DNA重組技術(shù)的基本工具課件 高二下學(xué)期生物人教版（2019）選擇性必修3

基因工程（DNA重組技術(shù)）

按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性?？瓜x基因普通棉轉(zhuǎn)基因抗蟲棉思考：培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉需要哪些基本工具?1.1DNA重組技術(shù)的基本工具“分子手術(shù)刀”——“分子縫合針”——“分子運輸車”——限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶基因進入受體細胞的載體一、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶1.來源：2.特點：一種限制酶只能識別一種特定核苷酸序列，并在特定位點進行切割。（限制酶）主要是從原核生物中分離純化出來的。具有專一性模擬實驗1：模擬限制酶的剪切

假設(shè)剪刀代表EcoRI限制酶（識別GAATTC序列，在G和A之間切），請用EcoRI限制酶提取目的基因（藍色框內(nèi)DNA片段）并剪開環(huán)狀DNA分子?！瑿TGAATTCCA……GAGAATTCCCG……GACTTAAGGT……CTCTTAAGGGC……TTCATGAATTCCCTA……AAGTACTTAAGGGAT…環(huán)狀DNA分子片段GCTTAAAATTCGabc磷酸二酯鍵bEcoRI限制酶3.作用結(jié)果：形成黏性末端或平末端。①黏性末端：②平末端：…CTG…GACTTAAAATTCCCG…GGGC……CATGCTATCCCGGGAACATA……GTACGATAGGGCCCTTGTAT…AATTCCA……GAGGGT……CTCTTAA…CTTCATG…GAAGTACTTAAAATTCCCTAA…

GGGATT…GG...TCTTAAAATTCC...AG…TCTTCATG…AGAAGTACTTAAAATTCCCTAAG…

GGGATTC…GG...TCTTAAAATTCC...AG二、“分子縫合針”——DNA連接酶環(huán)狀DNA分子片段模擬實驗2：模擬DNA連接酶的連接

假設(shè)膠帶代表DNA連接酶，請用DNA連接酶將模擬實驗1中切割形成的DNA片段連接成重組DNA分子。AATTCCA……GAGGGT……CTCTTAA

…TTCATG

…AAGTACTTAAAATTCCCTA…GGGAT…剪開的環(huán)狀DNA分子片段GCTTAAAATTCGDNA連接酶磷酸二酯鍵①E·coliDNA連接酶②T4DNA連接酶1.作用：2.種類：把兩條雙鏈DNA片段拼接起來二、“分子縫合針”——DNA連接酶種類E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶來源功能只“縫合”“縫合”

結(jié)果恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的大腸桿菌黏性末端黏性末端和平末端磷酸二酯鍵T4噬菌體兩種DNA連接酶的比較質(zhì)粒擬核細菌細胞質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動植物病毒三、“分子運輸車”——基因進入受體細胞的載體將外源基因送入受體細胞1.作用：2.種類：3.作為載體的條件：對受體細胞無害；有一個至多個限制酶切割位點；有特殊的標(biāo)記基因，便于鑒定和篩選；能在宿主細胞中自我復(fù)制或能整合到染色體DNA上。三、“分子運輸車”——基因進入受體細胞的載體基因工程與作物育種抗蟲棉普通棉本身有抗蟲基因嗎？抗蟲基因作物的使用有何好處？基因工程生產(chǎn)人胰島素受體細胞？活性？原理？轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性來源：主要來源于原核生物特點：具有專一性作用部位：磷酸二酯鍵結(jié)果：形成黏性末端或平末端限制酶DNA連接酶作用：把兩條雙鏈DNA片段拼接起來連接部位：磷酸二酯鍵種類：E.coliDNA連接酶、T4DNA連接酶載體作為載體的條件①對受體細胞無害②有一個至多個限制酶切割位點③有特殊的標(biāo)記基因④能自我復(fù)制或能整合到宿主DNA上小結(jié)DNA重組技術(shù)的基本工具種類：質(zhì)粒、

λ噬菌體衍生物

、動植物病毒1.有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是（

）

A.基因工程技術(shù)能定向地改造生物的遺傳性狀，培育生物新品種

B.限制酶是一種酶，只能識別GAATTC堿基序列

C.E.coliDNA連接酶只能“縫合”黏性末端

D.不是所有質(zhì)粒都可作為載體2.如圖為DNA分子在不