化學(xué)品 液態(tài)糞肥中的厭氧轉(zhuǎn)化試驗(yàn) 征求意見(jiàn)稿

1GB/TXXXXX—XXXX化學(xué)品液態(tài)糞肥中的厭氧轉(zhuǎn)化試驗(yàn)本文件規(guī)定了化學(xué)品液態(tài)糞肥中厭氧轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的術(shù)語(yǔ)與定義、試驗(yàn)原理、受試物信息、參比物、方法描述、試驗(yàn)程序、質(zhì)量保證與質(zhì)量控制、數(shù)據(jù)和報(bào)告。本文件適用于測(cè)試和評(píng)估化學(xué)品在液態(tài)糞肥中的厭氧轉(zhuǎn)化；用于測(cè)定化學(xué)品在液態(tài)糞肥作用下的轉(zhuǎn)化率，以及轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的性質(zhì)和生成率、降解率。本文件適用于不揮發(fā)或輕微揮發(fā)性物質(zhì)（亨利定律常數(shù)<100Pa?m3/mol或<1*10-3atm?m3/mol）、水溶性或水中微溶、能被精確分析的所有化學(xué)品。本文件不適用于易揮發(fā)的化學(xué)品。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T21845化學(xué)品水溶解度試驗(yàn)GB/T21852化學(xué)品分配系數(shù)(正辛醇-水)高效液相色譜法試驗(yàn)GB/T21853化學(xué)品分配系數(shù)（正辛醇-水）搖瓶法試驗(yàn)GB/T21855化學(xué)品與pH有關(guān)的水解作用試驗(yàn)GB/T22052用液體蒸汽壓力計(jì)測(cè)定液體的蒸汽壓力和溫度關(guān)系及初始分解溫度的方法GB/T22228工業(yè)用化學(xué)品固體及液體的蒸汽壓在10-1Pa至105Pa范圍內(nèi)的測(cè)定靜態(tài)法GB/T22229工業(yè)用化學(xué)品固體及液體的蒸汽壓在10-3Pa至1Pa范圍內(nèi)的測(cè)定蒸汽壓平衡法GB/T21851化學(xué)品批平衡法檢測(cè)吸附/解吸附試驗(yàn)HJ1257-2022化學(xué)物質(zhì)環(huán)境管理化學(xué)物質(zhì)測(cè)試術(shù)語(yǔ)OECD化學(xué)品測(cè)試導(dǎo)則No.104蒸汽壓OECD化學(xué)品測(cè)試導(dǎo)則No.112水中解離常數(shù)3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.150%衰減時(shí)間disappearanceordissipationtime50，DT50受試物濃度降低至初始濃度的50%時(shí)所需要的時(shí)間。3.290%衰減時(shí)間disappearanceordissipationtime90，DT90受試物濃度降低至初始濃度的90%時(shí)所需要的時(shí)間。2GB/TXXXXX—XXXX3.3流動(dòng)試驗(yàn)flow-throughtest經(jīng)水飽和的氮?dú)庖院愣魉偻ㄟ^(guò)糞肥培養(yǎng)系統(tǒng)的試驗(yàn)方法。3.4半靜態(tài)測(cè)試semi-statictest在培養(yǎng)系統(tǒng)中，潤(rùn)濕的氮?dú)庠陂_(kāi)始和整個(gè)測(cè)試過(guò)程中間歇地（例如一周一次）通過(guò)糞肥樣品的試驗(yàn)方法。3.5糞肥manure尿液、糞便和水的混合物。3.6質(zhì)量平衡massbalance在每個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn)，從測(cè)試系統(tǒng)中回收的最初添加的放射性物質(zhì)的百分比。3.7礦化mineralization有機(jī)化合物的完全降解。在厭氧條件下可變?yōu)镃H4、CO2和H2O。3.8不可提取殘留物non-extractableresidues,NER指糞肥中提取后殘留在基質(zhì)中的化合物。3.9轉(zhuǎn)化產(chǎn)物transformationproducts受試物經(jīng)生物或非生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)產(chǎn)生的所有物質(zhì)，包含CO2、CH4和不可提取的殘留物。4試驗(yàn)原理糞肥樣品經(jīng)受試物處理，并在受控的實(shí)驗(yàn)室條件下厭氧、恒溫、避光培養(yǎng)。在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間點(diǎn)，提取和分析糞肥樣品中的母體物質(zhì)和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，分析經(jīng)捕集裝置收集的揮發(fā)性產(chǎn)物，定量測(cè)定CO2和CH4；如果需要，也可以測(cè)定更多的揮發(fā)性產(chǎn)物。若使用14C標(biāo)記的受試物時(shí)，依據(jù)質(zhì)量平衡，測(cè)定受試物的礦化速率，確定不可提取殘留物的形成。5受試物信息未標(biāo)記或標(biāo)記的受試物可用于測(cè)量母體化學(xué)物質(zhì)的消散速率。標(biāo)記應(yīng)位于分子最穩(wěn)定的部分，14C放射性標(biāo)記受試物是用于研究轉(zhuǎn)化途徑，定量分析CO2和CH4、不可提取殘留物(NER)的產(chǎn)生，篩選和3GB/TXXXXX—XXXX量化轉(zhuǎn)化產(chǎn)物以及建立質(zhì)量平衡所必需的。為了跟蹤活性部分，應(yīng)在相應(yīng)位置標(biāo)記。對(duì)于復(fù)雜分子（例如，包含多個(gè)芳香基團(tuán)）或多取代的分子，可能需在不同位置進(jìn)行標(biāo)記。使用13C、15N或2D（非交換性）等穩(wěn)定同位素有助于通過(guò)各種光譜方法（例如質(zhì)譜法或核磁共振光譜法）識(shí)別轉(zhuǎn)化產(chǎn)物或表征不可提取殘留物。受試物的純度應(yīng)至少為95%。5.1受試物信息包括：a）水中溶解度（GB/T21845）；b）有機(jī)溶劑中溶解度；c）蒸汽壓（GB/T22052、GB/T22228、GB/T22229和OECDNo.l04）和亨利常數(shù)；d）正辛醇/水分配系數(shù)（GB/T21852和GB/T21853e）水中的化學(xué)穩(wěn)定性（水解GB/T21855f）解離常數(shù)pKa，如果分子易于質(zhì)子化或去質(zhì)子化（OECDNo.112g）吸附行為（GB/T21851）。5.2其他信息包括：a)受試物或轉(zhuǎn)化產(chǎn)物對(duì)微生物的毒性數(shù)據(jù)，例如：根據(jù)OECDTG209、OECDTG216、OECDTG217或OECDTG224；b)用于定量和鑒定受試物及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的分析方法（包括提取和凈化方法）。如果可獲得標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)采用標(biāo)準(zhǔn)品通過(guò)光譜和色譜方法來(lái)表征和/或鑒定轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。若無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品，可以嘗試基于光譜技術(shù)（高分辨率質(zhì)譜和核磁共振光譜）進(jìn)行鑒定。6參比物測(cè)試中可以包含參比物，以確保試驗(yàn)設(shè)備的適用性和糞肥中的微生物活性。在測(cè)試條件下容易降解的物質(zhì)可以作為參比物，例如水楊酸鈉（CAS：54-21-7）或水楊酸（CAS：69-72-7）。7方法描述7.1儀器設(shè)備試驗(yàn)所用儀器設(shè)備如下：a）分析儀器，氣相色譜儀（GC）、高效液相色譜儀（HPLC）等用于受試物及轉(zhuǎn)化產(chǎn)物化學(xué)分析的儀器設(shè)備，以及包括用于分析放射性同位素示蹤標(biāo)記、非標(biāo)記受試物的檢測(cè)系統(tǒng)；b）用于鑒定的儀器，如質(zhì)譜儀（MS）、拉曼光譜儀（RAM）高分辨質(zhì)譜儀（HRMS）、核磁共振儀（NMR）等；c）液閃儀和用于氧化放射性物質(zhì)的氧化器；d）離心機(jī)；e）提取裝置（例如，冷凍萃取離心管，索氏萃取裝置，加速溶劑提取裝置）；f）濃縮裝置（例如旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀g）水浴鍋；h）機(jī)械混合裝置（例如攪拌機(jī)、旋轉(zhuǎn)混合機(jī)、手動(dòng)混合機(jī)）。4GB/TXXXXX—XXXX7.2化學(xué)試劑試驗(yàn)所用化學(xué)試劑如下：a）NaOH（分析純2mol/L，或者其他合適的堿性試劑（如KOH，乙醇胺b）Ba(OH)2（分析純0.25mol/L；c）H2SO4（分析純0.05mol/L；d）HCl（分析純10%；e）有機(jī)溶劑（分析純?nèi)绫?、甲醇等；f）無(wú)機(jī)鹽（分析純例如KH2PO4（用作提取溶劑g）閃爍液。7.3試驗(yàn)裝置在合適的測(cè)試系統(tǒng)中進(jìn)行培養(yǎng)。半靜態(tài)試驗(yàn)和流動(dòng)試驗(yàn)培養(yǎng)裝置的示例分別見(jiàn)附錄B和附錄C。對(duì)于無(wú)礦化或極低礦化的物質(zhì)，可以使用流動(dòng)試驗(yàn)系統(tǒng)或半靜態(tài)試驗(yàn)系統(tǒng)。礦化度較高的物質(zhì)，優(yōu)先選擇半靜態(tài)試驗(yàn)系統(tǒng)。為確保厭氧條件，采用潤(rùn)濕氮?dú)庖?0~200mL/min的流速間歇（對(duì)于半靜態(tài)試驗(yàn)系統(tǒng)）或連續(xù)（對(duì)于流動(dòng)試驗(yàn)系統(tǒng)）通過(guò)樣品。填充了NaOH的捕集器（或其他合適的捕集溶液）用于吸收釋放的CO2?？赡苄纬傻募淄?CH4)積累在培養(yǎng)瓶中（半靜態(tài)試驗(yàn)系統(tǒng)）或通過(guò)CO2捕集器（流動(dòng)試驗(yàn)系統(tǒng)）后在燃燒管中燃燒生成CO2，最終被CO2捕集器吸收。通過(guò)測(cè)定Ba(OH)2沉淀的放射性，驗(yàn)證CO2捕集器中吸收的是14CO2，而不是來(lái)自揮發(fā)性脂肪酸(VFA)。根據(jù)受試物及其可能的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，可能需要進(jìn)一步的捕集器（例如乙二醇、硫酸）來(lái)收集揮發(fā)性有機(jī)化學(xué)物質(zhì)。預(yù)試驗(yàn)可為受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的行為提供有價(jià)值的數(shù)據(jù)（例如，在某些情況下，受試物快速消散，須調(diào)整采樣時(shí)間點(diǎn)；或消散很慢，需延長(zhǎng)試驗(yàn)時(shí)間）。7.4糞肥7.4.1糞肥的選擇用于測(cè)試的糞肥應(yīng)從糞肥儲(chǔ)存罐、預(yù)儲(chǔ)存罐或糞池中采集。糞肥儲(chǔ)存設(shè)施可在地上或地下，采樣前的六個(gè)月內(nèi)糞肥不應(yīng)暴露于受試物或同一類別的化學(xué)物質(zhì)。采樣時(shí)需了解動(dòng)物的數(shù)量、類型和年齡、飼料，以及動(dòng)物的用藥（例如獸藥或飼料添加劑）、動(dòng)物圈舍內(nèi)的殺生劑或其他化學(xué)產(chǎn)品（例如消毒或防蟲處理）的信息，若受試物用于農(nóng)田時(shí)建議進(jìn)行化學(xué)殘留分析。糞肥中的轉(zhuǎn)化研究應(yīng)在相關(guān)生物（例如豬、牛）的糞肥中進(jìn)行，不能從一個(gè)物種外推到另一個(gè)物種。每個(gè)物種至少應(yīng)使用一種糞肥，若經(jīng)采樣證明糞肥基質(zhì)參數(shù)不滿足標(biāo)準(zhǔn)，仍應(yīng)報(bào)告測(cè)定結(jié)果。7.4.2糞肥的采集、處理和貯存5GB/TXXXXX—XXXX豬和牛的糞肥采樣：采集前須經(jīng)糞肥罐中的設(shè)備或外部設(shè)備將糞肥在糞肥罐中至少混合均勻1h，以確保糞肥均質(zhì)化。基于豬糞比牛糞更快地分離成不同狀態(tài)，豬糞混合后應(yīng)立即取樣，牛糞可在取樣前提前一天混合?？梢允褂萌缫粋€(gè)帶大燒杯的長(zhǎng)柄勺子從糞罐中收集糞肥，采樣體積不超過(guò)容器的75%并密閉。因微生物持續(xù)產(chǎn)生氣態(tài)產(chǎn)物，建議將帶有發(fā)酵氣閘的管連接到采樣容器的出口。詳細(xì)記錄采樣地點(diǎn)、采樣程序（混合時(shí)間和持續(xù)時(shí)間）以及糞池的類型（例如地上/地下、覆蓋/露天）和大小。糞肥的貯存：試驗(yàn)時(shí)最好采集新鮮的糞肥，若無(wú)法滿足時(shí)也可將糞肥在4℃-20℃（最好在測(cè)試溫度下）最長(zhǎng)儲(chǔ)存兩個(gè)月。儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)確保厭氧/產(chǎn)甲烷條件。7.4.3糞肥的性質(zhì)表征糞肥參數(shù)見(jiàn)下表。表1用于表征糞肥的參數(shù)XXXXXX氮含量（N，mg/kg）X氮含量（NH-N，mg/kg）XXXXXXXXXXXXXXXX：例如DIN12879“CharakterisierungvonSchl?mmen-Be：必須確保在整個(gè)測(cè)試期間氧化還原電位：例如DINEN12880“污泥表征-干殘?jiān)蓸与A段后（即馴化開(kāi)始、試驗(yàn)開(kāi)始、試驗(yàn)期間和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)）收集的數(shù)據(jù)必須根據(jù)調(diào)整后的糞肥干物質(zhì)含量和濕重進(jìn)行報(bào)告。應(yīng)分析背景對(duì)照或空白樣品，以排除糞肥中存在的受試物。6GB/TXXXXX—XXXX除干物質(zhì)含量外，不得對(duì)采樣的糞肥進(jìn)行任何更改或調(diào)整。7.4.4糞肥干物質(zhì)含量和均質(zhì)化在馴化期開(kāi)始之前，需確定糞肥的干物質(zhì)含量，必要時(shí)可進(jìn)行調(diào)節(jié)。牛糞和豬糞推薦的干物質(zhì)含量分別為10±1%(w:w)和5±1%(w:w)。如果干物質(zhì)含量低于推薦值，則可以離心（例如以740g離心10min）進(jìn)行濃縮，但初始干物質(zhì)含量必須應(yīng)≥8%（牛）或≥3%（豬若不滿足這些最低值則須收采集新鮮糞肥并用于測(cè)試。若干物質(zhì)含量過(guò)高，可根據(jù)需要加水調(diào)節(jié)（去離子水，用氮?dú)夤呐?0min）。在確定干物質(zhì)含量和調(diào)整（如有必要）之前，應(yīng)對(duì)糞肥進(jìn)行均質(zhì)化處理。豬糞/牛糞應(yīng)在厭氧條件下進(jìn)行均質(zhì)化，以獲得穩(wěn)定的相態(tài)，例如將糞肥裝入燒杯中緩慢通入氮?dú)獠⒂没旌掀?均質(zhì)器（例如手動(dòng)攪拌器）混合，使糞肥均質(zhì)化；若緩慢混合（例如使用玻璃棒）將牛糞均質(zhì)化時(shí)無(wú)需進(jìn)行防止氧氣干擾的額外措施。調(diào)整干物質(zhì)含量后，再次將糞肥均質(zhì)化（方法同上將50-100g樣品（濕重）直接裝入培養(yǎng)容器中用于馴化和轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。7.4.5糞肥馴化應(yīng)在黑暗（首選）或漫射光下在測(cè)試溫度下進(jìn)行21±1d的馴化。如果使用半靜態(tài)試驗(yàn)設(shè)備，則培養(yǎng)系統(tǒng)用氮?dú)鉀_洗1h以保持厭氧條件，此后，通過(guò)閥門關(guān)閉培養(yǎng)系統(tǒng)；如果使用流動(dòng)試驗(yàn)設(shè)備，則必須關(guān)閉培養(yǎng)設(shè)備，并以水飽和的氮?dú)饧s50-200mL/min的恒定流率流過(guò)糞肥。7.5試驗(yàn)條件7.5.1試驗(yàn)溫度和光照條件培養(yǎng)應(yīng)在黑暗（首選）或漫射光下在受控溫度(±2℃)下進(jìn)行，該溫度可以是場(chǎng)地溫度或20℃的標(biāo)準(zhǔn)溫度。其中場(chǎng)地溫度可以是采樣時(shí)樣品的實(shí)際溫度，也可以是采樣點(diǎn)的平均場(chǎng)地溫度。DTx值可以轉(zhuǎn)換為與環(huán)境相關(guān)的溫度。為了確定轉(zhuǎn)化途徑，可能須使用與環(huán)境相關(guān)的溫度。注：如果在較低溫度下無(wú)法識(shí)別轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，則可能還7.5.2厭氧培養(yǎng)條件牛糞和豬糞的轉(zhuǎn)化試驗(yàn)應(yīng)在與糞肥罐中觀察到的相似的氧化還原條件下進(jìn)行。豬糞和牛糞的典型氧化還原電位值范圍為-230mV至-400mV，試驗(yàn)期間應(yīng)測(cè)量并定期記錄氧化還原電位，以確保整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中保持厭氧條件穩(wěn)定，Eh不應(yīng)超過(guò)-100mV。7.5.3非生物對(duì)照可設(shè)置無(wú)菌對(duì)照測(cè)定受試物的非生物轉(zhuǎn)化。對(duì)于進(jìn)行快速非生物轉(zhuǎn)化的受試物，必須進(jìn)行無(wú)菌對(duì)照。7GB/TXXXXX—XXXX無(wú)菌對(duì)照也可以提供轉(zhuǎn)化過(guò)程的更多信息。糞肥經(jīng)過(guò)消毒，用無(wú)菌受試物處理，燒瓶保持封閉。無(wú)菌對(duì)照的取樣應(yīng)根據(jù)取樣時(shí)間表進(jìn)行，取樣時(shí)間點(diǎn)可以較少，但至少應(yīng)在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)無(wú)菌對(duì)照進(jìn)行取樣?？赏ㄟ^(guò)至少兩次高壓滅菌來(lái)實(shí)現(xiàn)滅菌：將測(cè)試容器中的糞肥預(yù)熱過(guò)夜（至少12h）至100℃,白天讓容器冷卻至室溫。開(kāi)始第一次高壓滅菌循環(huán)（15min，121℃)并讓測(cè)試容器再次冷卻至室溫過(guò)夜，以使細(xì)菌孢子萌發(fā)。然后開(kāi)始第二次高壓滅菌循環(huán)（15min，121℃)。此程序有助于滅活細(xì)菌孢子并防止起泡。也可以使用其他消滅生物活性的方法（例如添加毒物或伽馬輻射）。7.5.4受試物的處理和添加受試物應(yīng)根據(jù)特定物質(zhì)的暴露情景以最大預(yù)期濃度投加到糞肥中，濃度單位通常為mg/kg，例如糞肥中的獸藥。應(yīng)報(bào)告使用特定受試物濃度的原因。如果該濃度不足以分析和鑒定轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，應(yīng)增加濃度進(jìn)行測(cè)試，但應(yīng)避免過(guò)高的添加濃度對(duì)微生物造成毒性抑制。受試物應(yīng)以水溶液形式或溶解在適當(dāng)?shù)乃烊苄杂袡C(jī)溶劑中加入，并應(yīng)添加到相應(yīng)培養(yǎng)容器中的馴化糞肥中，然后充分混合，同時(shí)保持厭氧條件。例如可通過(guò)在試驗(yàn)過(guò)程中連續(xù)通過(guò)樣品的氮?dú)饬鞅３謪捬?。使用移液器吸頭將所需體積的貯備溶液添加到糞肥中，并使溶液均勻分布在糞肥中，因糞肥可能會(huì)粘在移液器吸頭中，為避免損失移液器吸頭仍留在糞肥中。也可使用其他方式實(shí)現(xiàn)受試物均勻分布（例如玻璃移液管、微升注射器）。用于添加的溶劑的總體積不應(yīng)超過(guò)1%（按體積計(jì)）。7.5.5試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間和采樣試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間將取決于母體受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化速率。標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)時(shí)間為馴化期結(jié)束后的90d。在某些情況下，也可合理延長(zhǎng)試驗(yàn)時(shí)間，理想情況下試驗(yàn)結(jié)束時(shí)受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的含量應(yīng)低于加入量每次每組取兩瓶試驗(yàn)樣品。根據(jù)受試物的消散模型，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的生成和消散模型（確定取樣間隔時(shí)間例如0、1、3、7d；2、3周；1、2、3個(gè)月等）。除了添加受試物后直接取樣外，至少應(yīng)包括7個(gè)額外的取樣點(diǎn)。動(dòng)力學(xué)模型可能需要更多的采樣時(shí)間點(diǎn)，以涵蓋轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的形成和消散。預(yù)試驗(yàn)可能會(huì)為受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的行為提供有價(jià)值的信息。在某些情況下，可能會(huì)觀察到受試物的快速消散，因此須調(diào)整相應(yīng)的采樣時(shí)間點(diǎn)。CO2和CH4是在厭氧條件下可能形成的揮發(fā)性轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。除了這些化合物，還可能形成其他揮發(fā)物（例如揮發(fā)性脂肪酸，VFA）。試驗(yàn)裝置須滿足：定量捕獲以避免揮發(fā)物的任何損失并能夠建立質(zhì)量平衡，區(qū)分形成的CO2、CH4和其他揮發(fā)物。為此，至少在采樣時(shí)間點(diǎn)移除用于測(cè)量礦化的捕集阱，并分別分析捕獲的14CO2和其他產(chǎn)生的氣體。首先，取出吸收阱，用新填料的捕集阱代替，并分析原吸收阱的放射性含量。此后，將在該特定采樣點(diǎn)移除糞肥培養(yǎng)瓶并通過(guò)添加10mL的10%HCl進(jìn)行處理，以去除可能溶解的CO2（或HCO3-/CO32-）。添加10mL的10%HCl后，再次關(guān)閉培養(yǎng)瓶，通入氮?dú)庵辽?GB/TXXXXX—XXXX24h。此后，移出糞肥培養(yǎng)瓶并對(duì)樣品進(jìn)行清理、提取和分析。在酸化之前安裝的CO2捕集器直接被移出，并對(duì)額外捕集的14CO2進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)。如果受試物或轉(zhuǎn)化產(chǎn)物在酸化條件下不穩(wěn)定，則應(yīng)設(shè)置單獨(dú)的培養(yǎng)瓶用于化學(xué)分析。有關(guān)采樣流程的詳細(xì)說(shuō)明，請(qǐng)參見(jiàn)附錄B（半靜態(tài)系統(tǒng)）和附錄C（流動(dòng)試驗(yàn)系統(tǒng)）。7.6試驗(yàn)程序7.6.1質(zhì)量平衡、分析方法的回收率、重復(fù)性和靈敏度對(duì)于非標(biāo)記和有標(biāo)記的受試物，應(yīng)確定受試物分析方法的回收率和其他有效性標(biāo)準(zhǔn)（如重復(fù)性回收率應(yīng)至少為70%至110%。這些有效性標(biāo)準(zhǔn)也適用于轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的分析方法。對(duì)于放射性標(biāo)記的受試物，初始質(zhì)量平衡應(yīng)在90%-110%之間，試驗(yàn)期間每個(gè)重復(fù)的質(zhì)量平衡應(yīng)在85%-115%的范圍內(nèi)。用于受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的分析方法的檢測(cè)限應(yīng)至少為添加劑量的1%或至少0.01mg/kg濕重，以較低者為準(zhǔn)。還應(yīng)確定定量限。7.6.2測(cè)量和分析糞肥樣品在取樣后直接提取，除非可以證明樣品儲(chǔ)存不影響提取效率和分析檢測(cè)。樣品應(yīng)用適當(dāng)?shù)娜軇┨崛。崛》椒☉?yīng)確保母體物質(zhì)和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的回收率。應(yīng)使用水性溶劑混合物以及酸和堿體系作為溶劑，以確保提取更多的極性母體物質(zhì)和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物?？刹捎幂^多的提取方法，例如加速溶劑萃?。ㄈ鏏SE?,PLE）、回流、索氏等。當(dāng)使用14C標(biāo)記的受試物時(shí)，提取后剩余的殘留物（不可提取的殘留物）應(yīng)通過(guò)燃燒進(jìn)行量化，并應(yīng)計(jì)算每個(gè)采樣間隔的質(zhì)量平衡。注：如果不能定量確定不可提取殘留物（NER）的量，例如在非標(biāo)記的測(cè)應(yīng)確定并報(bào)告每次取樣時(shí)受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的濃度。一般情況，在任意采樣時(shí)間點(diǎn)，≥10%的放射性轉(zhuǎn)化產(chǎn)物應(yīng)被鑒定。一旦檢測(cè)到≥5%的放射性，在試驗(yàn)期間轉(zhuǎn)化產(chǎn)物濃度有所增加，則轉(zhuǎn)化產(chǎn)物也應(yīng)被鑒別。通常，鑒定是通過(guò)使用兩種不同的系統(tǒng)對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物與已知標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行聯(lián)合色譜分析或通過(guò)能夠進(jìn)行結(jié)構(gòu)識(shí)別的技術(shù)（如質(zhì)譜、核磁共振等）完成。在聯(lián)合色譜分析的情況下，使用具有相同的固定相和兩種不同的溶劑體系的色譜技術(shù)不足以驗(yàn)證轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的特性，應(yīng)使用兩種不同的、分析獨(dú)立的系統(tǒng)，例如反相和正相薄層色譜（TLC）或TLC以及高效液相色譜（HPLC通過(guò)聯(lián)合色譜分析進(jìn)行鑒定。如果色譜分離具有合適的質(zhì)量，則不需要通過(guò)光譜學(xué)進(jìn)行額外的確認(rèn)。還可以使用提供結(jié)構(gòu)信息的方法獲得明確的鑒定，如氣相色譜/質(zhì)譜（GC-MS）、液相色譜/質(zhì)譜（LC-MS）、液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）和核磁共振（NMR）。除非觀察到不同的行為，否則通常不需要確定轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的立體化學(xué)。應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆椒ūM可能充分地闡明轉(zhuǎn)化途徑。9GB/TXXXXX—XXXX應(yīng)特別注意不可提取殘留物（NER因?yàn)榧S肥是一個(gè)過(guò)渡區(qū)，即糞肥基質(zhì)本身在擴(kuò)散到土壤后會(huì)降解。因此，母體化學(xué)物質(zhì)或轉(zhuǎn)化產(chǎn)物被包留在糞肥基質(zhì)中或與糞肥基質(zhì)相關(guān)聯(lián)時(shí)，若不能通過(guò)上述提取方法提取，很大可能會(huì)由于糞肥基質(zhì)降解而釋放。7.6.3試驗(yàn)數(shù)據(jù)的動(dòng)力學(xué)評(píng)估必要時(shí)，評(píng)估動(dòng)力學(xué)模型與測(cè)試數(shù)據(jù)的擬合效果。若需確定轉(zhuǎn)換產(chǎn)物的DT50和DT90值時(shí)，可能需要更多的采樣時(shí)間點(diǎn)。8質(zhì)量保證與質(zhì)量控制a）試驗(yàn)須在糞肥罐中氧化還原條件下進(jìn)行，試驗(yàn)期間氧化還原電位（Eh）應(yīng)≤-100mV。b）對(duì)于放射性標(biāo)記的受試物，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)的質(zhì)量平衡應(yīng)在90%到110%之間。在試驗(yàn)期間，每個(gè)重復(fù)的質(zhì)量平衡應(yīng)在85%-115%范圍內(nèi)。c）對(duì)于標(biāo)記和未標(biāo)記的受試物，分析方法回收率應(yīng)達(dá)到70%-110%。9數(shù)據(jù)和報(bào)告9.1數(shù)據(jù)處理和試驗(yàn)結(jié)果評(píng)估應(yīng)報(bào)告糞肥基質(zhì)參數(shù)（如適用，基于濕重）。每個(gè)采樣間隔的受試物、轉(zhuǎn)化產(chǎn)物、揮發(fā)性物質(zhì)、CO2和CH4以及不可提取的殘留物（NER）的量應(yīng)按初始用量的百分比給出，并以mg/kg糞肥（基于濕重）計(jì)。質(zhì)量平衡應(yīng)以每個(gè)采樣間隔所占初始添加量的百分比給出。應(yīng)分別報(bào)告每個(gè)平行試驗(yàn)組的數(shù)據(jù)和所有平行的算術(shù)平均值（參見(jiàn)附錄D）。繪制基于非對(duì)數(shù)的受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物濃度與時(shí)間的圖。鑒別主要的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，并繪制時(shí)間與濃度圖，以顯示其形成和消散的速度。試驗(yàn)期間任何時(shí)間出現(xiàn)的≥10%的添加劑量的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。還應(yīng)鑒別在所應(yīng)用放射性的≥5%但在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)尚未達(dá)到最大生成量的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。盡可能通過(guò)數(shù)據(jù)與適當(dāng)動(dòng)力學(xué)模型擬合，確定受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的DT50和DT90值。DTx值應(yīng)與所使用的模型以及擬合優(yōu)度一起報(bào)告。9.2測(cè)試報(bào)告報(bào)告應(yīng)包括：a）受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物（如適用——通用名稱，化學(xué)名稱，CAS編號(hào)，結(jié)構(gòu)式(當(dāng)使用放射性標(biāo)記時(shí)指明標(biāo)記的位置)和相關(guān)的物理化學(xué)性質(zhì)；——受試物純度（雜質(zhì)——標(biāo)記受試物的純度和放射活性，分析證書（如適用）。GB/TXXXXX—XXXXb）用于鑒別轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：——用于表征和/或鑒定轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的標(biāo)準(zhǔn)品的化學(xué)名稱和結(jié)構(gòu)。c）分析測(cè)定：——糞肥基質(zhì)參數(shù)的測(cè)定方法；——受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的定量和鑒定方法；——分析方法驗(yàn)證的結(jié)果，包括但不限于所使用分析方法的回收率、重復(fù)性、LOD和LOQ（以加入量的百分比和mg/kg表示——質(zhì)量平衡；——提取過(guò)程。d）糞肥的測(cè)定：——采樣點(diǎn)的詳細(xì)信息（日期，位置，動(dòng)物類型和數(shù)量，飼料，糞肥罐的類型和大小，取樣前六個(gè)月內(nèi)使用化學(xué)品的信息，例如殺生劑或獸藥——糞肥取樣日期和程序；——糞肥基質(zhì)參數(shù)（pH值、有機(jī)質(zhì)含量，氮含量，氧化還原電位，干物質(zhì)含量，溫度，濕重——糞肥儲(chǔ)存的持續(xù)時(shí)間和儲(chǔ)存條件（如果儲(chǔ)存在實(shí)驗(yàn)室中）。e）試驗(yàn)條件：——試驗(yàn)日期；——受試物的添加量；——最大預(yù)期糞肥濃度的計(jì)算（包括理由——受試物添加使用的溶劑（如適用）和添加方法；——處理過(guò)的糞肥重量（鮮重——所用培養(yǎng)系統(tǒng)的描述；——氮?dú)饬魉伲▋H適用于流動(dòng)試驗(yàn)系統(tǒng)和半靜態(tài)試驗(yàn)系統(tǒng)——溫度；——糞肥的基質(zhì)參數(shù)（pH值，氧化還原電位，干物質(zhì)含量，糞肥濕重，溫度——平行樣個(gè)數(shù)和對(duì)照組個(gè)數(shù)，包括無(wú)菌對(duì)照。f）結(jié)果：——每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的糞肥基質(zhì)表征結(jié)果；——結(jié)果表以初始添加劑量的百分比表示，如適用，可用每個(gè)平行的mg/kg糞肥（基于濕重）表示和以下參數(shù)所有平行的平均值表示；——不可萃取殘留物的放射性表征；——產(chǎn)生的二氧化碳和甲烷以及其他揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)的量；GB/TXXXXX—XXXX——每個(gè)采樣點(diǎn)的質(zhì)量平衡；——受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的定量；——受試物的濃度（非對(duì)數(shù)）與時(shí)間的關(guān)系圖，如適用，繪制主要轉(zhuǎn)化產(chǎn)物濃度與時(shí)間的關(guān)系圖；——受試物的DT50和DT90值，以及（如適用）主要轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的DT50和DT90值，包括用于擬合的動(dòng)力學(xué)模型和程序；——無(wú)菌條件下的非生物轉(zhuǎn)化；——受試物儲(chǔ)存穩(wěn)定性，當(dāng)樣品在化學(xué)分析之前儲(chǔ)存時(shí)；——對(duì)受試物的轉(zhuǎn)化動(dòng)力學(xué)進(jìn)行評(píng)估，如適用評(píng)估轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化動(dòng)力學(xué)；——建議的轉(zhuǎn)化路徑，包括報(bào)告轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)式和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的名稱；——討論和結(jié)果解釋；——原始數(shù)據(jù)（例如，樣品色譜圖，轉(zhuǎn)化率計(jì)算和用于鑒別轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的方法）。GB/TXXXXX—XXXX（資料性附錄）水楊酸的取樣和分析測(cè)定除了下面描述的方法外，還可以使用其他適當(dāng)?shù)姆治龇椒ǎɡ鏕C-MS或LC-MS）。用80mL甲醇+1%三氟乙酸（TFA）提取50g濕糞肥樣品一次，然后用50mL甲醇+1%TFA提取兩次。提取時(shí)，將樣品在水平搖床上震蕩30min后離心（例如，以740g離心10min）。離心后，收集上清提取液，沉淀物進(jìn)行下一步提取。整個(gè)過(guò)程重復(fù)兩次。合并提取液，并通過(guò)放射性TLC（薄層色譜）進(jìn)一步分析。在最后一個(gè)提取步驟之后，將沉淀物風(fēng)干，對(duì)等分樣品進(jìn)行燃燒和放射測(cè)定，以提供有關(guān)不可提取殘留物（NER）量的信息。除了所描述的提取之外，還可以使用加速溶劑萃?。ˋSE?,PLE）進(jìn)行進(jìn)一步提取。加速溶劑萃取(ASE?)，即在高壓和高溫下萃?。?00℃,12000kPa，加熱5min，然后靜置10min使用與第一個(gè)提取步驟相同的溶劑混合物（80mL甲醇+1%TFA）。提取進(jìn)行兩次，但提取物不合并。由于未經(jīng)進(jìn)一步凈化的提取物可能會(huì)影響HPLC的性能，從而導(dǎo)致寬峰，因此放射性TLC優(yōu)于HPLC。建議使用以下TLC系統(tǒng)：a）固定相：硅膠KG60b）流動(dòng)相：甲醇/甲苯/乙酸乙酯/乙酸；10/44/43/3（v/v/v/v）經(jīng)TLC薄板獲得的放射性峰的特征是通過(guò)它們的Rf值和分配到共色譜中的水楊酸的峰和可能的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行表征。典型的Rf值為：a）水楊酸：Rf=0.50–0.55b）2-羥基馬尿酸：Rf=0.31–0.36c）龍膽酸：Rf=0.42–0.47此外，如果觀察到的峰不能分配給任何添加的參考物質(zhì)，則應(yīng)用其Rf值描述它們并命名為轉(zhuǎn)化產(chǎn)要確定CO2和CH4的礦化，參見(jiàn)附錄B?？梢酝ㄟ^(guò)在水/有機(jī)提取物，二氧化碳（14CO2甲烷（14CH4）和不可提取殘留物（NER）中添加放射性量（[%添加放射性;（%aR）]）表示質(zhì)量平衡：質(zhì)量平衡[%aR]=提取物[%aR]+14CO2[aR]+14CH4[%aR]+NER[%aR]。GB/TXXXXX—XXXX（資料性附錄）半靜態(tài)試驗(yàn)培養(yǎng)系統(tǒng)B.1半靜態(tài)試驗(yàn)培養(yǎng)裝置標(biāo)引序號(hào)說(shuō)明：1——氮?dú)馊肟冢?——含有去離子水的洗氣瓶；3——含有糞肥的培養(yǎng)瓶；4——CO2收集器（例如，含有2MNaOH5——CO2收集器（例如，含有2MNaOH6——出口。圖B.1半靜態(tài)試驗(yàn)培養(yǎng)裝置示例將糞肥樣品添加到連接在半靜態(tài)裝置上的培養(yǎng)瓶3中。為了確保厭氧條件，用緩慢濕潤(rùn)的氮?dú)饬魍ㄟ^(guò)糞肥1h，以排除系統(tǒng)中的空氣。用濕潤(rùn)的氮?dú)饬髋艢夂?，通過(guò)直接關(guān)閉分別在培養(yǎng)瓶和第二個(gè)NaOH捕集器5出口的閥門處的兩個(gè)閥門來(lái)關(guān)閉系統(tǒng)。根據(jù)受試物及其潛在的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的特點(diǎn)，可能需要不同的收集器（例如，乙二醇、硫酸）來(lái)收集揮發(fā)性有機(jī)物質(zhì)。注意：培養(yǎng)瓶出口處的閥門可以保持打開(kāi)狀態(tài)，以增加半靜態(tài)系統(tǒng)上方的空間，還可在第一個(gè)CO2收集器4處吸收培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的CO2。此時(shí)，應(yīng)在培養(yǎng)瓶3和CO2收集器4之間插入一個(gè)安全瓶（空洗瓶以防止在實(shí)驗(yàn)裝置壓力下降時(shí)，吸收溶液回流到培養(yǎng)瓶中。在培養(yǎng)期結(jié)束后，將各個(gè)培養(yǎng)瓶連接到后文總結(jié)的流動(dòng)試驗(yàn)裝置上，以檢測(cè)生成的CO2、CH4和揮由于糞肥生成了氣體，在培養(yǎng)期間，封閉實(shí)驗(yàn)裝置中的壓力會(huì)增加。所以為了避免揮發(fā)性物質(zhì)損失導(dǎo)致無(wú)法達(dá)到質(zhì)量平衡，可將該實(shí)驗(yàn)裝置連接到流動(dòng)試驗(yàn)裝置上并定期用濕潤(rùn)的氮?dú)馀艢猓ɡ纾恐蹽B/TXXXXX—XXXXB.2CO2、CH4和VFA的檢測(cè)標(biāo)引序號(hào)說(shuō)明：2——裝有去離子水的洗氣瓶；3——含有糞肥的培養(yǎng)瓶；4——CO2捕集器（例如，含有2MNaOH5——CO2捕集器（例如，含有2MNaOH6——包含硅膠或堿石灰顆粒的空氣/氧氣旁路入口管路；7——帶有石英玻璃管（填充CuO作為催化劑）的烘箱，800℃-850℃;8——CO2捕集器（例如，含有2MNaOH）。圖B.2CO2、CH4和VFA的檢測(cè)裝置示例將加濕氮?dú)庖约s50–200mL/min范圍內(nèi)的速率通過(guò)糞肥樣品鼓泡至少1h。從糞肥樣品中生成的14CO2，在含有CO2吸收劑（例如2MNaOH）的捕集阱（4和5）中運(yùn)輸和捕獲。如果生成14CH4，它將通過(guò)CO2捕集阱（4和5）。加入氧氣或環(huán)境空氣6后，14CH4在800℃-850℃的燃燒管中催化（CuO）氧化，形成14CO2。生成的14CO2被吸收在位于燃燒管出口處的CO2捕集器8中。該裝置可以區(qū)分轉(zhuǎn)化生成的14CO2（在捕集阱4和5中捕獲）和14CH4（在捕集阱8中捕獲）。根據(jù)受試物及其潛在的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，可能需要進(jìn)一步的捕集阱（例如乙二醇，硫酸）來(lái)收集揮發(fā)性有機(jī)化合物。為了驗(yàn)證在CO2捕集阱[4]和[5]中捕集的放射性是14CO2而不是來(lái)自可能形成的揮發(fā)性脂肪酸（VFA可以進(jìn)行放射性的BaCl2沉淀。計(jì)數(shù)捕集溶液4和5中的放射性。此后，將20mL0.25MBaCl2加入到10mL等分樣品的捕集溶液4中，并且5每次發(fā)生Ba14CO3沉淀。然后再次對(duì)上清液進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)。沉淀后這種上清液中的放射性含量可歸因于VFA，而沉淀前放射性含量減去沉淀后放射性含量的差異可歸因于轉(zhuǎn)化生成的14CO2。揮發(fā)物的定量捕集的揮發(fā)物的定量是通過(guò)對(duì)捕集溶液的等分樣品的放射性計(jì)數(shù)（液態(tài)閃爍計(jì)數(shù)，LSC）來(lái)定量。GB/TXXXXX—XXXX特別是在使用半靜態(tài)設(shè)置時(shí)，重要的是通過(guò)加入10mL10%HCl來(lái)酸化樣品以釋放捕集的CO2，然后進(jìn)一步培養(yǎng)和捕集額外釋放的CO2。可以通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)：在加濕氮?dú)馔ㄟ^(guò)糞肥樣品鼓泡至少1h后，去除CO2捕集阱（4和5）并分別分析捕集的14CO2和其他產(chǎn)生的氣體，如上所述。拆除的捕集阱被新填充的捕集阱取代。此后，在該特定采樣點(diǎn)移出糞肥培養(yǎng)瓶，通過(guò)加入10mL10%HCl去除潛在溶解的CO2（或HCO3-/CO32-）。加入10mL10%HCl后，再次關(guān)閉培養(yǎng)瓶，并將濕潤(rùn)的氮?dú)馔ㄟ^(guò)糞肥鼓泡至少24h。不要攪拌樣品以避免起泡。如果仍然觀察到發(fā)泡，則應(yīng)在培養(yǎng)期間緩慢添加酸（例如滴加酸）。此后，移出糞肥培養(yǎng)瓶，清理并提取糞肥。CO2捕集阱也被移出，并針對(duì)額外捕阱的CO2進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)。注意：在向糞肥中添加10%HCl之前，必須檢查受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物在酸性條件下是否穩(wěn)定。如果不穩(wěn)定，則必須為此目的培養(yǎng)設(shè)置更多的試驗(yàn)組。具有高礦化度的受試物，建議至少吹掃24h，但可能需要長(zhǎng)達(dá)數(shù)天的時(shí)間段才能完全捕阱14CO2。如果預(yù)計(jì)以在初步試驗(yàn)組中確定最佳清除時(shí)間。如果轉(zhuǎn)化產(chǎn)物未知，則無(wú)法進(jìn)行穩(wěn)定性檢查GB/TXXXXX—XXXX（資料性附錄）流動(dòng)試驗(yàn)培養(yǎng)系統(tǒng)圖C.1流動(dòng)試驗(yàn)裝置示例CO2、CH4和VFA（揮發(fā)性脂肪酸）的區(qū)分濕潤(rùn)氮?dú)庖约s50-200mL/min的速率通過(guò)糞肥樣品。在恒定N2氣流下，從糞肥樣品中產(chǎn)生的14CO2經(jīng)含CO2吸收劑（如2MNaOH）的捕集阱1和安全阱2中捕集。14CH4可以正常通過(guò)CO2捕集阱。通入氧氣后，在800-850℃燃燒管中催化氧化(催化劑CuO)，生成14CO2。這些14CO2被燃燒管出口的CO2捕集阱收集。GB/TXXXXX—XXXX此裝置可以區(qū)分14CO2（在阱1和2中收集）和14CH4（阱3）。根據(jù)受試物及其可能的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，需要其他捕集器（例如乙二醇、硫酸）來(lái)收集其他揮發(fā)性有機(jī)物。為了驗(yàn)證在阱1、2中捕獲的放射性物質(zhì)是14CO2而不是可能存在的揮發(fā)性脂肪酸(VFA)，可以用BaCl2對(duì)放射性物質(zhì)進(jìn)行沉淀。對(duì)捕集溶液（阱1和2中）的放射性進(jìn)行計(jì)數(shù)。然后將20mL0.25M的BaCl2添加到10mL捕集溶液中，產(chǎn)生Ba14CO3沉淀。再次對(duì)上清液進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)。沉淀處理后上清液的放射性含量可歸因于揮發(fā)性脂肪酸（VFA而沉淀前放射性總量減去沉淀后溶液的放射性的差值可歸因于產(chǎn)生的14CO2。揮發(fā)性化合物的定量捕集的揮發(fā)性物質(zhì)是通過(guò)對(duì)捕集溶液的樣品進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)（液態(tài)閃爍計(jì)數(shù)，LSC）來(lái)實(shí)現(xiàn)定量的。此外，為了證明潤(rùn)濕的氮?dú)馔ㄟ^(guò)糞肥樣品時(shí)是否產(chǎn)生了14CO2，可以通過(guò)向糞肥子樣品中添加HCl以溶解在糞肥基質(zhì)中的CO2（或HCO3-/CO32-）。如果14CO2的量超過(guò)總放射性(TRR)的10%，則應(yīng)添加HCl進(jìn)行吹掃。捕集物的量化可以通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)：移除捕集阱（阱1和2并分別分析捕集的14CO2和其他逸出氣體，移除的捕集器被新增的氣體捕集阱取代。此后，在該特定采樣點(diǎn)移出糞肥培養(yǎng)瓶，通過(guò)加入10mL10%HCl去除潛在溶解的CO2（或HCO3-/CO32-）。加入10mL10%HCl后，再次關(guān)閉培養(yǎng)瓶，并將濕潤(rùn)的氮?dú)馔ㄟ^(guò)糞肥鼓泡至少24h。不要攪拌樣品以避免起泡。如果仍然觀察到發(fā)泡，則應(yīng)在培養(yǎng)期間緩慢添加酸（例如滴加酸）。此后，移出糞肥培養(yǎng)瓶，清理并提取糞肥。CO2捕集阱也被移出，并針對(duì)額外捕獲的CO2進(jìn)行放射性計(jì)數(shù)。為了避免因氣體不斷變化而造成的干擾和污染，采樣應(yīng)從靠近出口的樣品開(kāi)始。注意：在向糞肥子樣品中添HCl前，必須驗(yàn)證受試物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物在酸性條件下是否穩(wěn)定。若不穩(wěn)定，則必須設(shè)置更多的試驗(yàn)組。注：如果轉(zhuǎn)化產(chǎn)物未知，則無(wú)法進(jìn)行穩(wěn)定性檢查?？梢赃M(jìn)行預(yù)試驗(yàn)（資料性附錄）D.1：報(bào)告示例-在液態(tài)糞肥中的厭氧轉(zhuǎn)化試驗(yàn)中測(cè)量出的放射性分布GB/TXXXXXXXXX—表D.GB/TXXXXXXXXX—時(shí)間/d母體物質(zhì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物礦化(CO2+CH4)NER不可提取的殘留物質(zhì)量平衡R1R2MeanR1R2MeanR1R2MeanR1R2MeanR1R2Mean091.097.094.0ndndndndndndndndnd91.097.094.0280.082.081.0ndndndndndndndndnd80.082.081.0575.076.075.5ndndndndndnd23.121.922.598.197.998.067.066.066.5ndndndndndnd25.224.725.092.290.791.560.059.059.5ndndndndndnd36.733.335.096.792.394.52753.055.054.0ndndndndndnd45.342.744.098.397.798.03549.051.050.02.2ndndnd36.733.935.387.986.287.15038.040.039.05.76.05.9ndndnd53.452.352.997.198.397.76533.034.033.59.7ndndnd47.545.946.791.389.690.57829.033.031.0ndndnd46.947.147.088.495.892.19034.030.032.0ndndnd44.943.744.388.382.285.3LOD0.3%0.5%0.3%0.5%-LOQ0.5%1.0%0.5%1.0%-GB/TXXXXX—XXXX（資料性附錄）糞肥基質(zhì)參數(shù)和DT50值的變異系數(shù)糞肥基質(zhì)參數(shù)與其他環(huán)境基質(zhì)例如土壤或沉積物相比，糞肥的基質(zhì)參數(shù)變化較小。盡管糞肥選擇多樣化，但方法開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證的數(shù)據(jù)顯示，基質(zhì)參數(shù)的范圍很窄。牛糞：干物質(zhì)：9.9±2.2%有機(jī)質(zhì)（Corg4.1±0.9%pH冬季（pHwinter）:7.3±0.4pH夏季（pHsummer）:6.9±0.2豬糞：干物質(zhì)：5.2±3.2%有機(jī)質(zhì)：2.1±1.3%pH:7.3±0.1DT50值FOCUS（2000）估算了不同土壤間的DT50的變異系數(shù)（COV）大約為100%。基于此，糞肥方法的開(kāi)發(fā)、驗(yàn)證研究和監(jiān)管研究的信息，獲取到的平均COV為38%。表E.1不同土壤和糞肥間的變異系數(shù) 20%-57%（n=9）相同的物質(zhì)EMA2018）GB/TXXXXX—XXXX參考文獻(xiàn)[1]WeinfurtnerK.(2010).Matrixparametersandstorageconditionsofmanure.UBA-Texte02/2011,ISSN1862-4804.Umweltbundesamt,Dessau-Ro?lau,1-54,http://www.uba.de/uba-info-medien-e/4054.html[2]JunkerT,AtorfC,BerknerS,DüringR-A,HenneckeD,HerrchenM,KonradiS,Merrettig-BrunsU,R?mbkeJ,WagnerJ,WeinfurtnerK(2020).Developmentofatestmethodfortransformationofveterinarypharmaceuticalsandbiocidesinanaerobicliquidmanure.EnvironmentalSciencesEurope32:39.[3]OECD(2002a).TestNo.307:AerobicandAnaerobicTransformationinSoil,OECDGuidelinesfortheTestingofChemicals,Section3,OECDPublishing,Paris,/10.1787/9789264070509-en.[4]OECD(2002b).TestNo.308:AerobicandAnaerobicTransformationinAquaticSedimentSystems,OECDGuidelinesfortheTestingofChemicals,Section3,OECDPublishing,Paris,/10.1787/9789264070523-en.[5]ISO(2021).ISO10390:ISO10390Soil,treatedbiowasteandsludge-DeterminationofpH.InternationalOrganizationforStandardization,Geneva,2021.[6]DIN(2001).DINEN12879:2001-02:Characterizationofsludges-Determinationofthelossonignitionofdrymass.DeutschesInstitutfürNormung,Berlin.[7]ISO(1995).ISO11261:Soilquality-Determinationoftotalnitrogen-ModifiedKjeldahlmethod.InternationalOrganizationforStandardization,Geneva,1995.[8]ISO(1984).ISO5664:Waterquality-Determinationofammonium-Distillationandtitrationmethod.InternationalOrganizationforStandardization,Geneva,1984.[9]ISO(2002).ISO11271:Soilquality-Determinationofredoxpotential-Fieldmethod.InternationalOrganizationforStandardization,Geneva,2002.[10]DIN(1984).DIN38404-6:1984-05:Germanstandardmethodsfortheexaminationofwater,wastewaterandsludge;physicalandphysico-chemicalparameters(groupC);determinationoftheoxidationreduction(redox)potential(C6).DeutschesInstitutfürNormung,Berlin,May1984.[11]DIN(2001).DINEN12880:2001-02:Characterizationofsludges-Determinationofdryresidueandwatercontent.DeutschesInstitutfürNormung,Berlin.[12]EFSA(2007).OpiniononarequestfromEFSArelatedtothedefaultQ10valueusedtodescribethetemperatureeffectontransformationratesofpesticidesinsoil.TheEFSAJournal622:1-32.[13]OECD(2002b).TestNo.308:AerobicandAnaerobicTransformation