高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)填空學(xué)案含答案

選修一生物技術(shù)實(shí)踐

專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

課題1果酒和果醋的制作

1.果酒制作的原理

(1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒，該過(guò)程用到的微生物是，

它的代謝類型是，與異化作用有關(guān)的方程有。

生活狀態(tài)：進(jìn)展發(fā)酵，產(chǎn)生大量。

(2)果酒制作條件

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來(lái)源是。

酵母菌生長(zhǎng)的最適溫度是；PH呈；

(3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是：酒精發(fā)酵過(guò)程中，隨著的提高，紅色葡萄皮的進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈色。

(4)在、的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其它微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。

2.果醋的制作原理

(1)果醋發(fā)酵菌種是，新陳代謝類型。

(2)當(dāng)氧氣和糖源充足時(shí)醋酸菌將糖分解成，當(dāng)糖源缺乏時(shí)醋酸菌將變?yōu)樵僮兂纱姿?，其反響式?/p>

3.操作過(guò)程應(yīng)注意的問(wèn)題

(1)為防止發(fā)酵液被污染，發(fā)酵瓶要用消毒。

(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留出大約的空間。

(3)制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在，時(shí)間控制在d左右，可通過(guò)對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)展及時(shí)的監(jiān)測(cè)。

(4)制葡萄醋的過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在，時(shí)間控制在d,并注意適時(shí)在充氣。

4.酒精的檢驗(yàn)

(1)檢驗(yàn)試劑:。

(2)反響條件及現(xiàn)象：在條件下，反響呈現(xiàn)。

5.制作果酒、果醋的實(shí)驗(yàn)流程

挑選葡萄一一一一

果酒果醋

P4旁欄思考題

1.你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗，為什么

應(yīng)該先沖洗葡萄，然后再除去枝梗，以防止除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的時(shí)機(jī)。

2.你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染

需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)展全面的考慮，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如：榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干

凈；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。

3.制作葡萄酒時(shí)，為什么要將溫度控制在18?25°C制作葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制在30?35°C

溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。20°C左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。

而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為30?35°C,因此要將溫度控制在30?35°C。

4.制葡萄醋時(shí)，為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣

醋酸菌是好氧菌，再將酒精變成醋酸時(shí)需要養(yǎng)的參與，因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。

P4:

A同學(xué)：每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開(kāi)瓶蓋；制醋時(shí)，再將瓶蓋翻開(kāi)，蓋上一層紗布，進(jìn)展葡萄醋的發(fā)酵。

來(lái)防止發(fā)酵液被污染，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌

B同學(xué)：分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲

的膠管與瓶身連接

充氣口：是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)展充氣用的；

排氣口：是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳的；

出料口：是用來(lái)取樣的。

排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)

閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接氣泵，輸入氧氣。

課題2腐乳的制作

1.制作原理

(1).經(jīng)過(guò)微生物的發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的和，脂肪被分解成和，因而更利于消化吸收。

(2).腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與，如、、、等，其中起主要作用的是。它是一種絲狀，常見(jiàn)、、、上。

(3).現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的條件下，將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上，這樣可以防止其他菌種的，保證產(chǎn)品

的質(zhì)量。

2.腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程：

讓豆腐長(zhǎng)出一一-密封腌制。

3.實(shí)驗(yàn)本卷須知

(1)在豆腐上長(zhǎng)出毛霉時(shí)，溫度控制在，自然條件下毛霉的菌種來(lái)自空氣中的。

(2)將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層加鹽，加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而，近瓶口的表層要。加鹽的目的是使豆腐塊

失水，利于，同時(shí)也能的生長(zhǎng)。鹽的濃度過(guò)低,；鹽的濃度過(guò)高,。

(3)鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在左右，它能微生物的生長(zhǎng)，同時(shí)也與豆腐乳獨(dú)特的形成有關(guān)。酒精含量過(guò)高,；

酒精含量過(guò)低，。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味，同時(shí)也有作用。

(4)瓶口密封時(shí)，最好將瓶口，防止瓶口污染。

P6旁欄思考題

1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí)，解釋豆腐長(zhǎng)白毛是若何一回事

豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。

2.王致和為什么要撒許多鹽，將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)

鹽能防止雜菌污染，防止豆腐腐敗。

3.你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎

讓豆腐長(zhǎng)出毛霉一加鹽腌制一密封腌制。

P7旁欄思考題

1.我們平常吃的豆腐，哪種適合用來(lái)做腐乳

含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳，不易成形。

2.吃腐乳時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮"。這層"皮”是若何形成的呢它對(duì)人體有害嗎它的作用是什

么

“皮〃是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐外表上生長(zhǎng)的菌絲(匍匐菌絲)，它能形成腐乳的“體〃，使腐乳成形?！捌ぁ▽?duì)人

體無(wú)害。

P8練習(xí)

1.腌制腐乳時(shí),為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量為什么在接近瓶口的外表要將鹽厚鋪一些

越接近瓶口，雜菌污染的可能性越大，因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量，在接近瓶口的外表，鹽要鋪厚一

些，以有效防止雜菌污染。

2.若何用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳(可以不看)

在酒和料上作變動(dòng)

紅腐乳：又稱紅方，指在后期發(fā)酵的湯料中，配以著色劑紅曲，釀制而成的腐乳。

白腐乳：又稱白方，指在后期發(fā)酵過(guò)程中，不添加任何著色劑，湯料以黃酒、白酒、香料為主釀制而成的腐乳，

在釀制過(guò)程中因添加不同的調(diào)味輔料，使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色，目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣方等品

種。

青腐乳：又稱青方，俗稱“臭豆腐〃，指在后期發(fā)酵過(guò)程中，以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳，具有特有的氣

味，外表呈青色。

醬腐乳：又稱醬方，指在后期發(fā)酵過(guò)程中，以醬曲(大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等)為主要輔料釀制而成的腐

乳。

課題3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量

1.乳酸菌代謝類型為，在情況狂下，將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛，在、、、內(nèi)都有分布。常見(jiàn)的乳

酸菌有和兩種，其中常用于生產(chǎn)酸奶。

2.亞硝酸鹽為，易溶于，在食品生產(chǎn)中用作。一般不會(huì)危害人體安康，但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達(dá)g時(shí)，會(huì)引起

中毒；當(dāng)攝入總量到達(dá)g時(shí)，會(huì)引起死亡。在特定的條件下，如、和的作用下，會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)一一亞硝胺，亞硝

胺對(duì)動(dòng)物有致畸和致突變作用。

3.泡菜制作大致流程：原料處理-一裝壇-一成品

(1)配制鹽水：清水和鹽的比例為，鹽水后備用。

(2)裝壇：蔬菜裝至?xí)r參加香辛料，裝至?xí)r加鹽水，鹽水要，蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中，保證壇內(nèi)環(huán)境。

(3)腌制過(guò)程種要注意控制腌制的、和。溫度過(guò)高、食鹽用量缺乏10%、過(guò)短，容易造成,。

4.測(cè)亞硝酸鹽含量的原理是。

將顯色反響后的樣品與濃度的進(jìn)展比較，可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

測(cè)定步驟：配定溶液-一制備樣品處理液一

P9旁欄思考題：

為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶

酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用?？股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L(zhǎng)，因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵

成酸奶。

P10旁欄思考題：

1.為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜，不宜多吃腌制蔬菜

有些蔬菜，入小白菜和蘿卜等，含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存

放太久時(shí)，蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物復(fù)原成亞硝酸鹽，危害人體安康。

2.為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜你認(rèn)為這層白膜是若何形成的

形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物，泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富，其外表氧氣含量也很豐富，

適合酵母菌繁殖。

P12練習(xí)：

2.你能總結(jié)果酒、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)

酵技術(shù)的共同特點(diǎn)嗎

果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵，

果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝，

腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類，

泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。

傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種，都為特定的菌種提供了良好的存在條件，最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的

組分，而是成分復(fù)雜的混合物。

專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1.根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為和。

2.培養(yǎng)基一般都含有、、、四類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)、以及的要求。

3.獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。

4.消毒是指

滅菌是指

5.日常生活中常用的消毒方法是，此外，人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)展消毒，如用、等。常用的滅菌方法有、、，此

外，實(shí)驗(yàn)室里還用或進(jìn)展消毒。

6.制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基的方法步驟是⑴，(2),(3),(4),⑸。

7.微生物接種的方法中最常用的是和。

平板劃線是指。

稀釋涂布平板法指。

8.菌種的保藏：

(1)臨時(shí)保藏：將菌種接種到試管的，在適宜的溫度下培養(yǎng)，長(zhǎng)成后，放入冰箱中保藏，以后每3—6個(gè)月，轉(zhuǎn)

移一次新的培養(yǎng)基。

缺點(diǎn)是：保存時(shí)間，菌種容易被或產(chǎn)生變異。

(2)長(zhǎng)期保存方法：法，放在冷凍箱中保存。

P15旁欄思考題：

無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的

無(wú)菌技術(shù)還能有效防止操作者自身被微生物感染。

P16旁欄思考題：

請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇適宜的方法。

(1)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿

(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管

(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手

(1)、(2)需要滅菌；(3)需要消毒。

P17倒平板操作的討論

1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么方法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度

可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)展倒平板了。

2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰

通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。

3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置

平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基外表的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基外表的水

分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎為什么

空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。

P18平板劃線操作的討論

1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)在劃線操作完畢時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎為什么

操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死

上次劃線完畢后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃

線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線完畢后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘

留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)展劃線

以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)場(chǎng)劃線

劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)場(chǎng)，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)

的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。

P19涂布平板操作的討論

涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)展。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)若何進(jìn)

展無(wú)菌操作

應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌〃。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管

要在酒精燈火焰周圍；等等。

P20六、課題成果評(píng)價(jià)

1.培養(yǎng)基的制作是否合格

如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1?2d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。

2.接種操作是否符合無(wú)菌要求

如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，則說(shuō)明接種操作是符合

要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說(shuō)明接種過(guò)程中，無(wú)菌操作還未到達(dá)要求，需要分析原因，再次練習(xí)。

3.是否進(jìn)展了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄

培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同，及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn)，并能觀察到其他一

些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。

P20練習(xí)

1.提示：可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)思考。例如，微生物的生長(zhǎng)需要水、空氣、適宜的溫度，食品

保存可以通過(guò)保持枯燥、真空的條件，以及冷藏等方法來(lái)阻止微生物的生長(zhǎng)。

2.提示：可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)展總結(jié)歸納。例如，這三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培

養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng)，但無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無(wú)菌的條件，而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。

3.提示：這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題，答案并不惟一，重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與，從不同的角度思考問(wèn)題。例如，

正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的，微生物學(xué)才可能開(kāi)展成為一門獨(dú)立的學(xué)科；巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的

方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn)，而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。

課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)

1.尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基特點(diǎn)：惟一氮源，按物理性質(zhì)歸類

為培養(yǎng)基。

2..PCR()是一種在體外將。此項(xiàng)技術(shù)的自動(dòng)化，要求使用耐高溫的DNA聚合酶。

3實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是：人為提供有利于生長(zhǎng)的條件(包括等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

4.選擇培養(yǎng)基是指。

5.常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基外表生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品

稀釋液中的。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)

在

的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)公式是。利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是。另外，也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用

方法。

6.一般來(lái)說(shuō)，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目。這是因?yàn)?/p>

o因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是活菌數(shù)來(lái)表示。

7.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對(duì)照實(shí)驗(yàn)是。滿足該條件的稱為，未滿足該條件的稱為。

8.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有:、、和，具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。

9.不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)和培養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，一般每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取

菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以。

10.土壤有“"之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中微生物、。

11.土壤中的微生物約是細(xì)菌，細(xì)菌適宜在酸堿度接近潮濕土壤中生長(zhǎng)。土壤中微生物的數(shù)量不同，別離不同微

生物采用的的稀釋度不同。

12.一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的、、和等方面。

13.在進(jìn)展多組實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)注意做好標(biāo)記，其目的是。

14.對(duì)所需的微生物進(jìn)展初步篩選，只是別離純化菌種的第一步，要對(duì)別離的菌種進(jìn)展一步的鑒定，還需要借助

的方法。

15.在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響中，細(xì)菌合成的將尿素分解成了。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性，PH。因此，我們可以通

過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基變化來(lái)判斷該化學(xué)反響是否發(fā)生。在以為唯一氮源的培養(yǎng)基中參加指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果PH

升高，指示劑將變，說(shuō)明該細(xì)菌能夠。

P22旁欄思考題

1.想一想，若何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)

答：統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按課本旁欄的公式

進(jìn)展計(jì)算。

P22

兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)IO,的培養(yǎng)集中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果:

1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230；2.第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個(gè)平板……

第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板，沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說(shuō)服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問(wèn)題，

涂布了3個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不

能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。

P22設(shè)置對(duì)照

A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同，可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同，二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。終究

是哪個(gè)原因，可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明。實(shí)驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)展實(shí)驗(yàn)，

如果結(jié)果與A同學(xué)一致，則證明A無(wú)誤；如果結(jié)果不同，則證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問(wèn)題。另一種

方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)展培養(yǎng)，作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過(guò)這個(gè)

事例可以看出，實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說(shuō)服力，對(duì)照的設(shè)置是必不可少的。

P24旁欄思考題

為什么別離不同的微生物要采用不同的稀釋度測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用

的稀釋范圍一樣嗎

這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量（單位：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧

細(xì)菌數(shù)約為2185萬(wàn)，放線菌數(shù)約為477萬(wàn)，霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。因此，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的

稀釋度進(jìn)展別離，同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。

P25結(jié)果分析與評(píng)價(jià)

1.培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落

對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇

培養(yǎng)基的數(shù)目，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。

2.樣品的稀釋操作是否成功

如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30?300的平板，則說(shuō)明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)展菌落的計(jì)數(shù)。

3.重復(fù)組的結(jié)果是否一致

如果學(xué)生選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異

的原因。

P26練習(xí)

2.提示：反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌，

接觸空氣后會(huì)死亡，因此別離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外，還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)展

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

課題3分解纖維素的微生物的別離

1.纖維素是類物質(zhì)，是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。

2.纖維素酶是一種酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即、和，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將

纖維二糖分解成。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)，同樣，也

可以為人類所利用。

3.篩選纖維素分解菌可以用法，這種方法能夠通過(guò)直接對(duì)微生物進(jìn)展篩選?？梢耘c像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成，

但并不和水解后的和發(fā)生這種反響。纖維素分解菌能產(chǎn)生分解纖維素，從而使菌落周圍形成。

4.別離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程圖如下：一梯度稀釋-一。

5.為確定得到的菌是否是纖維素分解菌，還學(xué)進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵和發(fā)酵。測(cè)定方法一般是

對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的進(jìn)展定量測(cè)定。

P28旁欄思考題

1.本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同

本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培

養(yǎng)基上，直接別離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其

他步驟基本一致。

2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌

由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土樣中獲

得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。

3.將濾紙埋在土壤中有什么作用你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深

將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌存在的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋

于深約10cm左右腐殖土壤中。

P29旁欄思考題

1.想一想，這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與缺乏你打算選用哪一種方法（兩種剛果紅染色法的比較）

方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點(diǎn)是操作繁瑣，參加剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反

響基本上是纖維素分解菌的作用。

方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問(wèn)題，缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以

使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反響。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖

維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是：有些微生物具有降解色素的能力，

它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。

2.為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮"所需的微生物

在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的

微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。

P29六、課題成果評(píng)價(jià)

1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落：對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)

基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。

2.別離的結(jié)果是否一致：由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量，因此最容易別離得到的是細(xì)菌。

但由于所取土樣的環(huán)境不同，學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的別離結(jié)果。

P30練習(xí)

2.答：流程圖表示如下。

土壤取樣一選擇培養(yǎng)（此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定）一梯度稀釋一將菌懸液涂布到

有特定選擇作用的培養(yǎng)基上一挑選單菌落一發(fā)酵培養(yǎng)

專題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)

課題1菊花的組織培養(yǎng)

1.有某種生物全套的任何一個(gè)活細(xì)胞，都具有發(fā)育成的能力，即每個(gè)生物細(xì)胞都具有。但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中

并不表現(xiàn)出來(lái)，這是因?yàn)樵跅l件下，通過(guò)基因的，構(gòu)成不同組織和器官。

2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的；培育作物；制作種子；培育作物以及細(xì)胞產(chǎn)物的等。

3.細(xì)胞分化：個(gè)體發(fā)育中細(xì)胞在上出現(xiàn)差異的過(guò)程。

4.愈傷組織是通過(guò)形成的，其細(xì)胞排列，高度

呈狀態(tài)的細(xì)胞。

5.植物組織培養(yǎng)的過(guò)程可簡(jiǎn)單表示為：

糖等。

8.激素：在培養(yǎng)基中需要添加和等植物激素，其、、等都影響結(jié)果

9.環(huán)境條件：PH、、等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為，溫度為，光照條件為。

10.配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時(shí)根據(jù)母液的，計(jì)算用量，并加稀釋。

11.配制培養(yǎng)基：應(yīng)參加的物質(zhì)有瓊脂、、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用定容到毫升。在菊花

組織培養(yǎng)中，可以不添加，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。

12.滅菌：采取的滅菌方法是。

13.發(fā)酵操作

13.1前期準(zhǔn)備：用消毒工作臺(tái)，點(diǎn)燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進(jìn)展，器械使用前后都要用火焰灼

燒。

13.2接種操作：接種過(guò)程中插入外植體時(shí)朝上，每個(gè)錐形瓶接種個(gè)外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似之處是。

13.3培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該放在中進(jìn)展，并定期進(jìn)展消毒，保持適宜的和。

13.4移栽前應(yīng)先翻開(kāi)培養(yǎng)瓶的，讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到等環(huán)境中生

活一段時(shí)間，進(jìn)展壯苗。最后進(jìn)展露天栽培。

課題成果評(píng)價(jià)

（一）對(duì)接種操作中污染情況的分析

接種3?4d后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請(qǐng)學(xué)生適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染率，分析接種操

作是否符合無(wú)菌要求。

（二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化

觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織，記錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基后愈傷組織進(jìn)一步分

化成根和芽的比例和時(shí)間。

（三）是否進(jìn)展了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄

做好統(tǒng)計(jì)和對(duì)照，填好結(jié)果記錄表，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。從實(shí)驗(yàn)的第一步開(kāi)場(chǎng)就要求學(xué)生做好實(shí)驗(yàn)記錄，可以

讓學(xué)生分組配制不同培養(yǎng)基，如誘導(dǎo)愈傷或直接分化叢芽的培養(yǎng)基，然后做不同配方的比較。

（四）生根苗的移栽是否合格

生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系外表的培養(yǎng)基，又不能傷及根系。一般使用無(wú)土栽培的方法。培養(yǎng)基

質(zhì)要提前消毒，可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的高鎰酸鉀，并用塑料薄膜覆蓋12ho掀開(kāi)塑料薄膜后24h才能

移栽。新移栽的組培苗要在溫室過(guò)渡幾天，等壯苗后再定植大田或進(jìn)展盆栽。學(xué)生可以在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率,

看看移栽是否合格。

答案和提示

（一）旁欄思考題

1.你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同

答：微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓；甘氨

酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)

基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量

元素和微量元素兩大類。

2.你打算做幾組重復(fù)你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎

答：教師可以安排學(xué)生分組，做不同的材料或配方，最后分別匯報(bào)成果。但每種材料或配方至少要做一組以上的

重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說(shuō)明培養(yǎng)

基制作合格，沒(méi)有被雜菌污染。

（二）練習(xí)

1.答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同

樣適合于某些微生物的生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄,

因此要進(jìn)展嚴(yán)格的無(wú)菌操作。

2.答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)展組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和

再分化。

課題2月季的花藥培養(yǎng)

①?gòu)幕ㄋ巵?lái)看，應(yīng)中選擇（初花期、盛花期、晚花期）的花藥；

②從花粉來(lái)看，應(yīng)中選擇（四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期）的花粉;

③從花蕾來(lái)看，應(yīng)中選擇（完全未開(kāi)放、略微開(kāi)放、完全盛開(kāi)）的花蕾。

7.選擇花藥時(shí)一般通過(guò)確定花粉發(fā)育時(shí)期，此時(shí)需要對(duì)花粉細(xì)胞核進(jìn)展染色，最常用的染色劑是和，它們分別可以

將細(xì)胞核染成色和色。

8.在使用焙花青一倍機(jī)溶液時(shí)，需要首先將花藥用處理20min。該試劑的配制方法是將按體積比為的比例混合均勻。

9.消毒后的花蕾，要在條件下除去花萼、花瓣。剝?nèi)』ㄋ帟r(shí)，一是注意不要損傷花藥，原因是；二是要徹底除去花絲,

原因是。

10.剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到上。每個(gè)培養(yǎng)瓶接種個(gè)花藥?；ㄋ幣囵B(yǎng)利用的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基，pH為，溫度為。C,幼苗

形成之前（需要、不需要）光照。在花藥培養(yǎng)基中，用量最高的激素是；在誘導(dǎo)叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中，用量最高

的激素是；在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中，用量最高的激素是。

11.培養(yǎng)20—30d后，花藥開(kāi)裂，長(zhǎng)出或釋放出胚狀體。前者還要轉(zhuǎn)移到上進(jìn)展分化培養(yǎng)成再生植株；后者要盡快并

轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。通過(guò)愈傷組織形成的植株，常常會(huì)出現(xiàn)的變化，因而需要鑒定和篩選。

課題成果評(píng)價(jià)

（-）選材是否恰當(dāng)

選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。學(xué)生應(yīng)學(xué)會(huì)通過(guò)顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。

（二）無(wú)菌技術(shù)是否過(guò)關(guān)

如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，說(shuō)明某些操作步驟，如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問(wèn)題。

（三）接種是否成功

如果接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體，花藥培養(yǎng)的第一步就成功了。要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便愈傷組織

或胚狀體進(jìn)一步分化成再生植株。

答案和提示

（一）旁欄思考題

為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難

答：花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來(lái)困難。

（二〕練習(xí)

1.答：F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。如果運(yùn)用常規(guī)育種方法，將F2代中的紫色甜玉米

與白色甜玉米（aasusu）進(jìn)展測(cè)交，可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣，耗時(shí)也較長(zhǎng),

需要至少三年的選種和育種時(shí)間。如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù)，在F1代產(chǎn)生的花粉中就可能有Asu的組合，再將花粉植

株進(jìn)展染色體加倍，就可以直接得到紫色甜玉米的純合體（AAsusu）o這種方法可以大大縮短育種周期。

2.答：植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的一樣之處是：培養(yǎng)基配制方法、無(wú)菌技術(shù)及接種操作等基本一樣。

兩者的不同之處在于：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先摸索時(shí)期適宜的花蕾；花藥裂開(kāi)后釋放出的愈傷組織或胚狀

體也要及時(shí)更換培養(yǎng)基；花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。

「概念：

原理：細(xì)胞的全能性＜根第題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)

（一）DNA的粗提取與鑒定

'條件:

1.實(shí)驗(yàn)原理脫分化再分化

提取生物大分橫儆1僦鬼基本過(guò)外植體-----A愈傷組織-----a胚狀體一^幼苗。對(duì)于DNA的粗

提取而籥聲庭要利用.與；外植體的選箸在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA,去除其他成分。

（1）DN^^溶解性

①DNA1營(yíng)養(yǎng)、林媾簟

溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使—

溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反

②DNA正溶二溶液，但是細(xì)胞9的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步

1溫度、pH、光照等

駕'DNA對(duì)臂實(shí)檄輯很洗輸闌的耐赭愫基?外植體消毒一?接種一?培養(yǎng)一?移栽一?栽培

蛋曾臀能水短_________，但是對(duì)__________沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80℃的高溫，而DNA在.

專為會(huì)變，胸滁臻勒nw灘蹄發(fā)育：花粉取郵腑隗㈱a眨小抱子母細(xì)胞一四分體時(shí)期一

",W遍比單核期一雙核期一精子

3J鑒定

月

季產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑:

的脫分化分化

花花藥中的花粉----------胚狀體一一叢芽誘導(dǎo)人，

藥-----―生根移栽

再分化

培花藥中的花粉刀’-愈傷組織

*-叢芽

在________條件下，DNA遇_____會(huì)被染成—色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

(1)實(shí)驗(yàn)材料的選取

但凡含有的生物材料都可以考慮，但是使用的生物組織，成功的可能性更大。

(2)破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液

破碎動(dòng)物細(xì)胞：如在雞血細(xì)胞液中參加一定量的，同時(shí)用攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可。破碎植物

細(xì)胞(如洋蔥)，需在切碎的洋蔥中參加一定的和，進(jìn)展充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液。

①參加蒸儲(chǔ)水作用：蒸儲(chǔ)水對(duì)于雞血細(xì)胞來(lái)說(shuō)是一種液體，使血細(xì)胞，再加上攪拌的機(jī)械作用，

加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂)，從而釋放出DNAo

②參加洗滌劑的作用是：洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解,有利于的釋放；參加食鹽的作用是：

溶解o

③如果研磨不充分，會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的釋放不完全，提取的DNA量變,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致看不

到、用二苯胺鑒定不顯示等。

(3)去除濾液中的雜質(zhì)

①方案一：利用DNA在不同濃度NaCl溶液中不同，通過(guò)控制去除雜質(zhì)。

②方案二：根據(jù)酶的專一性，利用木瓜蛋白酶分解，而不分解;

③方案三：利用DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，從而使變性，與別離。

(4)DNA的析出與鑒定

①DNA的析出：將處理后的溶液過(guò)濾，參加與濾液體積相等、冷卻的，靜置2?3min,溶液中會(huì)出現(xiàn)

，這就是粗提取的DNA。

②DNA的鑒定：將白色絲狀物用的NaCl溶液再溶解，參加4ml的,混合均勻后，在__________

—條件下，溶液被染成_______色。

3.本卷須知

(1)以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，需要參加檸檬酸鈉防止________________

(2)要提取洋蔥等的DNA時(shí)，參加洗滌劑后，動(dòng)作要,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟地操作。

(3)參加酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要,以免,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。

(4)二苯胺試劑要,否則會(huì)影響鑒定的效果。

(5)當(dāng)NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時(shí)，隨濃度的升高，DNA的溶解度；當(dāng)NaCl溶

液濃度高于0.14mol/L時(shí)，隨濃度升高，DNA的溶解度。

專題六植物有效成分的提取

課題1植物芳香油的提取

【導(dǎo)學(xué)誘思】

1.植物芳香油的來(lái)源

天然香料的主要來(lái)源是和。動(dòng)物香料主要來(lái)源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等，植物香料的來(lái)源更為廣泛。植物芳

香油可以從大約50多個(gè)科的植物中提取。例如，工業(yè)生產(chǎn)中，玫瑰花用于提取，樟樹(shù)樹(shù)干用于提取。提取出的植物芳

香油具有很強(qiáng)的，其組成也，主要包括及其

思考：你能說(shuō)出一些用于提取某些植物芳香油的器官嗎并分別可提取哪種芳香油

2.植物芳香油的提取方法

植物芳香油的提取方法有、和等。具體采用那種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定。是植物芳香油提取的常用方

法，它的原理是。根據(jù)蒸餌過(guò)程中的位置，可以將水蒸氣蒸儲(chǔ)法劃分為、和。其中，水中蒸僧的方法對(duì)于有些原料不

適用，如柑橘和檸檬。這是因?yàn)榈葐?wèn)題。因此，柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用法。

植物芳香油不僅，而且易溶于，如石油酸、酒精、乙醛和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸儲(chǔ)的原料，可以考慮使用

法。萃取法是將的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后，只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，就可以獲得純潔的了。但是，用于萃取的

有機(jī)溶劑必須,，否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。

3、玫瑰精油的提取

玫瑰精油是制作的主要成分，能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)，難溶于，易溶于，能隨一同蒸儲(chǔ)，通

常采用法中的法。提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程、、、、、。

思考：在提取過(guò)程中，若何對(duì)乳濁液的處理和玫瑰液的回收

4、橘皮精油的提取

從橘皮中提取的，主要成分為，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。橘皮精油主要儲(chǔ)藏在局部，由于橘皮精油的有效成分在用

水蒸氣蒸儲(chǔ)時(shí)會(huì)發(fā)生局部水解，使用水中蒸儲(chǔ)法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問(wèn)題，所以一般采用法。

具體的流程是、、、、、、。

實(shí)驗(yàn)案例

案例一玫瑰精油的提取

5月上、中旬是玫瑰的盛開(kāi)期，最好是選用當(dāng)天采摘的鮮玫瑰花。將花瓣用清水沖洗，去掉上面的灰塵等雜質(zhì)，

瀝干水分。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，從玫瑰花中提取玫瑰精油可采取水中蒸儲(chǔ)法。本實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。

1.稱取50g玫瑰花瓣，放入500mL的圓底燒瓶中，參加200mL蒸儲(chǔ)水。按教科書(shū)圖6-2所示安裝蒸儲(chǔ)裝置。蒸

像裝置包括：鐵架臺(tái)兩個(gè)、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸饋瓶、橡膠塞、蒸儲(chǔ)頭、溫度計(jì)、直型冷凝管、接液管、錐形瓶，以

及連接進(jìn)水口和出水口的橡皮管。所有儀器必須事先枯燥，保證無(wú)水。整套蒸儲(chǔ)裝置可分為左、中、右三局部，其中

左邊的局部通過(guò)加熱進(jìn)展蒸儲(chǔ)，中部將蒸儲(chǔ)物冷凝，右邊的局部用來(lái)接收。安裝儀器一般都按照自下而上、從左到右

的順序。拆卸儀器的順序與安裝時(shí)相反。具體安裝順序和方法如下。

(1)固定熱源——酒精燈。

(2)固定蒸儲(chǔ)瓶，使其離熱源的距離如教科書(shū)中圖6-2所示，并且保持蒸儲(chǔ)瓶軸心與鐵架臺(tái)的水平面垂直。

(3)安裝蒸儲(chǔ)頭，使蒸儲(chǔ)頭的橫截面與鐵架臺(tái)平行。

(4)連接冷凝管。保證上端出水口向上，通過(guò)橡皮管與水池相連；下端進(jìn)水口向下，通過(guò)橡皮管與水龍頭相連。

(5)連接接液管(或稱尾接收〕。

(6)將接收瓶瓶口對(duì)準(zhǔn)尾接收的出口。常壓蒸儲(chǔ)一般用錐形瓶而不用燒杯作承受器，接收瓶應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前稱重，并

做好記錄。

(7)將溫度計(jì)固定在蒸儲(chǔ)頭上，使溫度計(jì)水銀球的上限與蒸儲(chǔ)頭側(cè)管的下限處在同一水平線上。

2.蒸儲(chǔ)裝置安裝完畢后，可以在蒸儲(chǔ)瓶中加幾粒沸石，防止液體過(guò)度沸騰。翻開(kāi)水龍頭，緩緩?fù)ㄈ肜渌?，然后開(kāi)

場(chǎng)加熱。加熱時(shí)可以觀察到，蒸儲(chǔ)瓶中的液體逐漸沸騰，蒸氣逐漸上升，溫度計(jì)讀數(shù)也略有上升。當(dāng)蒸氣的頂端到達(dá)

溫度計(jì)水銀球部位時(shí)，溫度計(jì)讀數(shù)急劇上升。在整個(gè)蒸儲(chǔ)過(guò)程中，應(yīng)保證溫度計(jì)的水銀球上常有因冷凝作用而形成的

液滴?？刂普魞?chǔ)的時(shí)間和速度，通常以每秒1?2滴為宜。蒸儲(chǔ)完畢，應(yīng)先撤出熱源，然后停頓通水，最后拆卸蒸儲(chǔ)裝

置，拆卸的順序與安裝時(shí)相反。

3.收集錐形瓶中的乳白色的乳濁液，向錐形瓶中參加質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氯化鈉溶液，使乳化液分層。然后將

其倒入分液漏斗中，用分液漏斗將油層和水層完全分開(kāi)。翻開(kāi)頂塞，再將活塞緩緩旋開(kāi)，放出下層的玫瑰精油，用接

收瓶收集。向接收瓶中參加無(wú)水硫酸鈉，吸去油層中含有的水分，放置過(guò)夜。

為了更好地將油、水兩層液體別離，操作時(shí)應(yīng)注意正確使用分液漏斗。分液漏斗的使用方法如下。

(1)首先把活塞擦干，為活塞均勻涂上一層潤(rùn)滑脂，注意切勿將潤(rùn)滑脂涂得太厚或使?jié)櫥M(jìn)入活塞孔中，以免

污染萃取液。

(2)塞好活塞后，把活塞旋轉(zhuǎn)幾圈，使?jié)櫥植季鶆?。并用水檢查分液漏斗的頂塞與活塞處是否滲漏，確認(rèn)不

漏水后再使用。

(3)將分液漏斗放置在大小適宜的、并已固定在鐵架臺(tái)上的鐵圈中，關(guān)好活塞。將待別離的液體從上部開(kāi)口處倒

入漏斗中，塞緊頂塞，注意頂塞不能涂潤(rùn)滑脂。

(4)取下分液漏斗，用右手手掌頂住漏斗頂塞并握住漏斗頸，左手握住漏斗活塞處，大拇指壓緊活塞，將分液漏

斗略傾斜，前后振蕩(開(kāi)場(chǎng)振蕩時(shí)要慢)。

(5)振蕩后，使漏斗口仍保持原傾斜狀態(tài)，左手仍握在漏斗活塞處，下部管口指向無(wú)人處，用拇指和食指旋開(kāi)活

塞，使其釋放出漏斗內(nèi)的蒸氣或產(chǎn)生的氣體，以使內(nèi)外壓力平衡，這一步操作也稱做“放氣”。

(6)重復(fù)上述操作，直至分液漏斗中只放出很少的氣體時(shí)為止。再將分液漏斗劇烈振蕩2?3min,然后將漏斗

放回鐵圈中，待液體靜置分層。

案例二橘皮精油的提取

課前準(zhǔn)備

在實(shí)驗(yàn)前一天，教師需要準(zhǔn)備新鮮的、沒(méi)有霉?fàn)€的橘皮，用量可根據(jù)實(shí)驗(yàn)人數(shù)來(lái)決定。用清水沖洗橘皮，去掉灰

塵等雜質(zhì)，瀝干水分后，將橘皮攤放在枯燥通風(fēng)處。將晾干的橘皮浸泡在pH大于12、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%?8%的石灰水中，

時(shí)間為16?24h,中間翻動(dòng)2?3次。浸泡好的橘皮呈黃色、無(wú)白芯、稍硬、脆而不斷、具有彈性。這樣的橘皮在壓

榨時(shí)不易打滑，橘油的噴射力強(qiáng)；壓榨后的殘?jiān)暑w粒狀，殘?jiān)械暮康?，黏稠度不太高，過(guò)濾時(shí)比較順利，不

易堵塞篩孔。

提取橘皮精油的具體步驟如下。

1.將浸泡后的橘皮，用流動(dòng)的水漂洗，洗凈后撈起、瀝干。切記一定要將橘皮徹底沖洗干凈。然后將橘皮粉碎至

3mm大小，放入家用榨汁機(jī)或手動(dòng)壓榨機(jī)中粉碎。粉碎時(shí)參加與橘皮同質(zhì)量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25%的小蘇打和質(zhì)量分?jǐn)?shù)

為5%的硫酸鈉溶液，并調(diào)節(jié)pH為7?8。

2.在榨出的油水混合液中參加明磯，使之沉淀并變澄清，然后用布袋過(guò)濾，除去糊狀殘?jiān)?。再將得到的混合物?/p>

用6000r/min?8000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)展高速離心。在正常情況下，離心后獲得的香精油將是澄清透明的。

3.別離出的香精油往往帶有少量水分和蠟質(zhì)等雜質(zhì)，為了進(jìn)一步除去雜質(zhì)，可以將別離的產(chǎn)品放在5℃~10℃

的冰箱中，靜置5?7d,讓雜質(zhì)與水下沉。然后用吸管吸出上層澄清的油層，再通過(guò)墊有濾紙或石棉紙的漏斗進(jìn)展減

壓抽濾，得到黃色油狀的橘皮精油。

課題成果評(píng)價(jià)

(-)是否提取出了植物精油

觀察學(xué)生提取出的玫瑰精油或橘皮精油，從顏色、氣味等方面來(lái)評(píng)價(jià)所提取的精油的純度和質(zhì)量。從玫瑰花提取

的芳香油是淺黃色至黃色的液體，并帶有甜韻的玫瑰香；從橘皮提取的橘皮精油無(wú)色透明，具有誘人的橘香味。本課

題只是對(duì)兩種精油進(jìn)展了初步的提取，其中仍然含有大量的雜質(zhì)。

(二)出油率的計(jì)算

根據(jù)教科書(shū)提供的公式計(jì)算出油率。如果出油率高，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)合理；如果出油率低，教師可以幫助學(xué)生

從實(shí)驗(yàn)方法的選擇、實(shí)驗(yàn)過(guò)程的操作等各方面分析原因，改進(jìn)后再作嘗試。

答案和提示

練習(xí)

1.答：植物芳香油一般都是由2?3種芳香油混合調(diào)配而成的，其中的基底油常取自植物的種子或果實(shí)，比方胡桃

油、甜杏油?；子团c其他芳香油調(diào)配在一起，能夠加強(qiáng)成效。

從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱為“液體黃金”，是世界香料工業(yè)不可取代的原料，多用于制造高級(jí)香水等化裝品。

提取出的玫瑰油不含有任何添加劑或化學(xué)原料，是純天然的護(hù)膚品，具有極好的抗衰老和止癢作用，能夠促進(jìn)細(xì)胞再

生、防止肌膚老化、平撫肌膚細(xì)紋，還具有使人放松、愉悅心情的成效。

杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素，是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑。

熏衣草精油取自熏衣草花，具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用，此外它還具有降壓、止痛、促進(jìn)細(xì)胞再生的功

能，可以用于治療燙傷和蚊蟲(chóng)叮咬、預(yù)防和改善脫發(fā)。

檸檬精油取自檸檬果皮，具有消除緊張、焦慮、振奮精神的作用，可用于治療神經(jīng)衰弱、關(guān)節(jié)炎，還具有促進(jìn)血

液循環(huán)、殺菌止痛、平衡油脂分泌、舒緩肌膚老化、滋養(yǎng)頭發(fā)的成效。

茶樹(shù)精油具有新鮮、強(qiáng)烈的藥草香味，能改善毛孔阻塞，凈化肌膚，抗感染，對(duì)治療青春痘有奇效。它也能消除

疲勞、緩解壓力。

天竺葵精油能收斂皮膚，平衡、調(diào)理、潤(rùn)滑中干性皮膚和敏感性皮膚，改善橘皮樣表皮，還有助于恢復(fù)精力，平

緩心情。

茉莉精油能防止肌膚老化，對(duì)中干性皮膚和敏感性皮膚具有良好的保濕和滋潤(rùn)作用，尤其對(duì)女性的妊娠紋和內(nèi)分

泌有獨(dú)特的改善效果。

橙花精油具有清新的水果香味，不但能使人鎮(zhèn)靜，還能防止中干性肌膚的老化現(xiàn)象發(fā)生，給肌膚賦予青春活力，

促進(jìn)皮膚再生。

2.建議：教師可以組織學(xué)生進(jìn)展一次社會(huì)調(diào)查，并要求學(xué)生寫(xiě)出詳細(xì)的調(diào)查報(bào)告。

課題2胡蘿卜素的提取

【導(dǎo)學(xué)誘思】

1.胡蘿卜素是，化學(xué)性質(zhì)比較，不溶于水，微溶于，易溶于等有機(jī)溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃

分為a、B、Y三類。是其中最主要的組成成分。與8-胡蘿卜素化學(xué)構(gòu)造類似的胡蘿卜素約有100多種,它們大

多存在于蔬菜中。等蔬菜是提取天然6-胡蘿卜素的原料。

工業(yè)生產(chǎn)上，提取天然8-胡蘿卜素的方法主要有三種，一是從中提取，二是從中獲得，三是利用生產(chǎn)。本課

題所提供的方法只能提取胡蘿卜素的，假設(shè)要獲得。-胡蘿卜素，還需要進(jìn)一步的。

2.提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)流程有........

思考：影響萃取的因素有哪些

實(shí)驗(yàn)案例

提取胡蘿卜素的主要步驟如下。

1.選取500g新鮮的胡蘿卜，用清水洗凈，瀝干、切碎，然后在40C的烘箱中烘干，時(shí)間約需2h,將枯燥后的

胡蘿卜進(jìn)一步粉碎過(guò)篩。注意胡蘿卜的粉碎一定要徹底。

2.將樣品放入500mL圓底燒瓶中，參加200mL石油酸混勻，按教科書(shū)中圖6-7所示安裝萃取回流裝置，萃取30

min,然后過(guò)濾萃取液，除去固體物質(zhì)。

3.按教科書(shū)中圖6-2所示安裝蒸儲(chǔ)裝置，對(duì)萃取的樣品進(jìn)展?jié)饪s。具體的操作步驟及本卷須知見(jiàn)本專題課題1的

案例1=

4.收集承受器中的樣品，觀察樣品的顏色和氣味，并通過(guò)紙層析進(jìn)展鑒定。層析時(shí)注意選擇干凈的濾紙，為了防

止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染，應(yīng)盡量防止用手直接接觸濾紙，可以帶手套進(jìn)展操作。點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注意點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大(直

徑應(yīng)小于0.5cm),如果用吹風(fēng)機(jī)吹干，溫度不宜過(guò)高，否則斑點(diǎn)會(huì)變黃。將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀，卷紙時(shí)注意濾

紙的兩邊不能相互接觸，以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，溶劑前沿不齊，影響結(jié)果。

課題成果評(píng)價(jià)

(-)確定提取胡蘿卜素的最正確方案

在進(jìn)展本實(shí)驗(yàn)時(shí)，教師可以將學(xué)生分組，每組可以采用不同的有機(jī)溶劑和時(shí)間進(jìn)展萃取，比較各組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，

確定提取胡蘿卜素的最正確方案。

(二)是否出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的層析帶

如果萃取樣品中出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶，說(shuō)明提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)成功。由于提取物中含有雜質(zhì)，萃取

樣品的顏色可能比標(biāo)準(zhǔn)樣品的顏色淺，我們也可以通過(guò)顏色的比較，初步確定提取的胡蘿卜素的量。

參考答案

專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

課題1果酒和果醋的制作

1.(1)酵母菌兼性厭氧型有氧時(shí)C6Hl2O6+6H2O+6O2T6co2+I2H2O+能量,無(wú)氧時(shí)C6Hl2。6T2c2H5OH+2c02+

能量,

酒精

(2)附著于葡萄品皮上的野生型酵母菌20℃酸性(3)酒精度色素深紅

(4)缺氧酸性

2.(1)醋酸菌需氧型

(2)醋酸乙醇乙醛C2H5OH+O2^CH3COOH+H2O

3.(1)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精

(2)1/3

(3)18?25℃10—12天

14)30—35℃7—8天通氣口

4.(1)重倍酸鉀

(2)酸性灰綠色

5.沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵

課題2腐乳的制作

1.(1).肽氨基酸甘油脂肪酸

(2).青霉酵母曲霉毛霉毛霉真菌土壤水果蔬菜谷物

(3).無(wú)菌毛霉污染

2.毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶

3.（1）15—18℃毛霉泡子（2）增加鹽量鋪厚一些成形抑制其它微生物缺乏以抑制微生物的生長(zhǎng)，可導(dǎo)致豆腐腐

敗變質(zhì)影響腐乳的口味（3）12%抑制腐乳成熟時(shí)間延長(zhǎng)缺乏以抑制微生物的生長(zhǎng)，導(dǎo)致豆腐腐敗防腐殺菌（4）通過(guò)

酒精燈的火焰

課題3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量

1.異氧厭氧型無(wú)氧空氣土壤植物體外表腸道乳酸鏈球菌乳酸桿菌乳酸桿菌

2.白色粉末水添加劑0.3-0.53適宜溫度PH一定的微生物

3.鹽水配制封壇（1）4：1煮沸冷卻（2）一半八成滿沒(méi)過(guò)全部菜料注滿水無(wú)氧（3）時(shí)間溫度

食鹽的用量腌制時(shí)間細(xì)菌大量繁殖亞硝酸鹽含量增加

4.在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反響后，與N-1一秦基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅

染料制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液比色

專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1.液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基

2,水碳源氮源無(wú)機(jī)鹽PH特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氧氣

3.防止外來(lái)雜菌的污染

4.使用較為溫和的方法僅殺死物體外表或內(nèi)部一局部對(duì)人體有危害的微生物使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外微

生物，包括芽抱和抱子

5.煮沸消毒酒精氯氣灼燒滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌紫外線化學(xué)藥物

6.計(jì)算稱量融化滅菌倒平板

7.平板劃線法稀釋涂布法通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基外表連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)

基外表將菌液進(jìn)展一系列梯度稀釋，并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)展培養(yǎng)

8.（1）固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)菌落4C較短污染（2）甘油管藏法一20C

課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)

1.JR酶氨和CO尿素固體

2.DNA多聚酶鏈?zhǔn)椒错懮倭緿NA大量復(fù)制的技術(shù)

3.目的菌株?duì)I養(yǎng)、溫度、PH等

4.允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其