2024年華師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年華師大新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、為研究治療性克隆技術(shù)能否用于帕金森病的治療，科研人員利用帕金森病模型鼠進(jìn)行如圖實(shí)驗(yàn)，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過(guò)程①中選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)B.過(guò)程②重構(gòu)胚培養(yǎng)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行一次脫分化和兩次胰蛋白酶處理C.過(guò)程③的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)D.過(guò)程④對(duì)受體小鼠無(wú)需注射免疫抑制劑來(lái)抑制其細(xì)胞免疫功能2、隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，“基因污染”應(yīng)運(yùn)而生，關(guān)于基因污染的說(shuō)法不正確的是A.轉(zhuǎn)基因作物可通過(guò)花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫(kù)B.基因污染是一種不可以擴(kuò)散的污染C.雜草、害蟲從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性D.轉(zhuǎn)基因生物有可能成為“入侵的外來(lái)物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存3、酸性土壤是pH小于7的土壤總稱，包括紅壤、黃壤、磚紅壤、赤紅壤等。酸性土壤在世界范圍內(nèi)分布廣泛，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位。如圖表示利用耐酸植物甲(4N)和高產(chǎn)植物乙(2N)培育高產(chǎn)耐酸雜種植物的過(guò)程，圖中序號(hào)表示過(guò)程或處理手段，字母表示細(xì)胞、細(xì)胞結(jié)構(gòu)或組織名稱。下列敘述正確的是（）

A.①過(guò)程用到的酶是纖維素酶，B表示原生質(zhì)層B.②過(guò)程可以使用高Ca2+-高pH或滅活的病毒誘導(dǎo)C.③過(guò)程得到的雜種細(xì)胞含有3個(gè)染色體組D.④⑤過(guò)程使用的培養(yǎng)基需加入生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，但加入的比例不同4、人肌紅蛋白（Myo）是早期診斷急性心肌梗寒的生化標(biāo)志物之一。為制備抗Myo的單克隆抗體，科研人員通常采用雙抗體夾心法對(duì)抗原進(jìn)行定量檢測(cè)，具體過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.抗Myo的單克隆抗體可與Myo特異性結(jié)合，用于診斷急性心肌梗塞B.可將能表達(dá)Myo基因的細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，來(lái)制備抗Myo的單克隆抗體C.固相抗體和酶標(biāo)抗體雖都能與抗原結(jié)合，但二者仍具有不同的結(jié)構(gòu)D.加入酶標(biāo)抗體的目的是通過(guò)測(cè)定酶促反應(yīng)的產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量5、腫瘤壞死因子（TNF）在體內(nèi)和體外均能殺死某些腫瘤細(xì)胞或抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，科研人員欲利用乳腺生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)TNF，用于臨床上疾病的治療。已知HindⅢ、BamHI、BglⅡ和PstI為限制性內(nèi)切核酸酶，識(shí)別的序列均不相同。下列關(guān)于基因工程中重組質(zhì)粒構(gòu)建的說(shuō)法，正確的是（）

A.可選用PstI，BglⅡ和HindⅢ、BglⅡ兩種組合切割質(zhì)粒和目的基因B.可用DNA連接酶或DNA聚合酶連接TNF基因和切割開的質(zhì)粒C.啟動(dòng)子指的就是起始密碼子，可驅(qū)動(dòng)TNF基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程D.四環(huán)素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因，便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因6、為探究抗生素對(duì)細(xì)菌的選擇作用，將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上（如下圖），一段時(shí)間后測(cè)量并記錄抑菌圈的直徑。從抑菌圈邊緣的菌落上挑取細(xì)菌擴(kuò)大培養(yǎng)，重復(fù)實(shí)驗(yàn)2~5次。下列敘述不正確的是（）

A.接種時(shí)，將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上B.①處濾紙片上不含抗生素，起對(duì)照作用C.重復(fù)2~5次實(shí)驗(yàn)后，抑菌圈的直徑會(huì)變大D.抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細(xì)菌抗藥性較強(qiáng)評(píng)卷人得分二、多選題(共5題，共10分)7、我國(guó)科學(xué)家提出的異種克隆大熊貓實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.科學(xué)家通過(guò)對(duì)母兔注射孕激素，進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞B.異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)，為保證無(wú)毒無(wú)菌環(huán)境，往往需要在培養(yǎng)液中加入維生素C.囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成，后者將來(lái)可發(fā)育成胎兒的各種組織D.兔子宮提供的生理環(huán)境與大熊貓差異大，異種重構(gòu)囊胚可能不能正常發(fā)育出大熊貓幼仔8、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是我國(guó)文化中的精髓，是我國(guó)人們利用勤勞的雙手、機(jī)智的頭腦所探究出來(lái)的智慧結(jié)晶。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.利用發(fā)酵技術(shù)，在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品B.制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制乳酸菌繁殖C.白酒的釀造過(guò)程中利用了霉菌和酵母菌兩種微生物的發(fā)酵作用D.將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中，其目的是促進(jìn)微生物代謝產(chǎn)物的累積9、下圖是將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說(shuō)法正確的是（）

A.若能在細(xì)菌B中檢測(cè)到人的生長(zhǎng)激素基因，則說(shuō)明該基因工程項(xiàng)目獲得成功B.將完成導(dǎo)入過(guò)程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長(zhǎng)的就是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌C.將人的生長(zhǎng)激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過(guò)程共形成了4個(gè)磷酸二酯鍵D.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B之前，可以用Ca2+處理細(xì)菌B10、2020年5月22日，在世界權(quán)威醫(yī)學(xué)期刊《柳葉刀》雜志在線刊登了中國(guó)陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的重組腺病毒疫苗I期人體（108位志愿者）試驗(yàn)臨床數(shù)據(jù)結(jié)果：安全、能誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。重組腺病毒疫苗是一種重組的基因工程產(chǎn)品，用不會(huì)使人體致病的腺病毒作為載體，把克隆出來(lái)的編碼新冠病毒S蛋白（介導(dǎo)新冠病毒感染細(xì)胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進(jìn)入人體細(xì)胞，表達(dá)出S蛋白，刺激人體產(chǎn)生針對(duì)新冠病毒的免疫應(yīng)答。相關(guān)敘述正確的是（）A.重組腺病毒疫苗包括S蛋白基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等B.重組腺病毒疫苗只能使人體產(chǎn)生體液免疫C.重組腺病毒疫苗引發(fā)的體液免疫中有吞噬細(xì)胞、T細(xì)胞的參與D.重組腺病毒疫苗引起免疫反應(yīng)后相應(yīng)淋巴細(xì)胞增多，細(xì)胞周期將變長(zhǎng)11、某對(duì)美國(guó)夫婦將用他們精子、卵子形成的胚胎冷藏在澳大利亞墨爾本一家不孕癥治療中心。在一次外出時(shí)，他們因飛機(jī)失事而去世。于是有親人提出，可以將該夫婦冷藏的胚胎植入某個(gè)受體母親子宮，生下一個(gè)孩子來(lái)繼承遺產(chǎn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.用精子、卵子形成胚胎需要借助人工授精技術(shù)B.若實(shí)施胚胎移植，需要受體母親處于合適的生理狀態(tài)C.受體母親與胚胎的主要HLA的相似程度要大于50%D.該件事反映了“胚胎冷藏”技術(shù)可能帶來(lái)倫理問(wèn)題評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)12、本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會(huì)使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基______________來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。13、統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_____________。這是因?yàn)開_____________________。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來(lái)表示。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。14、通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的________________，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_________________________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。15、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。16、什么是生物武器？簡(jiǎn)述生物武器的危害。__________17、生物武器的致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對(duì)植物無(wú)害。（選擇性必修3P111）()評(píng)卷人得分四、判斷題(共1題，共10分)18、胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共12分)19、苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如圖所示,①為土壤樣品。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)②中培養(yǎng)目的菌株的培養(yǎng)基中應(yīng)加入________作為碳源,②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基____（A.影響;B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量,如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量,常采用_____法.

(2)④為對(duì)照,微生物在④中不生長(zhǎng),在⑤中生長(zhǎng),④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于_______;使用________法可以在⑥上獲得單菌落;采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)?___________________。

(3)如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小?____________________________。

(4)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如何防止其他微生物的污染?____________________________。20、嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶。為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用；開展了以下實(shí)驗(yàn)。如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜，如表為幾種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進(jìn)行擴(kuò)增，最簡(jiǎn)便的方法是_________技術(shù)。

(2)分析上圖，可選擇_______和_______兩種不同的限制酶切割質(zhì)粒，以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。質(zhì)粒被切割后，可用_______將其與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是_______。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)開______。

(4)蛋白質(zhì)工程是二代基因工程，它的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→_______→_______→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共21分)21、人乳鐵蛋白（hLF）廣泛分布于乳汁等外分泌液，初乳中含量較高，對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如圖，圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點(diǎn)，neor為新霉素抗性基因；BLG基因?yàn)棣氯榍虻鞍谆颍珿FP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答：

(1)過(guò)程①方法的基本原理是先以人乳腺細(xì)胞總RNA為模板通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA（互補(bǔ)DNA），再通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA片段——hLF基因。但是過(guò)程①中，不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR，這是因?yàn)開___________，在RT-PCR過(guò)程中，加入的引物需在____________端添加識(shí)別序列的限制酶是____________；以便于hLF基因插入pEB質(zhì)粒中。

(2)過(guò)程②中，hLF基因插入到BLG基因之后，利用后者的啟動(dòng)子的目的是____________。

(3)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入了____________的細(xì)胞，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞是否有____________以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

(4)科研過(guò)程中，可以用PCR技術(shù)檢測(cè)受體細(xì)胞中的染色體上DNA上是否____________或檢測(cè)____________?？梢杂胈___________技術(shù)，檢測(cè)hLF基因是否翻譯成人乳鐵蛋白。22、西北農(nóng)業(yè)大學(xué)的科學(xué)家們將抗煙草花葉病毒的基因與土壤農(nóng)桿菌的質(zhì)粒進(jìn)行重組。下圖表示構(gòu)建重組質(zhì)粒和篩選含抗煙草花葉病毒基因的土壤農(nóng)桿菌的過(guò)程；請(qǐng)據(jù)圖回答：

圖1表示含有目的基因的DNA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列；限制性核酸內(nèi)切酶SmaⅠ的識(shí)別序列為CCCGGG，切點(diǎn)在C和G之間。

（1）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為___________。若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子中分離出圖1及對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有___________種不同長(zhǎng)度的DNA片段。

（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要_____酶，為了促進(jìn)重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的過(guò)程，常用_________處理土壤農(nóng)桿菌，使之成為感受態(tài)，即___________。

（3）分析圖中B、C兩個(gè)培養(yǎng)基上的菌落存活情況，含抗煙草花葉病毒基因的菌落位于____________（B/C）上，由此可知目的基因很可能是插入到________________（卡那霉素基因/氯霉素基因）中。

（4）將含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入煙草的葉肉細(xì)胞后，通過(guò)_____技術(shù)培養(yǎng)成抗煙草花葉病毒的煙草植株，為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因煙草是否抗煙草花葉病毒，可采用________的方法檢測(cè)煙草體內(nèi)是否含煙草花葉病毒的蛋白質(zhì)，也可進(jìn)行___________水平的鑒定，既用病毒進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn)。23、人胰島素由A鏈和B鏈構(gòu)成；其中B鏈的第20~29位氨基酸是胰島素分子間相互作用形成多聚體的關(guān)鍵區(qū)域。丹麥科學(xué)家將B28位脯氨酸替換為天冬氨酸，從而有效抑制了胰島素分子間的聚合，由此研發(fā)出速效胰島素類似物，并已經(jīng)在臨床上廣泛應(yīng)用?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題：

(1)蛋白質(zhì)工程是指以_________作為基礎(chǔ)；通過(guò)改造或合成基因，來(lái)改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

(2)蛋白質(zhì)工程的基本思路如下圖所示，物質(zhì)a是_________；在制備速效胰島素類似物時(shí)可能出現(xiàn)物質(zhì)b不同但合成的速效胰島素類似物空間構(gòu)象相同的現(xiàn)象，原因是_________。

(3)在對(duì)胰島素基因進(jìn)行改造時(shí)；常采用重疊延伸PCR技術(shù)引入特定位點(diǎn)突變，過(guò)程如圖所示：

除DNA模板﹑引物外，PCR反應(yīng)還需要_________等物質(zhì)條件才能順利進(jìn)行。PCR②③過(guò)程分別至少需要經(jīng)過(guò)_________輪反應(yīng)可得到等長(zhǎng)的DNA片段。PCR②③過(guò)程不能在同一反應(yīng)容器內(nèi)同時(shí)進(jìn)行，原因是_________。經(jīng)⑤過(guò)程形成的改造后的胰島素基因在PCR擴(kuò)增時(shí)，需要添加的引物是_________。

(4)若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的速效胰島素和天然胰島素的降血糖能力的差異，簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：_________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程為；①在輸卵管完成受精；②卵裂期，受精進(jìn)行有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體體積并不增加，或略有減?。虎凵］嘏?，胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí)，胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑葚，每個(gè)細(xì)胞都是全能細(xì)胞；④囊胚，開始出現(xiàn)分化，聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，中間的空腔稱為囊胚腔；⑤原腸胚，有了三胚層的分化，具有囊胚腔和原腸腔。

【詳解】

A；卵母細(xì)胞中含激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì)；核移植過(guò)程中選擇MII中期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)，A正確；

B；過(guò)程②重組細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)歷了卵裂、桑椹胚、囊胚和原腸胚等胚胎發(fā)育過(guò)程；不需要進(jìn)行脫分化和胰蛋白酶處理，B錯(cuò)誤；

C；過(guò)程③是誘導(dǎo)分化過(guò)程；其關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)，C正確；

D；過(guò)程④移植的神經(jīng)元細(xì)胞是取自該小鼠自身細(xì)胞誘導(dǎo)分化而來(lái)；不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選B。2、B【分析】【分析】

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因作物的花粉能夠散落到它的近親作物上；導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因擴(kuò)散，從而污染生物基因庫(kù)，A正確；

B；基因污染可以隨著轉(zhuǎn)基因生物的花粉傳播而擴(kuò)散；是一種可以擴(kuò)散的污染，B錯(cuò)誤；

C；雜草、害蟲可以與它的感染轉(zhuǎn)基因的近親雜交；進(jìn)而從它的近親獲得抗性基因，可能破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，C正確；

D；轉(zhuǎn)基因生物獲得的某些特殊性狀；增強(qiáng)了它們?cè)谠摰貐^(qū)生存條件下的競(jìng)爭(zhēng)能力，有可能成為“入侵的外來(lái)物種”，威脅生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法(聚乙二醇)或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合?？筛鶕?jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。

【詳解】

A；①過(guò)程是用酶解法去除植物細(xì)胞壁；用到的酶是纖維素酶和果膠酶，A、B表示原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；

B、②過(guò)程可以使用化學(xué)方法(聚乙二醇、高Ca2+-高pH）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；但滅活的病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法之一，B錯(cuò)誤；

C；③過(guò)程得到的雜種細(xì)胞含有兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)；故有4+2=6個(gè)染色體組，C錯(cuò)誤；

D；決定植物④脫分化和⑤再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的共同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，但加入的比例不同，D正確。

故選D。4、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗Myo的單克隆抗體可與Myo特異性結(jié)合；用于診斷急性心肌梗塞，A正確；

B；B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合制備單克隆抗體；表達(dá)Myo基因的細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，不能制備抗Myo的單克隆抗體，B錯(cuò)誤；

C；抗體與抗原的結(jié)合具有特異性；因此不同抗體可與同一抗原表面的不同部位結(jié)合，固相抗體和酶標(biāo)抗體具有不同的結(jié)構(gòu)，C正確；

D；由于抗體具有特異性；因此該檢測(cè)方法中，酶標(biāo)抗體的作用是與待測(cè)抗原結(jié)合，酶催化檢測(cè)底物反應(yīng)，可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)推測(cè)抗原量，D正確。

故選B。5、D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。

【詳解】

A；據(jù)圖可知；限制酶PstI切割質(zhì)粒時(shí)，會(huì)將質(zhì)粒切成兩段，且會(huì)破壞標(biāo)記基因，切掉啟動(dòng)子，因此不能選用PstI．BglⅡ這一組合，A錯(cuò)誤；

B；不能使用DNA聚合酶連接目的基因和切割開的質(zhì)粒；應(yīng)使用DNA連接酶，B錯(cuò)誤；

C；起始密碼子位于mRNA上；啟動(dòng)子是一段具有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)TNF基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，C錯(cuò)誤；

D；四環(huán)素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因；便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，D正確。

故選D。6、C【分析】【分析】

本實(shí)驗(yàn)的思路為：將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上；濾紙片周圍會(huì)出現(xiàn)抑菌圈，在抑菌圈邊緣生長(zhǎng)的細(xì)菌可能是耐藥菌；若抗生素對(duì)細(xì)菌起選擇作用，則隨著培養(yǎng)次數(shù)增多，耐藥菌的比例增大，在連續(xù)培養(yǎng)幾代后，抑菌圈的平均直徑變小。

【詳解】

A；將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上；使平板上長(zhǎng)出密集菌落，利于觀察抑菌圈，A正確；

B；①處濾紙片周圍未出現(xiàn)抑菌圈；濾紙片上不含抗生素，起對(duì)照作用，B正確；

C；隨重復(fù)次數(shù)增加；抗藥菌株的比例增加，抑菌圈的直徑會(huì)變小，C錯(cuò)誤；

D；抑菌圈邊緣的菌落可能是耐藥菌；所以，抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細(xì)菌抗藥性較強(qiáng)，D正確。

故選C。二、多選題(共5題，共10分)7、A:B【分析】【分析】

分析圖解：異種克隆大熊貓的培育首先通過(guò)核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞；然后經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng)獲得異種重構(gòu)囊胚，再利用胚胎移植技術(shù)將重構(gòu)囊胚移植如代孕兔體內(nèi)。

【詳解】

A；科學(xué)家通過(guò)對(duì)母兔注射促性腺激素；進(jìn)行超數(shù)排卵處理以獲得更多的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；異種重構(gòu)囊胚在體外培養(yǎng)時(shí)；往往需要在培養(yǎng)液中加入抗生素，從而保證無(wú)毒無(wú)菌環(huán)境，B錯(cuò)誤；

C；囊胚由滋養(yǎng)層細(xì)胞和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)構(gòu)成；其中滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育為胎盤和胎膜，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，C正確；

D；目前；異種重構(gòu)囊胚在代孕兔的子宮內(nèi)能正常著床，但是不能正常發(fā)育生產(chǎn)出大熊貓幼仔，很可能是代孕兔提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能讓異種重構(gòu)囊胚正常發(fā)育，D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】8、B:D【分析】【分析】

（1）微生物的發(fā)酵在食品的制作中具有重要意義；如制饅頭；面包、釀酒要用到酵母菌，制酸奶要用到乳酸菌。

（2）低溫能抑制細(xì)菌；真菌的生長(zhǎng)和繁殖。

（3）制作泡菜的原理就是利用乳酸菌使蔬菜中的有機(jī)物生成乳酸。

【詳解】

A；制酸奶要用到乳酸菌；乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，使得酸奶有一種特殊的酸味，所以在鮮奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品，A正確；

B；制作泡菜的壇子加水密封隔絕空氣是為了抑制需氧型微生物繁殖；B錯(cuò)誤；

C；白酒的釀造過(guò)程中利用了酵母菌的發(fā)酵作用；同時(shí)利用霉菌產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉糖化，C正確；

D；地窖中溫度低；能抑制細(xì)菌、真菌等微生物的生長(zhǎng)和繁殖，使其繁殖速度慢，數(shù)量少，不能充分分解食物，達(dá)到保鮮的目的，所以將做好的發(fā)酵食品冷藏于地窖中是為了抑制微生物的生長(zhǎng)，D錯(cuò)誤。

故選BD。9、C:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測(cè)到細(xì)菌B合成人的生長(zhǎng)激素才能說(shuō)明獲得成功；A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題意；細(xì)菌B不含有質(zhì)粒A及其上的基因，即沒(méi)有抗氨芐青霉素基因；質(zhì)粒含抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發(fā)生重組時(shí)抗四環(huán)素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的是導(dǎo)入了普通質(zhì)粒或者重組質(zhì)粒的細(xì)菌，B錯(cuò)誤；

C；將人的生長(zhǎng)激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過(guò)程連接兩個(gè)切口；該過(guò)程共形成4個(gè)磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因?qū)爰?xì)菌時(shí)，需要用Ca2+處理細(xì)菌；使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】10、A:C【分析】【分析】

編碼新冠病毒的S蛋白不具有感染性；但可以引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫，腺病毒不會(huì)使人致病，可將克隆出來(lái)的編碼新冠病毒S蛋白（介導(dǎo)新冠病毒感染細(xì)胞的成分）基因裝入載體腺病毒，注入人體，進(jìn)入人體細(xì)胞，表達(dá)出S蛋白，刺激人體產(chǎn)生針對(duì)新冠病毒的免疫應(yīng)答。

【詳解】

A；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心；一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因（S蛋白基因）、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，A正確；

B；由于病毒需要寄生在細(xì)胞內(nèi)；且S蛋白是在細(xì)胞內(nèi)合成的，所以重組腺病毒疫苗能使人體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫，B錯(cuò)誤；

C；重組腺病毒疫苗引發(fā)的體液免疫中有吞噬細(xì)胞（處理抗原）、T細(xì)胞（釋放淋巴因子）的參與；C正確；

D；重組腺病毒疫苗引起免疫反應(yīng)后相應(yīng)淋巴細(xì)胞增多；細(xì)胞周期將變短，D錯(cuò)誤。

故選AC。

【點(diǎn)睛】11、B:D【分析】【分析】

胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：①動(dòng)物發(fā)情排卵后；同種動(dòng)物的供；受體生殖器官的生理變化是相同的，這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過(guò)程中不受影響。

【詳解】

A；人工授精技術(shù)是輔助生殖技術(shù)；在臨床上利用工具把精液放置進(jìn)入子宮內(nèi)，合成受精卵，用精子、卵子形成胚胎需要借助的是體外受精技術(shù)，不是人工授精技術(shù)，A錯(cuò)誤；

B；若實(shí)施胚胎移植；需要受體母親處于受孕狀態(tài)，即處于合適的生理狀態(tài)，B正確；

C；子宮對(duì)外來(lái)胚胎一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此不需要受體母親與胚胎的主要HLA相似，C錯(cuò)誤；

D；“胚胎冷藏”技術(shù)所引起的這些爭(zhēng)論；實(shí)質(zhì)是冷凍胚胎的道德與法律地位的爭(zhēng)論，即帶來(lái)的倫理問(wèn)題，D正確。

故選BD。三、填空題(共6題，共12分)12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落菌落數(shù)14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】菌落數(shù)30～30015、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮16、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物，若用與戰(zhàn)爭(zhēng)，則可以對(duì)軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥可镂淦鞣N類：包括致病菌類、病毒類、生化毒劑類等，以及經(jīng)過(guò)基因重組的致病菌等。生物武器致病力強(qiáng)、攻擊范圍廣。把這些病原體直接或者間接通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由消化道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，也能損害植物。17、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣。它可以直接或通過(guò)食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時(shí)可毀壞植物，該說(shuō)法錯(cuò)誤?！窘馕觥垮e(cuò)誤四、判斷題(共1題，共10分)18、A【分析】【分析】

早期胚胎發(fā)育從受精卵開始；當(dāng)卵裂分裂到16-32個(gè)細(xì)胞時(shí)，卵裂產(chǎn)生的子細(xì)胞逐漸形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑葚時(shí)，這時(shí)的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞。胚胎進(jìn)一步發(fā)育，細(xì)胞開始出現(xiàn)分化，形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；滋養(yǎng)層；隨著胚胎進(jìn)一步發(fā)育，胚胎內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個(gè)時(shí)期的胚胎叫做囊胚。胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時(shí)期聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，即發(fā)育成完整的胚胎，而沿透明帶內(nèi)壁拓展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤，為胚胎的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)，故“胚胎發(fā)育至囊胚期時(shí)，細(xì)胞逐漸分化表述”正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共12分)19、略

【分析】【詳解】

（1）②中的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源；②中不同濃度的碳源A影響細(xì)菌數(shù)量，稀釋涂布平板法來(lái)測(cè)定②中活菌數(shù)目。

（2）④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于④的培養(yǎng)基沒(méi)有加入苯酚作為碳源；⑤培養(yǎng)基的中加入苯酚作為碳源。使用釋涂布平板法或平板劃線法可以在（6）上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。

（3）5支潔凈培養(yǎng)瓶→分別加入相同培養(yǎng)基（加等量的苯酚；用pH試紙檢測(cè)這5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基的pH值，用苯酚調(diào)試使之相等，苯酚是唯一的碳源）→分別接種5種等量的來(lái)自不同菌株的菌種→在相同的適宜條件下培養(yǎng)相同時(shí)間→再用pH試紙檢測(cè)這5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基的pH.苯酚顯酸性，不同菌株的菌種降解苯酚的能力不同，5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基中的苯酚被分解的量不同，所以pH值不同。用pH試紙檢測(cè)這5支瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基的pH值，從而比較不同菌株降解苯酚能力的大小。

（4）從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實(shí)驗(yàn)過(guò)程要無(wú)菌操作，通過(guò)培養(yǎng)基滅菌、接種環(huán)境滅菌、接種過(guò)程無(wú)菌操作等都可以防止其他微生物的污染?！窘馕觥竣?苯酚②.A③.稀釋涂布平板④.①含除苯酚外的其他碳源；②以苯酚作為唯一碳源⑤.稀釋涂布平板法或平板劃線⑥.避免培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng)⑦.用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株,一定時(shí)間后,測(cè)定培養(yǎng)液中苯酚的含量⑧.培養(yǎng)基滅菌、接種環(huán)境滅菌、接種過(guò)程無(wú)菌操作20、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作過(guò)程主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲取；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)與鑒定。（1）目的基因的獲取方法目的基因的獲取方法主要有從自然界已有的物種中分離出來(lái)（如鳥槍法從基因文庫(kù)或cDNA文庫(kù)中獲?。⑷斯ず铣桑ǔＳ玫姆椒ㄓ谢瘜W(xué)合成法和反轉(zhuǎn)錄法）、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體；需分別用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)，選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)。用DNA連接酶連接，構(gòu)成重組質(zhì)粒。（3）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法：將含有目的基因的表達(dá)載體提純→從雌性動(dòng)物體內(nèi)取出卵（可在體外受精，也可在體內(nèi)受精）→采用顯微注射儀進(jìn)行顯微注射→將注射了目的基因的受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時(shí)間后，移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。

2；蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

（1）獲取目的基因的方法主要有三種；最簡(jiǎn)便的是PCR技術(shù)。

（2）用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)；選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)，由圖可知可選用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割質(zhì)粒。用DNA連接酶將切割后的質(zhì)粒與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是顯微注射法。

（3）上述建構(gòu)好的表達(dá)載體含有能夠表達(dá)β-萄糖苷酶(BglB)的基因；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌能夠分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能夠降解纖維素。

（4）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列?！窘馕觥?1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA連接酶顯微注射法。

(3)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列六、綜合題(共3題，共21分)21、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中①是利用反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③是用脂質(zhì)體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

【詳解】

（1）由于hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá))；因此①過(guò)程中不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR。DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，根據(jù)②過(guò)程構(gòu)建的重組質(zhì)粒中目的基因兩側(cè)限制酶的識(shí)別序列（只有Sall和BamHI）可知，在RT-PCR過(guò)程中，加入的引物需在5'端添加Sall和BamHI兩種限制酶的識(shí)別序列以便于hLF基因插入pEB中。

（2）BLG基因?yàn)锽乳球蛋白基因；過(guò)程②中，hLF基因插入到BLG基因之后，利用BLG基因的啟動(dòng)子的目的是使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。

（3）據(jù)圖可知，質(zhì)粒和重組質(zhì)粒中的標(biāo)記基因是neor；因此將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入pEB質(zhì)?；騪EBL質(zhì)粒的細(xì)胞，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞中是否有綠色熒光，以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

（4）目的基因的檢測(cè)首先要采用PCR技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；其次采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，最后通過(guò)抗原一抗體雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生理解識(shí)記有關(guān)技術(shù)的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能將教材中的知識(shí)結(jié)合題中信息進(jìn)行遷移應(yīng)用?！窘馕觥?1)hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）5'SalⅠ和BamHⅠ

(2)使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。

(3)pEB質(zhì)?；騪EBL質(zhì)粒（或普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒）綠色熒光。

(4)插入了hLF基因hLF基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA抗原—抗體雜交22、略

【分析】【分析】

分析題圖：圖中DNA片段含有2個(gè)限制酶SmaⅠ切割位點(diǎn)。細(xì)菌能在加入氯霉素的培養(yǎng)基生長(zhǎng)；就說(shuō)明構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)沒(méi)有破壞氯霉素抗性基因。

【詳解】

（1）由分析可知，D基因片段有兩個(gè)限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)，可被限制酶SmaⅠ切割產(chǎn)生長(zhǎng)度為534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三種DNA片段。發(fā)生基因突變后的d基因片段只有一個(gè)限制酶SmaⅠ酶切位點(diǎn)，完全切割后出現(xiàn)兩個(gè)片段長(zhǎng)度分別是1327bp、661bp。D基因和d基因被切割后有一個(gè)片段相同；所以從雜合子中分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割產(chǎn)物中共有4種不