生物自我小測(cè)　DNA重組技術(shù)的基本工具

學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精自我小測(cè)1．以下有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（）A．基因工程是細(xì)胞水平上的生物工程B．基因工程的產(chǎn)物對(duì)人類都是有益的C．基因工程產(chǎn)生的變異屬于人工誘變D．基因工程育種的優(yōu)點(diǎn)之一是目的性強(qiáng)2．科學(xué)家們經(jīng)過(guò)多年的努力，創(chuàng)立了一種新興生物技術(shù)--基因工程。實(shí)施該工程的最終目的是()A．定向提取生物體的DNA分子B．定向地對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”C．在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行改造D．定向地改造生物的遺傳性狀3．下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是（）A．限制酶只在獲取目的基因時(shí)才用B．重組質(zhì)粒的形成是在細(xì)胞內(nèi)完成的C．質(zhì)粒是目前基因工程的唯一載體D．DNA連接酶和DNA聚合酶都連接磷酸二酯鍵4．如下圖所示，若用兩種識(shí)別切割序列完全不同的限制酶E和F,從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3。7kb,1kb＝1000對(duì)堿基）上相應(yīng)的E—F區(qū)域（0。2kb），那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2（）A．既能被E也能被F切開(kāi) B．能被E但不能被F切開(kāi)C．既不能被E也不能被F切開(kāi) D．能被F但不能被E切開(kāi)5．俄羅斯研究人員曾經(jīng)在貝加爾湖中發(fā)現(xiàn)了一些微生物突變種，其體內(nèi)含有以前未發(fā)現(xiàn)的限制性核酸內(nèi)切酶，能夠?qū)⑦M(jìn)入微生物體內(nèi)的外來(lái)病毒的脫氧核糖核酸“切割"開(kāi)，從而殺死病毒。對(duì)這些微生物突變種體內(nèi)的新發(fā)現(xiàn)的限制酶進(jìn)行分析,正確的說(shuō)法是（）A．該限制酶廣泛分布在一切原核生物中B．該限制酶能切割自身的突變DNAC．該限制酶切割DNA產(chǎn)生有黏性末端的DNA片段D．該限制酶有望推動(dòng)基因工程的進(jìn)一步發(fā)展6．下表關(guān)于基因工程中有關(guān)的名詞及對(duì)應(yīng)的內(nèi)容，正確的組合是（）供體剪刀針線載體受體A質(zhì)粒限制酶DNA連接酶提供目的基因的生物大腸桿菌等B提供目的基因的生物DNA連接酶限制酶質(zhì)粒大腸桿菌等C提供目的基因的生物限制酶DNA連接酶質(zhì)粒大腸桿菌等D大腸桿菌等DNA連接酶限制酶提供目的基因的生物質(zhì)粒7．能催化磷酸二酯鍵形成的酶有(）①E·coliDNA連接酶②T4DNA連接酶③DNA聚合酶④解旋酶⑤RNA聚合酶A．①②③ B．①②③④ C．①②③⑤ D．①②③④⑤8．某科學(xué)家從細(xì)菌中分離出耐高溫淀粉酶(Amy）基因a，通過(guò)基因工程的方法，將基因a與載體結(jié)合后導(dǎo)入馬鈴薯植株中，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在。下列有關(guān)這一過(guò)程的敘述不正確的是（）A．獲取基因a的限制酶的作用部位是上圖中的①B．連接基因a與載體的DNA連接酶的作用部位是圖中的②C．基因a進(jìn)入馬鈴薯細(xì)胞后，可隨馬鈴薯DNA分子的復(fù)制而復(fù)制，傳給子代細(xì)胞D．通過(guò)該技術(shù)人類實(shí)現(xiàn)了定向改造馬鈴薯的遺傳性狀9．下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶及其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)（注：表中Y為C或T，R為A或G)。據(jù)圖分析，可以得到的結(jié)論是（）限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)BamHⅠG↓GATCCKpnⅠGGTAC↓CEcoRⅠG↓AATTCSau3AⅠ↓GATCHindⅡGTY↓RACSmaⅠCCC↓GGGA．限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列的中間B．限制酶切割后都形成黏性末端C．不同限制酶切割后形成的黏性末端都相同D．一種限制酶可能識(shí)別多種核苷酸序列10．以動(dòng)植物病毒作為目的基因的載體進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作，有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．動(dòng)植物病毒一般為DNA病毒B．操作過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶C．目的基因和病毒DNA被拼接成重組DNAD．進(jìn)入受體細(xì)胞的是含蛋白質(zhì)外殼的動(dòng)植物病毒,而不是裸露的重組DNA11．將ada(腺苷酸脫氨酶基因）通過(guò)質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是(）A．每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B．每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)C．每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD．每個(gè)插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酶脫氨酶分子12．下面是四種不同質(zhì)粒的示意圖,其中ori為復(fù)制必需的序列,amp為氨芐青霉素抗性基因,tet為四環(huán)素抗性基因,箭頭表示一種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn).若要得到一個(gè)能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的含重組DNA的細(xì)胞,應(yīng)選用的質(zhì)粒是（）13．利用DNA重組技術(shù)使原有基因得以改造的動(dòng)物稱為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。運(yùn)用這一技術(shù)可以使羊奶中含有人體蛋白質(zhì),下圖表示這一技術(shù)的基本過(guò)程。在該工程中所用的基因“分子手術(shù)刀”能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1）從羊染色體中“剪下”羊蛋白質(zhì)基因所用的酶是______。人體蛋白質(zhì)基因“插入”后連接在羊體細(xì)胞染色體中時(shí)需要的酶是__________。（2）請(qǐng)?jiān)谙聢D中畫(huà)出質(zhì)粒被切割形成黏性末端的過(guò)程圖：（3）人體蛋白質(zhì)基因之所以能“插入”到羊的染色體內(nèi)，是因?yàn)開(kāi)_________________。14．根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題。（1）限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有__________和__________。（2）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下：AATTC……GG……CTTAA為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是______________________________.（3)按其來(lái)源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即______DNA連接酶和______DNA連接酶。（4）基因工程中除質(zhì)粒外，______和______也可作為運(yùn)載體.15．下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖A、圖B中的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn).請(qǐng)回答下列問(wèn)題。限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ識(shí)別序列及切割位點(diǎn)(1）一個(gè)圖A所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有______個(gè)游離的磷酸基團(tuán).（2)若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越______。（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是______________________.（4）與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止______________________________.（5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入__________酶。（6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了____________________。參考答案1．解析：基因工程是在生物體外，通過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”，對(duì)生物的基因進(jìn)行改造(目的性強(qiáng)）和重新組合（基因重組），然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需要的基因產(chǎn)物.但并不是所有的基因產(chǎn)物對(duì)人類都有益。答案:D2．解析:基因工程是指在生物體外,通過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切"和“拼接”，對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無(wú)性繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需的基因產(chǎn)物，也就是定向地改造了生物的遺傳性狀.答案:D3．解析：基因工程的操作環(huán)境是在生物體外;基因工程所需的工具有三種：（1)限制酶，作用是切割目的基因和載體;（2）DNA連接酶,它和DNA聚合酶的相同點(diǎn)是均作用于磷酸二酯鍵；(3）載體，質(zhì)粒是常用載體，λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒也可作載體.答案：D4．解析:欲用目的基因取代質(zhì)粒pZHZ1上相應(yīng)的E-F區(qū)域，需要用酶E和F將質(zhì)粒E—F區(qū)域切下，構(gòu)建的重組質(zhì)粒pZHZ2仍然存在酶E和F識(shí)別的位點(diǎn)。答案：A5．解析:該限制酶是在某些微生物突變種體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的，說(shuō)明其在原核生物中的分布沒(méi)有普遍性，A項(xiàng)錯(cuò).該限制酶能切割病毒的DNA，對(duì)自身有免疫作用，B項(xiàng)錯(cuò)。由題干材料無(wú)法確定該限制酶切割DNA產(chǎn)生的末端是黏性末端還是平末端,C項(xiàng)錯(cuò)。新限制酶的發(fā)現(xiàn)增加了限制酶的類型，有望推動(dòng)基因工程的進(jìn)一步發(fā)展。答案：D6．解析：基因工程中的剪刀是限制性核酸內(nèi)切酶,針線是DNA連接酶，最常用的載體是質(zhì)粒，受體多用原核生物,如大腸桿菌等。答案:C7．解析：DNA連接酶和DNA聚合酶都能催化形成磷酸二酯鍵，不同之處是DNA連接酶連接的是DNA片段，而DNA聚合酶連接的是單個(gè)脫氧核苷酸,將單個(gè)脫氧核苷酸連接形成與模板鏈互補(bǔ)的單鏈；RNA聚合酶也可催化磷酸二酯鍵的形成,在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中可將單個(gè)核糖核苷酸連接形成mRNA。解旋酶的作用是將DNA兩條鏈的氫鍵解開(kāi)。答案：C8．解析：②為氫鍵，①為磷酸二酯鍵，DNA連接酶和限制酶都是作用于磷酸二酯鍵，不能作用于氫鍵。答案：B9．解析:限制酶切割的位點(diǎn)可能在識(shí)別序列的一端或中間；限制酶切割DNA后可形成黏性末端或平末端;不同限制酶切割DNA后形成的黏性末端一般不同。答案：D10．解析：病毒感染宿主細(xì)胞時(shí),進(jìn)入宿主細(xì)胞的是病毒的核酸，蛋白質(zhì)外殼留在外面不起作用。答案：D11．解析:每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)處只能插入一個(gè)ada。答案：C12．解析:要得到能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的含重組DNA的細(xì)胞,選用的質(zhì)粒應(yīng)為ori正常，amp被破壞、tet正常，故選A。答案：A13．解析：（2)畫(huà)圖時(shí)應(yīng)注意兩條鏈都要畫(huà)出，兩條鏈堿基序列反向閱讀相同。（3）不同生物的基因能拼接在一起的原因是，基因的化學(xué)本質(zhì)均為DNA且分子結(jié)構(gòu)相同。答案:（1）限制酶DNA連接酶（2)(3)人的遺傳物質(zhì)（基因）與羊的遺傳物質(zhì)都為DNA，其物質(zhì)組成和空間結(jié)構(gòu)相同14．解析：（1）DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式，即黏性末端和平末端。(2）若用不同的酶切割目的基因，形成的末端一定要與EcoRⅠ切割運(yùn)載體產(chǎn)生的末端相同，這樣才能互補(bǔ)連接。（3）根據(jù)酶的來(lái)源,可將DNA連接酶分為E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶兩類。（4)基因工程中常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒等.答案:(1）黏性末端平末端（2）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同(3）E·coliT4（4)動(dòng)植物病毒λ噬菌體的衍生物15．解析：（1）質(zhì)粒切割前的DNA是雙鏈環(huán)狀DNA,所有磷酸基團(tuán)參與形成磷酸二酯鍵，故沒(méi)有游離的磷酸基團(tuán)。從圖A可以看出，質(zhì)粒上只含有一個(gè)SmaⅠ的切點(diǎn)，因此被該酶切割后，質(zhì)粒變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子,因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，所以切割后的DNA含有2個(gè)磷酸基團(tuán).（2）SmaⅠ酶切位點(diǎn)中含堿基對(duì)C-G越多，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，氫鍵越多，熱穩(wěn)定性就越高.（3）目的基因和質(zhì)粒的抗生素抗性基因中都含有SmaⅠ酶切位點(diǎn)，使用SmaⅠ切割時(shí)會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和目的基因。（4）質(zhì)粒是環(huán)狀DNA，其中有一個(gè)EcoRⅠ的識(shí)別位點(diǎn)，經(jīng)切割后容易自身環(huán)化,目的基因中有2個(gè)EcoRⅠ的識(shí)別位點(diǎn),經(jīng)切割