氟化嵌段聚合物的應(yīng)用

II1引言1.1腫瘤治療概述惡性腫瘤威脅人類的生命。腫瘤會(huì)隨著身體內(nèi)細(xì)胞的增長和轉(zhuǎn)移發(fā)生惡化，最終導(dǎo)致人的死亡。腫瘤的一般治療方法有手術(shù)治療，主要用于實(shí)體瘤病人，許多腫瘤可通過手術(shù)切除治療達(dá)到治愈或延長生命的效果；也可以通過應(yīng)用化學(xué)藥物來抑制或殺死腫瘤細(xì)胞，化療通常用于全身性治療，適用于廣泛轉(zhuǎn)移或無法通過手術(shù)完全切除的腫瘤，還有一些放射治療等等[1]。傳統(tǒng)治療腫瘤方法雖然在一定程度上可以控制疾病發(fā)展，但也存在較大的副作用。研究人員花費(fèi)了大量的人力物力去研究治療腫瘤的方案，但是結(jié)果都不盡人意。直至近年，研究人員開發(fā)了新型的癌癥治療手段——光動(dòng)力療法(photodynamictherapy,PDT)。PDT可以產(chǎn)生活性氧殺傷腫瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡[2]。光動(dòng)力治療具有許多優(yōu)點(diǎn)，準(zhǔn)確度高，效率高，治療效果好，副作用低等。PDT僅將光源引導(dǎo)到體內(nèi)進(jìn)行治療，盡可能的避免了手術(shù)造成的創(chuàng)傷和痛苦，能較快的使病人恢復(fù)[3]。光動(dòng)力療法是基于光敏劑、氧氣和光源三種物質(zhì)的相互作用的癌癥治療方法，作為一種安全高效的腫瘤治療方式,在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有極廣闊的應(yīng)用前景。光動(dòng)力治療法的治療效果取決于腫瘤組織中的氧氣含量，但絕大部分實(shí)體腫瘤都存在乏氧環(huán)境,氧氣含量顯著低于正常組織,使得光動(dòng)力治療的療效受到了很大的影響[4]。目前大多研究主要通過改善腫瘤微環(huán)境缺氧問題提高PDT療效。1.2腫瘤乏氧環(huán)境腫瘤微環(huán)境（tumormicroenvironment,TME）是由成纖維細(xì)胞、免疫細(xì)胞、髓系細(xì)胞等多種細(xì)胞和物質(zhì)組成的腫瘤細(xì)胞生存的直接環(huán)境，與人體正常組織環(huán)境有不同的特征[5]。腫瘤乏氧是腫瘤組織關(guān)鍵特征之一，腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞周圍沒有足夠的氧分子，比正常的細(xì)胞組織的氧分子濃度低。腫瘤細(xì)胞的代謝活動(dòng)比正常細(xì)胞更為活躍，需要更多的氧氣供應(yīng)，但腫瘤內(nèi)部的血管結(jié)構(gòu)異常，無法有效提供足夠的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)[6]，使其自身形成乏氧環(huán)境。乏氧微環(huán)境導(dǎo)致腫瘤對(duì)治療產(chǎn)生抵抗性，降低PDT的療效。乏氧環(huán)境還能夠刺激腫瘤細(xì)胞發(fā)生變化，以適應(yīng)乏氧環(huán)境，同時(shí)可能導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞改變微環(huán)境，加劇腫瘤細(xì)胞部位的乏氧問題，進(jìn)一步導(dǎo)致癌癥的惡化?？鼓[瘤納米藥物的效果被限制就是因?yàn)槟[瘤乏氧微環(huán)境的存在[7]，導(dǎo)致癌癥治療受到阻礙。1.3含氟聚合物在抗腫瘤活性方面的應(yīng)用在光動(dòng)力治療過程中，腫瘤的缺氧問題成為阻礙治療效果的關(guān)鍵因素。嵌段聚合物作為一種具有多功能的材料，在抗腫瘤活性研究中展現(xiàn)出與光動(dòng)力治療的聯(lián)合潛力，能有效改善腫瘤缺氧問題[8]。嵌段聚合物在藥物傳遞領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注，其結(jié)構(gòu)可調(diào)、生物相容性高、載藥能力強(qiáng)以及具備靶向性等特點(diǎn)[9]，使得它能夠被設(shè)計(jì)成為控制藥物釋放的載體，并實(shí)現(xiàn)藥物在體內(nèi)的精準(zhǔn)遞送。這些優(yōu)勢(shì)讓嵌段聚合物在抗腫瘤治療領(lǐng)域具備巨大的應(yīng)用潛力。含氟聚合物因氟原子的特殊性質(zhì)——強(qiáng)電負(fù)性、范德華半徑小和C—F鍵能高，展現(xiàn)出了雙疏性（同時(shí)具備疏水性和疏油性）、高化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性以及生物相容性等特性[10]。氟化自組裝聚合物的溶氧性使得它能夠運(yùn)輸大量氧氣，從而有效改善腫瘤的缺氧環(huán)境。與單一的光動(dòng)力治療相比，這種結(jié)合了藥物緩解缺氧和光動(dòng)力治療的協(xié)同治療方式有望顯著提高癌癥的治療效果。綜上所述，含氟嵌段聚合物因其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和性能，在腫瘤治療領(lǐng)域展現(xiàn)出了良好的應(yīng)用前景。1.4文章的選題思路和研究方向癌癥，作為全球范圍內(nèi)的一大健康難題，給人類的生命與健康帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。傳統(tǒng)的癌癥治療手段，諸如化療與放療，盡管在一定程度上能夠遏制疾病的進(jìn)展[11]，但其所存在的局限亦不容忽視。例如，腫瘤細(xì)胞在長時(shí)間的化療過程中可能產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致治療效果大打折扣，這些治療手段還可能對(duì)正常細(xì)胞造成損傷，引發(fā)一系列副作用，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。而PDT能有效解決傳統(tǒng)癌癥治療手段中的這些問題。PDT中光敏劑在特定波長的光源的照射下,消耗氧氣產(chǎn)生毒性活性氧(ROS),從而有效誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡和壞死。激光、光敏劑以及氧氣本身都是無害的,所以PDT對(duì)于正常組織和細(xì)胞都具有較低的毒副作用[12]。腫瘤缺氧微環(huán)境導(dǎo)致腫瘤對(duì)治療產(chǎn)生抵抗性，降低PDT的療效[13]。因此,緩解腫瘤缺氧對(duì)于增強(qiáng)光動(dòng)力治療療效具有重要的意義。本實(shí)驗(yàn)利用含氟聚合物PEGAF，這種納米材料憑借其獨(dú)特性能，能夠有效地緩解腫瘤缺氧狀態(tài)并促進(jìn)光動(dòng)力治療（PDT）的效果。光敏劑通常具有疏水性，因此面臨著生物利用度不高以及腫瘤靶向性差的缺點(diǎn)[14]。而含氟聚合物PEGAF的設(shè)計(jì)巧妙地在其疏水核心中融入了光敏劑Ce6，從而克服了這些缺點(diǎn)。此外，由于該聚合物的氟元素含量高，它展現(xiàn)出了良好的載氧能力，為緩解腫瘤缺氧微環(huán)境提供了可靠的解決方案。在實(shí)驗(yàn)中，我們利用660nm激光照射，發(fā)現(xiàn)Ce6能夠高效地生成有毒的單重態(tài)氧（1O2），這一過程有效地改善了腫瘤組織的乏氧環(huán)境。為了全面評(píng)估所制備的氟化聚合物的性能，我們進(jìn)一步檢測(cè)了其載氧能力、載藥能力以及ROS生成能力。不僅如此，我們還深入探討了負(fù)載了O2和Ce6的氟化聚合物在抗癌方面的潛力，旨在揭示其在癌癥中的治療能力。2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法2.1實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑本實(shí)驗(yàn)使用的主要試劑有蒸餾水、75%酒精、青霉素、鏈霉素、胎牛血清、DMEM培養(yǎng)基、胰蛋白酶、二甲基亞砜（DMEM）、活性氧探針（DCFH-DA）、PBS等。2.2實(shí)驗(yàn)相關(guān)儀器本實(shí)驗(yàn)使用的主要儀器有生物安全柜、細(xì)胞培養(yǎng)箱、離心機(jī)、激光共聚焦掃描顯微鏡(CLSM)、熒光分光光度計(jì)、便攜式溶解氧儀（YSI550A）等。2.3PEGAF中溶氧量的測(cè)定由于含氟自組裝聚合物作為氧氣載體具有高溶氧性的特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)中使用攜式溶解氧儀進(jìn)行水溶液中氧濃度的測(cè)定。向試劑瓶中通入氮?dú)鈱?duì)10mL的蒸餾水做凈化處理。接著在溶液中加入10mgPEGAF，通過通入氧氣的方式讓其裝載氧氣，這一過程持續(xù)了15分鐘。然后將氧探針插入溶液中，用便攜式溶氧儀對(duì)溶液中的氧濃度連續(xù)測(cè)量30分鐘，觀察氧氣的變化。設(shè)置對(duì)照組，比較通入氧氣后PEGAF溶液中的含氧量與水和PBS中的含氧量。2.4PEGAF@Ce6的體外活性氧生成能力熒光成像技術(shù)相比于傳統(tǒng)成像技術(shù)靈敏度高、而且操作簡單和分辨率高,熒光成像技術(shù)是一種基于熒光物質(zhì)與激發(fā)光相互作用產(chǎn)生熒光信號(hào)的技術(shù)。當(dāng)熒光物質(zhì)受到激發(fā)光的照射時(shí)，它們會(huì)吸收激發(fā)光的能量，并將其轉(zhuǎn)化為熒光。熒光的波長比激發(fā)光的波長更長，因此可以通過檢測(cè)熒光的波長和強(qiáng)度來獲取被檢測(cè)物體的信息。在熒光成像中，通常使用熒光染料或熒光蛋白等熒光物質(zhì)來標(biāo)記被檢測(cè)物體，然后使用激發(fā)光源來照射被檢測(cè)物體，使熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。最后，使用熒光顯微鏡或其他成像設(shè)備來檢測(cè)熒光的波長和強(qiáng)度，并將其轉(zhuǎn)換為圖像信息[15]。本實(shí)驗(yàn)中通過熒光光譜技術(shù)來評(píng)估單線態(tài)氧的生成情況。為了深入探究PEGAF納米顆粒包裹光敏劑Ce6后在溶液環(huán)境中單線態(tài)氧的產(chǎn)生能力，我們分別將15mg的PEGAF@Ce6和游離態(tài)的Ce6加入到3mL的去離子水中。對(duì)這些樣品進(jìn)行10分鐘的氧化處理，并在此基礎(chǔ)上加入了30μM的SOSG溶液。接下來，我們使用強(qiáng)度為0.5W/cm2、波長為660納米的激光對(duì)這些樣品進(jìn)行了10分鐘的照射，利用熒光分光光度計(jì)，在525nm處（激發(fā)波長：504nm）測(cè)量了樣品的熒光強(qiáng)度，準(zhǔn)確地評(píng)估了單線態(tài)氧的生成情況。2.5細(xì)胞的培養(yǎng)本實(shí)驗(yàn)要在細(xì)胞培養(yǎng)室里準(zhǔn)備，在無菌的條件下，把所需的藥品和試劑都準(zhǔn)備好。先把培養(yǎng)基預(yù)熱到室溫，為了確定是否更換培養(yǎng)液或進(jìn)行傳代，可利用倒置顯微鏡觀察。將凍存的鼠乳腺癌細(xì)胞4T1細(xì)胞取出后復(fù)蘇，放入到DMEM培養(yǎng)基（10%（v/v）胎牛血清、100U/mL青霉素和100ug/mL鏈霉素）中進(jìn)行培養(yǎng)，輕輕吹勻后離心，制成細(xì)胞懸液，接種于DMEM培養(yǎng)皿中，在37℃且含5%的CO2的條件下培養(yǎng)。更換培養(yǎng)液時(shí)加入3mL的DMEM即可。進(jìn)行細(xì)胞傳代時(shí)在培養(yǎng)基中加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，消化時(shí)最佳溫度是37℃。消化后，傳代繼續(xù)培養(yǎng)等待后續(xù)實(shí)驗(yàn)。在細(xì)胞的培育過程中，我們必須時(shí)刻保持培養(yǎng)環(huán)境的潔凈無菌，這是確保細(xì)胞健康生長的關(guān)鍵。任何微小的污染都可能對(duì)細(xì)胞的生長產(chǎn)生不利影響，因此我們必須嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，避免任何潛在的污染源。同時(shí)，我們還需要定期觀察細(xì)胞的生長情況，密切關(guān)注它們的狀態(tài)和變化，以便及時(shí)調(diào)整培養(yǎng)條件，確保細(xì)胞能夠在最佳的環(huán)境中生長和繁殖。并且記錄細(xì)胞的傳代次數(shù)和生長情況，以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。2.6PEGAF@Ce6細(xì)胞內(nèi)活性氧的生成能力為了在細(xì)胞水平評(píng)估單態(tài)線氧的生成能力，我們采用了熒光光譜技術(shù)，通過熒光光譜使用DCFH-DA為熒光探針。具體操作如下：首先，在1.5mL的細(xì)胞懸液中加入含有4μg/mLCe6的PEGAF@Ce6溶液，確保細(xì)胞在培養(yǎng)箱中孵育兩小時(shí)，使納米顆粒充分與細(xì)胞作用。隨后，用PBS對(duì)細(xì)胞進(jìn)行一次洗滌，再加入1.5mL的DCFH-DA探針繼續(xù)孵育半小時(shí)。完成孵育后，用PBS再次洗滌細(xì)胞兩次，以去除多余的探針。接下來，用660nm的激光對(duì)每個(gè)培養(yǎng)皿照射十分鐘，以激發(fā)熒光反應(yīng)。最后，通過熒光分光光度計(jì)測(cè)定細(xì)胞在525nm波長處的熒光強(qiáng)度，分析綠色熒光的強(qiáng)度來評(píng)估活性氧的生成能力。2.7PEGAF@Ce6細(xì)胞內(nèi)光動(dòng)力毒性測(cè)試為了深入探究PEGAF@Ce6納米顆粒對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性效應(yīng)，我們?cè)诖瞬捎昧薓TT比色法來評(píng)估腫瘤細(xì)胞存活率。將不同濃度的PEGAF和PEGAF@Ce6納米顆粒分別加入到含有5%CO2的培養(yǎng)箱中的細(xì)胞中，并使其進(jìn)行孵育。實(shí)驗(yàn)分為兩組，一組為激光組，另一組為非激光組。在孵育了4個(gè)小時(shí)后，我們使用660納米的激光對(duì)激光組進(jìn)行照射，照射時(shí)間為10分鐘，而非激光組則保持不做任何處理。隨后，我們將兩組細(xì)胞繼續(xù)孵育培養(yǎng)20個(gè)小時(shí)，以便充分觀察其生長情況。隨后，我們?cè)谝呀?jīng)處理完畢的細(xì)胞中加入了10μL的5mg/mLMTT溶液，以便進(jìn)一步評(píng)估細(xì)胞的活性。接下來，將這些細(xì)胞置于37℃、含有5%CO2的培養(yǎng)箱中，確保它們能夠在適宜的環(huán)境下孵育4個(gè)小時(shí)。孵育完成后，我們輕輕吸出了上清液，以避免對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成干擾。然后，在每個(gè)孔中加入了150μL的二甲基亞砜（DMSO），使其顯色。最后，我們使用多功能酶標(biāo)儀測(cè)量了這些細(xì)胞在570nm波長處的吸光度。通過比較不同樣本之間的吸光度差異，準(zhǔn)確地評(píng)估PEGAF@Ce6納米顆粒對(duì)細(xì)胞活力的影響。這一實(shí)驗(yàn)步驟不僅幫助我們了解了納米顆粒與細(xì)胞相互作用的機(jī)制，還為后續(xù)研究提供了重要的數(shù)據(jù)支持。3結(jié)果與討論3.1PEGAF的載氧能力由于氟化自組裝聚合物作為氧氣載體存在著優(yōu)異的特點(diǎn)，比如說高溶氧性，氟原子的存在使其能運(yùn)輸大量的氧氣，有效改善了腫瘤組織中的缺氧環(huán)境。通入氮?dú)庖耘懦芤褐腥芙獾臍怏w，隨后通入過量氧氣使溶液達(dá)到飽和狀態(tài)。使用便攜式溶解氧儀監(jiān)測(cè)了不同溶液中氧濃度的變化，以探究PEGAF的攜氧能力及其釋放行為（如圖1所示）。觀察圖1，我們可以清晰地看到，即便在1800s的監(jiān)測(cè)時(shí)間中，PEGAF仍然能夠保持高達(dá)18mg/mL的氧濃度。相比之下，對(duì)照組的PBS溶液和水中的氧濃度則呈現(xiàn)出不斷下降的趨勢(shì)，最終降至16mg/mL以下。這一對(duì)比結(jié)果充分表明，與水和PBS相比，PEGAF能夠維持更為恒定且較高的氧濃度。綜上所述，我們得出結(jié)論：PEGAF可以長時(shí)間儲(chǔ)存氧氣，為缺氧腫瘤提供可靠的氧氣供應(yīng)。圖1通入氧氣后PEGAF溶液中的含氧量與水和PBS中的含氧量對(duì)比3.2PEGAF@Ce6納米顆粒的體外活性氧生成性能評(píng)價(jià)在實(shí)驗(yàn)過程中升高的氧氣濃度促進(jìn)了活性氧的生成，導(dǎo)致了細(xì)胞造成大量的損傷，為了檢測(cè)PEGAF@Ce6產(chǎn)生單線態(tài)氧（1O2）的產(chǎn)生能力，并且檢測(cè)活性氧的產(chǎn)生量，我們?cè)谘芯窟^程中使用SOSG和DCFH-DA作為探針來評(píng)估。圖2不同溶液熒光強(qiáng)度隨波長的變化如圖2所示，對(duì)于不同的波長光線，PEGAF@Ce6產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度明顯高于Ce6和蒸餾水。在525nm波長處，熒光強(qiáng)度達(dá)到了峰值。這充分證明，PEGAF@Ce6納米顆粒在生成單線態(tài)氧方面的能力遠(yuǎn)勝于Ce6和蒸餾水。3.3PEGAF@Ce6的細(xì)胞內(nèi)ROS生成能力先前的實(shí)驗(yàn)已充分驗(yàn)證了溶液中單態(tài)氧的產(chǎn)生能力。為了進(jìn)一步深入了解這一過程中細(xì)胞內(nèi)活性氧的生成情況，我們采用了激光共聚焦顯微鏡（CLSM）技術(shù)。如圖3所示，首先，我們利用熒光染料DCFH-DA對(duì)細(xì)胞進(jìn)行了染色處理。這種染料具有高度的特異性和靈敏度，能夠在細(xì)胞內(nèi)被活性氧氧化后發(fā)出明亮的綠色熒光。通過CLSM的觀察，我們可以看到第一行中的細(xì)胞被DCFH-DA染色，PEGAF@Ce6處理的細(xì)胞表現(xiàn)出微弱的綠光，PEGAF@Ce6+L處理的細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的熒光綠，而PBS處理的細(xì)胞熒光很暗淡，幾乎沒有熒光。這直觀地反映了細(xì)胞內(nèi)的活性氧濃度。同時(shí)，我們利用Hoechst染料對(duì)細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)行了染色。這種染料能夠特異地與細(xì)胞核中的DNA結(jié)合，使其呈現(xiàn)出清晰的藍(lán)色輪廓。在CLSM下，我們可以清晰地看到第二行中細(xì)胞的細(xì)胞核被染成了藍(lán)色，與周圍的細(xì)胞質(zhì)形成了鮮明的對(duì)比。最后，我們將DCFH-DA和Hoechst兩種染色的圖像進(jìn)行了疊加處理，得到了細(xì)胞內(nèi)活性氧分布的綜合圖像。為了更深入地研究細(xì)胞內(nèi)活性氧的生成量，我們還利用激光共聚焦顯微鏡捕捉了綠色熒光圖像，并制作了熒光強(qiáng)度定量分析圖（如圖4所示）。通過對(duì)比不同處理?xiàng)l件下細(xì)胞的熒光強(qiáng)度，我們可以發(fā)現(xiàn)，經(jīng)PEGAF@Ce6處理的細(xì)胞在激光照射下呈現(xiàn)出較強(qiáng)的熒光信號(hào)，而PBS處理的細(xì)胞熒光則相對(duì)較弱。熒光強(qiáng)度直接反映了細(xì)胞內(nèi)活性氧生成量的增加。這一現(xiàn)象進(jìn)一步表明，納米材料在產(chǎn)生活性氧方面的能力得到了顯著提升。根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，PEGAF@Ce6納米顆粒在產(chǎn)生活性氧方面的表現(xiàn)明顯優(yōu)于PBS，其生成活性氧的能力更強(qiáng)。這一結(jié)果不僅進(jìn)一步驗(yàn)證了PEGAF@Ce6在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧的能力，也為我們后續(xù)研究其在光動(dòng)力治療中的應(yīng)用提供了重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。圖3使用激光共聚焦顯微鏡拍攝的不同組分處理細(xì)胞后的活性氧熒光強(qiáng)度圖4使用激光共聚焦顯微鏡定量分析各組分的熒光強(qiáng)度。3.4PEGAF@Ce6細(xì)胞光動(dòng)力毒性測(cè)試在光動(dòng)力治療中，活性氧的產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡。為了驗(yàn)證不同試劑的光動(dòng)力效應(yīng)，我們采用了MTT比色法，探究了PEGAF@Ce6納米顆粒的細(xì)胞毒性。首先，我們測(cè)試了單獨(dú)PEGAF對(duì)細(xì)胞的毒性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不管是在什么濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞的存活率依然保持在百分之八十以上，這充分證明了PEGAF本身對(duì)細(xì)胞的毒性較低。接著，我們進(jìn)一步測(cè)試了PEGAF@Ce6的細(xì)胞毒性。實(shí)驗(yàn)分為兩組進(jìn)行，一組在有660nm激光照射的條件下進(jìn)行，另一組則無激光照射。結(jié)果顯示，在有激光照射的條件下，細(xì)胞的存活率相比于無激光照射組有明顯的下降。這一發(fā)現(xiàn)表明，在激光的激發(fā)下，PEGAF@Ce6納米粒子能夠產(chǎn)生更多的活性氧，從而顯著增強(qiáng)了光動(dòng)力治療的效果，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的死亡。綜上所述，PEGAF@Ce6納米粒子在660nm激光照射下產(chǎn)生的活性氧更多，能增強(qiáng)光動(dòng)力治療效果，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的死亡。圖5PEGAF的細(xì)胞毒性圖6激光和無激光作用下PEGAF@Ce6的細(xì)胞毒性4結(jié)論在本次實(shí)驗(yàn)中，評(píng)估了含氟嵌段聚合物PEGAF的載氧能力、載藥能力和ROS生成能力。通過便攜式溶解氧儀監(jiān)測(cè)比較了PEGAF與水和PBS中的氧的濃度，得出PEGAF可以長時(shí)間儲(chǔ)存氧氣，為缺氧腫瘤提供可靠的氧氣供應(yīng)的結(jié)論；通過檢測(cè)熒光強(qiáng)度比較PEGAF@Ce6、游離Ce6和蒸餾水產(chǎn)生的單態(tài)氧的含量，實(shí)驗(yàn)表明了PEGAF@Ce6納米顆粒產(chǎn)生單線態(tài)氧的能力比游離Ce6和蒸餾水產(chǎn)生單線態(tài)氧的能力強(qiáng)；利用熒光染料探究細(xì)胞內(nèi)ROS的生成含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果PEGAF@Ce6納米顆粒產(chǎn)生活性氧的能力強(qiáng)于PBS；最后，通過光動(dòng)力毒性測(cè)試，在660nm激光照射下PEGAF@Ce6納米粒子產(chǎn)生的活性氧更多，能增強(qiáng)光動(dòng)力治療效果，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的死亡。綜上所述，PEGAF可以包裹Ce6顯著增強(qiáng)了光動(dòng)力治療效果，此次研究說明了在光動(dòng)力治療的過程中氟化嵌段聚合物PEGAF通過包裹氧氣和光敏劑，產(chǎn)生的活性氧可緩解乏氧環(huán)境的問題，大大提高了腫瘤治療的效率。這一發(fā)現(xiàn)讓我們對(duì)含氟嵌段聚合物在腫瘤治療領(lǐng)域的應(yīng)用前景充滿了無限期待，相信未來它將在抗擊癌癥的戰(zhàn)斗中發(fā)揮更加重要的作用。參考文獻(xiàn)趙印民.具有毒性自由基和改善乏氧微環(huán)境的納米劑在腫瘤治療中的應(yīn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