卡式配血講座課件

DianaSystem

戴安娜

凝膠卡式血型配血系統(tǒng)李曉榮血庫卡式配血講座內容臨床輸血歷史的簡單回顧紅細胞血型血清學檢測技術簡介如何保證臨床輸血配型相符DianaGel凝膠卡式檢測法的工作原理、特點以及方法學評價DianaGel凝膠卡式檢測法的臨床應用回顧總結卡式配血講座臨床輸血歷史的簡單回顧1667年法國御醫(yī)Jean用羊血治療精神病患者卡式配血講座臨床輸血歷史的簡單回顧1818年英國產科醫(yī)生James首次用人血輸治患者卡式配血講座臨床輸血歷史的簡單回顧1900、1940年奧地利科學家Landsteiner等人先后發(fā)現(xiàn)了ABO和RH血型系統(tǒng)，使輸血治療有了牢固的科學基礎，從而極大地提高了臨床輸血的安全性1937年世界上第一個血庫在芝加哥CockCounty醫(yī)院建立，標志著輸血開始成為臨床醫(yī)學的重要組成部分和常規(guī)治療手段現(xiàn)在輸血已經發(fā)展成一門涉及多學科的獨立的邊緣學科——輸血學，今天我要講的免疫血液學檢測技術只是其中一部分卡式配血講座紅細胞血型血清學檢測技術簡介鹽水凝集法低離子強度鹽水法酶技術凝聚胺技術抗人球蛋白檢測法凝膠卡式檢測法卡式配血講座一、鹽水凝集法紅細胞和抗血清在鹽水溶液中直接反應特點是操作簡便，設備簡單，缺點是影響因素多，靈敏度低卡式配血講座二、低離子強度鹽水法通過降低介質溶液的離子強度，減少紅細胞外圍離子云的強度，促進IgG分子在兩個紅細胞間橋聯(lián)，而促進凝集特點是縮短抗原抗體反應時間，提高反應靈敏度卡式配血講座三、酶技術利用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細胞表面唾液酸，使紅細胞失去電荷，縮小細胞間距離同時改變紅細胞膜表面結構，使某些隱蔽的抗原暴露，從而增強凝集反應主要用于一些不完全抗體的檢測卡式配血講座四、凝聚胺技術利用多聚季胺鹽在介質溶液中產生大量正電荷中和紅細胞表面的負電荷，減少紅細胞間排斥，促進凝集卡式配血講座五、抗人球蛋白檢測法—Coombs試驗在鹽水凝集法或低離子強度鹽水法的基礎上，加入抗人球蛋白抗體，通過抗人球蛋白抗體的特異性橋連作用，促進紅細胞的凝集卡式配血講座六、凝膠卡式檢測法是微柱凝膠技術與上述所有技術相結合的產物1986年由法國人Dr.YvesLappierre發(fā)明1994年獲得美國FDA認證，目前在許多發(fā)達國家已經作為常規(guī)技術應用于臨床卡式配血講座如何保證輸血配型相符?掌握準確的病人信息：了解病人的輸血史和實驗室檢查結果選用最可靠的實驗方法：盡可能采用靈敏度和特異性最高的實驗技術避免人為錯誤：實現(xiàn)自動化，減少人為錯誤的發(fā)生引入全面質量控制的觀念：實驗室所有操作程序要標準化，要有質量控制標準（如引進GMP和ISO9000質量控制體系）卡式配血講座戴安娜凝膠卡式檢測法的

工作原理凝膠微柱：試管上端、柱體過濾介質：顆粒直徑26-103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠間縫隙只允許游離紅細胞通過緩沖液：LISS（加或不加抗血清）卡式配血講座戴安娜凝膠卡式檢測法的

工作原理將紅細胞和抗血清加在凝膠上部反應，離心后觀察凝集的紅細胞，被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央，證明發(fā)生凝集反應，判斷凝集反應陽性游離的紅細胞，被擠過裝有過濾介質的小柱，而到達小柱的底部，證明未發(fā)生凝集，判斷凝集反應陰性

卡式配血講座結果判讀模式卡式配血講座靈敏度和準確性高，重復性好不需要清洗紅細胞自動化程度高

可以實現(xiàn)全自動操作實驗全過程標準化

標準化的孵育時間、離心時間以及結果判讀

消除了主觀因素對弱反應結果的判讀，減少了人為錯誤的發(fā)生實驗結果客觀性強，而且穩(wěn)定，可以長期保存獲得ISO9000\CE認證戴安娜凝膠卡式檢測法的特點卡式配血講座凝膠抗人球試驗

—凝膠凝集試驗與抗人球技術結合

事先在凝膠微柱中的LISS緩沖液中加入AHG,實驗中,將紅細胞與抗血清加入凝膠上部,離心后觀察如果抗體能結合在紅細胞表面,那么通過凝膠內AHG橋聯(lián),紅細胞發(fā)生凝集,判斷凝集實驗陽性如果抗體未能結合在紅細胞表面,那么紅細胞不能凝集,判斷凝集實驗陰性卡式配血講座凝膠酶試驗

—凝膠技術與酶技術結合在凝膠上層加入酶試劑，利用木瓜酶或菠蘿酶減小紅細胞間阻力，促進紅細胞凝集卡式配血講座凝膠卡式檢測法的方法評價——

卡式檢測法與低離子強度鹽水法、手工凝聚胺法的比較

1990年，卡式檢測法的發(fā)明人Dr.YvesLapierre等用低離子強度鹽水法（試管法）、聚凝胺試驗（試管法）和卡式檢測法（凝膠）研究了400例已知抗體的樣本。血清與細胞的比例是按照試管法標準配置。結果為：卡式檢測法檢出359例（檢出率為90%）聚凝胺試驗檢出301例（檢出率為75%）低離子強度鹽水法檢出243例（檢出率為61%）卡式配血講座結論靈敏度高凝膠卡式檢測法靈敏度比低離子鹽水法、凝聚胺法都高；與Coombs法相近，但是在實驗的標準化、重復性方面具有更大優(yōu)勢，更適合常規(guī)的紅細胞血型血清學檢測避免了試管法中必須清洗紅細胞的煩瑣步驟方法容易掌握，易于標準化塑料卡可以長期保存，也容易銷毀卡式配血講座凝膠卡式配血的臨床應用簡單地講，凝膠卡式檢測法就是利用實驗中紅細胞在凝膠微柱中的移動，來指示肉眼所不能見的紅細胞與相應抗體發(fā)生的血清學反應，因此只需要更換不同的試劑卡，就能廣泛地應用在：

紅細胞血型鑒定交叉配血抗體篩查新生兒溶血病的檢測卡式配血講座

戴安娜卡式配血的優(yōu)點靈敏度好

特別是做抗體篩查和交叉配血時，能捕捉到十分微弱的抗原抗體反應特異性強

許多實驗中都加入了抗人球，大大促進了紅細胞的特異性凝集重復性好

采用標準定量操作，最大限度地減少了操作人員的隨意性簡化操作

實驗中不用清洗紅細胞，檢測結果可以較長