樣液變?yōu)開_______色，說明產(chǎn)生了酒精。

（4）產(chǎn)生酒精后，若在發(fā)酵液中加入醋酸菌，然后將裝置放在________環(huán)境中，適時打開______向發(fā)酵液中充氣，原因是______________________________________________。26、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱；有人將地衣芽孢桿菌的a-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過程如圖甲所示）。請據(jù)圖回答：

（1）圖甲中為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以______________作為唯一碳源。②③過程需重復(fù)幾次，目的是______________。

（2）某同學(xué)嘗試過程③的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是_____________；推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是___________________________。

（3）以淀粉為原料，用等量的工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵一段時間，接種_____________菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是______________。

（4）用凝膠色譜法分離a-淀粉酶時，在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量較_____________。27、鑒江是粵西沿海最大的河流，沿河兩岸的居民生活用水基本來源于鑒江。但若生活污水未經(jīng)處理排放到鑒江中，會導(dǎo)致大腸桿菌超標(biāo)，進(jìn)而引發(fā)細(xì)菌性痢疾等腸道疾病。研究發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌能分解乳糖，產(chǎn)生酸性物質(zhì)和氣體。某研究小組擬對鑒江中的大腸桿菌進(jìn)行鑒別和統(tǒng)計。用到的兩種培養(yǎng)基配方和濾膜法步驟如下：。培養(yǎng)基名稱配方（L-1）pH乳糖蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨10g，牛肉膏5g，乳糖5g，NaCl5g，溴甲酚紫0．016g（溴甲酚紫在酸性時呈黃色，堿性時呈紫色）7．4牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g7．4

濾膜法具體步驟：

（一）用無菌的三角瓶接取1000毫升水樣；蓋好瓶塞。

（二）將漏斗和抽濾瓶固定好；用鑷子夾住濾膜邊緣，將水樣倒入漏斗中，邊抽濾；邊加水。

（三）用鑷子將濾膜取出；放在無菌平板上進(jìn)行培養(yǎng)；觀察并記錄實驗結(jié)果。

回答下列問題：

(1)在乳糖蛋白胨培養(yǎng)基中，提供氮源的物質(zhì)有______________________。

(2)高壓滅菌條件常為121℃，15min，但乳糖蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時，因為乳糖在121℃會被破壞，而選用了115℃，為了達(dá)到相同滅菌效果可以______________________；

(3)研究小組取兩支含乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的試管A和B，A管中加入1ml待測水樣，B管不做處理，然后都放人培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。若A試管產(chǎn)生氣體，同時出現(xiàn)______________________（填顏色）時；則提示水樣被大腸桿菌污染。

(4)制作濾膜法中所用的無菌平板時，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上還應(yīng)加入______________________，便于統(tǒng)計菌落。按上述濾膜法步驟制作的3個樣品平板上的菌落初步從______________________（答出兩點）等方面進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。然后統(tǒng)計三個平板上所有的菌落數(shù)分別為49、51、47，能否據(jù)此得出每升水樣中大腸桿菌數(shù)約為49的結(jié)論?______________________。理由是_________________________________________。28、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進(jìn)入豬細(xì)胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)的機理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達(dá)載體，再分別導(dǎo)入豬肝細(xì)胞，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達(dá)。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細(xì)胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實驗結(jié)果推測，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進(jìn)而推測第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計實驗進(jìn)一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實驗設(shè)計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析，實驗假設(shè)是_____。評卷人得分六、綜合題(共3題，共21分)29、DDT的化學(xué)式為C14H9Cl5；因其在防治農(nóng)業(yè)病蟲害，減輕瘧疾傷寒等蚊蠅傳播的疾病等方面起到了不小的作用，因此該農(nóng)藥在20世紀(jì)上半葉，曾在世界范圍內(nèi)被廣泛的使用。但由于其對環(huán)境污染過于嚴(yán)重，現(xiàn)已被很多國家或地區(qū)禁止使用多年，但土壤中仍有DDT殘留。研究發(fā)現(xiàn)，DDT能被土壤中的某些微生物降解。分離降解DDT的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲；乙所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)欲選育出能降解DDT的細(xì)菌，需配制選用DDT作為___________的培養(yǎng)基，其原因是___________。按用途，這種培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基，在接種前需進(jìn)行___________滅菌處理。

(2)在一定的培養(yǎng)條件下，單個細(xì)菌在平板上會形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是___________。

(3)純化菌株時，通常使用的劃線工具是____________。在作第二次以及其后的劃線操作時，要求要從上一次劃線的末端開始劃線，其原因是___________。

(4)為探究DDT的降解機制，有人又做了如圖乙所示實驗，即將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液并加入某種酶溶液，最后測定DDT的降解率。請推測，該實驗的假設(shè)是___________。事實上，該實驗設(shè)計并不嚴(yán)謹(jǐn)，理由是___________。30、新冠病毒是一種RNA病毒；其表面的刺突蛋白（簡稱S蛋白）是主要的病毒抗原。單克隆抗體既可作為診斷試劑，又可阻斷病毒的黏附和入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。制備抗S蛋白單克隆抗體的流程如下圖。請回答下列問題：

(1)步驟①中必須給小鼠注射新冠病毒的S蛋白，目的是_______。取小鼠的脾臟剪碎后用______處理一段時間；再加入培養(yǎng)液可制成單細(xì)胞懸液。

(2)步驟②中常用的誘導(dǎo)方法有______（答2點即可）。融合完成后，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是________。

(3)步驟③是使用具有篩選作用的培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)的結(jié)果是_______。步驟④含多次篩選，篩選依據(jù)的基本原理是________。31、近50年來；全球不斷出現(xiàn)許多新的不同種類的冠狀病毒，分別在人類及動物中引起了不同疾病，冠狀病毒一般有4種結(jié)構(gòu)蛋白：S蛋白（刺突蛋白，可與人體黏膜細(xì)胞表面的ACE2受體結(jié)合，它是病毒入侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白）；M蛋白（膜蛋白，病毒體中含量最多的蛋白，可以保持病毒的完整形態(tài)，并與N蛋白相連接）、E蛋白（包膜蛋白，與病毒聚合及釋放的功能相關(guān)）、N蛋白（核衣殼蛋白）。新冠病毒的遺傳物質(zhì)是單鏈RNA，下圖1為新冠病毒侵染宿主細(xì)胞后合成子代病毒過程的示意圖，圖2表示科研人員研制新冠病毒疫苗的一條技術(shù)路線。根據(jù)以上信息回答下列有關(guān)問題：

(1)由圖1可知，新冠病毒的遺傳物質(zhì)RNA__________（填“具有”或“不具有”）直接翻譯為蛋白質(zhì)的功能；以負(fù)鏈RNA為模板合成的亞基因組RNA的功能是__________。S蛋白與核衣殼的組裝場所是__________。

(2)圖2中③過程需要用__________處理，選擇大腸桿菌做受體細(xì)胞的主要原因是_____________。

(3)pVAX1是一種可以應(yīng)用于人體的載體質(zhì)粒，其化學(xué)本質(zhì)是__________，疫苗I和疫苗Ⅱ同為通過基因工程獲得的疫苗，它們在人體內(nèi)引起的免疫效應(yīng)的不同之處是__________。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

據(jù)圖可知，質(zhì)粒為環(huán)狀DNA分子，同時用酶I和酶IV切割圖中質(zhì)粒A，產(chǎn)生1．8kb和8．2kb的兩種片段；則說明質(zhì)粒上含有10000個堿基對，據(jù)此分析作答。

【詳解】

如同時用酶I和酶IV切割圖中質(zhì)粒A，產(chǎn)生1.8kb和8.2kb的兩種片段（1kb=1000對堿基對），說明質(zhì)粒上含有10000個堿基對；如用四種酶同時切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生0.6kb和8.2kb兩種片段，則說明酶I和酶II、酶II和酶III、酶III和酶IV切割位點間的都含有600個堿基對，那么同時用酶II和酶IV切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生的片段有600+600=1200對堿基（酶II、酶III和酶IV之間的堿基）和8200+600=8800對堿基（酶IV、酶Ⅰ和酶II之間的堿基），故則產(chǎn)生的片段有1.2kb和8.8kb。

故選A。2、A【分析】【分析】

關(guān)于細(xì)胞的“全能性”；可以從以下幾方面把握：

(1)概念：細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。

(2)細(xì)胞具有全能性的原因是：細(xì)胞含有該生物全部的遺傳物質(zhì)。

(3)細(xì)胞全能性大小：受精卵>干細(xì)胞>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。

(4)細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件：離體；適宜的營養(yǎng)條件、適宜的環(huán)境條件。

(5)全能性以細(xì)胞形成個體為標(biāo)志。

【詳解】

A；細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能；所以組織培養(yǎng)繁育花卉所利用的原理就是植物細(xì)胞具有全能性，A正確；

B；動物克隆技術(shù)說明高度分化的動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；B錯誤；

C；種子是器官；用種子繁殖后代不能說明植物細(xì)胞具有全能性，C錯誤；

D；細(xì)胞分化程度越高；全能性越低，分裂能力越弱，D錯誤。

故選A。3、D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；嗜極微生物適應(yīng)極端環(huán)境的特性使它們有在空間暴露環(huán)境或地外星球環(huán)境中存活的可能；因此航天器上存在適應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物，A正確；

B；細(xì)菌形成菌膜粘附于航天器設(shè)備表面產(chǎn)生生物腐蝕；會腐蝕艙內(nèi)材料以及設(shè)備線路、元器件，B正確；

C；對航天器及潔凈的組裝車間進(jìn)行環(huán)境微生物檢測；需要在組裝車間地面和設(shè)備表面采集環(huán)境微生物樣品，C正確；

D；航天器及潔凈的組裝車間環(huán)境微生物很少；分離培養(yǎng)微生物，觀察菌落特征，不需要采用平板劃線法，D錯誤。

故選D。4、C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。（1）有關(guān)食物安全問題；反對者的觀點是：不能對轉(zhuǎn)基因食物安全性掉以輕心．他們的理由是：①反對“實質(zhì)性等同”；②擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng)；③擔(dān)心出現(xiàn)新的過敏源；④擔(dān)心營養(yǎng)成分改變；⑤擔(dān)心會侵犯宗教信仰者或素食者的權(quán)益。（2）有關(guān)生物安全問題，反對者的觀點是：轉(zhuǎn)基因植物可能會對生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險和威脅。他們的理由：①轉(zhuǎn)基因植物擴散到種植區(qū)外變成野生種或雜草；②轉(zhuǎn)基因植物競爭能力強，可能成為“入侵的外來物種”；③轉(zhuǎn)基因植物的外源基因與細(xì)菌或病毒雜交，重組出有害的病原體；④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。（3）有關(guān)環(huán)境安全問題，反對者的觀點是：轉(zhuǎn)基因生物會對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性和人類生活環(huán)境造成破壞。他們的理由：①轉(zhuǎn)基因植物打破自然物種的原有界限，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性；②重組微生物產(chǎn)生的中間產(chǎn)物可能造成二次污染；③重組DNA與微生物雜交是否會產(chǎn)生有害病原微生物；④轉(zhuǎn)基因植物花粉中的有毒蛋白可能通過食物鏈進(jìn)入生物。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過程中所產(chǎn)生的中間產(chǎn)物；可能會對人類生活環(huán)境產(chǎn)生二次污染，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因作物作為外來品種進(jìn)入自然生態(tài)系統(tǒng)；往往具有較強的“選擇優(yōu)勢”,可能會影響植物基因庫的遺傳結(jié)構(gòu)，淘汰原來棲息地上的物種及其它遺傳資源，致使物種呈單一化趨勢，造成生物數(shù)量劇減，甚至?xí)乖形锓N滅絕，導(dǎo)致生物多樣性的喪失，B正確；

C；即使轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界；也可能會產(chǎn)生安全性問題，如某些轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的蛋白質(zhì)可能會成為某些人的新的過敏源，C錯誤；

D；對轉(zhuǎn)基因生物的管理的總原則是在保證人類健康和環(huán)境安全的前提下；促進(jìn)生物技術(shù)的發(fā)展，需要重視轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的安全性評價和管理，D正確。

故選C。5、C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。

2；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；由于乙酰膽堿受體大量分布于神經(jīng)細(xì)胞膜上；所以在神經(jīng)細(xì)胞中最易獲得該基因的mRNA，A錯誤；

B；腺病毒不能作為基因表達(dá)的載體；但可以作為基因表達(dá)載體的受體，B錯誤；

C；①是逆轉(zhuǎn)錄過程；需要逆轉(zhuǎn)錄酶，②是DNA的復(fù)制，需要DNA聚合酶，C正確；

D；探針篩選的目的是保留被感染的細(xì)胞；因為細(xì)胞被感染證明基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，而應(yīng)淘汰未被感染的細(xì)菌，D錯誤。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)6、A:B:D【分析】【分析】

生物武器包括致病菌類；病毒類和生化毒劑類等；例如，天花病毒、波特淋菌、霍亂弧菌和炭疽桿菌，都可以用來制造生物武器。生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或者通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵人人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能大量損害植物。

【詳解】

生物武器的種類包括致病菌類；病毒類、生化毒劑類；而抗生素不屬于生物武器，C錯誤，A、B、D正確。

故選ABD。7、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析；①過程導(dǎo)入外源基因，類似于植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化，②表示細(xì)胞分裂和分化，③表示動物細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，④是動物細(xì)胞培養(yǎng)。

【詳解】

A；①過程是通過誘導(dǎo)基因作用使纖維母細(xì)胞（高度分化）脫分化為干細(xì)胞（具有分裂和分化能力）；與纖維母細(xì)胞相比，干細(xì)胞的全能性較高，A正確；

B；②過程是干細(xì)胞再分化為其他組織器官細(xì)胞；是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，B正確；

C；③過程是細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞過程；需要用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選，C正確；

D；圖中的肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞均來自于甲鼠；具有相同的基因組成，Y細(xì)胞來自于乙鼠，其基因組成不同，D錯誤。

故選ABC。8、C【分析】【分析】

根據(jù)DNA的溶解性提取DNA；1；DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaC中的溶解度不同。2、DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。3、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

【詳解】

A；將粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNA；A正確；

B；DNA不溶于酒精；而某些蛋白質(zhì)溶解于酒精，可用體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精溶解某些蛋白質(zhì)，析出DNA，獲得粗提取的DNA，B正確；

C；香蕉果肉組織細(xì)胞有細(xì)胞壁保護(hù)；因此加蒸餾水不會破壞細(xì)胞，不能將DNA釋放岀來，C錯誤；

D；將DNA再次溶于NaCl溶液；加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻出現(xiàn)藍(lán)色，D正確。

故選C。

【點睛】9、B:C:D【分析】【分析】

在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質(zhì)）、氮源（提供氮元素的物質(zhì)）和無機鹽。

【詳解】

A；培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水；將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象，對生長不利，A錯誤；

B；這種培養(yǎng)基以石油為唯一碳源；只有石油降解菌可在該培養(yǎng)基上正常存活，因此是一種選擇培養(yǎng)基，B正確；

C；被石油污染的土壤通氣性極差；利用這種石油降解菌可以降解石油，修復(fù)土壤，C正確；

D；根據(jù)生物與其生存環(huán)境相適應(yīng)的特點；未被污染的土壤中幾乎不含石油分解菌，從被石油污染的土壤中更容易分離到石油降解菌，D正確。

故選BCD。10、A:B:C【分析】【分析】

本題知識點為剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理、培養(yǎng)基中各物質(zhì)的作用。剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH。獲取單個菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等技術(shù)完成。

【詳解】

A；在此培養(yǎng)基中；纖維素為纖維素分解菌提供碳源，尿素為纖維素分解菌提供氮源，A正確；

B、KH2PO4和K2HPO4具有緩沖作用；在提供無機鹽的同時還能維持培養(yǎng)基的pH，B正確；

C；從平板上纖維素分解菌的菌落分布可以看出（菌落較均勻）；接種方法為稀釋涂布平板法，C正確；

D；菌落周圍有透明圈不一定是細(xì)胞分解了纖維素；還有可能是分解了剛果紅染料，D錯誤；

故選ABC。11、A:D【分析】【分析】

分析題意可知，GAL4基因可以控制GAL4蛋白的表達(dá)，它能夠與特定的DNA序列UAS結(jié)合，并驅(qū)動UAS下游基因的表達(dá)。將GAL4基因插入到雄果蠅的Ⅲ號染色體上(一條常染色體上)，UAS綠色熒光蛋白基因隨機插入到雌果蠅某條染色體上，但無法表達(dá)(親代雌果蠅缺乏GAL4蛋白)。同時具備GAL4和UAS-綠色熒光蛋白基因的果蠅，才能合成GAL4蛋白驅(qū)動UAS下游的綠色熒光蛋白基因表達(dá)，從而表現(xiàn)出綠色性狀。為便于理解，假設(shè)插入GAL4基因用A表示(沒有該基因用a表示)，插入UAS綠色熒光蛋白基因用B表示(沒有該基因用b表示)。UAS-綠色熒光蛋白基因插入的位置有3種可能：Ⅲ號染色體上(則雄、雌基因型可表示為Aabb×aaBb，遵循連鎖定律)，其他常染色體上(則雄、雌基因型可表示為Aabb×aaBb，遵循自由組合定律)、X染色體上(則雄、雌基因型可表示為AaXbY×aaXBXb；遵循自由組合定律)。

【詳解】

A；同時具備GAL4和UAS-綠色熒光蛋白基因（M基因）的果蠅；才能合成GAL4蛋白驅(qū)動UAS下游的綠色熒光蛋白基因表達(dá)，從而表現(xiàn)出綠色性狀，A正確；

B、若綠色熒光蛋白基因（M基因）插入Ⅲ號染色體上，發(fā)生基因連鎖，假設(shè)插入GAL4基因用A表示(沒有該基因用a表示)，插入UAS綠色熒光蛋白基因用B表示(沒有該基因用b表示)，則親本為Aabb×aaBb，則F1中綠色翅（AaBb）：無色翅（Aabb、aaBb、aabb）為1：3，若插入Ⅲ號染色體以外的染色體上，兩對基因遵循基因組合定律，則親本仍為Aabb×aaBb，F(xiàn)1中綠色翅（AaBb）與無色翅（Aabb、aaBb、aabb）比例仍為1：3；B錯誤；

C、若F2中綠色翅：無色翅=9：7，則說明兩種基因自由組合，故綠色熒光蛋白基因（M基因）沒有插入Ⅲ號染色體上，但不能確定熒光蛋白基因的具體位置，不一定就在常染色體上，也可能在X染色體上，C錯誤；

D、若F2中綠色翅雌性：無色翅雌性：綠色翅雄性：無色翅雄性=6：2：3：5；雌雄中綠色翅和無色翅比例不同，說明與性別相關(guān)，則可以得出熒光蛋白基因（M基因）插入X染色體的結(jié)論，D正確。

故選AD。三、填空題(共9題，共18分)12、略

【解析】①.胚胎細(xì)胞②.體細(xì)胞13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2種引物DNA或RNA20—3016、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學(xué)性18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在19、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤?！窘馕觥垮e誤20、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤?！窘馕觥垮e誤四、判斷題(共4題，共28分)21、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡，特別是對生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過億萬年的演化，各種生物相對處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是，如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強悍”，那其他物種就會衰敗以至滅絕，故本題正確。22、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯誤。23、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅持依法監(jiān)管。

該說法正確。24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程，主要是因為蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜，并且蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說法正確。五、實驗題(共4題，共16分)25、略

【分析】【分析】

1；果酒制作過程中的相關(guān)實驗操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機要清洗干凈；并晾干；②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機榨取葡萄汁。

（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶；要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口；②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃～25℃，時間控制在10～12d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進(jìn)行，及時的監(jiān)測。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃～35℃，時間控制在前7～8d左右，并注意適時通過充氣口充氣。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行進(jìn)行沖洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機會。

（2）榨汁機要清洗干凈，并晾干，發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒，再裝入葡萄汁，將發(fā)酵裝置放在18～23℃環(huán)境中，發(fā)酵過程中由于酵母菌呼吸作用會產(chǎn)生二氧化碳，因此每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量二氧化碳。裝置中d處設(shè)計成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理，即為了防止排氣時空氣中微生物的污染。

（3）酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物中會產(chǎn)生酒精；利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測酒精的存在，酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會變?yōu)榛揖G色，從而鑒定酒精的存在。

（4）溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件；20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30℃～35℃，因此要將溫度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參與，因此要適時向發(fā)酵裝置中充氣，需要打開a閥通入空氣。

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作過程的知識點，要求學(xué)生掌握果酒的制作的原理、過程以及發(fā)酵過程中的注意事項是該題的重點，識記果酒的制作過程是解決重點的關(guān)鍵。理解并識記果醋的發(fā)酵過程和原理是解決第（4）問的關(guān)鍵?！窘馕觥繘_洗CO2防止排氣時空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30～35℃氣閥a醋酸菌是好氧細(xì)菌，酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿嵝枰鯕獠拍苓M(jìn)行26、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖甲為可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種的培育過程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，是基因工程的關(guān)鍵步驟；②③表示分離純化工程酵母菌菌種。乙圖為稀釋涂布平板法得到的菌落，但是其菌落沒有均勻分布，說明其涂布是不均勻的。

【詳解】

（1）該實驗的目的是獲得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種；因此其培養(yǎng)基應(yīng)該以淀粉為唯一碳源；②；③過程為分離純化工程酵母菌菌種，多次重復(fù)篩選可以提高分解淀粉能力強的工程酵母菌菌種的純度。

（2）圖乙顯示平板培養(yǎng)后；形成了多個菌落，因此該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；但是菌落分布不均勻，集中分布在一定區(qū)域，說明是涂布不均勻?qū)е碌摹?/p>

（3）與普通酵母菌相比；在以淀粉為原料的培養(yǎng)條件下，工程酵母菌更能夠高效地利用淀粉，其分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力更強，呼吸作用產(chǎn)生二氧化碳速率更快，所以需要先排氣。

（4）凝膠色譜法分離的原理是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子；不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過的路程較短，移動的速度較快；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，通過的路程較長，移動的速度較慢。因此，在色譜柱中移動速度較慢的蛋白質(zhì)，相對分子質(zhì)量較小。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的基本步驟、微生物的培養(yǎng)和分離、蛋白質(zhì)的分離等相關(guān)知識，能夠根據(jù)實驗?zāi)康姆治雠囵B(yǎng)基成分，并能夠根據(jù)工程菌的特點分析其代謝情況?！窘馕觥康矸圻M(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強的酵母菌（或高效利用利用淀粉的工程酵母菌）稀釋涂布平板法涂布不均勻工程酵母工程菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強，工程菌呼吸強度大，產(chǎn)生CO2多小27、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水；碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。(1)

由配方表分析可知；在乳糖蛋白胨培養(yǎng)基中，提供氮源的物質(zhì)有蛋白胨和牛肉膏。

(2)

高壓滅菌條件常為121℃；15min；但乳糖蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時，因為乳糖在121℃會被破壞，而選用了115℃，為了達(dá)到相同滅菌效果可以適當(dāng)延長滅菌時間。

(3)

研究小組取兩支含乳糖蛋白胨培養(yǎng)基的試管A和B；A管中加入1mL待測水樣，B管不做處理，然后都放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。若A試管產(chǎn)生氣體，還不可以提示水樣可能被大腸桿菌污染，這時還需要再觀察試管中的顏色變化，由于大腸桿菌能產(chǎn)生酸性物質(zhì)和氣體，同時培養(yǎng)基中的溴甲酚紫在酸性時呈黃色，故若A試管出現(xiàn)黃色時，則提示水樣被大腸桿菌污染。

(4)

制作濾膜法中所用的無菌平板時；在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上還應(yīng)加入瓊脂形成固體培養(yǎng)基，便于統(tǒng)計菌落。按上述濾膜法步驟制作的3個樣品平板上的菌落初步從形態(tài)；大小、顏色和透明度等方面進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，在平板上生長的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落，因此大腸桿菌實際數(shù)值應(yīng)該小于49。

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的種類和作用，掌握菌落計數(shù)的方法和具體操作等知識，意在考查學(xué)生識記所學(xué)知識要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力，同時獲取題干信息準(zhǔn)確答題。【解析】(1)牛肉膏；蛋白胨##蛋白胨、牛肉膏。

(2)適當(dāng)延長滅菌時間。

(3)黃色。

(4)①.瓊脂②.形態(tài)、大小、顏色和透明度③.否#不能④.培養(yǎng)基表面的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落28、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達(dá)水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細(xì)胞內(nèi)。次級代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進(jìn)入細(xì)胞。

（2）實驗的自變量是有無調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調(diào)控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細(xì)胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達(dá)載體，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調(diào)控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性。【解析】(1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個；T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性增強。

(3)結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共3題，共21分)29、略

【分析】【分析】

微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源；氮源、水和無機鹽四類。

培養(yǎng)基滅菌用的方法是高壓蒸汽滅菌。

根據(jù)菌落的形狀；大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。

用接種環(huán)劃線時；要求在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，并且在灼燒接種環(huán)之后，還要等其冷卻后再進(jìn)行劃線。由于劃線后線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，因此每次劃線要從上一次劃線的末端開始，這樣就能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。

【詳解】

（1）微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無機鹽四類。根據(jù)題意，該實驗的目