檢驗(yàn)科血清胱抑素C測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號：JYK-3-SH-022版本/修訂號：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20110701第2頁共3頁編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清胱抑素C測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗(yàn)申請單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請：血清胱抑素C測定(縮寫CysC)；組合項(xiàng)目申請：腎功能測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定一天，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定3天。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時(shí)間超過1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3方法原理試劑中含有抗CysC多克隆抗體的膠體顆粒在546nm吸光度有最大吸收，當(dāng)和樣本中的CysC抗原發(fā)生凝集，在546nm吸光度發(fā)生變化，吸光度發(fā)生變化的幅度與CysC的濃度相關(guān)。根據(jù)工作曲線可以檢測樣本中的CysC含量。4試劑及其他用品4.1試劑：血清胱抑素C測定試劑盒，由北京利德曼生化股份有限公司出品。4.2試劑盒保存：未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內(nèi)穩(wěn)定14天。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開蓋的液體有沉淀，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.4試劑盒主要成分：R1：緩沖液（PH＝6.7）；R2：含有抗人CysC的抗體。5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1校準(zhǔn)品：與試劑配套的校準(zhǔn)品。5.2校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：非線性模式，6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。5.3校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時(shí)間不限。但在：①更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后，進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4校準(zhǔn)液重建方法：校準(zhǔn)液即開即用，無需特殊準(zhǔn)備。6質(zhì)控：換試劑定標(biāo)，試劑換批換瓶做標(biāo)本比對。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器。8標(biāo)本檢測步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測定→結(jié)果復(fù)核→報(bào)告。9主要分析參數(shù)參見說明書。10結(jié)果計(jì)算計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度的差值（A2－A1），建立標(biāo)準(zhǔn)液吸光度－濃度工作曲線。計(jì)算標(biāo)本的吸光度差值，并在工作曲線上讀取濃度值（mg/dL）。如標(biāo)本的吸光度值大于標(biāo)準(zhǔn)液的最大值，則需稀釋標(biāo)本后，重新測量11檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1結(jié)果的報(bào)告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2報(bào)告范圍：0.2-8mg/L，超過此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV＜8.0%；總CV＜10%。12.2線性范圍：0.2-8mg/L。12.3方法的有限性及干擾因素：內(nèi)源性干擾物溶血為3g/L、乳糜＜5000FTU、黃疸200mg/L、對測試結(jié)果無明顯影響。13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平男性0-51歲:0.63-1.25mg/L，女性0-51歲：0.54-1.15mg/L。51歲以上:0.60-1.55mg/L14臨床意義胱抑素C可由人體中所有的有核細(xì)胞產(chǎn)生,生成速度穩(wěn)定、不受炎癥、膽紅素、溶血、三酰甘油等影響,CysC分子量低和等電點(diǎn)高,能從腎小球自由濾過,并在近曲小管上皮細(xì)胞內(nèi)分解代謝.由于CysC的生成速度和血濃度穩(wěn)定,不受其他病理變化影響,腎臟是其唯一的濾過和代謝器官,因此可作為測定腎小球?yàn)V過率(GFR)的一種理想的內(nèi)源性指標(biāo).且隨著檢測方法的改進(jìn),已有大量研究證實(shí)CysC是優(yōu)于尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)的內(nèi)源性標(biāo)記物,而CysC與GFR的相關(guān)性比Scr與GFR的相關(guān)性更為顯著,是迄今為止基本滿足理想內(nèi)源性GFR標(biāo)志物要求的內(nèi)源性物質(zhì),是新近發(fā)展起來的評估腎功能的一種敏感性好、特異性高的指標(biāo),越來越受到廣大臨床工作者的重視.15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個(gè)測定結(jié)果，審核者對發(fā)出報(bào)告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與血尿素、其他反映腎功能的指標(biāo)如CR等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16無威脅生命的“緊急值”及報(bào)告規(guī)定17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.2生