DB31∕T 1178-2019 水源水中微囊藻毒素測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法

水源水中微囊藻毒素測定上海市市場監(jiān)督管理局發(fā)布 I 1 1 1 1 2 2 2 3 3 11測定步驟 5 513精密度與準確度 614質量保證與質量控制 715試驗報告 7附錄A(資料性附錄)6種微囊藻毒素的色譜圖、特征離子圖 8附錄B(資料性附錄)方法的性能 I本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由上海市水務局提出并組織實施。本標準由上海市水務局歸口。本標準起草單位：上海城市水資源開發(fā)利用國家工程中心有限公司、上海市供水調(diào)度監(jiān)測中心、上海市環(huán)境監(jiān)測中心、上海市質量監(jiān)督檢驗技術研究院。1水源水中微囊藻毒素測定液相色譜-串聯(lián)質譜法1范圍2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB15603常用化學危險品貯存通則3術語和定義精密度precision準確度accuracy測定結果與被測量真值或參考值間的一致程度。用回用特定分析方法在給定的置信度內(nèi)可從樣品中檢出待測物質的最低4縮略語MC-LF:微囊藻毒素-LF2表16種微囊藻毒素的分子式、相對分子質量與結構式XY⑥0H④CH共R①③本方法采用液相色譜-串聯(lián)質譜法測定水中6種微囊藻毒素。水樣經(jīng)過濾膜過濾后，采用液相色6.1試驗應滿足儀器對環(huán)境的要求。實驗室應控制環(huán)境溫度在15℃~25℃之間，濕度不高于80%。6.2常用化學危險品貯存和處理的基本要求應按照GB15603的規(guī)定執(zhí)行。7.5甲酸乙腈溶液(0.1%,體積分數(shù)):量取1mL甲酸(7.3),與1L乙腈(7.2)混合均勻。7.6甲酸水溶液(0.1%,體積分數(shù)):量取1mL甲酸(7.3),與1L水混合均勻。7.7甲醇水溶液(90%,體積分數(shù)):量取900mL甲醇(7.1),與100mL水混合均勻。7.8甲醇水溶液(50%,體積分數(shù)):量取500mL甲醇(7.1),溶的標準儲備液。-20℃保存。7.10微囊藻毒素混合標準工作溶液(1μg/mL):分別準確移取1mL微囊藻毒素標準儲備溶液(7.9)38儀器與設備能當天處理，水樣應在4℃保存，膜樣應在-20℃保存。樣品應盡快測定。如不能立即測定，應于-20℃保存，28天內(nèi)測定完畢。依次用10mL甲醇(7.1)、15mL水活化固相萃取小柱(7.13),流速控制在3mL/min~5mL/min。取1L濾后水樣(9.1),使水樣通過預先活化的固相萃取小柱進行微囊藻毒素的富集，流速控制在4用5mL的90%甲醇水溶液(7.7)洗脫固相萃取小柱上的微囊藻毒素，重復上述洗脫1次，合并2次洗脫液在室溫下用氮吹濃縮儀(8.5)濃縮至0.5mL,以水定容至1mL。定容后的樣品經(jīng)針式微孔濾膜(7.12)過濾，置于液相樣品瓶(7.15),待測。處理后樣品應盡快測定。如不能立即完成，應于-20℃保存，28天內(nèi)測定完畢。將帶有藻細胞的膜樣(9.1)剪碎置于離心管(8.8)中，加入15mL的50%甲醇溶液(7.8)。用超聲細胞破碎儀(8.6)破碎細胞，功率為150W,時間為20min(破碎5s,間歇5s),超聲時需冰浴。超聲破碎后，取1mL萃取液經(jīng)針式微孔濾膜(7.12)過濾，置于液相樣品瓶(7.15),待測。處理后樣品應盡快測定。如不能立即完成，應于-20℃保存，28天內(nèi)測定完畢?！鶞貫?0℃;——流動相A為甲酸乙腈溶液(7.5),流動相B為甲酸水溶液(7.6);采用梯度洗脫，洗脫程序見表2;——進樣量為20μL。時間/min流速/(mL/min)05——掃描模式采用正離子模式(ESI+);——干燥氣溫度為350℃;—干燥氣流速為10L/min;—毛細管電壓為4000V;—霧化器壓力為0.24MPa;6種微囊藻毒素的質譜監(jiān)測離子與主要參數(shù)值見表3。按照12.1的定性分析和12.2的定量分析方法，計算得出樣品中微囊藻毒素6200μL微囊藻毒素標準工作溶液(7.的標準系列溶液。100μL、200μL微囊藻毒素標準工作溶液(7.10)于1mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液(7.8)定容至刻200μg/L的標準系列溶液。根據(jù)樣品峰面積在標準曲線上得出相應的質量濃度。樣品中微囊藻毒素質量濃度為p:(μg/L),按K——濃縮倍數(shù)。13精密度與準確度13.1精密度按照本標準直接進樣方法對微囊藻毒素加標質量濃度為1.00μg/L~10.0μg/L的水源水進行重復測定，測定結果相對標準偏差MC-LR為1.50%～14.91%,MC-YR為2.55%～9.75%,MC-RR為0.52%～6.22%,MC-LA為1.43%～11.36%,MC-LF為1.68%～7.91%,MC-LY為0.82%～6.58%。按照本標準固相萃取法對加標質量濃度為25.0ng/L～100ng/L的水源水進行重復測定，測定結果相對標準偏差MC-LR為1.20%～10.56%,MC-YR為1.40%～5.28%,MC-RR為0.51%～3.41%,MC-LA為0.58%～5.72%,MC-LF為0.45%～6.46%,MC-LY為0.65%～5.88%。按照本標準直接進樣方法對微囊藻毒素加標質量濃度為1.00μg/L~10.0μg/L的水源水進行重復測定，平均回收率MC-LR為96.28%,MC-YR為100.14%,MC-RR為93.66%,MC-LA為94.49%,MC-LF為87.29%,MC-LY為95.25%。按照本標準固相萃取法對加標質量濃度為25.0ng/L～100ng/L的水源水進行重復測定收率MC-LR為105.00%,MC-YR為99.58%,MC-RR為65.04%,MC-LA為101.81%,MC-LF為81.96%,MC-LY為91.21%。具體精密度和準確度參見附錄B。714質量保證與質量控制14.1空白試驗每20個樣品或每批次(每批少于20個樣品)樣品應至少做一個純水或試劑空白，空白樣品中目標化合物的濃度應低于方法的檢出限。14.2平行試驗對同一樣品在相同條件下平行做兩份試驗，檢驗單項測定結果對平均值的偏離程度，反映批內(nèi)測定每20個樣品或每批次(每批少于20個樣品)樣品應進行不小于10%的平行試驗。當樣品測定結果不小于1μg/L時，平行雙樣測定相對偏差不得超過20%;當樣品測定結果小于1μg/L時，平行試驗相對偏差不得超過30%。14.3質控樣品測定已知濃度的質控樣品，分析質控樣測定結果與真值之間的差異，以確認標準曲線的準確性，檢驗測定結果的準確度，采用相對誤差表示。每批次樣品測定時，至少同時測定一個質控樣品。質控樣的配制濃度應在標準曲線的中間值附近，質控樣測定結果與配制濃度相對誤差應在允許的范圍內(nèi)。15試驗報告試驗報告至少應給出樣品性狀、所使用的標準、所使用的方法、結果、觀察到的異?，F(xiàn)象及試驗8(資料性附錄)6種微囊藻毒素的色譜圖、特征離子圖6種微囊藻毒素的色譜圖、特征離子圖見圖A.1～圖A.3。EQ\*jc3\*hps15\o\al(\s\up1(V),T)1.4-EQ\*jc3\*hps15\o\al(\s\up1(V),T)……………行EQ\*jc3\*hps17\o\al(\s\up3(5),1)EQ\*jc3\*hps15\o\al(\s\up1(O),W)……………行1MC-YRMC-YR0.5-0.4-0.35-0.3-0.2- 0七0.2040608112141618222242.6283323436384424446485525.45.658660.90.80.70.64a2040608112141618222242628332343638442444648552545658669(資料性附錄)方法的性能表B.1和表B.2給出了采用直接進樣法、固相萃取富集法測定水源水中6種微囊藻毒素的精密度和準確度的參考值。表B.3給出了直接進樣法、固相萃取富集法測定水源水中6種微囊