河北省高碑店市崇德實(shí)驗(yàn)中學(xué)高二下學(xué)期5月月考生物試題

20222023學(xué)年度第二學(xué)期月考高二生物試題說(shuō)明：本試題滿分100分，考試時(shí)間75分鐘。請(qǐng)?jiān)诖痤}卡上作答。一、選擇題：本題共13小題，每小題2分，共26分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.2017年11月27日，世界上首例體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”在我國(guó)誕生。克隆動(dòng)物一般是指將動(dòng)物體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中培育成的新個(gè)體，該技術(shù)主要是利用了動(dòng)物細(xì)胞核的（）A.全能性 B.復(fù)雜性 C.多樣性 D.統(tǒng)一性【答案】A【解析】【分析】動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物?！驹斀狻拷Y(jié)合分析可知，克隆動(dòng)物一般是指將動(dòng)物體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中培育成的新個(gè)體，該技術(shù)主要是利用了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。故選A。2.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.在體細(xì)胞核移植過(guò)程中，普遍使用的去核方法是顯微操作法B.由于體細(xì)胞分化程度高，因此體細(xì)胞核移植難度高于胚胎細(xì)胞核移植C.非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞核移植難度較大D.克隆動(dòng)物所利用的細(xì)胞核可以是卵細(xì)胞或精子中的細(xì)胞核【答案】D【解析】【分析】動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是指將供核細(xì)胞的細(xì)胞移入去核的卵母細(xì)胞中，構(gòu)成的重組細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞分裂、分化可形成新個(gè)體?！驹斀狻緼、在體細(xì)胞核移植過(guò)程中，普遍使用顯微操作法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核以及與之同時(shí)產(chǎn)生的極體，A正確；BC、由于體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)分裂能力難度大，因此體細(xì)胞核移植難度高于胚胎細(xì)胞核移植，非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞核移植難度較大，BC正確；D、克隆動(dòng)物所利用的細(xì)胞核可以是體細(xì)胞或胚胎細(xì)胞的細(xì)胞核，D錯(cuò)誤。故選D。3.下列細(xì)胞中，哪一個(gè)代表發(fā)生了受精作用（）A. B. C. D.【答案】C【解析】【分析】當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶間隙可以觀察到兩個(gè)極體時(shí)，說(shuō)明卵子已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵子是否受精的重要標(biāo)志。【詳解】在哺乳動(dòng)物體內(nèi)受精過(guò)程中，當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)極體時(shí)，說(shuō)明卵子已經(jīng)完成了受精，這是判斷卵子是否受精的重要標(biāo)志。C正確。故選C?！军c(diǎn)睛】4.科學(xué)家已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通過(guò)一定技術(shù)手段將干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成原始生殖細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)成功培育出能夠受精的人造精子和人造卵子。這項(xiàng)技術(shù)為試管嬰兒提供了廣闊的發(fā)展前景。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.人造卵子是健康女性捐贈(zèng)細(xì)胞核和不孕癥女性的去核卵母細(xì)胞構(gòu)成的重組細(xì)胞B.培養(yǎng)人造卵子需要加入血清等成分并提供無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境C.人造生殖細(xì)胞受精形成的胚胎在桑葚胚之前，每個(gè)細(xì)胞都具有全能性D.人造卵子技術(shù)為女性不育的家庭帶來(lái)了福音，但也存在倫理隱患【答案】A【解析】【分析】干細(xì)胞的應(yīng)用：擁有自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。【詳解】A、人造卵子是干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化成原始生殖細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)成功培育出的，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)人造卵子需要加入血清等成分并提供無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境，B正確；C、胚胎在桑葚胚之前，每個(gè)細(xì)胞都具有全能性，C正確；D、人造卵子技術(shù)為女性無(wú)法產(chǎn)生正常卵細(xì)胞的不育問(wèn)題的家庭帶來(lái)了福音，但也存在倫理隱患，D正確。故選A。5.如圖為受精作用及胚胎發(fā)育示意圖，a、b代表兩個(gè)發(fā)育時(shí)期，下列敘述正確的是（）A.受精卵的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自精子B.a、b分別表示原腸胚和囊胚C.受精卵發(fā)育為桑葚胚的過(guò)程是在透明帶內(nèi)完成的，孵化后進(jìn)入a階段D.②過(guò)程細(xì)胞的數(shù)量在不斷增加，但細(xì)胞的體積在不斷減小【答案】D【解析】【分析】①為受精作用，②為卵裂期，③④均為有絲分裂，a是囊胚，b是原腸胚。【詳解】A、受精卵細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自精子，一半來(lái)自卵細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)主要來(lái)自卵細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、a是囊胚，b是原腸胚，B錯(cuò)誤；C、受精卵發(fā)育為桑葚胚的過(guò)程是在透明帶內(nèi)完成的，桑葚胚繼續(xù)分裂變?yōu)槟遗撸遗哌M(jìn)一步分裂，導(dǎo)致透明帶破裂，這一過(guò)程稱為孵化，孵化后進(jìn)入b階段，C錯(cuò)誤；D、②過(guò)程為卵裂期，其特點(diǎn)是細(xì)胞的數(shù)量在不斷增加，但細(xì)胞的體積在不斷減小，D正確。故選D。6.下列有關(guān)DNA連接酶的敘述，正確的是（）A.E·coliDNA連接酶來(lái)自大腸桿菌，只能連接平末端B.催化具有相同黏性末端的DNA片段之間形成磷酸二酯鍵C.催化具有相同黏性末端的DNA片段之間形成氫鍵D.可以將單個(gè)的脫氧核苷酸連接到DNA片段上【答案】B【解析】【分析】DNA連接酶：（1）根據(jù)酶的來(lái)源不同分為兩類：E.coliDNA連接酶、T4DNA連接酶。這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低。（2）DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵?！驹斀狻緼、E.coliDNA連接酶只能將具有互補(bǔ)黏性末端的DNA片段之間連接，A錯(cuò)誤；BC、DNA連接酶催化具有相同黏性末端的DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，B正確，C錯(cuò)誤；D、將單個(gè)的脫氧核苷酸連接到DNA片段上的是DNA聚合酶，DNA連接酶連接的是兩個(gè)DNA片段，D錯(cuò)誤。故選B。7.下列有關(guān)限制酶的敘述，正確的是（）A.限制酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小B.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同C.只有用相同的限制酶處理含目的基因和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒D.用限制酶切割DNA分子中部，獲得一個(gè)目的基因時(shí)被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)【答案】B【解析】【分析】限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。【詳解】A、限制酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大，A錯(cuò)誤；B、CATG↓和G↓GATCC序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同，都是4個(gè)，B正確；C、用不同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，也可能形成相同的黏性末端，再用DNA連接酶也可能形成重組質(zhì)粒，C錯(cuò)誤；D、用限制酶從一個(gè)DNA分子中部獲取一個(gè)目的基因時(shí)，需要切開(kāi)兩個(gè)切口，斷裂4個(gè)磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。故選B。8.下列關(guān)于PCR擴(kuò)增DNA片段及電泳鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)B.耐高溫的DNA聚合酶只能從引物的5′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸C.反應(yīng)過(guò)程中的每一輪循環(huán)依次包括變性、復(fù)性、延伸三步D.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物一般可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)進(jìn)行鑒定【答案】B【解析】【分析】PCR擴(kuò)增：目的基因DNA受熱變性后解為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合；然后以單鏈DNA為模板，在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸，如此循環(huán)多次。【詳解】A、在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)，一般DNA分子越大，遷移越慢，A正確；B、耐高溫的DNA聚合酶只能從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，B錯(cuò)誤；C、反應(yīng)過(guò)程中的每一輪循環(huán)依次包括變性（將雙鏈DNA解聚為單鏈）、復(fù)性（引物與模板鏈結(jié)合）、延伸（合成新的DNA鏈）三步，C正確；D、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物一般可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)進(jìn)行鑒定，根據(jù)不同DNA分子遷移的結(jié)果進(jìn)行鑒別，D正確。故選B。9.下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是（）A.表達(dá)載體中的胰島素基因可通過(guò)人肝細(xì)胞mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得B.表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動(dòng)于復(fù)制原點(diǎn)C.借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)D.基因表達(dá)載體需要包含目的基因、標(biāo)記基因、起始密碼子、終止密碼子等序列【答案】C【解析】【分析】基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用?！驹斀狻緼、由于人肝細(xì)胞中胰島素基因不能表達(dá)，所以無(wú)法利用肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得胰島素基因，A錯(cuò)誤；B、表達(dá)載體的復(fù)制啟動(dòng)于復(fù)制原點(diǎn)，胰島素基因的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)于啟動(dòng)子，B錯(cuò)誤；C、抗生素基因是標(biāo)記基因，作用是檢測(cè)受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)，C正確；D、基因表達(dá)載體組成至少包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子，還有復(fù)制原點(diǎn)等，D錯(cuò)誤；故選C。10.蛋白質(zhì)工程取得的進(jìn)展，向人們展示出誘人的前景。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.可以改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造一種新的蛋白質(zhì)B.基本思路是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)的C.直接操作對(duì)象是蛋白質(zhì)D.蛋白質(zhì)工程的實(shí)現(xiàn)需要多學(xué)科技術(shù)支撐【答案】C【解析】【分析】蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要，其核心是基因工程?！驹斀狻緼、蛋白質(zhì)工程通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，A正確；B、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）→表達(dá)（轉(zhuǎn)錄和翻譯）→形成預(yù)期功能的蛋白質(zhì)，B正確；C、蛋白質(zhì)工程是在基因水平上改造蛋白質(zhì)的，直接操作對(duì)象不是蛋白質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)工程是以基因工程為基礎(chǔ)延伸出來(lái)的第二代基因工程，包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域，D正確。故選C。11.我國(guó)科研人員利用小鼠獲得了單倍體胚胎干細(xì)胞，流程如下圖所示。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無(wú)包含Y染色體的細(xì)胞。已知小鼠Y染色體比X染色體短小。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.精子頭部入卵后，透明帶迅速發(fā)生生理反應(yīng)拒絕其它精子進(jìn)入透明帶B.為得到只含精子染色體的胚胎干細(xì)胞需在核融合前剔除卵子的雌原核C.由圖可知，單倍體胚胎干細(xì)胞來(lái)自小鼠囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞D.Y染色體比X染色體短小，可能缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因【答案】A【解析】【分析】聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；而沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤?！驹斀狻緼、在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，卵細(xì)胞膜外的透明帶會(huì)迅速發(fā)生生理反應(yīng)，阻止后來(lái)的精子進(jìn)入透明帶。然后，精子入卵。精子入卵后，卵細(xì)胞膜也會(huì)立即發(fā)生生理反應(yīng)，拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)，A錯(cuò)誤；B、精子入卵后，尾部脫離，原有的核膜破裂并形成一個(gè)新的核膜，最后形成一個(gè)比原來(lái)精子的核還大的核，叫作雄原核。與此同時(shí)，精子入卵后被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核。為得到只含精子染色體的胚胎干細(xì)胞需在核融合前剔除卵子的雌原核，B正確；C、聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞具有全能性，所以單倍體胚胎干細(xì)胞可以來(lái)自小鼠囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，C正確；D、Y染色體比X染色體短小，所以Y染色體上的基因相對(duì)較少，可能缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因，D正確。故選A。12.大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述不正確的是（）A.利用DNA和蛋白質(zhì)在冷酒精中溶解性的差異可將DNA進(jìn)一步純化分離B.在提取白色絲狀物時(shí)雙向攪拌比單向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNAC.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理D.根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上不一定含有限制酶I和Ⅱ的切割位點(diǎn)，含有限制酶Ⅲ的切割位點(diǎn)【答案】B【解析】【分析】DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開(kāi)；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可利用這個(gè)特性將DNA與蛋白質(zhì)分離，即利用DNA和蛋白質(zhì)在冷酒精中溶解性的差異可將DNA進(jìn)一步純化分離，A正確；B、在提取白色絲狀物時(shí)用玻璃棒輕輕單向攪拌更有利于獲得結(jié)構(gòu)完整的DNA，B錯(cuò)誤；C、DNA帶負(fù)電，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場(chǎng)中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，C正確；D、質(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA，且由圖可知，限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有1個(gè)條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個(gè)切割位點(diǎn)，也可能沒(méi)有切割位點(diǎn)，即質(zhì)粒上不一定含有限制酶I和Ⅱ的切割位點(diǎn)，但限制酶III切割后有2個(gè)條帶，故一定有限制酶Ⅲ的切割位點(diǎn)，D正確。故選B。13.2019年1月24日，我國(guó)科學(xué)家宣布世界首批疾病克隆猴在中國(guó)誕生。科學(xué)家采集了睡眠紊亂最明顯的生物節(jié)律基因敲除獼猴體細(xì)胞，通過(guò)體細(xì)胞核移植技術(shù)，獲得了5只克隆猴——這是國(guó)際上首次成功構(gòu)建的一批遺傳背景一致的生物節(jié)律紊亂獼猴模型。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性B.理論上5只克隆獼猴細(xì)胞核基因型與核供體細(xì)胞完全一致C.體細(xì)胞核移植需用取自新鮮卵巢的卵母細(xì)胞直接做受體細(xì)胞D.該研究可彌補(bǔ)實(shí)驗(yàn)獼猴繁殖周期長(zhǎng)、單胎數(shù)量少的不足【答案】C【解析】【分析】動(dòng)物體細(xì)胞核移植：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為克隆動(dòng)物?？寺?dòng)物具備雙親的遺傳特性，因?yàn)槠浼?xì)胞核基因來(lái)自提供細(xì)胞核的生物，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自提供細(xì)胞質(zhì)的生物，但其性狀主要與提供細(xì)胞核的生物相似?！驹斀狻緼、動(dòng)物細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物所依據(jù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，A正確；B、克隆猴細(xì)胞核基因型與核供體細(xì)胞完全一致，細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)源于受體細(xì)胞，B正確；C、體細(xì)胞核移植需用取自新鮮卵巢的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂的中期，再做受體細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、克隆動(dòng)物可大量繁殖，可彌補(bǔ)實(shí)驗(yàn)撈猴繁殖周期長(zhǎng)、單胎數(shù)量少的不足，D正確。故選C。二、多選題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有兩個(gè)或兩個(gè)以上選項(xiàng)符合題目要求，全部選對(duì)得3分，選對(duì)但不全的得1分，有選錯(cuò)的得0分。14.常用的核移植方法主要有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出注入去核卵母細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個(gè)細(xì)胞融合，從而具有發(fā)育的全能性。我國(guó)科學(xué)家于2017年底培育出的體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”采用的就是后者。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，就可自行進(jìn)入卵母細(xì)胞B.相比之下，透明帶下注射法對(duì)供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小C.可以用蛋白酶合成抑制劑激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程D.“中中”和“華華”核DNA均來(lái)自供體細(xì)胞，質(zhì)DNA均來(lái)自去核卵母細(xì)胞【答案】AD【解析】【分析】動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。在體外將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過(guò)顯微操作技術(shù)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和第一極體，核移植時(shí)，對(duì)提供細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的奶牛不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理，使用電刺激等方法可以激活重組細(xì)胞使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育?！驹斀狻緼、供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，還需要電融合法誘導(dǎo)才能使供體細(xì)胞進(jìn)入卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，A錯(cuò)誤；B、微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核吸出可能會(huì)破壞細(xì)胞核，而透明帶下注射法是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，對(duì)供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小，B正確；C、使用電刺激、蛋白酶合成抑制劑等方法可以激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，C正確；D、“中中”和“華華”是由透明帶下注射法形成的，核DNA均來(lái)自供體細(xì)胞，但質(zhì)DNA來(lái)自去核卵母細(xì)胞和供體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選AD。15.胚胎工程理論的發(fā)展和技術(shù)的應(yīng)用提高了良種奶牛的繁育速度，保證了我國(guó)高品質(zhì)牛奶的充足供應(yīng)。如圖表示繁殖良種奶牛以及獲取胚胎干細(xì)胞的流程，下列敘述正確的是（）A.體外受精與體內(nèi)受精不同的是體外受精前精子需要獲能B.進(jìn)行①胚胎分割后獲得的2個(gè)健康胚胎的遺傳性狀相同C.可從早期囊胚（b）中的滋養(yǎng)層細(xì)胞獲得胚胎干細(xì)胞（e）D.進(jìn)行②胚胎移植時(shí)能否成功，與供體和受體的生理狀態(tài)有關(guān)【答案】BD【解析】【分析】胚胎移的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理(選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理)；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集檢查、培養(yǎng)或保存(對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑堪或胚囊胚階段)；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植;移植后的檢查?！驹斀狻緼、體外受精時(shí)，精子在雌性動(dòng)物的陰道內(nèi)獲能，體外受精前精子需要專門的培養(yǎng)液中獲能，A錯(cuò)誤；B、進(jìn)行①胚胎分割屬于無(wú)性生殖，故分割后獲得的2個(gè)健康胚胎的遺傳性狀相同，B正確；C、可從早期囊胚（b）中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞獲得胚胎干細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、進(jìn)行②胚胎移植時(shí)能否成功，與供體和受體的生理狀態(tài)有關(guān)，D正確。故選BD。16.科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)，將甘露葡萄糖酶氨基酸序列中兩個(gè)位點(diǎn)的組氨酸和脯氨酸都替換為脯氨酸后，其熱穩(wěn)定性顯著提高。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.上述過(guò)程應(yīng)先設(shè)計(jì)甘露葡萄糖酶的三維結(jié)構(gòu)，再預(yù)期其功能B.替換蛋白質(zhì)中的氨基酸可以通過(guò)改造基因中的堿基序列實(shí)現(xiàn)C.細(xì)胞合成熱穩(wěn)定性高的甘露葡萄糖酶的過(guò)程遵循了中心法則D.可用PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞是否合成熱穩(wěn)定性高的甘露葡萄糖酶【答案】BC【解析】【分析】蛋白質(zhì)工程基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)?！驹斀狻緼、上述過(guò)程應(yīng)先預(yù)期該蛋白質(zhì)功能，然后再設(shè)計(jì)其三維結(jié)構(gòu)，A錯(cuò)誤；B、從根本上說(shuō)，基因中的堿基序列決定蛋白質(zhì)中氨基酸種類和排序，因此應(yīng)該從對(duì)基因的操作來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)天然蛋白質(zhì)改造，B正確；C、細(xì)胞合成熱穩(wěn)定性高的甘露葡萄糖酶的過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程，這兩個(gè)過(guò)程都遵循中心法則，C正確；D、若要檢測(cè)細(xì)胞是否合成熱穩(wěn)定性高的甘露葡萄糖酶，可以利用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，D錯(cuò)誤。故選BC。17.如圖是被農(nóng)桿菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者將其連接成環(huán)，并以此環(huán)為模板進(jìn)行PCR，擴(kuò)增出TDNA插入位置兩側(cè)的未知序列，據(jù)此來(lái)確定TDNA插入的具體位置。有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.農(nóng)桿菌在自然條件下主要侵染單子葉植物和裸子植物，TDNA存在于其Ti質(zhì)粒上B.利用圖中的引物②③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列C.若擴(kuò)增循環(huán)n次，需要2n+12個(gè)引物D.將擴(kuò)增出的未知序列與水稻基因組序列比對(duì)可確定TDNA的插入位置【答案】CD【解析】【分析】PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。引物是根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列來(lái)設(shè)計(jì)的，其作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：目的基因插入Ti質(zhì)粒的TDNA中進(jìn)入農(nóng)桿菌，農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞時(shí)TDNA攜帶目的基因整合到植物染色體的DNA中，目的基因能夠穩(wěn)定維持表達(dá)。【詳解】A、農(nóng)桿菌在自然條件下主要侵染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力，A錯(cuò)誤；B、耐高溫的DNA聚合酶可在引物的3'端延伸子鏈，因此可利用圖中的引物①④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，B錯(cuò)誤；C、擴(kuò)增循環(huán)n次，得到2n個(gè)DNA分子，總單鏈數(shù)為2×2n即2n+1條，只有最初的兩條母鏈不需要引物，因此共需要2n+12個(gè)引物，C正確；D、不同的DNA分子或DNA區(qū)段具有特異性，將擴(kuò)增出的未知序列與水稻基因組序列比對(duì)可確定TDNA的插入位置，D正確。故選CD。18.乳酸菌是乳酸的傳統(tǒng)生產(chǎn)菌，但耐酸能力較差，影響產(chǎn)量；釀酒酵母耐酸能力較強(qiáng)，但不產(chǎn)生乳酸。研究者將乳酸菌內(nèi)催化乳酸生成的乳酸脫氫酶基因（LDH）導(dǎo)入釀酒酵母，獲得能產(chǎn)生乳酸的酵母工程菌株。下圖為通過(guò)雙酶切構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程。GTG為原核生物偏好的起始密碼子序列，ATG為真核生物偏好的起始密碼子序列。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.引物1的5′端序列應(yīng)包含XbaⅠ的識(shí)別序列B.引物1的5′端序列應(yīng)考慮將GTG改為ATGC.重組質(zhì)粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體D.酵母工程菌培育成功的標(biāo)志是產(chǎn)生乳酸脫氫酶【答案】ACD【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。4、目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斀狻緼、設(shè)計(jì)引物1的5′端序列，要同時(shí)能通過(guò)雙酶切以正確方向插入質(zhì)粒，需要包含BamHⅠ的識(shí)別序列，A錯(cuò)誤；B、設(shè)計(jì)引物1的5′端序列，應(yīng)考慮將編碼起始密碼子的序列由原核生物偏好的GTG轉(zhuǎn)變?yōu)檎婧松锲玫腁TG，以便目的基因在酵母細(xì)胞中更好的表達(dá)，B正確；C、結(jié)合題意可知，本過(guò)程中重組質(zhì)粒以不能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體，然后在缺乏尿嘧啶的選擇培養(yǎng)基上，不能合成尿嘧啶的釀酒酵母菌株不能生存，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的酸酒酵母菌株因?yàn)楂@得了尿噓啶合成酶基因而可以正常生存，從而起到篩選作用，C錯(cuò)誤；D、結(jié)合題意可知，酵母工程菌培育成功的標(biāo)志是產(chǎn)生乳酸，D錯(cuò)誤。故選ACD。三、非選擇題：本題共5小題，共59分。19.有些人體內(nèi)缺乏足夠的乳糖酶（），無(wú)法充分消化牛奶中的乳糖，會(huì)導(dǎo)致喝牛奶后產(chǎn)生腹瀉等不良反應(yīng)。我國(guó)科研人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)和克隆技術(shù)培育出了可產(chǎn)低乳糖牛奶的拉克斯牛，培育過(guò)程如圖所示，A～C表示操作步驟。（圖中胚胎成纖維細(xì)胞是由胚胎干細(xì)胞經(jīng)分裂分化后產(chǎn)生的一類仍具有分裂能力的細(xì)胞）（1）通過(guò)步驟A獲取重組質(zhì)粒T時(shí)，除需要限制酶BamHI外，還需要__________等酶的參與。實(shí)現(xiàn)步驟B常用的方法是__________，步驟C中的技術(shù)被稱為_(kāi)_________。（2）動(dòng)物基因工程中常用受精卵作為受體細(xì)胞，而在拉克斯牛的培育過(guò)程中選擇胚胎成纖維細(xì)胞作為受體細(xì)胞，此舉有何意義：__________。（3）在現(xiàn)有的技術(shù)條件下，還不能直接將重組細(xì)胞1培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體，而必須獲取重組細(xì)胞2后才能發(fā)育成新個(gè)體，你認(rèn)為原因最可能是__________（填字母）。A.重組細(xì)胞2的細(xì)胞核才具有全能性B.重組細(xì)胞2的核與重組細(xì)胞1不同C.重組細(xì)胞2中核基因的表達(dá)情況與重組細(xì)胞1不同D.卵細(xì)胞較大，便于操作（4）下列對(duì)拉克斯牛的分析中正確的有__________（填字母）。A.拉克斯牛體內(nèi)的神經(jīng)、肌肉和乳腺細(xì)胞中均含有乳糖酶基因B.除乳糖酶基因外，拉克斯牛的核基因與圖中黑白花奶牛相同C.對(duì)圖中拉克斯牛進(jìn)行克隆繁育，無(wú)法獲得雄拉克斯牛D.導(dǎo)入了乳糖酶基因的重組細(xì)胞2，一定能培育出拉克斯?！敬鸢浮浚?）①.限制酶HindⅢ、DNA連接酶②.顯微注射③.細(xì)胞核移植技術(shù)（2）基因工程成功率較低，而受精卵數(shù)量少。胚胎成纖維細(xì)胞能夠分裂增殖，便于為基因工程提供大量受體細(xì)胞，有利于篩選（3）A（4）AC【解析】【分析】1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。【小問(wèn)1詳解】通過(guò)步驟A獲取重組質(zhì)粒T時(shí)，除需要限制酶BamHI外，還需要限制酶HindⅢ、DNA連接酶；步驟B是獲得重組細(xì)胞常用的方法是顯微注射法；步驟C是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，該技術(shù)稱為細(xì)胞核移植技術(shù)。【小問(wèn)2詳解】動(dòng)物基因工程中常用受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞，主要原因是受精卵的全能性高，易于表達(dá)，極大程度的增加了實(shí)驗(yàn)的可行性和成功率；但是基因工程成功率依然較低，而受精卵數(shù)量少；而拉克斯牛的胚胎成纖維細(xì)胞能夠分裂增殖，便于為基因工程提供大量受體細(xì)胞，有利于篩選?！拘?wèn)3詳解】在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下，還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體，而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，因?yàn)槁鸭?xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞細(xì)胞核全能性得到表達(dá)，A正確。故選A?！拘?wèn)4詳解】AC、分析題圖可知拉克斯牛體內(nèi)的神經(jīng)、肌肉和乳腺細(xì)胞中均含有乳糖酶基因可以合成乳糖酶，從而在體內(nèi)合成乳糖；圖中拉克斯牛為雌性，對(duì)其進(jìn)行克隆繁育，無(wú)法獲得雄拉克斯牛，AC正確；B、拉克斯牛的核基因與圖中黑白花奶牛除了乳糖酶基因不同外，還有部分質(zhì)粒上的基因，B錯(cuò)誤；D、導(dǎo)入了乳糖酶基因的重組細(xì)胞2，不一定就能培育出拉克斯牛，D錯(cuò)誤。故選AC。20.杜泊羊以其生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，被稱為“鉆石級(jí)”肉用綿羊。科研工作者通過(guò)胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如圖所示，請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：（1）在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，培養(yǎng)液中通常需加入_____等一些天然成分，還需要提供CO2以維持_____。（2）在胚胎移植前要對(duì)接受胚胎的當(dāng)?shù)仄胀ňd羊進(jìn)行_____處理。代孕母羊?qū)χ萌胱訉m的早期胚胎基本上不發(fā)生_____，這就為早期胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。（3）采用胚胎分割技術(shù)能得到“同卵多胞胎”，對(duì)囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要特別注意將_____均等分割，否則會(huì)影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育?！敬鸢浮浚?）①.血清②.培養(yǎng)液的pH（2）①同期發(fā)情②.免疫排斥反應(yīng)（3）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)【解析】【分析】核移植技術(shù)指的是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體；用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物，原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性；動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植?！拘?wèn)1詳解】體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，類似于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，在培養(yǎng)液中通常需加入血清等一些天然成分，還需要一定的氣體環(huán)境，O2是細(xì)胞代謝所必需的，提供CO2以維持培養(yǎng)液的pH?！拘?wèn)2詳解】在胚胎移植前要對(duì)接受胚胎的當(dāng)?shù)仄胀ňd羊即受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，使它們的生理狀態(tài)相同；由于免疫豁免現(xiàn)象的存在，代孕母羊?qū)χ萌胱訉m的早期胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這就為早期胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。【小問(wèn)3詳解】?jī)?nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)能發(fā)育成個(gè)體，采用胚胎分割技術(shù)能得到“同卵多胞胎”，對(duì)胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要特別注意將囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。21.草甘膦是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的除草劑，從某種細(xì)菌中提取草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入棉花植株，獲得抗草甘膦的轉(zhuǎn)基因棉花?；卮鹣铝袉?wèn)題。（1）提取到的草甘膦抗性基因可通過(guò)_____擴(kuò)增。（2）草甘膦抗性基因的部分序列如下：5′——ATGGCT………AGGAAC——3′3′——TACCGA………TCCTTG——5′根據(jù)上述序列，應(yīng)選擇_____（填字母）作為引物進(jìn)行草甘膦抗性基因的擴(kuò)增。A.引物：5′TACCGA3′B.引物：5′GTTCCT3′C.引物：5′AUGGCU3′D.引物：5′ATGGCT3′（3）要使草甘膦抗性基因能在受體細(xì)胞中正常表達(dá)，需要利用質(zhì)粒構(gòu)建成_______________，不能直接將草甘膦抗性基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是___________。（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法把草甘膦抗性基因?qū)朊藁?xì)胞，脫分化形成__________后，草甘膦抗性基因沒(méi)有表達(dá)，再分化發(fā)育成棉花植株后，草甘膦抗性基因正常表達(dá)，原因是______?！敬鸢浮浚?）PCR（2）BD（3）①.基因表達(dá)載體②.需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子、終止子之間（4）①.愈傷組織②.基因的選擇性表達(dá)【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！拘?wèn)1詳解】可通過(guò)PCR的方法擴(kuò)增目的基因（草甘膦抗性基因）?！拘?wèn)2詳解】?jī)蓚€(gè)引物應(yīng)該與目的基因的兩條鏈的3′端分別堿基互補(bǔ)配對(duì)，則需要的引物序列為5′GTTCCT3′和5′ATGGCT3′，BD符合題意?！拘?wèn)3詳解】需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子、終止子之間，目的基因才能表達(dá)，所以需要將草甘膦抗性基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，直接將草甘膦抗性基因?qū)胧荏w細(xì)胞基因是不會(huì)表達(dá)的。【小問(wèn)4詳解】外植體經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織，所以把草甘膦抗性基因?qū)朊藁?xì)胞，脫分化形成愈傷組織。由于基因的選擇性表達(dá)，草甘膦抗性基因在愈傷組織中不表達(dá)，在棉花植株中進(jìn)行了正常的表達(dá)。22.基因工程中的載體分為克隆載體和表達(dá)載體。克隆載體用來(lái)克隆和擴(kuò)增DNA片段，而表達(dá)載體是使外源基因在宿主細(xì)胞中有效表達(dá)。圖1為利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)某種藥用蛋白過(guò)程中使用的一種載體，其中含有氨芐青霉素抗性基因（Ampr）、四環(huán)素抗性基因（Tetr）及多種限制酶的識(shí)別位點(diǎn)；圖2為目的基因及限制酶的識(shí)別位點(diǎn)?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）圖1所示的載體為_(kāi)_____載體，判斷依據(jù)是__________________。（2）質(zhì)粒上一般具有兩種抗生素抗性基因，且其中一個(gè)會(huì)因目的基因的插入而失活。這種雙標(biāo)記和插入失活能使____________（質(zhì)粒）的受體細(xì)胞在含有抗生素的培養(yǎng)基中得以區(qū)分。（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)不能使用SmaI的原因是________。限制酶的最好選擇為_(kāi)_____。（4）重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞和目的基因表達(dá)的細(xì)胞分別是____________和___________?！敬鸢浮浚?）①.表達(dá)②.可以使藥用蛋白基因宿主細(xì)胞中有效表達(dá)（2）含有目基因和不含目的基因（3）①.SmaI會(huì)破壞目的基因②.BamHI和HindIII（4）①.受精卵②.乳腺細(xì)胞【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將