《大米中2-乙?；?1-吡咯啉的測定 頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法》

ICS67.060

CCSB04

團體標(biāo)準

T/NAIAXXX—2021

大米中2-乙?；?1-吡咯啉的測定

頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法

Determinationof2-acetyl-1-pyrrolineinricebyheadspacesolid-phase

microextractiontechniquecoupledwithgaschromatographymass

spectrometry(HSSPME-GCMS)

2023-XX-XX發(fā)布2023-XX-XX實施

寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會發(fā)布

大米中2-乙酰基-1-吡咯啉的測定

頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法

警示—本文件的使用可能涉及到某些有危險的材料、操作及設(shè)備，但并未對所有的安全

問題都提出建議。因此，用戶在使用本文件前應(yīng)建立適當(dāng)?shù)陌踩雷o措施，并確定相關(guān)規(guī)章

限制的適用性。

1范圍

本文件規(guī)定了大米中2-乙酰基-1-吡咯啉的頂空固相微萃?。?lián)氣相色譜質(zhì)譜測定方

法。

本文件適用于大米中2-乙?；?1-吡咯啉的測定。大米中其他風(fēng)味物質(zhì)也可參照本文件，

本文件未做驗證。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4方法概要

試樣經(jīng)粉碎后，經(jīng)頂空固相微萃取串聯(lián)氣相色譜質(zhì)譜儀（HS-SPME-GC-MS）檢測；以

保留時間及特征離子的相對豐度定性，外標(biāo)法定量。

5試劑和材料

5.1試劑

無水乙醇（C６H6O，CAS號：64-17-5）：色譜純。

純水：三級水。

5.2標(biāo)準品

2-乙?；?1-吡咯啉（縮寫2-AP）（C６H９NO，CAS號：85213-22-5）：純度：≥95.0%。

5.3標(biāo)準溶液的配制

5.3.12-AP標(biāo)準儲備溶液（1000mg/L）：準確稱取2-AP標(biāo)準品（5.2）10.0mg（精確至0.1

mg）于10mL容量瓶中，立即用無水乙醇（5.1）定容至刻度，放置于-80℃冰箱，有效期6

個月。

5.3.22-AP標(biāo)準工作溶液（100.0mg/L）：取2-AP標(biāo)準儲備溶液（5.3.1）1.0mL于10mL容

量瓶中，用無水乙醇（5.1）定容，放置于-20℃冰箱，有效期3個月。

3

2-AP基質(zhì)標(biāo)準曲線的配制：準確吸取2-AP標(biāo)準工作溶液（5.3.2）0.05mL、0.25mL、0.50mL、

0.75mL、1.00mL、1.25mL于10mL的容量瓶中，加無水乙醇定容至刻度，配得濃度分別

為0.5mg/L、2.5mg/L、5.0mg/L、7.5mg/L、10.0mg/L、12.5mg/L的系列標(biāo)準溶液。標(biāo)準工

作溶液的濃度亦可根據(jù)實際情況自行調(diào)整。分別取10μL標(biāo)準工作液加入到1g的空白大米粉

中（空白大米粉的制備：乙醇反復(fù)洗滌大米粉，至香氣成分含量在GC-MS中無法檢出或含

量很低，并自然晾干；或者用超臨界二氧化碳萃取出去大米中的香氣成分），測定方式同樣

品的測定。以在空白基質(zhì)中的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以定量離子峰面積為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準曲

線。

5.4材料

頂空瓶：20mL。

6儀器和設(shè)備

6.1氣相色譜-質(zhì)譜儀（GC-MS）：儀器至少應(yīng)包括汽化室、控溫色譜柱箱、配有電子轟擊

電離源（EI源）的質(zhì)譜檢測器和色譜工作站（詳見第8章）。色譜柱：5%苯基-95%聚二甲

基硅氧烷，或其他類型色譜柱若被驗證能夠達到良好的分離效果亦可用于本文件。

6.2分析天平：精確到0.0001g和0.01g。

6.3固相微萃取裝置。

6.4棕色容量瓶：10mL、25mL、50mL，A級，若干。

6.5移液槍：1μL～10μL、10μL～100μL、100μL～1000μL、0.5mL～5mL、

1mL～10mL。

6.6水浴鍋。

6.7渦旋震蕩器。

6.8粉碎機。

6.9標(biāo)準網(wǎng)篩：0.25mm。

7試樣及其制備

稱取大米樣品250g，粉碎過標(biāo)準網(wǎng)篩（6.8）后于樣品瓶中，宜用封口膜封口后，4℃

條件下保存。

8分析步驟

8.1樣品前處理

稱取1.00g試樣（精確至0.01g）于20mL玻璃頂空瓶中，加入5mL水（5.1），立即

用壓蓋機壓緊蓋子，利用CAR/DVB/PDMS固相萃取頭在60℃水浴下萃取30min，待上機

測定。

8.2測定

4

8.2.1參考色譜質(zhì)譜工作條件（表1）

表1參考色譜-質(zhì)譜工作條件

色譜-質(zhì)譜工作條件/儀器參數(shù)

控制方式HS-SPME-GC-MS

載氣氦氣（He），純度≥99.999%，流速1mL/min。

進樣模式不分流

進樣系統(tǒng)

分流比

進樣口溫度/℃280

解析時間/min5

GC

類型5%苯基-95%二甲基聚硅氧烷石英毛細管柱，或性能相當(dāng)者。

柱長度/m30

色譜柱

膜厚/μm0.25

內(nèi)徑/mm0.25

最高溫度/℃325

柱箱

初溫40℃，保持5min，以5℃/min升溫至150℃，保持3min，再以15

程序升溫方式

℃/min升溫至250℃，保持5min。

離子源（EI）溫度/℃280

電子轟擊源70eV

接口溫度/℃280

MS

溶劑延遲時間/min0

是不是改成定量

定性SIM。Commented[M1]:

采集方式

定量SIM

注：色譜條件允許根據(jù)實際情況適當(dāng)變動，上述條件僅供參考。

表22-AP的定性定量參考質(zhì)譜條件

目標(biāo)化合物保留時間，min定性離子對，m/z定量離子，m/z定性離子豐度比碰撞電壓CE，V

模式?jīng)]有碰撞電壓

83和1114：10：2.6無Commented[M2]:sim

2-AP8.11111/83/68

定性分析Commented[M3]:和5.3.2重復(fù)

5

通過對比試樣和標(biāo)準溶液中目標(biāo)物的保留時間及特征離子的相對豐度定性，所檢測的特

定2-AP色譜峰信噪比（S/N）大于3，被測試樣中特定2-AP的保留時間與標(biāo)準溶液中目標(biāo)

化合物的保留時間比較，相對誤差應(yīng)在±2.5%之內(nèi)。同時，被測試樣中特定2-AP的相應(yīng)特

征離子豐度比與標(biāo)準溶液中特定2-AP的色譜豐度比，允許的偏差見表3。

表3定性確定時相對離子豐度的最大允許偏差

%

相對離子豐度>50>20～50>10～20≤10

允許相對偏差±20±25±30±50

8.2.3定量分析

采用外標(biāo)法定量，將SPME萃取頭插入進樣口后解析5min后拔出萃取頭，試樣中待測

組分注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，得到相應(yīng)的2-AP的峰面積，根據(jù)標(biāo)準曲線得到待測液中

2-AP的濃度。試樣待測液中的被測物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測定的線性范圍內(nèi)，若試樣待測

液的質(zhì)量濃度超過曲線上限濃度，使用空白基質(zhì)提取溶液稀釋后測定。上述條件下，0.5

mg/kg2-AP標(biāo)準溶液（空白基質(zhì)配）的選擇離子監(jiān)測（SIM）色譜圖（TIC）和質(zhì)譜圖見附

錄A。

8.3空白試驗

采用空白基質(zhì)，按照8.1~8.2的規(guī)定的操作。

9質(zhì)量控制

通過分析QC樣品以確保儀器狀態(tài)正?；驒z測過程無誤，可每批次運行5個試樣后驗證一

次標(biāo)準曲線或分析QC樣品，測定結(jié)果與QC樣品的參比值之差應(yīng)小于再現(xiàn)性要求，否則應(yīng)確

定誤差來源，并對方法操作和儀器狀態(tài)進行必要檢查。如果實驗室已經(jīng)建立QC或質(zhì)量保證

（QA）協(xié)議，則在確認測試結(jié)果可靠性時可以使用。

10結(jié)果計算

試樣中2-AP的含量以質(zhì)量分數(shù)ω計，按式（1）計算：

ω=ρ―ρ0????????????（1）

式中：

ω—試樣中2-AP質(zhì)量分數(shù)的數(shù)值，單位為毫克每千克（mg/kg）；

?—基質(zhì)標(biāo)準工作溶液中被測物的質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為毫克每千克（mg/kg）；

?0—通過標(biāo)準工作曲線計算得空白基質(zhì)的濃度的數(shù)值，單位為毫克每千克（mg/kg）；

計算結(jié)果用重復(fù)性條件下獲得的2次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，精確至3位有效

數(shù)字。

11精密度和靈敏度

11.1精密度

6

在重復(fù)性條件下獲得的２次獨立測試結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的15%。

11.2靈敏度

方法檢出限為0.01mg/kg，方法定量限為0.03mg/kg。

12試驗報告

試驗報告至少應(yīng)給出以下內(nèi)容：

a)試樣編號；

b)使用的文件；

c)采用方法；

d)試驗項目；

e)試驗結(jié)果；

f)試驗人員；

g)試驗日期。

附錄A

（資料性）

大米中2-AP的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）色譜圖和離子對圖

7

大米中2-APTIC色譜圖和離子對圖分別見圖A.１和圖A.２。

手分

8.3e7123#662[動積]2-apTICTIC

counts

8.0e7

7.0e7

6.0e7

5.0e7

4.0e7

3.0e7

2.0e7

1.0e7

0.0e0

min

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3.6