發(fā)酵法生產白細胞介素資料_第1頁
發(fā)酵法生產白細胞介素資料_第2頁
發(fā)酵法生產白細胞介素資料_第3頁
發(fā)酵法生產白細胞介素資料_第4頁
發(fā)酵法生產白細胞介素資料_第5頁
已閱讀5頁，還剩6頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

發(fā)酵法生產白細胞介素-2

白細胞介素-2白介素－2是一個分子量為14500的糖蛋白，它刺激已被特異性抗原或致絲裂因數(shù)啟動的T細胞增殖【所屬】免疫增強劑/其他抗腫瘤藥及輔助治療藥【別名】白間素,欣吉爾,T細胞生長因子,白細胞介素-2等【適應癥】主要用于腎癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效（Rossenberg）。LAK細胞代表1個有單核巨噬細胞，B和T淋巴細胞特征的異原的細胞體。這些LAK細胞似乎對癌細胞有特異作用。此外，LAK細胞（不象T細胞）介導殺傷不受MHC的約束。應用【藥理作用】本品可促進T淋巴細胞增殖與分化，誘導具有細胞毒樣活力的殺傷細胞，誘導及增強殺傷性T細胞、單核細胞、巨噬細胞的活力等。【臨床應用】適用于慢性活動性乙型肝炎病毒感染等；用于腎細胞癌、黑色素瘤的治療，用于癌性胸腹水的控制及其他晚期腫瘤；用于先天或后天免疫缺陷癥的治療，如艾滋病，可提高病人細胞免疫功能和抗感染能力；各種自身免疫病的治療，如類風濕性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征等；對某些疾病性、桿菌性疾病、胞內寄生菌感染性疾病，如乙型肝炎、麻風病、肺結核、白色念珠菌感染等具有一定的治療作用。2生產過程及工藝過程(1)發(fā)酵工程菌為大腸桿菌，溫度敏感型。種子用LB培養(yǎng)基；發(fā)酵用M9CA培養(yǎng)基，30度10小時，后提高溫度至42度，誘導3h。

傳統(tǒng)工藝雞瘟病毒，PHA,培養(yǎng)液[啟動誘生]37℃人白細胞粉誘生白細胞培養(yǎng)液[滅活病毒，分離],HCl,NaOHpH=2~2.5,pH=7.2~7.4,離心上清液35%硫酸銨4℃，24h，離心上清液85%硫酸銨4℃，24h，離心沉淀10mmol/LPBS透析pH=6.5，24h透析內液[親和層析]上Sepharose柱pH=6.5親和載體I[洗滌]0.4mol/LNaCl，PBSpH=6.5親和載體Ⅱ[吸收]1.0mol/LNaCl,PBS透析pH=6.5IL-2組分[凝膠層析]上Utrogel柱pH=6.5凝膠載體0.2mol/Ltris-HCl含0.1%PEG2%正丁醇，0.2mol/L甘氨酸pH=7.6IL-2酶法生產1工藝流程圖IL-2工程菌斜面搖瓶發(fā)酵制備包涵體洗滌與裂解凝膠過濾與復性檢定與包裝(2)分離純化包涵體制備離心收集，菌體懸于EDTA溶液中，用超聲波破碎細胞，后8000r/min離心，收集沉淀(包涵體和細胞碎片)。包涵體洗滌及裂解：

用Tris-HCl洗滌3次，離心收集沉淀，用鹽酸胍變性，離心收集上清液。凝膠過濾及復性：

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論