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文檔簡介
免疫血清的制備免疫血清是一種含有高效價特異性抗體的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。通過注射抗血清也可以傳遞被動免疫,治療許多疾病前言免疫血清將抗原以不同途徑免疫動物可從動物血清中分離得到抗體,把這類含有抗體的血清稱為免疫血清或抗血清
免疫血清多價抗原多個B細胞克隆(致敏的B細胞)多克隆抗體抗血清制備流程免疫動物選擇免疫方案制定動物采血抗血清分離純化及鑒定抗血清的保存免疫動物選擇動物種系抗血清要求動物個體抗原的性質(zhì)選擇適齡、健壯、無感染性疾病,體重符合要求的健康動物,一般多選擇雄性動物抗原與免疫動物種屬差異越遠越好,親緣關系太近不易產(chǎn)生免疫應答蛋白質(zhì)類抗原對多數(shù)動物皆適合,常選用家兔和山羊R型抗血清適用于診斷試劑H型一般用作免疫治療免疫方案制定免疫原的劑量免疫途徑免疫間隔時間皮內(nèi)、皮下、肌肉、靜脈、腹腔、脾臟、淋巴結(jié)一般間隔10~20d為佳。兩次以后的每次間隔一般為7~10d一定范圍內(nèi),免疫原的用量越大,免疫反應越強,產(chǎn)生的抗體效價越高傷寒沙門菌O抗原免疫家兔的方案動物采血最常用的方法多用于家兔、綿羊山羊等動物靜脈采血時家兔可用耳靜脈;山羊可用頸靜脈此法多用于豚鼠大鼠等小動物技術(shù)要求高010203頸動脈放血法心臟采血法靜脈采血法抗血清分離采集的血液多采用在室溫自然凝固,然后防置37℃溫育1h,之后防置4℃冰箱中待凝塊收縮后分離血清抗血清純化①親和層析法②吸附劑方法①鹽析②凝膠過濾③離子交換和親和層析法抗血清純化特異性抗體的純化IgG類抗體的純化抗血清鑒定抗體效價的鑒定抗體特異性的鑒定抗體純度的鑒定抗體親和力的鑒定一般原則是顆粒性抗原用凝集試驗可溶性抗原用雙向瓊脂擴散試驗常用雙向免疫擴散法進行鑒定可采用免疫電泳、雙向瓊脂擴散試驗、SDS等方法鑒定常用ELISA、RIA和平衡透析法等進行測定抗血清保存4℃保存3~6個月-70℃~-20℃保存2~3年冷凍真空干燥保存4~5年03010202免疫方案的制定03動物采血04抗血清分離、純化和鑒定
小結(jié)01免疫動物的選擇05
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