2024年滬教版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2024年滬教版選擇性必修3生物上冊月考試卷557考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗，其過程如圖所示。下列敘述不正確的是（）

A.用胡蘿卜根段培養(yǎng)成試管苗，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性B.⑤⑥過程所需的生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同C.愈傷組織的細(xì)胞呈正方形，排列緊密，無大液泡D.經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株，一般可保持原品種的遺傳特性2、限制酶MunI和限制酶EcoRI的識別序列及切割位點(diǎn)分別是和如圖表示的是四種質(zhì)粒和目的基因；其中箭頭所指部位為酶的識別位點(diǎn)，質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因。適于作為圖示目的基因載體的質(zhì)粒是（）

A.B.C.D.3、下列有關(guān)蛋白質(zhì)和DNA提取和分離實(shí)驗(yàn)的敘述，錯誤的是（）A.可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)B.透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜C.可以用雞血作為血紅蛋白和DNA提取的良好材料D.調(diào)節(jié)NaC1溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除血紅蛋白中的部分雜質(zhì)4、治療性克隆有望最終解決供體器官的短缺和器官移植出現(xiàn)的排異反應(yīng)。下圖表示治療性克隆的過程，下列說法正確的是（）A.上述過程利用了動物體細(xì)胞融合技術(shù)B.上述過程實(shí)現(xiàn)了動物細(xì)胞的全能性C.胚胎干細(xì)胞的不斷增殖和分化潛能保證①過程的進(jìn)行D.圖示克隆技術(shù)違背倫理道德，因此我國政府提出不贊成、不允許、不支持、不接受等“四不”原則5、下圖為單克隆抗體制備過程的示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.X細(xì)胞是從脾臟中提取的已免疫的B淋巴細(xì)胞B.Y細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，必須取用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞C.圖中的過程至少需要篩選兩次且方法不同，最終保留抗體檢測呈陽性的細(xì)胞D.圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象6、穿刺接種是用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動，則在穿刺線周圍能夠生長。下列敘述錯誤的是（）

A.穿刺接種可用于鑒定微生物的呼吸作用類型B.穿刺接種可用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運(yùn)動C.相對于平板劃線法，穿刺接種所需的培養(yǎng)基添加的瓊脂較多D.相對于稀釋涂布平板法，穿刺接種不可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)7、下列關(guān)于菊花組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.用自然生長的莖進(jìn)行組培須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒B.培養(yǎng)瓶用專用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶內(nèi)外的氣體交換C.組培苗鍛煉時采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是蛭石帶菌量低且營養(yǎng)豐富D.不帶葉片的菊花幼莖切段可以通過器官發(fā)生的途徑形成完整的菊花植株8、水稻胚乳含直鏈淀粉和支鏈淀粉；直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)?？蒲腥藛T將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個突變品系。各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如下圖所示。下列分析不合理的是（）

A.構(gòu)建基因編輯系統(tǒng)的DNA重組載體所需的酶是限制酶和DNA連接酶B.Wx基因啟動子序列的改變可能影響RNA聚合酶與啟動子的識別和結(jié)合C.根據(jù)各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果，可推測品系3的糯性最強(qiáng)D.與野生型相比，3個突變品系中直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列發(fā)生改變評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)9、下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖；沒有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對正常細(xì)胞也有一定毒性。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程C.在治療中，應(yīng)先注射非活化的磷酸酶，再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強(qiáng)，能減輕阿霉素對正常細(xì)胞的傷害10、生物技術(shù)安全性和倫理問題是社會關(guān)注的熱點(diǎn)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.應(yīng)嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對人類有害的物質(zhì)B.當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)，但不反對治療性克隆C.反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒D.生物武器用微生物、毒素，干擾素及重組致病菌等來形成殺傷力11、科學(xué)家將4個關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)胞中并表達(dá)；使這個細(xì)胞成為多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），下圖為該實(shí)驗(yàn)示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.應(yīng)用該技術(shù)可緩解器官移植時器官供應(yīng)不足的問題B.iPS細(xì)胞所攜帶的遺傳信息與肌肉細(xì)胞相同C.關(guān)鍵基因表達(dá)使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，降低了細(xì)胞的分化程度D.病人的iPS細(xì)胞分化而來的細(xì)胞移植回體內(nèi)后，可以避免免疫排斥12、重疊延伸PCR技術(shù)是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋；互為模板；經(jīng)過多次PCR擴(kuò)增。從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴(kuò)增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點(diǎn)誘變等方而具有廣泛的應(yīng)用前景，下圖表示利用重疊延伸PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因的過程。下列敘述正確的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高B.在第一階段由于引物2和引物3發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中C.引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制，共產(chǎn)生4種雙鏈DNA分子D.在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經(jīng)過3次復(fù)制13、相較于其他模型動物（如小鼠和大鼠），兔的免疫系統(tǒng)可對更廣泛的抗原產(chǎn)生應(yīng)答且其較大的脾臟可產(chǎn)生更多抗體。除此之外，兔的單克隆抗體具有天然多樣性、高親和力和特異性、全新的表位識別、易于人源化（已成為將外源抗體轉(zhuǎn)化為有效安全的治療藥物的重要方式）等優(yōu)勢。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.利用人源化兔單克隆抗體進(jìn)行治療時，機(jī)體將會發(fā)生細(xì)胞免疫B.給兔子注射抗原后，兔子體內(nèi)的抗體只有很少一部分是單克隆抗體C.利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力D.體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時，需要給予95％的氧氣和5％的CO214、下圖是快速RT-PCR過程示意圖；①和②為逆轉(zhuǎn)錄酶催化的逆轉(zhuǎn)錄過程，③是PCR過程。據(jù)圖分析下列說法錯誤的是（）

A.逆轉(zhuǎn)錄酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR過程只需要引物bC.RT-PCR不能檢測基因表達(dá)水平D.RT-PCR可檢測新冠病毒等RNA病毒評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)15、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。16、DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中，如果實(shí)驗(yàn)材料是非哺乳動物如雞血細(xì)胞，需要在雞血細(xì)胞中加入一定量的____________，如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先使用_______________溶解細(xì)胞膜。17、植物體細(xì)胞雜交的意義：_____。18、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。19、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。20、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：_____、_____、_____、_____等。評卷人得分四、判斷題(共3題，共12分)21、從牛卵巢中采集的卵母細(xì)胞可直接用于體細(xì)胞核移植。（選擇性必修3P53）()A.正確B.錯誤22、中國政府禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆。()A.正確B.錯誤23、蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共30分)24、如圖為果酒與果醋發(fā)酵裝置示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行________再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會。

（2）將發(fā)酵裝置放在18～25℃環(huán)境中，每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量________。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀的目的是____________________________________________。

（3）10天之后；利用酸性條件下的________對從出料口c取樣的物質(zhì)進(jìn)行檢驗(yàn)，若樣液變?yōu)開_______色，說明產(chǎn)生了酒精。

（4）產(chǎn)生酒精后，若在發(fā)酵液中加入醋酸菌，然后將裝置放在________環(huán)境中，適時打開______向發(fā)酵液中充氣，原因是______________________________________________。25、氧化硫硫桿菌（T．t）通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用?？茖W(xué)家欲通過實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響。

實(shí)驗(yàn)材料：氧化硫硫桿菌（T．t）菌液；蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液，配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基(含單質(zhì)硫)，恒溫?fù)u床等。

請分析并回答以下問題：

（1）氧化硫硫桿菌的代謝類型為______________，培養(yǎng)氧化硫硫桿菌（T．t）的液體培養(yǎng)基中的碳源是___________，該培養(yǎng)基從功能上屬于______________培養(yǎng)基。

（2）實(shí)驗(yàn)前，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)氧化硫硫桿菌（T．t）菌液已被雜菌污染，于是在配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基中加入____________，用______________法接種并進(jìn)行純化培養(yǎng)；得到了氧化硫硫桿菌菌落。

（3）實(shí)驗(yàn)步驟：

第一步：對配制好的培養(yǎng)基再次進(jìn)行______________滅菌處理；以防止雜菌污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

第二步：取三個錐形瓶（編號A、B、C）分別加入等量培養(yǎng)基后，再依次分別加入____________________________；

第三步：往A、B、C三組中接種______________后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

第四步：每天測定并記錄各組的硫酸含量。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：如圖所示；據(jù)圖分析實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：________________________________________________________。26、下圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請?jiān)O(shè)計(jì)簡單的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般以天然存在的______發(fā)酵，品質(zhì)不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質(zhì)較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品，在實(shí)際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，觀察并統(tǒng)計(jì)到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時，操作上的最主要的區(qū)別是______。評卷人得分六、綜合題(共4題，共12分)27、我們在生產(chǎn)；生活中產(chǎn)生的大量垃圾；正在嚴(yán)重侵蝕我們的生存環(huán)境，垃圾分類是實(shí)現(xiàn)垃圾減量化、資源化、無害化，避免“垃圾圍城”的有效途徑。利用微生物將垃圾中的有機(jī)物分解是常用的方法。請回答下列問題。

（1）不同微生物對廚余垃圾的分解能力不同，科研人員在選取能高效降解廚余垃圾微生物的過程中，獲得純凈微生物的關(guān)鍵是_____。廚余垃圾含有較多鹽分，在選取微生物時需在培養(yǎng)基中提高_(dá)____含量配制成選擇培養(yǎng)基，該類型培養(yǎng)基篩選微生物的原理是：_____。

（2）若要處理廚余垃圾中富含纖維素的廢棄物，需篩選產(chǎn)纖維素酶的微生物，一般認(rèn)為纖維素酶至少包括三種組分，即_____。采集的樣品需_____后才可以涂布到鑒別培養(yǎng)基上，配制培養(yǎng)基的過程中，可在倒平板時加入經(jīng)滅菌處理的_____，待長出菌落后，依據(jù)是否產(chǎn)生_____來篩選纖維素分解菌。

（3）處理廚余垃圾除了利用微生物，還可以利用這些微生物產(chǎn)生的酶，現(xiàn)代的固定化酶技術(shù)可以回收酶，使酶能夠被反復(fù)利用，常用的固定化酶的方法有_____。

（4）請列舉兩項(xiàng)進(jìn)行垃圾分類或集中處理的益處：_____。28、回答下列問題：

（1）取少量酸奶，用無菌蒸餾水稀釋后，再用______蘸取少量的稀釋液，在MRS乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線，以獲得乳酸菌單菌落。如圖所示的劃線分離操作，正確的是______。

（2）國標(biāo)規(guī)定牛奶中的細(xì)菌含量不能超過200萬個/mL。牛奶罐裝時需要實(shí)時檢測其中的細(xì)菌含量，此時不宜采用稀釋涂布平板法接種來計(jì)數(shù)菌落，原因是______。

（3）制作饅頭時；可以先用酵母菌和面，隨后放置約1h，而發(fā)了之后再揉面并制成饅頭劑子，將饅頭劑子放置約10min，然后將饅頭劑子置于蒸鍋中蒸。

①面發(fā)了之后體積會增大，原因是______。

②小明制作的饅頭經(jīng)常會發(fā)酸，推測饅頭中的酸味可能是醋酸桿菌或乳酸菌等產(chǎn)酸的微生物所導(dǎo)致的。小明用保鮮膜將發(fā)面的容器密封起來，饅頭劑子也用保鮮膜涂油覆蓋，結(jié)果饅頭就不酸了。據(jù)此判斷導(dǎo)致饅頭發(fā)酸的微生物主要是______，判斷的依據(jù)是______。29、草甘膦是一種非選擇性除草劑；殺死雜草的同時也殺死農(nóng)作物。它與植物體內(nèi)的PEP（磷酸烯醇式丙酮酸）結(jié)構(gòu)相似，可與PEP競爭結(jié)合EPSP合酶，阻止PEP轉(zhuǎn)化，影響植物細(xì)胞正常代謝。我國科學(xué)家從草甘膦施用土壤中的某微生物體內(nèi)獲取GR79基因（草甘膦抗性基因），并將其導(dǎo)入植物體細(xì)胞中獲得抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因植物。據(jù)圖回答下列問題：

(1)GR79基因發(fā)揮抗草甘膦作用的機(jī)理可能是______。從分離得到的某土壤微生物體內(nèi)獲取含有GR79基因的質(zhì)粒，并將其保存在某細(xì)菌群體（受體菌）中，各個受體菌分別含有該微生物的不同的基因，這些受體菌群中該微生物的所有DNA序列克隆的匯總，稱為______。

(2)據(jù)圖推測，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增GR79基因時，需設(shè)計(jì)能與該基因兩條模板鏈3’端______的引物；同時為構(gòu)建該基因表達(dá)載體，需在引物1和引物2的______端加上限制酶______的識別序列。

(3)實(shí)驗(yàn)中常采用______法將GR79基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物受體細(xì)胞；為避免該基因在近緣農(nóng)作物中傳播，可將其導(dǎo)入植物受體細(xì)胞的______；除溫度、酸堿度等環(huán)境因素外，影響該基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞成功率的因素有______。

(4)為檢測GR79基因是否導(dǎo)入植物體細(xì)胞，可在培養(yǎng)基中添加______篩選含該基因的受體細(xì)胞；也可利用______技術(shù)更加精準(zhǔn)地進(jìn)行檢測，若待檢DNA中含有該基因，則會發(fā)現(xiàn)硝酸纖維素膜上會出現(xiàn)______。

(5)經(jīng)檢測，科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得GR79基因的植物幼苗不具有抗草甘膦的能力，原因可能是______。30、酯酶結(jié)合熒光分析法可對有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行檢測；某研究院利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得一種催化效率高；農(nóng)藥敏感性強(qiáng)的微生物酯酶。請分析回答：

限制酶識別序列與切割位點(diǎn)限制酶識別序列與切割位點(diǎn)PstⅠ5′－CTGCA↓G－3′NdeⅡ5′－↓GATC－3′HindⅢ5′－A↓AGCTT－3′EcoRⅠ5′－G↓AATTC－3′DpnⅡ5′－↓GATC－3′AluⅠ5′－AG↓CT－3′

(1)人工合成酯酶基因后通過PCR技術(shù)可實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增，為該過程提供原料的是________；還需要設(shè)計(jì)兩種引物，設(shè)計(jì)引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的_______端開始連接脫氧核苷酸。某質(zhì)粒圖譜和目的基因的序列如圖所示，應(yīng)選擇引物________（填下列數(shù)字）（①～④中加框表示識別序列前的保護(hù)堿基，增強(qiáng)上述酶與目的基因的結(jié)合。）。在PCR擴(kuò)增儀中加入所選擇的引物，需擴(kuò)增________代后才會得到等長的8條DNA片段。

①5′－CCGGAATTCATGCTTGATATGCCAATC－3′

②5′－CCCAAGCTTATGCTTGATATGCCAATC－3′

③5′－CCCAAGCTTCTAGTCGAACACAAGAAG－3′

④5′－CCGGAATTCCTAGTCGAACACAAGAAG－3′

(2)若提取高產(chǎn)酯酶野生菌的基因組DNA，用設(shè)計(jì)好的兩種引物和合適的條件進(jìn)行PCR，其產(chǎn)物可以通過________來鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有目的基因以外的雜帶存在，分析可能原因是________。解決措施是在目的基因的________（填“內(nèi)部”或“上；下游”）重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR。

(3)將PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒用限制酶酶切，酶切產(chǎn)物純化后，用_______連接，連接產(chǎn)物導(dǎo)入大腸桿菌前需用________處理大腸桿菌；使其處于感受態(tài)。

(4)將目的蛋白與某些標(biāo)簽融合表達(dá)形成含標(biāo)簽的融合蛋白，實(shí)現(xiàn)增溶、防降解、促進(jìn)分泌、便于純化和檢測等功能。6×His-Tag（組氨酸標(biāo)簽）含有的咪唑基團(tuán)選擇性地結(jié)合在已固定于層析介質(zhì)的Ni2＋、Co2＋等金屬離子上。高濃度的咪唑緩沖液可以競爭性洗脫結(jié)合在介質(zhì)上的His標(biāo)簽蛋白。據(jù)此推測，6×His-Tag的作用之一是________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。原理是植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株；這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有全能性，A正確；

B；⑤⑥過程分別形成愈傷組織和試管苗；形成的產(chǎn)物不同，所需的生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同，B正確；

C；愈傷組織的細(xì)胞是一團(tuán)疏松無規(guī)則、高度液泡化、呈無定形狀態(tài)的、具有分生能力的薄壁細(xì)胞；C錯誤；

D；經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株；屬于無性生殖，一般可保持原品種的遺傳特性，D正確。

故選C。2、A【分析】【分析】

分析題圖：目的基因兩側(cè)都是限制酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)；因此應(yīng)選用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子。限制酶MumⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及切割位點(diǎn)分別是-C↓AATTG-和-G↓AATTC-，可見兩者切割后產(chǎn)生的黏性末端相同，用DNA連接酶可將兩者切割后的DNA連接形成重組DNA分子。

【詳解】

A；用限制酶MunⅠ切割A(yù)質(zhì)粒后；不會破壞標(biāo)記基因，而且還能產(chǎn)生與目的基因兩側(cè)黏性末端相同的末端，適于作為目的基因的載體，A正確；

B；質(zhì)粒沒有標(biāo)記基因；不適于作為目的基因的載體，B錯誤；

C；質(zhì)粒含有標(biāo)記基因；但用MumⅠ切割后，標(biāo)記基因會被破壞，因此不適于作為目的基因的載體，C錯誤。

D；質(zhì)粒含有標(biāo)記基因；但用EcoRⅠ切割后，標(biāo)記基因會被破壞，因此不適于作為目的基因的載體，D錯誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

DNA的粗提取的步驟主要有：實(shí)驗(yàn)材料的選??；破碎細(xì)胞、獲得含DNA的濾液、去除濾液中的雜質(zhì)、DNA的析出與鑒定。

【詳解】

A；豬紅細(xì)胞沒有細(xì)胞壁；可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，A正確；

B；透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜；小分子雜質(zhì)可以通過，B正確；

C；雞血細(xì)胞中含有豐富的DNA和血紅蛋白；可以用雞血作為血紅蛋白和DNA提取的良好材料，C正確；

D；加入木瓜蛋白酶會將蛋白質(zhì)水解；D錯誤。

故選D。4、C【分析】【分析】

該過程利用了動物細(xì)胞核移植技術(shù)；該技術(shù)體現(xiàn)了動物細(xì)胞核的全能性；由胚胎干細(xì)胞發(fā)育成組織是細(xì)胞分裂和分化的結(jié)果，所以①②過程中都存在細(xì)胞的分裂，都會進(jìn)行DNA的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成。

【詳解】

A；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官；用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞，組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。上述過程利用了動物細(xì)胞核移植技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，A錯誤；

B；上述過程涉及到核移植技術(shù)；但沒有發(fā)育成完整個體，則不能體現(xiàn)動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，即便發(fā)育成個體也不能體現(xiàn)動物細(xì)胞的全能性，只能體現(xiàn)動物細(xì)胞核的全能性，B錯誤。

C；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性；經(jīng)過分裂和分化，可以得到能用于移植的各種組織、細(xì)胞，因此，胚胎干細(xì)胞的不斷增殖和分化潛能保證①過程的進(jìn)行，C正確；

D、圖示所示技術(shù)為治療性克隆，而非生殖性克隆，我國政府的“四不”原則針對的是生殖性克隆，D錯誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】5、B【分析】【分析】

分析圖示可知；給小鼠注射抗原后，從小鼠體內(nèi)收集經(jīng)過免疫的細(xì)胞（X細(xì)胞），與體外培養(yǎng)的Y（骨髓瘤細(xì)胞）細(xì)胞融合，經(jīng)過培養(yǎng)后篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

A；單克隆抗體的制備是用經(jīng)過免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；制備雜交瘤細(xì)胞，所以X細(xì)胞是從脾臟中提取的已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；Y細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞；B錯誤；

C；圖中篩選過程至少兩次且方法不同；第一次篩選是選擇雜交瘤細(xì)胞，需要抑制同種細(xì)胞的融合體、以及未融合的細(xì)胞的增殖；第二次篩選是用抗體檢測的方法選擇能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，最終保留抗體檢測呈陽性的細(xì)胞，C正確；

D；由于雜交瘤細(xì)胞即保留了骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn)；又有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的作用，所以圖中能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】6、C【分析】【分析】

穿刺接種在保藏厭氧菌種或研究微生物的運(yùn)動時常采用此法。做穿刺接種時；用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。它的做法是：用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動，則在穿刺線周圍能夠生長。

【詳解】

A、由分析可知，穿刺接種可用于鑒定微生物的呼吸作用類型，A正確；

B、穿刺接種常用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運(yùn)動，因此需要接種在半固體培養(yǎng)基中，B正確；

C、由分析可知，相對于平板劃線法，穿刺接種所需的培養(yǎng)基添加的瓊脂較少，C錯誤；

D、稀釋涂布平板法可用于活菌計(jì)數(shù)，而穿刺接種不可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)，D正確。

故選C。7、D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：1；過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）．2、原理：植物細(xì)胞的全能性．3、條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）。

【詳解】

A；自然生長莖段的消毒屬于外植體消毒；先用70%酒精，再用無菌水清洗，再用5%次氯酸鈉消毒處理，最后再用無菌水清洗，A錯誤；

B；培養(yǎng)瓶用專用封口膜封口的目的是防止雜菌污染；并不影響氣體交換，B錯誤；

C；組培苗鍛煉時采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是蛭石比較松軟；持水性也較好，有利于幼苗的生根和葉片的生長，C錯誤；

D；不帶葉片的菊花莖的切段可通過植物組織培養(yǎng)分化出芽和根這種器官發(fā)生的途徑形成完整的菊花植株；D正確。

故選D。8、D【分析】【分析】

根據(jù)題干信息“將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻；實(shí)現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點(diǎn)編輯，從而獲得了三個突變品系”，說明突變品系的獲得是由于啟動子發(fā)生改變，啟動子位于編碼區(qū)是RNA聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)。

根據(jù)圖中信息；品系3的WxmRNA含量最低，說明其直鏈淀粉合成酶基因表達(dá)量最少。

【詳解】

A；將目的基因與Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時；需要限制酶的切割，將目的基因插入載體時需要DNA連接酶的連接，A正確；

B；啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點(diǎn)；如果啟動子序列改變將會影響RNA聚合酶與之結(jié)合和識別，進(jìn)而影響基因的轉(zhuǎn)錄水平，B正確；

C；圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少；那么合成的直鏈淀粉酶最少，直鏈淀粉合成量最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強(qiáng)，C正確；

D；在真核生物中；編碼蛋白質(zhì)的序列是基因中編碼區(qū)，編碼區(qū)中不包括啟動子序列，因此直鏈淀粉合成酶的基因堿基序列中不含有啟動子，因此3個突變品系中Wx基因中控制合成直鏈淀粉酶的氨基酸序列不發(fā)生改變，D錯誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共6題，共12分)9、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的；A正確；

B；根據(jù)題意可知；“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程，B正確；

C；在治療中；應(yīng)將非活化磷酸阿霉素和生物導(dǎo)彈同時注射，C錯誤；

D；單克隆抗體特異性強(qiáng)；能減輕阿霉素對正常細(xì)胞的傷害，D正確。

故選ABD。10、A:B:C【分析】【分析】

（1）生物技術(shù)安全性問題包括食物安全；生物安全、環(huán)境安全三個方面。

（2）倫理問題主要在克隆人的問題上出現(xiàn)爭議。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因植物合成的某些新蛋白質(zhì)；可能會成為過敏原而引起少數(shù)人過敏，A正確；

B；治療性克隆是為了從胚胎中取出干細(xì)胞用于醫(yī)學(xué)研究和治療；生殖性克隆就是將人的體細(xì)胞移植到去核的卵中，然后將其在體外形成的胚胎移植到母體子言中，最終經(jīng)足懷胎后生下的嬰兒就是克隆人，當(dāng)今社會的大多數(shù)人對克隆人的研究持否定態(tài)度，但不反對治療性克隆，B正確；

C；反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒；C正確；

D；生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，對軍隊(duì)和平民造成大規(guī)模殺傷效果，干擾是動物或人體細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白，它是一種抗病毒的特效藥，D錯誤。

故選ABC。11、B:C【分析】【分析】

分析題圖：圖中表示將4個關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)中并表達(dá)；使這個細(xì)胞成為多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）以及多能干細(xì)胞的分化過程，即圖中①②③表示細(xì)胞分化。

【詳解】

A；用iPS細(xì)胞誘導(dǎo)分化成需要的器官后進(jìn)行自體移植；沒有免疫排斥反應(yīng)，可緩解器官移植時器官供應(yīng)不足的問題，A正確；

B；將4個關(guān)鍵基因移植入已分化的肌肉細(xì)中并表達(dá)；使這個細(xì)胞成為多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），可見iPS細(xì)胞所帶遺傳信息與肌肉細(xì)胞不同，B錯誤；

C；圖中關(guān)鍵基因表達(dá)形成iPS細(xì)胞；沒有使細(xì)胞功能趨向?qū)ｉT化，C錯誤；

D；用患者自己的體細(xì)胞通過體外誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞；所以將iPS細(xì)胞增殖分化出的不同細(xì)胞移植回病人體內(nèi)，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選BC。12、A:B【分析】【分析】

PCR擴(kuò)增運(yùn)用DNA分子復(fù)制的原理；經(jīng)過變性；復(fù)性、延伸，最終獲得大量DNA的過程。

【詳解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之間是三個氫鍵連接，因此引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性越高，A正確；

B；圖中可知；引物2和引物3分別作用同一段DNA的兩條鏈，會發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，因此兩者置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中，B正確；

C；引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制；共產(chǎn)生2種雙鏈DNA分子，C錯誤；

D；在引物1、2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中；經(jīng)第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經(jīng)過2次復(fù)制，D錯誤。

故選AB。13、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理：利用病毒對宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗體參與的是體液免疫；A錯誤；

B；單克隆抗體是由特異性雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的；B錯誤；

C；雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力；C正確；

D、體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時，需要給予95％的空氣和5％的CO2，D錯誤。

故選ABD。14、B:C【分析】【分析】

據(jù)圖可知，逆轉(zhuǎn)錄酶可以催化以RNA為模板合成cDNA，還可催化以cDNA為模板合成其互補(bǔ)DNA；RT-PCR過程中需要a、b兩種引物。

【詳解】

A；逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正確；

B、③PCR過程需要引物a、b；因?yàn)楹罄m(xù)的模板鏈序列既有與靶RNA一致的，也有與cDNA一致的，B錯誤；

C；RT-PCR可檢測基因的轉(zhuǎn)錄情況從而推知基因的表達(dá)水平；C錯誤；

D；通過設(shè)計(jì)RNA的特異性引物進(jìn)行RT-PCR檢測新冠病毒等RNA病毒；D正確。

故選BC。三、填空題(共6題，共12分)15、略

【解析】①.胚胎細(xì)胞②.體細(xì)胞16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蒸餾水洗滌劑和食鹽17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。18、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶19、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。20、略

【分析】略【解析】營養(yǎng)無菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環(huán)境四、判斷題(共3題，共12分)21、B【分析】【詳解】

從牛卵巢中采集到卵母細(xì)胞后；接著對其進(jìn)行的操作是先在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，再通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，獲得去核的卵母細(xì)胞，再經(jīng)核移植獲得重組的受體細(xì)胞。

故該表述錯誤。22、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個體。中國政府：禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對治療性克隆人。

【詳解】

據(jù)分析可知；中國政府禁止生殖性克隆，但不反對治療性克隆。

故正確。23、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜，并且蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共30分)24、略

【分析】【分析】

1；果酒制作過程中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機(jī)要清洗干凈；并晾干；②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。

（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶；要留要大約1/3的空間，并封閉充氣口；②制葡萄酒的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃～25℃，時間控制在10～12d左右，可通過出料口對發(fā)酵的情況進(jìn)行，及時的監(jiān)測。③制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃～35℃，時間控制在前7～8d左右，并注意適時通過充氣口充氣。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）釀造葡萄酒時；在葡萄榨汁前，葡萄要先進(jìn)行進(jìn)行沖洗，然后再除去枝梗，可以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會。

（2）榨汁機(jī)要清洗干凈，并晾干，發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒，再裝入葡萄汁，將發(fā)酵裝置放在18～23℃環(huán)境中，發(fā)酵過程中由于酵母菌呼吸作用會產(chǎn)生二氧化碳，因此每天擰開氣閥b多次；排出發(fā)酵過程產(chǎn)生的大量二氧化碳。裝置中d處設(shè)計(jì)成彎曲形狀利用了巴斯德的鵝頸瓶的原理，即為了防止排氣時空氣中微生物的污染。

（3）酵母菌發(fā)酵的產(chǎn)物中會產(chǎn)生酒精；利用橙色的重鉻酸鉀可以檢測酒精的存在，酒精遇到橙色的重鉻酸鉀會變?yōu)榛揖G色，從而鑒定酒精的存在。

（4）溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件；20℃左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30℃～35℃，因此要將溫度控制在30℃～35℃。醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參與，因此要適時向發(fā)酵裝置中充氣，需要打開a閥通入空氣。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作過程的知識點(diǎn)，要求學(xué)生掌握果酒的制作的原理、過程以及發(fā)酵過程中的注意事項(xiàng)是該題的重點(diǎn)，識記果酒的制作過程是解決重點(diǎn)的關(guān)鍵。理解并識記果醋的發(fā)酵過程和原理是解決第（4）問的關(guān)鍵?！窘馕觥繘_洗CO2防止排氣時空氣中微生物的污染重鉻酸鉀灰綠30～35℃氣閥a醋酸菌是好氧細(xì)菌，酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿嵝枰鯕獠拍苓M(jìn)行25、略

【分析】【分析】

微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）

結(jié)合題意“氧化硫硫桿菌通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用”可知，氧化硫硫桿菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型；由于該菌可以進(jìn)行化能合成作用，可以利用液體培養(yǎng)基中的無機(jī)碳或CO2；可以其作為液體培養(yǎng)基中的碳源；該培養(yǎng)基中含有單質(zhì)硫，對生長的菌類具有選擇作用，在功能上屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）

培養(yǎng)微生物應(yīng)用固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；故應(yīng)在配置好的液體培養(yǎng)基中加入瓊脂；對微生物進(jìn)行純化培養(yǎng)的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）

第一步；對培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌；

第二步；由于本實(shí)驗(yàn)的目的是通過實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響，則實(shí)驗(yàn)的自變量為硫酸鋅的有無及其含量，實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故本步驟應(yīng)在三個錐形瓶中分別加入等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液；

第三步；遵循無關(guān)變量一致原則，故往A；B、C三組中接種等量的氧化硫硫桿菌（T．t）后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

（4）

據(jù)圖分析；與對照（蒸餾水組）相比，低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強(qiáng)化學(xué)生對實(shí)驗(yàn)室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識的理解與掌握。熟記相關(guān)知識并能結(jié)合術(shù)語分析作答是解題關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）自養(yǎng)需氧型無機(jī)碳或CO2選擇培養(yǎng)基。

（2）瓊脂平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）高壓蒸汽等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液等量的氧化硫硫桿菌（T．t）

（4）低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用26、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進(jìn)行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；變成灰綠色，該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精，因此實(shí)驗(yàn)自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對照組中應(yīng)加入酒精作為陽性對照。實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)遵循等量原則；單一變量原則等，因此實(shí)驗(yàn)思路是：取兩支試管分別標(biāo)號A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實(shí)驗(yàn)組，B試管中各加入2ml酒精，作為對照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗(yàn)證發(fā)酵過程中產(chǎn)生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種?，F(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：酵母細(xì)胞個數(shù)/1mL=1個中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實(shí)驗(yàn)中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關(guān)閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實(shí)驗(yàn)思路：取兩支試管分別標(biāo)號A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時需關(guān)閉充氣口，釀醋時則需向充氣孔中充入無菌空氣六、綜合題(共4題，共12分)27、略

【分析】【分析】

（1）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌污染。實(shí)驗(yàn)室中篩選微生物的原理是：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)；溫度、pH等）；同時抑制或阻止其他微生物生長。（2）分解纖維素的微生物的分離：剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)；當(dāng)纖維素被纖維素酶水解后，剛果紅─纖維素復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，據(jù)此可篩選出纖維素分解菌。（3）酶分子很小，容易從包埋材料中漏出，更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化。

【詳解】

（1）獲得純凈微生物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。從含有較多鹽分的廚余垃圾中選取微生物時；需在培養(yǎng)基提高鹽分（食鹽）含量配制成選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基篩選微生物的原理是：允許特定類型的微生物生長同時阻止或抑制其他種類微生物生長。

（2）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶。采用稀釋涂布平板法對微生物進(jìn)行接種前；需要對采集的樣品進(jìn)行梯度稀釋（或系列稀釋）。篩選產(chǎn)纖維素酶的微生物，在配制培養(yǎng)基的過程中，可在倒平板時加入經(jīng)滅菌處理的稀釋剛果紅染液。剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維素水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生顏色反應(yīng)；當(dāng)纖維素被纖維素酶水解后，剛果紅─纖維素復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。由此可見，待培養(yǎng)基上長出菌落后，可依據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

（3）常用的固定化酶的方法有化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。

（4）進(jìn)行垃圾分類或集中處理的益處有：降低垃圾后續(xù)處理的經(jīng)濟(jì)成本；有利于再生資源回收利用、帶來經(jīng)濟(jì)效益、減少二次污染等。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查學(xué)生對無菌技術(shù)、分解纖維素的微生物的分離、固定化酶等相關(guān)知識的識記和理解能力，以及分析問題的能力?！窘馕觥糠乐雇鈦黼s菌的入侵鹽分（食鹽）允許特定類型的微生物生長同時阻止或抑制其他種類微生物生長C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶梯度稀釋/系列稀釋稀釋剛果紅染液透明圈化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法降低垃圾后續(xù)處理的經(jīng)濟(jì)成本、有利于再生資源回收利用、帶來經(jīng)濟(jì)效益、減少二次污染等28、略

【分析】分析圖解：圖中細(xì)菌的分離的方法為平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

【詳解】

（1）劃線接種時需要用到接種環(huán)或接種針；正確的劃線分離操作應(yīng)該多次劃線；且從上一次劃線的末端開始劃線，因此B的劃線分離操作最為合理，故選B。

（2）平板菌落計(jì)數(shù)時；需要將涂布的平板放置24-48h，等待平板上長出菌落再計(jì)數(shù)，在等待菌落長出的這一段時間內(nèi)，牛奶營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，其中的微生物在這一時間段內(nèi)會以牛奶為培養(yǎng)基進(jìn)行繁殖，因此這就會導(dǎo)致計(jì)數(shù)時牛奶中的細(xì)菌數(shù)要比取樣時的細(xì)菌數(shù)高，菌落計(jì)數(shù)結(jié)果不能真實(shí)客觀反映牛奶中菌落數(shù)目。

（3）①發(fā)面時主要是酵母菌的作用，酵母菌通過細(xì)胞呼吸釋放CO2，CO2進(jìn)入面團(tuán)中導(dǎo)致面團(tuán)蓬松；體積變大。

②如果饅頭中的酸味主要是乳酸桿菌導(dǎo)致的；則密封后乳酸桿菌厭氧發(fā)酵，饅頭仍將是酸的；如果饅頭中的酸味是由醋酸桿菌導(dǎo)致的，醋酸桿菌是好氧型細(xì)菌，則密封后醋酸桿菌不能生長，饅頭中的酸味將消失，由題干信息“用保鮮膜將發(fā)面的容器密封起來，饅頭劑子也用保鮮膜涂油覆蓋，結(jié)果饅頭就不酸了”可知導(dǎo)致饅頭發(fā)酸的微生物主要是醋酸桿菌。

【點(diǎn)睛】

本題傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)及微生物的培養(yǎng)。考查學(xué)生理解能力、獲取信息的能力以及綜合運(yùn)用能力，體現(xiàn)了生命觀念和科學(xué)思維。【解析】接種環(huán)（針）B平板上長出菌落需要一段時間，此期間牛奶中的細(xì)菌數(shù)量會發(fā)生變化，計(jì)數(shù)結(jié)果不能反映牛奶罐裝時實(shí)際的細(xì)菌數(shù)量酵母菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2，