2025高考生物備考教案動物細(xì)胞工程

課時4動物細(xì)胞工程考點1動物細(xì)胞培養(yǎng)和干細(xì)胞的應(yīng)用1.動物細(xì)胞培養(yǎng)（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、條件和過程辨析細(xì)胞貼壁和接觸抑制（1）細(xì)胞貼壁是指體外培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上生長的現(xiàn)象；接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞通常會停止分裂增殖的現(xiàn)象。（2）細(xì)胞貼壁生長對培養(yǎng)瓶的要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。（3）應(yīng)對接觸抑制現(xiàn)象的方法是將貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)比較項目動物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)理論基礎(chǔ)細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性取材新鮮的組織植物的器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)基狀態(tài)[10]液體固體培養(yǎng)基成分糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素等過程原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)脫分化、再分化細(xì)胞分裂、生長、分化特點貼壁生長、接觸抑制脫分化形成愈傷組織，再分化形成根、芽等結(jié)果[11]子代細(xì)胞產(chǎn)生新個體相同點①都需人工條件下的無菌操作；②都需要適宜的溫度、pH等條件；③都進行有絲分裂，都不涉及減數(shù)分裂2.干細(xì)胞的類型及其應(yīng)用（1）干細(xì)胞的類型類型胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）分布或來源[12]早期胚胎成體組織或器官中，包括造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、精原干細(xì)胞等最初通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞獲得，也可誘導(dǎo)已分化的B細(xì)胞、T細(xì)胞產(chǎn)生特點具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至[13]個體的潛能具有組織特異性，只能分化為[14]特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個體的能力不涉及倫理問題，可以避免免疫排斥反應(yīng)分化程度胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）＜成體干細(xì)胞＜誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）（2）干細(xì)胞的應(yīng)用類型應(yīng)用造血干細(xì)胞治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病神經(jīng)干細(xì)胞治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，如帕金森病、阿爾茨海默病等誘導(dǎo)多能干細(xì)胞治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血，在治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得新進展基礎(chǔ)自測1.動物細(xì)胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多為動物的受精卵。（×）2.多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，其培養(yǎng)液所需的適宜pH為6.8～7.0。（×）3.幼齡動物的細(xì)胞比老齡動物的細(xì)胞更容易進行動物細(xì)胞培養(yǎng)。（√）4.動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是動物細(xì)胞的全能性。（×）5.培養(yǎng)動物細(xì)胞的第一代（即第一次細(xì)胞增殖）被稱為原代培養(yǎng)。（×）6.肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5％的CO2刺激細(xì)胞呼吸。（×）7.在一定條件下，胚胎干細(xì)胞能分化成成年動物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞。（√）8.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。（√）情境應(yīng)用自身皮膚移植是治療創(chuàng)傷、燒傷及其他因素所致皮膚缺損的常用方法。這種治療方式，需要先取患者自身細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)獲得自體健康皮膚，再移植到創(chuàng)面上。培養(yǎng)自身細(xì)胞時，需要進行原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，進行傳代培養(yǎng)的原因是什么？提示貼壁細(xì)胞在生長增殖時會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，因此需要進行傳代培養(yǎng)。深度思考1.在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，合成培養(yǎng)基中加入血清的原因是什么？用胰蛋白酶處理組織塊使其分散成單個細(xì)胞的目的是什么？提示加入血清的原因是血清中含有多種未知的促細(xì)胞生長因子以及其他活性物質(zhì)，可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。用胰蛋白酶處理組織塊使其分散成單個細(xì)胞，可以使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，保證細(xì)胞所需的營養(yǎng)供應(yīng)，以及細(xì)胞內(nèi)代謝物及時排出。2.傳代培養(yǎng)時為什么不選用胃蛋白酶分散細(xì)胞？提示多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，此環(huán)境下胃蛋白酶失去活性。3.為什么說iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景要優(yōu)于ES細(xì)胞？提示ES細(xì)胞必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題，限制了其在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可以來自病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。4.科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細(xì)胞，嘗試說出幾種獲取iPS細(xì)胞的方法。提示借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中，直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的，后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。命題點1動物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1.[2022湖北]某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢，其原因不可能是（A）A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性解析小鼠胚胎的腦組織中含有豐富的神經(jīng)元，這些神經(jīng)元增殖能力強，在體外培養(yǎng)的條件下一般不會生長緩慢，A符合題意；將培養(yǎng)瓶瓶口密封會使培養(yǎng)液中缺氧，影響細(xì)胞進行有氧呼吸，從而造成供能不足，可能會使原代神經(jīng)元生長緩慢甚至死亡，B不符合題意；血清經(jīng)過高溫處理后，其活性成分會因變性而失去原有功能，因此，將血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基，可能會使原代神經(jīng)元生長緩慢，C不符合題意；小鼠內(nèi)環(huán)境呈弱堿性，若使用呈弱酸性的培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠原代神經(jīng)元，可能會導(dǎo)致原代神經(jīng)元生長緩慢，D不符合題意。2.[2021浙江1月改編]如圖為動物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（C）A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進行B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D.步驟④培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)不會發(fā)生改變解析為避免雜菌污染，步驟①的切取組織操作需要在無菌、無毒的環(huán)境條件下進行，A錯誤。步驟②需要用胰蛋白酶處理，使細(xì)胞分離，B錯誤。步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞，使細(xì)胞分離，以便分瓶進行傳代培養(yǎng)，C正確。步驟④為傳代培養(yǎng)過程，該過程中部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)會發(fā)生改變，D錯誤。命題點2干細(xì)胞的培養(yǎng)和應(yīng)用分析3.[2023海南]某團隊通過多代細(xì)胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干細(xì)胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯誤的是（A）A.營養(yǎng)供應(yīng)充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會發(fā)生接觸抑制B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化D.若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育解析營養(yǎng)供應(yīng)充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞分裂生長到一定程度時會發(fā)生接觸抑制，A錯誤；據(jù)題干“將小鼠胚胎干細(xì)胞……XO胚胎干細(xì)胞”可知，獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異，B正確；依據(jù)細(xì)胞分化的概念可知，XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化，C正確；若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可以通過一系列處理獲得有功能的卵母細(xì)胞，用于繁育，D正確。4.[2024大慶質(zhì)檢]誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）在許多方面類似于胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞），科學(xué)家直接將特定蛋白導(dǎo)入成年體細(xì)胞誘導(dǎo)出iPS細(xì)胞，如圖所示。下列說法正確的是（B）A.人工誘導(dǎo)細(xì)胞核重編程過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)會發(fā)生改變B.iPS細(xì)胞分化產(chǎn)生多種細(xì)胞的實質(zhì)是基因的選擇性表達C.人體的骨髓造血干細(xì)胞屬于iPS細(xì)胞的一種D.表皮細(xì)胞衰老時，其細(xì)胞核體積變小，呼吸速率減慢解析人工誘導(dǎo)細(xì)胞核重編程過程導(dǎo)致細(xì)胞分化，形成iPS細(xì)胞，細(xì)胞分化是基因選擇性表達的結(jié)果，細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，因此，人工誘導(dǎo)細(xì)胞核重編程過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)不會發(fā)生改變，A錯誤；細(xì)胞分化是基因選擇性表達的結(jié)果，iPS細(xì)胞分化產(chǎn)生多種細(xì)胞的實質(zhì)是基因的選擇性表達，B正確；人體的骨髓造血干細(xì)胞不是全能干細(xì)胞，其分裂和分化只能形成血細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等，而iPS細(xì)胞類似于胚胎干細(xì)胞，可以分化出各種細(xì)胞，故人體的骨髓造血干細(xì)胞不屬于iPS細(xì)胞的一種，C錯誤；表皮細(xì)胞衰老時，其細(xì)胞核體積變大，D錯誤。考點2動物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體1.動物細(xì)胞融合技術(shù)（1）動物細(xì)胞融合（2）辨析動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交項目動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性前處理使細(xì)胞分散開除去細(xì)胞壁相關(guān)酶胰蛋白酶和膠原蛋白酶纖維素酶和果膠酶誘導(dǎo)方法物理法：電融合法；化學(xué)法：PEG融合法；生物法：滅活病毒誘導(dǎo)法物理法：電融合法、離心法等；化學(xué)法：PEG融合法、高Ca2＋—高pH融合法目的獲得雜交細(xì)胞獲得雜種植株意義和用途制備單克隆抗體，診斷、治療、預(yù)防疾病打破生殖隔離，實現(xiàn)遠緣雜交育種，培育植物新品種2.單克隆抗體及其應(yīng)用技術(shù)手段動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞增殖制備流程篩選目的第一次：獲得[6]雜交瘤細(xì)胞；第二次：獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞特點雜交瘤細(xì)胞：既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生[7]特異性抗體單克隆抗體：能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差別，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備應(yīng)用①作為診斷試劑：利用同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。②運載藥物[如抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）]。③用于治療疾病基礎(chǔ)自測1.動物細(xì)胞融合過程中既有細(xì)胞膜融合也有核的融合。（√）2.動物細(xì)胞融合的結(jié)果是形成單核的雜種細(xì)胞，植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是得到雜種植株。（√）3.用特定的抗原對小鼠進行免疫后，從小鼠脾臟中只能得到一種B淋巴細(xì)胞。（×）4.單克隆抗體是單個B淋巴細(xì)胞增殖并產(chǎn)生的抗體。（×）5.單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。（×）6.雜交瘤細(xì)胞進行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎。（×）深度思考1.為什么誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合時要用滅活的病毒，而不用活病毒？誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是什么？提示活病毒可能會感染細(xì)胞，而滅活的病毒不會感染細(xì)胞。誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。2.ADC在臨床應(yīng)用上的作用機理是什么？提示其作用機理是通過單克隆抗體的靶向作用特異性地識別并結(jié)合腫瘤細(xì)胞表面的抗原，然后利用細(xì)胞本身具備的內(nèi)吞作用使化學(xué)藥物進入腫瘤細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，從而達到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。命題點1動物細(xì)胞融合的過程分析1.細(xì)胞融合技術(shù)是研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫等的重要手段，如圖A、B表示兩種動物細(xì)胞。下列有關(guān)說法錯誤的是（D）A.圖示過程與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同B.仙臺病毒需要用紫外線等滅活使其失去感染能力C.圖中C細(xì)胞進行的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂D.將A、B細(xì)胞等量混合誘導(dǎo)得到的融合細(xì)胞即為雜交細(xì)胞解析圖示過程為動物細(xì)胞的融合，該過程與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，都依賴于細(xì)胞膜的流動性，A正確；用來誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的病毒，需要用紫外線等滅活使其失去感染能力，B正確；圖中C細(xì)胞進行的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂，C正確；將A、B細(xì)胞等量混合誘導(dǎo)得到的融合細(xì)胞可能有三種類型：AA型、BB型、AB型（雜交細(xì)胞），D錯誤。2.[2022江蘇，多選]如圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進行基因定位的過程，在人—鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進行基因定位?，F(xiàn)檢測細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（ACD）A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人—人、人—鼠、鼠—鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上D.胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上解析加入滅活仙臺病毒的作用是促進細(xì)胞融合，A正確。細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均是在選擇培養(yǎng)基上進行篩選過的細(xì)胞，所以均是人—鼠雜交細(xì)胞，B錯誤。由題意可知，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，分析題圖可知，相關(guān)基因位于2號染色體上；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均含有11號染色體，故乳酸脫氫酶基因位于11號染色體上，C正確。只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅲ含有17號染色體，而Ⅰ、Ⅱ不含有17號染色體，故相關(guān)基因位于17號染色體上；Ⅰ、Ⅲ都有X染色體和11號染色體，都有磷酸甘油酸激酶活性，而Ⅱ不具有磷酸甘油酸激酶活性，故磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，D正確。命題點2單克隆抗體的制備和應(yīng)用分析3.[2023北京]甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關(guān)制備過程的敘述不正確的是（D）A.需要使用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細(xì)胞解析在單克隆抗體制備過程中需要用到動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，還需要制備用PTH免疫的小鼠，A、B正確；若要篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要利用抗原—抗體結(jié)合的原理進行篩選，C正確；一般來說，單個雜交瘤細(xì)胞只能分泌一種抗體，D錯誤。4.[2023湖北節(jié)選，11分]某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進細(xì)胞融合，該過程中PEG對細(xì)胞膜的作用是改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)（使兩個細(xì)胞接觸處質(zhì)膜的脂類分子發(fā)生疏散和重組）。（2）在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基），該培養(yǎng)基對未融合的（親本）細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞生長具有抑制作用。（3）單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是篩選能分泌與該病毒外殼蛋白A特異性結(jié)合的抗體的雜交瘤細(xì)胞。解析（1）聚乙二醇（PEG）分子能改變膜結(jié)構(gòu)，使兩個細(xì)胞接觸處質(zhì)膜的脂類分子發(fā)生疏散和重組，從而導(dǎo)致質(zhì)膜相互親和、融合。（2）淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合后，有的細(xì)胞未融合，有的細(xì)胞已融合；融合細(xì)胞中有的是具有同種核的細(xì)胞，有的是具有不同種核的細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞）。使用選擇培養(yǎng)基的目的是篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞的生長受到抑制，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。（3）將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交的目的是從雜交瘤細(xì)胞中篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?？键c3動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)（1）[選必3P52“相關(guān)信息”]減數(shù)分裂Ⅱ中期（MⅡ期）卵母細(xì)胞中的“核”其實是紡錘體—染色體復(fù)合物。文中所說的“去核”是去除該復(fù)合物。（2）[選必3P54“相關(guān)信息”]目前動物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。2.應(yīng)用前景及存在的問題應(yīng)用前景畜牧生產(chǎn)加速家畜[6]遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育醫(yī)藥衛(wèi)生轉(zhuǎn)基因克隆動物可作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白治療人類疾病[7]轉(zhuǎn)基因克隆動物的細(xì)胞、組織、器官可作為異種移植的供體科研使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程；克隆動物分析致病基因，為研究疾病的致病機制和開發(fā)相應(yīng)藥物提供幫助保護瀕危物種有望增加瀕危物種的存活數(shù)量存在的問題體細(xì)胞核移植成功率[8]非常低；絕大多數(shù)克隆動物存在[9]健康問題，許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷基礎(chǔ)自測1.動物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必須是卵母細(xì)胞。（×）2.經(jīng)體細(xì)胞核移植培育出的新個體只有一個親本的遺傳性狀。（×）3.克隆動物的產(chǎn)生體現(xiàn)了動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。（√）4.重構(gòu)胚的激活可用Ca2＋載體、蛋白酶合成抑制劑等方法。（√）5.克隆特定疾病模型的動物可用于疾病的研究和藥物開發(fā)。（√）6.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。（√）7.克隆牛技術(shù)涉及體細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等過程[2022江蘇，T4C]。（√）深度思考1.動物體細(xì)胞核移植過程中為什么選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞？提示①細(xì)胞大，易于操作；②卵黃多，營養(yǎng)豐富，為胚胎發(fā)育提供充足的營養(yǎng)；③此時具備受精能力，細(xì)胞質(zhì)中含有促使細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)。2.通過核移植技術(shù)獲得的克隆動物為什么與供核動物的性狀不完全相同？提示①克隆動物絕大部分DNA來自供核細(xì)胞的細(xì)胞核，但其細(xì)胞質(zhì)中的DNA主要來自去核的卵母細(xì)胞。②性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果，供核動物生活的環(huán)境與克隆動物生活的環(huán)境不完全相同，其性狀也可能和供核動物不完全相同。③克隆動物在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變，產(chǎn)生供核動物沒有的性狀。命題點1動物體細(xì)胞核移植的原理和過程分析1.[2023天津]根據(jù)圖分析，下列說法正確的是（D）A.子代動物遺傳性狀和受體動物完全一致B.過程1需要MⅡ期去核卵母細(xì)胞C.過程2可以大幅改良動物性狀D.過程2為過程3提供了量產(chǎn)方式，過程3為過程1、2提供了改良性狀的方式解析子代動物的遺傳性狀與受體動物（只提供子宮）基本無關(guān)，A錯誤。過程1是培育試管動物，該過程需要將獲能的精子與培養(yǎng)至MⅡ期的卵母細(xì)胞（不去核）進行體外受精，B錯誤。通過過程2得到克隆動物的過程屬于無性生殖，無性生殖不能大幅改良動物性狀，C錯誤。通過過程2可得到大量同種個體，為過程3提供了量產(chǎn)方式；過程3運用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以改變動物性狀，培育新品種，故過程3為過程1、2提供了改良性狀的方式，D正確。2.[2021遼寧]如圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖。有關(guān)敘述正確的是（B）A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定B.過程①需要提供95％空氣和5％CO2的混合氣體C.過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理D.過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植解析據(jù)圖可知，后代丁的遺傳物質(zhì)來自甲牛和乙牛，丙牛只提供了胚胎發(fā)育的場所，并未提供遺傳物質(zhì)，故后代丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同決定，A錯誤；進行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶，將其置于含有95％空氣和5％CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，B正確；過程②常使用顯微操作去核法對處于MⅡ期的卵母細(xì)胞進行處理，C錯誤；通常情況下，過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚階段后移植，D錯誤。命題變式[設(shè)問拓展型]（1）必須先對卵母細(xì)胞進行去核操作，其目的是使核移植后得到的胚胎或動物的遺傳物質(zhì)絕大部分來自有重要利用價值的動物提供的細(xì)胞核。（2）哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，通過胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度小于（填“大于”或“小于”）體細(xì)胞核移植，其原因是胚胎細(xì)胞分化程度相對較低，恢復(fù)全能性相對容易。（3）核移植過程中用物理或化學(xué)方法（如電刺激、乙醇和蛋白酶合成抑制劑等）激活重構(gòu)胚，其目的是使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進程。命題點2克隆動物的培育和應(yīng)用分析3.[2024南京調(diào)研]世界上首個體細(xì)胞克隆猴“中中”在中國誕生。如圖是克隆“中中”的相關(guān)示意圖。下列敘述錯誤的是（C）A.動物細(xì)胞核的全能性是通過體細(xì)胞核移植獲得克隆動物成功的基礎(chǔ)B.去核卵子可以為重組細(xì)胞全能性的表達提供所需的物質(zhì)條件C.代孕猴對早期胚胎不發(fā)生免疫排斥，為胚胎收集提供了可能D.克隆猴比鼠更適合作為人類疾病研究和藥物實驗的模型動物解析通過體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆動物的原理是動物細(xì)胞核具有全能性，A正確；去核卵子含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，可以為重組細(xì)胞全能性的表達提供所需的物質(zhì)條件，B正確；受體對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，C錯誤；猴與人在進化上親緣關(guān)系比鼠與人近，因此，與鼠相比，克隆猴比鼠更適合作為人類疾病研究和藥物實驗的模型動物，D正確。4.根據(jù)體細(xì)胞核移植技術(shù)的特點進行推斷，體細(xì)胞核移植技術(shù)可以用來（D）①擴大瀕危動物種群數(shù)量，有效提高生物多樣性②提高某些良種家畜自然繁殖率③解決人體器官移植供體來源短缺的問題④為科學(xué)研究提供實驗動物⑤構(gòu)建轉(zhuǎn)基因克隆動物，作為生物反應(yīng)器，大規(guī)模生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白A.①②④⑤ B.①②③C.②③④⑤ D.③④⑤解析利用體細(xì)胞核移植技術(shù)，只能增加動物的個體數(shù)量，不能提高生物多樣性，①錯誤；核移植技術(shù)不能提高良種家畜自然繁殖率，自然繁殖率主要是由生物的基因決定的，②錯誤。故選D。1.[2022江蘇]航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是（B）A.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌B.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳C.心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動解析培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌，但是部分培養(yǎng)心肌細(xì)胞所用試劑（如動物血清）不能用高壓蒸汽滅菌法滅菌，A錯誤；培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時候既需要氧氣（有助于心肌細(xì)胞進行有氧呼吸）也需要二氧化碳（有助于維持培養(yǎng)液的pH），B正確；在體外培養(yǎng)條件下，心肌細(xì)胞通過有絲分裂進行增殖，但細(xì)胞增殖一段時間后會出現(xiàn)接觸抑制等現(xiàn)象，因此不會不斷增殖，C錯誤；心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的支配下跳動，D錯誤。2.[2023山東]一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（D）A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大B.單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況解析由題中信息“一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體”可知，由同一抗原刺激機體可以產(chǎn)生多抗，說明多抗與一個抗原的多個不同的抗原決定簇有關(guān)，抗原純度對多抗純度的影響大，單抗理論上與抗原純度無關(guān)，A錯誤；單抗制備過程中，通常將分離出的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B錯誤；一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激可產(chǎn)生多種不同的抗體，因此利用該小鼠能制備出多種抗p72的單抗，C錯誤；p72部分結(jié)構(gòu)改變會導(dǎo)致部分抗原決定簇改變，原單抗會失效，而多抗仍有效，D正確。3.[2022海南，13分]以我國科學(xué)家為主的科研團隊將OSNL（即4個基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫）導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞（CEFs），誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS），再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs），然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代，實驗流程如圖。回答下列問題。（1）CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為了獲得單細(xì)胞懸液，雞胚組織剪碎后需用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理。動物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，以滿足細(xì)胞對某些細(xì)胞因子的需求。（2）體外獲取OSNL的方法有基因文庫法、PCR、人工合成法（答出1種即可）。若要在CEFs中表達外源基因的蛋白，需構(gòu)建基因表達載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動子和終止子等。啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達出所需要的蛋白質(zhì)。（3）iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是基因的選擇性表達。（4）誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞（iPS），再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs）的技術(shù)；體細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。（5）該實驗流程中用到的生物技術(shù)有基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)（答出2點即可）。解析（1）進行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，動物組織剪碎后需要用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理，以獲得單細(xì)胞懸液。使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動物細(xì)胞時，通常需要添加血清等天然成分，以滿足細(xì)胞對某些細(xì)胞因子的需求。（2）體外獲取目的基因的方法有多種，如基因文庫法、PCR、人工合成法等?；虮磉_載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子等結(jié)構(gòu)，啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了啟動子才能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達出所需要的蛋白質(zhì)。（3）iPGCs細(xì)胞是由iPS細(xì)胞分化而來的，兩者的遺傳物質(zhì)相同，兩者的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是基因的選擇性表達。（4）誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)存在明顯的區(qū)別，主要表現(xiàn)在誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞（iPS），再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞（iPGCs）的技術(shù)；而體細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)。（5）分析題意可知，該實驗流程中用到的生物技術(shù)有基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)等。4.[2022遼寧節(jié)選，6分]某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中，需要表達N蛋白胞外段，制備相應(yīng)的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖。（3）用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進行免疫后，取小鼠脾組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，制成細(xì)胞懸液，置于含有混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞進行融合。（4）用選擇性培養(yǎng)基對融合后的細(xì)胞進行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，將其接種到96孔板，進行克隆化培養(yǎng)。用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測每孔中的抗體，篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株，經(jīng)體外擴大培養(yǎng)，收集細(xì)胞培養(yǎng)液，提取單克隆抗體。（5）利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合，形成抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC），實現(xiàn)特異性治療。解析（3）用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理小鼠脾組織，可使組織分散成單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，可將細(xì)胞懸液置于含有95％空氣和5％CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。（4）使用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞后，將其接種到96孔板，進行克隆化培養(yǎng)。用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測每孔中的抗體，最終獲得既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株，經(jīng)擴大培養(yǎng)可獲得大量的單克隆抗體。擴大培養(yǎng)的方式有兩種：體外培養(yǎng)和注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，前者可以從細(xì)胞培養(yǎng)液中獲取單克隆抗體，后者可以從小鼠腹水中獲取單克隆抗體。（5）利用N蛋白胞外段抗體（可特異性識別N蛋白胞外段）與藥物結(jié)合，形成抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC），可實現(xiàn)特異性治療?；A(chǔ)練習(xí)一、選擇題1.[2023遼寧]大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞，可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯誤的是（D）A.懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞可有效避免接觸抑制B.用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清C.當(dāng)病毒達到一定數(shù)量時會影響細(xì)胞的增殖D.培養(yǎng)基pH不會影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量解析懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞，可以保證足夠的氣體交換，通過振蕩或轉(zhuǎn)動裝置使細(xì)胞始終處于分散狀態(tài)懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)，可有效避免接觸抑制，A正確；由于細(xì)胞的生長是比較復(fù)雜的過程，血清中含有一些細(xì)胞生存的必要成分，用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清，B正確；病毒借助于細(xì)胞進行繁殖，利用了宿主細(xì)胞的物質(zhì)、能量等，當(dāng)病毒達到一定數(shù)量時細(xì)胞的生命活動會受到影響，進而影響細(xì)胞的增殖，C正確；細(xì)胞的正常生命活動需要適宜的pH，培養(yǎng)基的pH會影響細(xì)胞代謝，進而影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量，D錯誤。2.[2024牡丹江一模]實驗小鼠皮膚細(xì)胞進行貼壁生長培養(yǎng)的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（D）A.甲過程需要在無菌條件下進行B.乙過程需要用機械的方法或用胰蛋白酶等處理皮膚組織C.丙過程是原代培養(yǎng)，可能出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.丁過程可以直接離心來進行傳代培養(yǎng)解析甲過程表示取實驗小鼠的組織細(xì)胞，離體動物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌、無毒的環(huán)境，因此甲過程需要在無菌條件下進行，A正確；乙過程表示用機械的方法或用胰蛋白酶等處理皮膚組織，使其分散成單個皮膚細(xì)胞，B正確；丙過程表示原代培養(yǎng)，會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，C正確；丁過程表示傳代培養(yǎng)，該過程也需要用胰蛋白酶等處理細(xì)胞，使貼壁細(xì)胞分散成單個皮膚細(xì)胞，再進行離心，D錯誤。3.[2023湖南九校聯(lián)考]使用細(xì)胞核移植技術(shù)培育“三親嬰兒”過程可選用如下技術(shù)路線。下列相關(guān)敘述錯誤的是（D）A.“三親嬰兒”的遺傳物質(zhì)來自捐獻者、母親及提供精子的男子B.圖中的精子在參與受精前需要進行獲能處理C.該項技術(shù)的細(xì)胞學(xué)原理是動物細(xì)胞核具有全能性D.圖中捐獻者和母親的卵母細(xì)胞取自卵巢或輸卵管解析由題圖分析可知，“三親嬰兒”的遺傳物質(zhì)來自捐獻者、母親及提供精子的男子，A正確；圖中的精子參與受精前需經(jīng)過獲能處理才具有受精能力，B正確；題圖所示為動物細(xì)胞核移植技術(shù)，其細(xì)胞學(xué)原理是動物細(xì)胞核具有全能性，C正確；從題圖可以看出，重組后的卵母細(xì)胞需要在體外培養(yǎng)至MⅡ期，說明卵母細(xì)胞不是來自輸卵管，因為來自輸卵管的卵母細(xì)胞已經(jīng)進入了MⅡ期，D錯誤。4.[2024浙江聯(lián)考]抗原決定簇是決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團，大多存在于抗原物質(zhì)的表面，一個天然抗原可以有多種和多個抗原決定簇。如圖是某種RNA病毒的結(jié)構(gòu)蛋白M表面的兩種抗原決定簇及這兩種抗原決定簇與相應(yīng)抗體結(jié)合的示意圖，將蛋白M注入小鼠體內(nèi)一段時間后，提取該小鼠的血清和免疫細(xì)胞，并利用免疫細(xì)胞制備單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯誤的是（B）A.抗體與抗原的結(jié)合實質(zhì)是抗體與抗原決定簇的結(jié)合B.制備單克隆抗體時需要先將分離出的免疫細(xì)胞進行克隆化培養(yǎng)C.利用該小鼠能制備不止一種抗蛋白M的單克隆抗體D.該蛋白M可用于制備針對該RNA病毒的疫苗解析單克隆抗體制備過程中需要先將分離出的免疫細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，不需要先將免疫細(xì)胞進行克隆化培養(yǎng)，B錯誤。二、非選擇題5.[2023長沙模擬，10分]隨著基因工程等現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，動物細(xì)胞工程的理論和應(yīng)用均獲得了突破性的進展。如圖為動物細(xì)胞工程涉及的主要技術(shù)領(lǐng)域?；卮鹣铝袉栴}：（1）在進行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，將成塊的組織中的細(xì)胞分散成單個細(xì)胞的方法是用機械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理。在培養(yǎng)過程中，要向培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，以防止微生物的污染；還需要向培養(yǎng)液中加入血清等一些天然成分，以保證細(xì)胞所需的營養(yǎng)。（2）與植物細(xì)胞不同，動物細(xì)胞的全能性會隨著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，因此，到目前為止，用動物體細(xì)胞克隆的動物，實際是通過圖中所示的核移植技術(shù)實現(xiàn)的。采用圖中的細(xì)胞融合技術(shù)，可使兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個單核（填“單核”或“多核”）的雜交細(xì)胞。解析（1）在進行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，需用機械的方法或用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理組織塊，使其分散成單個細(xì)胞。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，要向培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，以防止微生物的污染；需要向培養(yǎng)液中加入血清等一些天然成分，以保證細(xì)胞所需的營養(yǎng)。（2）動物細(xì)胞的全能性會隨著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，因此，用動物體細(xì)胞克隆的動物，實際是通過核移植技術(shù)實現(xiàn)的。細(xì)胞融合技術(shù)可使兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個單核的雜交細(xì)胞。能力提升一、選擇題6.[2024山西聯(lián)考]我國科學(xué)家成功用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠，部分流程如圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列說法正確的是（A）A.推測組蛋白乙?；腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程B.①過程的小分子化合物可誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞C.③過程中使用有活性的病毒處理的目的是誘導(dǎo)細(xì)胞融合D.圖示流程未運用胚胎移植等技術(shù)解析結(jié)合題圖可知，在重構(gòu)胚中注入Kdm4d的mRNA，并用TSA處理后，重構(gòu)胚發(fā)育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA的翻譯產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶，可以使組蛋白去甲基化，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑，可抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，組蛋白可發(fā)生正常的乙?；揎棧释茰y組蛋白乙?；腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程，A正確；①過程的小分子化合物可誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞形成iPS細(xì)胞，而不是突變?yōu)閕PS細(xì)胞，B錯誤；③為動物細(xì)胞融合的過程，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合所用的病毒是滅活的病毒，C錯誤；圖示流程運用了體細(xì)胞核移植、胚胎移植等技術(shù)，D錯誤。7.[2024安徽六校聯(lián)考]研究人員利用CD14蛋白制備抗CD14單克隆抗體的流程如圖所示，下列選項錯誤的是（A）A.步驟②可直接將從小鼠脾臟中分離出的能分泌抗CD14抗體的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合B.步驟③中的特定培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C.步驟⑤除圖中所示途徑外還可以將篩選出的雜交瘤細(xì)胞置于動物細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)D.圖中步驟⑥能從小鼠的腹水中提取與CD14蛋白特異性結(jié)合的抗CD14單克隆抗體解析步驟②無法將能分泌抗CD14抗體的漿細(xì)胞與其他B淋巴細(xì)胞分離開，因此應(yīng)先將從小鼠脾臟中分離出的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，之后再進行篩選，A錯誤；步驟③為用選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，以篩選出雜交瘤細(xì)胞，步驟④為通過克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測進行進一步篩選，以篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；篩選