DB32T 4815-2024 淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物監(jiān)測技術(shù)規(guī)范

淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物監(jiān)測技術(shù)規(guī)范發(fā)出布版發(fā)出布版江蘇省市場監(jiān)督管理局Ⅰ前言 Ⅲ 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4試劑和材料 5儀器和設(shè)備 6監(jiān)測步驟 7質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 附錄A（規(guī)范性）采樣器及其適用條件和使用方法 附錄B（資料性）記錄表 附錄C（規(guī)范性）分樣挑揀方法 附錄D（規(guī)范性）物種分類鑒定基本要求 Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省生態(tài)環(huán)境廳提出并歸口。本文件起草單位：江蘇省常州環(huán)境監(jiān)測中心、江蘇省環(huán)境監(jiān)測中心。1DB32/T4815—2024淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物監(jiān)測技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物監(jiān)測的試劑和材料、儀器和設(shè)備、監(jiān)測步驟、質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的要求。本文件適用于湖泊、水庫、河流等水體中淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物的監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ710.8生物多樣性觀測技術(shù)導(dǎo)則淡水底棲大型無脊椎動(dòng)物3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物freshwaterbenthicmacroinvertebrate生活史全部或至少一個(gè)時(shí)期棲息于內(nèi)陸淡水（包括流水與靜水）水體的水底表面或底部基質(zhì)中且個(gè)體不能通過425μm網(wǎng)篩的無脊椎動(dòng)物，它們具有相對(duì)穩(wěn)定的生活環(huán)境，移動(dòng)能力差。注：淡水中常見的大型底棲無脊椎動(dòng)物主要包括水生的軟體動(dòng)物（Mollusca）、環(huán)節(jié)動(dòng)物（Annelida）、節(jié)肢動(dòng)物（Ar?thropoda）、扁形動(dòng)物（Platyhelminthes）、線形動(dòng)物（Nematomorpha）、紐形動(dòng)物（Nem3.2分類單元taxon物種分類工作中的客觀操作單位，有特定的名稱和分類特征，主要包括門（Phylum）、綱（Class）、目3.3密度density單位面積內(nèi)某分類單元或全部淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物的個(gè)體數(shù)量。注：單位為個(gè)每平方米（個(gè)/m2）。3.4生物量biomass單位面積內(nèi)某分類單元或全部淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物的濕重。注：其中軟體動(dòng)物為帶殼濕重，單位為克每平方米（g/m2）。2DB32/T4815—20243.5可涉水河流wadeableriver在不借助工具的條件下，可徒步蹚水而行的河流。注：具體分為涉水可過河流和涉水不可過河流。其中，涉水可過河流具有水深較淺、河床穩(wěn)定、河道淤積程度較輕等特點(diǎn)，可徒步蹚水而過，如山地丘陵地區(qū)的溪流；涉水不可過河流具有沿岸帶水深較淺、河岸穩(wěn)定、岸坡平緩、淤積程度較輕等特點(diǎn)，但主河道水深較深或淤積嚴(yán)重，僅可沿岸蹚水而行，不可蹚水而過，如岸坡較平緩或漫灘較發(fā)育的自然河道。3.6不可涉水河流non?wadeableriver在不借助工具的條件下添加，不可蹚水而行的河流，具有水深較深、岸坡較陡等特點(diǎn)。注：如深U形河流、駁岸直立硬質(zhì)化的河流。4試劑和材料4.1本文件所用試劑均為符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑、蒸餾水或同等純度的水。4.2甲醛溶液：φ（HCHO）=37%~40%。4.3甲醛溶液：φ（HCHO）≈5%。4.4無水乙醇：ρ（C2H5OH）=0.79g/mL。4.5乙醇溶液：φ（C2H5OH）=75%。4.6丙三醇。4.7加拿大樹膠。4.8普氏（Puris）膠：將8g阿拉伯膠和10mL蒸餾水加入燒杯中，并將其置于80℃恒溫水浴，用玻璃棒攪動(dòng)，待膠溶后，依次加入30g水合氯醛、7mL甘油和3mL冰乙酸，繼續(xù)用玻璃棒攪拌均勻，最后以薄棉過濾即成。5儀器和設(shè)備5.1采樣器：根據(jù)生境條件選擇合適的采樣器，各采樣器規(guī)格及其適用條件見附錄A。5.2體視顯微鏡：物鏡變倍比≥5∶1，目鏡10×或15×。5.3生物顯微鏡：物鏡10×、20×、40×,目鏡10×或15×。5.4電子天平：最大稱量220g，分度值0.0001g；最大稱量500g，分度值0.001g；最大稱量3000g，分度值0.01g。5.5洗樣篩：篩網(wǎng)孔徑425μm，篩網(wǎng)材質(zhì)為鋼制、尼龍制或其他不易破損的材料。5.6洗樣盆。5.7便攜式冷藏箱。5.8塑料自封袋或廣口塑料瓶。5.9網(wǎng)格托盤：30cm×36cm，劃30個(gè)網(wǎng)格（每格6cm×6cm）。5.10搪瓷盤。5.11鑷子。5.12細(xì)口吸管。5.13標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒：具蓋。5.14放大鏡。5.15培養(yǎng)皿。3圖1監(jiān)測流程圖DB32/T4815—20244表1不同規(guī)模水體監(jiān)測點(diǎn)位參考布設(shè)數(shù)量水體類型點(diǎn)位數(shù)量50km2~<500km210個(gè)～<15個(gè)500km2~<1.000km215個(gè)～<20個(gè)1000km2~<2000km2按等距分段(涉水可過河流和涉水不可過河流每段分別不超過10km和50km);當(dāng)河流生境或沿線土地利用類型存在明顯差異時(shí)，按主要差異因子的分布情況等),每段布設(shè)不少于2個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位6.2.2采樣區(qū)域的設(shè)置6.2.2.1湖泊和水庫以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，半徑100m的圓形范圍為湖泊和水庫的采樣區(qū)域，見圖2。XX圖2湖泊和水庫監(jiān)測點(diǎn)位和采樣區(qū)域空間關(guān)系示意圖6.2.2.2.1涉水可過河流以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，上下游各50m范圍的河段為采樣區(qū)域。6.2.2.2.2涉水不可過河流和不可涉水河流當(dāng)河寬不超過200m時(shí)，以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，上下游各500m范圍的河段為采樣區(qū)域，當(dāng)河寬為200m及以上時(shí)，以既定監(jiān)測點(diǎn)位為中心，上下游各1000m范圍的河段為采樣區(qū)域，見圖3。5AAX-66.4.3涉水可過河流6.4.3.1根據(jù)水流方向，按逆流采樣原則，自下而上開展樣品采集。6.4.3.2按附錄A要求，使用相應(yīng)的采樣器（5.1）采集采樣區(qū)域內(nèi)的主要生境類型（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等）的樣品。6.4.3.3當(dāng)水深不大于30cm時(shí)，每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位分別使用索伯網(wǎng)和踢網(wǎng)或者索伯網(wǎng)和手抄網(wǎng)采集樣品；當(dāng)水深大于30cm時(shí)，使用手抄網(wǎng)采集樣品。6.4.3.4使用索伯網(wǎng)和踢網(wǎng)或者索伯網(wǎng)和手抄網(wǎng)時(shí)，每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位累計(jì)采樣面積不低于0.36m2和1m2，兩種采樣器采集的樣品混合處理；僅使用手抄網(wǎng)時(shí)，每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位累計(jì)采樣面積不低于1.5m2。6.4.4涉水不可過河流按照逆流采樣原則，按附錄A要求，使用手抄網(wǎng)采集采樣區(qū)域內(nèi)的主要生境類型（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等）的樣品，每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位累計(jì)采樣面積不低于1.5m2。6.4.5不可涉水河流6.4.5.1按照逆流采樣原則，按附錄A要求，使用采泥器和三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)采集采樣區(qū)域內(nèi)的主要生境類型（不同底質(zhì)、水生植物和水文條件等）的樣品，每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位采泥器累計(jì)采樣面積不低于0.25m2，三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)累計(jì)采樣面積不低于1.5m2。6.4.5.2樣品按不同采樣器分別混合，即一份為采泥器采集的樣品，另一份為三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)采集的樣品（6.5~6.11也按不同采樣器對(duì)樣品分別進(jìn)行處理）。6.5樣品篩洗6.5.1將每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位的樣品經(jīng)洗樣篩（5.5）篩洗，直至過篩后的出水澄清。揀出洗樣篩（5.5）內(nèi)較大的雜物，如葉片、植物殘枝、石塊、塑料袋等，將附著在其表面的動(dòng)物個(gè)體沖洗入洗樣篩（5.5）后丟棄。6.5.2當(dāng)樣品中含有較多沙粒、砂石和石塊時(shí)，可將樣品放入洗樣盆（5.6）內(nèi)沖水進(jìn)行浮洗分離，將上層泥水混合物倒入洗樣篩（5.5如此重復(fù)3次~5次。肉眼檢查洗樣盆（5.6）內(nèi)剩余殘?jiān)?，將遺留的動(dòng)物個(gè)體挑揀放入洗樣篩（5.5）內(nèi)，確認(rèn)無遺留后丟棄。6.5.3當(dāng)具備條件時(shí)，可在現(xiàn)場按6.8的要求開展樣品挑揀，否則將樣品按6.6要求封裝保存后，運(yùn)送回駐地或?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行處理。6.6樣品封裝和保存6.6.1將樣品篩洗后的剩余物全部裝入塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）內(nèi)，并檢查洗樣篩（5.5確保無動(dòng)物個(gè)體遺留。貼上標(biāo)簽，注明監(jiān)測點(diǎn)位名稱、樣品采集日期、采集人員以及樣品唯一性標(biāo)識(shí)碼等信息。6.6.2當(dāng)某個(gè)點(diǎn)位的樣品需分裝多個(gè)塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）時(shí)，標(biāo)明樣品編號(hào)及總數(shù)；必要時(shí)，可在塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）內(nèi)放入相同信息的標(biāo)簽。封好袋口或蓋緊瓶蓋，填寫現(xiàn)場采樣記錄6.6.3樣品整理、清點(diǎn)、核對(duì)無誤后，置于便攜式冷藏箱（5.7）并運(yùn)送回實(shí)驗(yàn)室處理。6.6.4若樣品中的動(dòng)物樣本無法及時(shí)挑揀（冷藏保存一般不宜超過24h，室溫保存一般不宜超過5h則在塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）中加入適量的無水乙醇（4.4）或甲醛溶液（4.2）進(jìn)行固定，以防樣品腐爛。固定保存時(shí)間一般不超過2周。6.6.5徹底沖洗并仔細(xì)檢查采樣器（5.1避免樣品遺漏，造成交叉干擾。76.7樣品前處理6.7.1將現(xiàn)場采回的樣品，按6.5要求使用自來水再次篩洗，直至出水完全澄清。若樣品中已添加了無水乙醇（4.4）或甲醛溶液（4.2則將樣品在水中浸泡15min左右，洗脫固定液并使動(dòng)物樣本充分吸水。6.7.2若某個(gè)點(diǎn)位的樣品分裝了多個(gè)塑料自封袋或廣口塑料瓶（5.8）時(shí)，將其合并處理，并在篩洗過程中保持水流速度較緩，輕輕攪動(dòng)，混合均勻。6.8樣品挑揀6.8.1動(dòng)物樣本的挑揀應(yīng)包括已死亡但未腐爛分解的個(gè)體，不應(yīng)包括空殼。6.8.2檢查并確保用于樣品挑揀的工具均無動(dòng)物樣本殘留，避免交叉干擾。6.8.3將經(jīng)過6.7處理的樣品放入搪瓷盤（5.10）中，首先通過肉眼觀察，使用鑷子（5.11）挑揀出個(gè)體相對(duì)較大的動(dòng)物樣本，再使用鑷子（5.11）或細(xì)口吸管（5.12）挑揀出個(gè)體相對(duì)較小的動(dòng)物樣本，當(dāng)肉眼視力無6.8.4挑揀出的動(dòng)物樣本放置于合適大小的標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）中。6.8.5當(dāng)某些種類的個(gè)體數(shù)量極大且難以挑盡時(shí)，則將全部樣品充分拌勻后，選擇二分法（C.1）或網(wǎng)格法（C.2）對(duì)樣品中的這些種類進(jìn)行分樣挑揀，其余種類的動(dòng)物個(gè)體仍全部挑揀。6.8.6當(dāng)樣品中殘?jiān)^多且動(dòng)物個(gè)體密度較低時(shí)，累計(jì)挑揀時(shí)間達(dá)4h仍無法完成，則停止挑揀，記錄已挑揀樣品比例。6.8.7除6.8.5、6.8.6情況外，樣品中的動(dòng)物個(gè)體應(yīng)全部挑揀。6.8.8當(dāng)日的挑揀工作出現(xiàn)中斷時(shí)，將待挑揀樣品冷藏保存，保存時(shí)間不宜超過24h。6.8.9挑揀過程中，若發(fā)現(xiàn)小個(gè)體樣本、偶見物種樣本或暫時(shí)難以辨認(rèn)的樣本時(shí)，單獨(dú)保存，并予以記錄。6.8.10根據(jù)樣品挑揀情況，填寫大型底棲無脊椎動(dòng)物樣品挑揀及固定記錄表（見表B.2）相關(guān)內(nèi)容。6.9樣品固定6.9.1軟體動(dòng)物和水生昆蟲樣本先用甲醛溶液（4.3）固定，2d~3d后將甲醛溶液倒出并加入乙醇溶液6.9.2水棲寡毛類和其他動(dòng)物先放入培養(yǎng)皿（5.15）中，加少量水，并緩緩滴加數(shù)滴乙醇溶液（4.5）將其麻醉，待其完全舒展伸直后，再用甲醛溶液（4.3）固定，2d~3d后將甲醛溶液倒出并加入乙醇溶液（4.5）固定。6.9.3在野外或遠(yuǎn)途采集樣品過程中，當(dāng)不具備6.9.1和6.9.2的固定條件時(shí)，可直接用乙醇溶液（4.5）對(duì)動(dòng)物樣本進(jìn)行固定。6.9.4固定液應(yīng)完全浸沒動(dòng)物樣本，并于首次加入固定液后的2d~3d更換一次。6.9.5在標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）外貼上標(biāo)簽，注明監(jiān)測點(diǎn)位名稱、樣品固定日期、樣品處理人員、樣品挑揀比例等相關(guān)信息，當(dāng)某個(gè)點(diǎn)位的動(dòng)物樣本需分裝多個(gè)標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）時(shí)，標(biāo)明樣本編號(hào)及分裝總數(shù)；必要時(shí)，可在標(biāo)本瓶或標(biāo)本盒（5.13）內(nèi)放入相同信息的標(biāo)簽。填寫大型底棲無脊椎動(dòng)物樣品挑揀及固定記錄表（見表B.2）相關(guān)內(nèi)容。6.9.6將倒出的乙醇溶液和甲醛溶液等固定液存放至專用的廢液桶，按危險(xiǎn)廢物處理。6.10樣品分析6.10.1物種鑒定形態(tài)學(xué)觀察。若存在卵、蛹等且可以被鑒定的，標(biāo)明其生命階段。86.10.1.2使用生物顯微鏡（5.3）對(duì)搖蚊幼蟲、寡毛綱等類群中的一些較小個(gè)體動(dòng)物樣本進(jìn)行觀察時(shí)，滴加1滴~2滴丙三醇（4.6增加透光性，輔助觀察分類特征。6.10.1.3按附錄D要求對(duì)物種進(jìn)行鑒定，也可依據(jù)監(jiān)測工作目標(biāo)的實(shí)際需求，將其鑒定到盡可能低的分類單元。6.10.1.4鑒定完成后，將個(gè)體完整、分類特征明顯的動(dòng)物樣本單獨(dú)存放，添加乙醇溶液（4.5）進(jìn)行固定。需進(jìn)一步觀察、研究或尚有異議的物種，用加拿大樹膠（4.7）或普氏膠（4.8）制作典型分類特征部位的封片，保存待研究。6.10.1.5對(duì)于一些不能確認(rèn)的物種，可拍攝典型特征照片或提供動(dòng)物樣本，邀請(qǐng)專家指導(dǎo)鑒定；對(duì)于樣品中完整個(gè)體較少且鑒定過程會(huì)造成不可逆破壞的樣本（如需制片觀察的搖蚊幼蟲盡可能多地拍攝典型特征照片，以備復(fù)核和長期保存。6.10.1.6有條件的實(shí)驗(yàn)室可借助分子生物學(xué)技術(shù)輔助鑒定。6.10.1.7當(dāng)發(fā)現(xiàn)外來入侵物種時(shí)，單獨(dú)保存并記錄其種類、密度和生物量等信息。6.10.2.1每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位的物種按6.10.1要求鑒定，并一一對(duì)應(yīng)統(tǒng)計(jì)個(gè)體數(shù)。6.10.2.2若遇不完整的動(dòng)物個(gè)體，只以頭部計(jì)數(shù)，其中節(jié)肢動(dòng)物只統(tǒng)計(jì)包含頭節(jié)和胸節(jié)的個(gè)體，不統(tǒng)計(jì)零散的腹部、附肢等。6.10.3.1按動(dòng)物樣本的個(gè)體大小選擇相應(yīng)量程及分度值的電子天平（5.4對(duì)每個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位的物種進(jìn)行分類稱重。6.10.3.2去除待稱重個(gè)體樣本附著的雜物，使用吸水紙（5.16）吸干表面水分。吸干軟體動(dòng)物等外套腔內(nèi)的水分，并帶殼稱重。6.10.3.3對(duì)于個(gè)體較小且無法直接稱量獲得生物量數(shù)據(jù)的物種，其生物量以電子天平的最小分度值6.10.3.4填寫大型底棲無脊椎動(dòng)物分析記錄表（見表B.3）。6.11標(biāo)本保存6.11.1經(jīng)鑒定、計(jì)數(shù)和稱重完成后的動(dòng)物標(biāo)本，使用乙醇溶液（4.5）或甲醛溶液（4.3）進(jìn)行固定，按種類分類存放，貼上標(biāo)簽，注明中文學(xué)名、拉丁名、監(jiān)測點(diǎn)位名稱、采集日期、固定液以及鑒定人員等信息，填寫大型底棲無脊椎動(dòng)物標(biāo)本保存記錄表（見表B.4）。6.11.2對(duì)較典型的標(biāo)本拍攝特征圖片并單獨(dú)固定保存。6.11.3動(dòng)物標(biāo)本一般保存1年或至任務(wù)完成為止。6.11.4有條件的實(shí)驗(yàn)室可長期保存動(dòng)物標(biāo)本，每半年檢查固定液和標(biāo)簽信息1次~2次。6.12結(jié)果計(jì)算與表示6.12.1密度計(jì)算6.12.1.1根據(jù)6.10的分析結(jié)果，按式（1）計(jì)算大型底棲無脊椎動(dòng)物各分類單元的密度。Di=di/(AcA)…………（1）式中：Di——分類單元i的密度，單位為個(gè)每平方米（個(gè)/m2di——樣品計(jì)數(shù)所得分類單元i的個(gè)體數(shù)量，單位為個(gè)；9Ac——樣品的挑揀比例，以分?jǐn)?shù)表示；A——現(xiàn)場樣品采集面積，單位為平方米（m2）。6.12.1.2基于某種采樣器，監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物密度計(jì)算見式（2）。D=1Di…………（2）式中：D——基于某種采樣器的監(jiān)測點(diǎn)位大型底棲無脊椎動(dòng)物密度，單位為個(gè)每平方米（個(gè)/m2N——基于某種采樣器的監(jiān)測點(diǎn)位大型底棲無脊椎動(dòng)物物種數(shù)。6.12.1.3各監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物密度計(jì)算結(jié)果可修約至一位小數(shù)。6.12.2生物量計(jì)算6.12.2.1根據(jù)6.10的分析結(jié)果，按式（3）計(jì)算大型底棲無脊椎動(dòng)物各分類單元的生物量。Bi=bi/(AcA)…………（3）式中：Bi——分類單元i的生物量，單位為克每平方米（g/m2bi——樣品稱重所得分類單元i的重量，單位為克（g）。6.12.2.2基于某種采樣器，監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物生物量計(jì)算見式（4）。B=1Bi…………（4）式中：B——基于某種采樣器的監(jiān)測點(diǎn)位大型底棲無脊椎動(dòng)物生物量，單位為克每平方米（g/m2）。6.12.2.3各監(jiān)測點(diǎn)位的淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物生物量計(jì)算結(jié)果可修約至兩位小數(shù)。6.12.3不同采樣器的結(jié)果合并6.12.3.1分類單元名錄以不同采樣器采集結(jié)果的并集計(jì)。6.12.3.2對(duì)于使用采泥器和三角拖網(wǎng)（或手抄網(wǎng)）進(jìn)行樣品采集的湖泊、水庫和不可涉水河流，當(dāng)某分類單元在不同采樣器采集的樣品中均有出現(xiàn)時(shí)，個(gè)體較大（大型蚌類）、移動(dòng)能力較強(qiáng)（十足目、蜻蜓目、半翅目和鞘翅目等）的分類單元的密度和生物量以三角拖網(wǎng)或手抄網(wǎng)采集的結(jié)果計(jì)，其余以采泥器結(jié)果計(jì)。6.12.4結(jié)果匯總按6.12.3匯總各監(jiān)測點(diǎn)位的大型底棲無脊椎動(dòng)物分類單元名錄及其對(duì)應(yīng)的密度和生物量，填寫監(jiān)7質(zhì)量保證和質(zhì)量控制7.1人員基本要求7.1.1現(xiàn)場采樣和實(shí)驗(yàn)室分析人員、復(fù)核人員及負(fù)責(zé)人應(yīng)定期參加專題培訓(xùn)并獲得授權(quán)。7.1.2質(zhì)量監(jiān)督人員應(yīng)熟悉淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物系統(tǒng)分類且從事淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物監(jiān)測工作不低于5年。7.1.3復(fù)核人員應(yīng)分別對(duì)現(xiàn)場采樣記錄、樣品挑揀及固定記錄、分析記錄、標(biāo)本保存記錄和監(jiān)測結(jié)果匯總記錄開展校核并簽字確認(rèn)。7.1.4現(xiàn)場負(fù)責(zé)人對(duì)樣品采集、樣品篩洗、樣品封裝和保存等過程進(jìn)行監(jiān)督和審核。7.1.5實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)樣品前處理、樣品挑揀、樣品固定、樣品分析、標(biāo)本保存等過程進(jìn)行監(jiān)督和審核。7.2樣品采集7.2.1制定合理的采樣計(jì)劃，使用手持式全球定位系統(tǒng)準(zhǔn)確定位監(jiān)測點(diǎn)位并用符合質(zhì)量要求的設(shè)備進(jìn)行樣品采集。7.2.2為實(shí)現(xiàn)采樣代表性和效率的平衡，可在樣品采集前開展前期摸底監(jiān)測，確定物種累積與采樣面積的關(guān)系，以選擇最佳采樣面積。7.3樣品挑揀7.3.1質(zhì)量監(jiān)督人員應(yīng)在樣品挑揀完畢后立即開展抽樣檢查。7.3.2抽取約10%已挑揀后的剩余殘?jiān)匦绿魭?.3.3若重新挑揀出的動(dòng)物個(gè)體數(shù)不超過該樣品已挑揀出動(dòng)物個(gè)體數(shù)的10%，且未發(fā)現(xiàn)新的分類單元，則該樣品挑揀合格，否則，應(yīng)進(jìn)行第二次抽檢，若仍不合格，則該樣品應(yīng)重新挑揀。7.4樣品分析7.4.1實(shí)驗(yàn)室需建立并統(tǒng)一淡水大型底棲無脊椎動(dòng)物系統(tǒng)分類學(xué)檢索資料、圖譜及參考標(biāo)本。7.4.2若需委托分類學(xué)專家對(duì)標(biāo)本進(jìn)行鑒定時(shí)，應(yīng)做好信息記錄，包括鑒定人姓名、所在單位、日期等。7.4.3具備條件的實(shí)驗(yàn)室，可選擇約10%已完成分析的樣品，開展實(shí)驗(yàn)室內(nèi)人員比對(duì)、實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)或者與分類學(xué)專家比對(duì)。依據(jù)雙方鑒定和計(jì)數(shù)結(jié)果，計(jì)算物種分類差異百分比PTD和計(jì)數(shù)差異百分比PDE，如PTD≤15%且PDE≤5%，物種分類鑒定計(jì)數(shù)合格。否則，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)組織比對(duì)人員圍繞分析結(jié)果開展討論，查找原因。式中：PTD——物種分類差異百分比；C——比對(duì)分析結(jié)果中，物種分類一致的數(shù)量，單位為個(gè)；N——比對(duì)分析結(jié)果中，物種較多一方數(shù)量，單位為個(gè)。7.4.5計(jì)數(shù)差異百分比按公式（6）計(jì)算。PDE=×100%…………（6）式中：PDE——計(jì)數(shù)差異百分比；1——比對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果1，單位為個(gè)；2——比對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果2，單位為個(gè)。（規(guī)范性）采樣器及其適用條件和使用方法大型底棲無脊椎動(dòng)物樣品采樣器及其適用條件和使用方法見表A.1。表A.1采樣器及其適用條件和使用方法采樣器規(guī)格適用條件使用方法示例圖片底質(zhì)類型水體類型彼得森采泥器開口面積2淤泥，泥沙等軟質(zhì)底質(zhì)生境打開閉合夾雙頁，掛好兩側(cè)提鉤；緩慢放至水底，采泥器觸底后繼續(xù)放繩，抖脫兩側(cè)提鉤；輕輕向上拉緊提繩使閉合夾雙頁慢慢閉合采集底質(zhì)，手感提繩變沉后，雙頁即閉合完成；將采泥器拉出水面、置于桶或盆內(nèi)，打開閉合夾雙頁獲取采得的底質(zhì)?？寺赡嗥鏖_口面積2拉起閉合夾拉繩，固定在拉繩固定器上；緩慢放至水底，采泥器觸底后，將使錘沿不銹鋼纜或尼龍繩釋放落下；等待使錘落下片刻即閉合夾閉合（落下的使錘擊中彈簧釋放管后，閉合夾拉繩會(huì)從拉繩固定器上脫落，閉合夾彈簧會(huì)使閉合夾閉合將采泥器拉出水面、置于桶或盆內(nèi)，打開閉合夾拉繩獲取采得的底質(zhì)范維恩（VanVeen）采泥器開口面積2打開閉合夾雙側(cè)連接桿，掛上掛鉤；緩慢放至水底，采泥器觸底后，掛鉤自動(dòng)脫落，閉合夾被釋放；緩慢拉緊提繩，閉合夾就會(huì)慢慢關(guān)閉，手感提繩變沉后，雙頁即閉合完成；將采泥器拉出水面、置于桶或盆內(nèi)，打開閉合夾雙側(cè)連接桿獲取采得的底質(zhì)網(wǎng)框邊長30cm×石塊等涉水可過河流將網(wǎng)開口面向水流方向，用鐵鍬將網(wǎng)框范圍內(nèi)的泥砂、植物根墊、枯枝落葉等均裝進(jìn)索伯網(wǎng)；如有石塊等較大的基質(zhì)，則將其表面生物洗進(jìn)索伯網(wǎng)后棄去；反復(fù)沖洗紗網(wǎng)袋將所有生物沖進(jìn)底部收集區(qū)中三角拖網(wǎng)網(wǎng)框邊長30cm×30cm×淤泥，泥沙等軟質(zhì)底質(zhì)生境；硬質(zhì)底質(zhì)生境；草型生境等湖泊和水庫不可涉水的可涉水河流當(dāng)使用船采集樣品時(shí)，選擇三角拖網(wǎng)采集樣品。在船靜止?fàn)顟B(tài)下拋入水中，沉底后拉緊拖繩，在水底緩慢拖行，累計(jì)拖拽距離一般為10m~15m。其中，淤積較為嚴(yán)重的點(diǎn)可以適當(dāng)縮短拖拽距離約為5m，以硬質(zhì)底為主的點(diǎn)可以適當(dāng)延長拖拽距離至20m~30m。當(dāng)流速較快時(shí)，需配重錘，避免拖網(wǎng)上浮表A.1采樣器及其適用條件和使用方法(續(xù))示例圖片水體類型網(wǎng)網(wǎng)框底邊長涉水河流當(dāng)沿岸水深不超過1m時(shí)，使用手抄網(wǎng)采集樣品。使手抄網(wǎng)底的直邊緊貼底質(zhì)，迎向水流方向型，累計(jì)掃過底質(zhì)的距離為3m～5m圖A.7圖A.8踢網(wǎng)底邊長1m,網(wǎng)孔徑沙質(zhì)，砂迎向水流方向布置踢網(wǎng)，以石頭將其底邊壓般為15min圖A.9圖A.1彼得森(Peterson)采泥器圖A.3?？寺?Ekman)采泥器圖A.4范維恩(VanVeen)采泥器圖A.6三角拖網(wǎng)圖A.7D型手抄網(wǎng)圖A.9踢網(wǎng)（資料性） 記錄表B.1現(xiàn)場采樣記錄表大型底棲無脊椎動(dòng)物樣品現(xiàn)場采樣記錄見表B.1。表B.1現(xiàn)場采樣記錄表大型底棲無脊椎動(dòng)物現(xiàn)場采樣記錄表點(diǎn)位編號(hào)：點(diǎn)位名稱：采樣日期：年月日采樣時(shí)間：監(jiān)測點(diǎn)位所在水體類型：○湖泊○水庫○涉水可過河流○涉水不可過河流○不可涉水河流現(xiàn)場采樣示意圖：生境觀測：生境類型采樣區(qū)域底質(zhì)水流ⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡⅠⅡ硬質(zhì)靜水○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○淤泥緩流○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○細(xì)沙急流○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○碎石湍流○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○○水草生長情況藻類水華情況其他樣品采集：采樣器1面積/m2采樣器2面積/m2采樣器（設(shè)備編號(hào)①彼得森采泥器(),②埃克曼采泥器(),③范維恩采泥器(),④索伯網(wǎng)(),⑤三角拖網(wǎng)(),⑥D(zhuǎn)型手抄網(wǎng)(),⑦直角手抄網(wǎng)(),⑧踢網(wǎng)()樣品封裝與保存：樣品名稱：樣品標(biāo)識(shí)碼：樣品是否分裝○是，分裝數(shù)量：○否樣品保存條件：○常溫保存○冷藏保存○添加固定液(□無水乙醇（終濃度約75%□甲醛溶液（終濃度約5%備注：簡要記錄采樣當(dāng)天及前一周的天氣以及其他現(xiàn)場情況。采樣人員：復(fù)核人員：現(xiàn)場負(fù)責(zé)人：B2樣品挑揀及固定記錄表大B2樣品挑揀及固定記錄表大型底棲無脊椎動(dòng)物樣品挑揀及固定記錄見表B2。表B2樣品挑揀及固定記錄表固定記錄動(dòng)物樣本固定添加量mL審核人員：審核人員：固定液及更換情況單獨(dú)保存樣本○是，○是，○否○是，○是，○否分裝數(shù)量 / / / // / / / //樣品挑揀及是否分樣○否○否大型底棲無脊椎動(dòng)物○是○是挑揀人員：復(fù)核人員：日期及時(shí)間月日月日保存條件○常溫保存○冷藏保存○添加固定液○常溫保存○冷藏保存○添加固定液采樣日期及起始保存時(shí)間月日月日樣品名稱及樣品標(biāo)識(shí)碼編號(hào)備注DB32/T4815—2024B.3分析記錄表大型底棲無脊椎動(dòng)物樣品分析記錄見表B.3。表B.3分析記錄表大型底棲無脊椎動(dòng)物樣品分析記錄表樣品名稱：樣品標(biāo)識(shí)碼：采樣器：采樣面積：m2體視顯微鏡編號(hào)：生物顯微鏡編號(hào)：電子天平編號(hào)：編號(hào)類群中文學(xué)名拉丁名數(shù)量個(gè)重量g分析結(jié)果密度個(gè)/m2生物量g/m2123456789101112131415“類群”欄中填寫相應(yīng)的序號(hào)：①寡毛綱Oligochaeta；②蛭綱Hirudinea；③多毛綱Polychaeta；④搖蚊科Chironomidae；⑤蜻蜓目Odonata；⑥蜉蝣目Ephemeroptera；⑦毛翅目Trichoptera；⑧襀翅目Plecoptera；⑨甲殼動(dòng)物亞門Crustacea；⑩腹足綱Gastropoda；?雙殼綱Bivalvia；?線蟲動(dòng)物門Nematoda；?線形動(dòng)物門Nematomorpha；?扁形動(dòng)物門Platy?helminthes；?紐形動(dòng)物門Nemertea；?其他（注明類群名稱）。該樣品的物種數(shù)：密度：個(gè)/m2生物量：