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2圍產(chǎn)期母羊低血鈣癥的預(yù)防診斷規(guī)程本文件規(guī)定了圍產(chǎn)期母羊低血鈣癥的臨床表現(xiàn)、血樣采集及檢測(cè)方法、預(yù)防方法。本文件適用于圍產(chǎn)期母羊低血鈣癥的預(yù)防和診斷。2術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。2.1圍產(chǎn)期Perinatalperiod一般是指母羊產(chǎn)前30天到產(chǎn)后20天這段時(shí)間。2.2低血鈣癥Hypocalcemia低血鈣癥,亦稱產(chǎn)乳熱,是母畜分娩前后突然發(fā)生的一種嚴(yán)重的代謝性疾病。低血鈣癥是由于母畜在形成初乳以及在生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)道的收縮需要大量的鈣離子,此時(shí)母畜從腸道吸收的鈣和從骨骼動(dòng)員的鈣不能完全滿足血液中動(dòng)用的血鈣時(shí),就會(huì)出現(xiàn)低血鈣癥。3臨床表現(xiàn)3.1多發(fā)生于圍產(chǎn)期經(jīng)產(chǎn)的多胎次母羊;多發(fā)病于妊娠最后一個(gè)月的母羊。3.2表現(xiàn)為四肢癱瘓,知覺(jué)喪失,舌、咽、腸道麻痹;表現(xiàn)出食欲減退或廢絕,反芻及瘤胃蠕動(dòng)停止,糞尿減少或沒(méi)有,泌乳下降;表現(xiàn)出不愿走動(dòng),步態(tài)僵直,站立不穩(wěn),肌肉發(fā)抖,臥下不能起立,癱瘓,有時(shí)四肢痙攣,呈胸臥式。3.3發(fā)病后期昏睡,角膜反射很弱或消失,瞳孔散大,體溫可降至36-37℃,皮溫降低,心跳加快,呼吸深慢,脈搏先慢后弱,以后稍快,進(jìn)而更微弱,勉強(qiáng)可以觸到。4血樣采集及檢測(cè)方法4.1血樣采集與處理:空腹從頸靜脈采集血液樣本,4℃靜置30min,3000rpm離心15min后收集血清。4.2檢測(cè)儀器:分光光度計(jì)。4.3檢測(cè)原理:利用甲基百里香酚藍(lán)比色法測(cè)定血清及乳樣樣品中鈣濃度,樣品溶液中的鈣在堿性溶液中能夠與甲基百里香酚藍(lán)(MTB)相結(jié)合,生成藍(lán)色透明絡(luò)合物,使用分光光度計(jì)比色法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的吸光度,進(jìn)而可以計(jì)算出樣品中鈣的含量。4.4檢測(cè)步驟34.4.1試劑配制按照下表所示方式進(jìn)行試劑混合。表1試劑混合方法空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管去離子水(mL)a2.5mmol/鈣標(biāo)準(zhǔn)液a血清aMTB試劑(mL)堿性溶液(mL)2.02.02.04.4.2吸光度測(cè)定混合均勻后,室溫靜置五分鐘,將分光光度計(jì)調(diào)至610nm,去離子水調(diào)零,測(cè)定各管的吸光度。4.4.3計(jì)算按照計(jì)算公式計(jì)算樣品中鈣的濃度:鈣含量(mmol/L)=(測(cè)定OD值-空白OD值)/(標(biāo)準(zhǔn)OD值-空白OD值)4.4.4判定標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)母羊臨床癥狀可作出初步診斷,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室診斷予以確診。表2圍產(chǎn)期母羊低血鈣癥判定標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果判定血鈣含量健康2.15~2.85mmol/L亞臨床型低血鈣癥1.2~2.14mmol/L臨床型低血鈣癥<1.2mmol/L5預(yù)防方法5.1利用5-羥基色氨酸日糧L型色氨酸在色氨酸羥化酶作用下生成5-羥基色氨酸,之后又在脫羧酶作用下形成5-羥色胺(5-HT)。PTHrP是調(diào)控鈣轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)鍵基因,它可以調(diào)控破骨細(xì)胞的活性,從而維持血鈣的平衡。5-HT能夠通過(guò)PTHrP信號(hào)通路調(diào)控骨鈣流失及血鈣和乳鈣代謝平衡。因此,通過(guò)在日糧中添加五羥基色氨酸(50mg/kgBW)能夠預(yù)防低血鈣癥的發(fā)生。5.2利用低鈣日糧4由于飼喂低鈣日糧(<1.5%)后導(dǎo)致機(jī)體的鈣離子水平比較低,母體的自分泌系統(tǒng)會(huì)感受到這種鈣缺乏狀態(tài),而刺激甲狀腺腺素分泌,該分泌物可以使骨骼中的鈣離子處于活化狀態(tài),增強(qiáng)了對(duì)骨骼中鈣離子的吸收能力,與此同時(shí)也強(qiáng)化了小腸對(duì)于鈣離子的吸收能力,從而在身體內(nèi)部迅速建立起一種對(duì)鈣離子的動(dòng)態(tài)吸收機(jī)制,短期內(nèi)使血液中鈣離子水平恢復(fù)正常。5.3補(bǔ)充外源維生素D和甲狀旁腺素補(bǔ)充一定量的外源性維生素D可以促進(jìn)對(duì)鈣離子的吸收能力,尤其是腸道對(duì)鈣離子的吸收能力,從而避免血液中離子的含量過(guò)低,預(yù)防低血鈣癥的發(fā)生。但需注意的是,含量過(guò)低的維生素D有可能反而誘發(fā)母羊發(fā)生低血鈣癥,因?yàn)檫@種外源性的添加物質(zhì)會(huì)對(duì)身體內(nèi)部動(dòng)態(tài)鈣離子吸收機(jī)制的形成造成障礙。因此,通常在添加維生素D的同時(shí)也補(bǔ)充一定量的甲狀旁腺素,能夠獲得較好的效果。5.4降低日糧中鈉和鉀的含量降低日糧中鈉和鉀的含量可在圍產(chǎn)期日糧中不添加鈉離子,但除去鉀很困難,因?yàn)檐俎5蕊暡堇锩婧写罅库涬x子,所以建議母羊圍產(chǎn)期盡量多飼喂青貯玉米、酒糟、大麥等代替苜蓿。5.5添加陰離子鹽誘導(dǎo)輕度(代償性)酸中毒在產(chǎn)前日糧中添加陰離子鹽(ClS2-)濃度為-15~-10mEq/100gDM時(shí)可防止低血鈣癥的發(fā)生,因?yàn)殛庪x子型日糧可降尿液pH,使母體產(chǎn)生代償性酸中毒,增加尿液鈣的排泄,使鈣在體內(nèi)停留時(shí)間縮短,并
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