（2019年-2023年）高考生物真題匯編20細胞工程與胚胎工程（學(xué)生用）

專題20細胞工程與胚胎工程

考點1動物細胞工程

K2023年高考真題U

1.(2023?北京?統(tǒng)考高考真題)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單

克隆抗體用于快速檢測PTH,有關(guān)制備過程的敘述不正確的是()

A.需要使用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)

B.需要制備用PTH免疫的小鼠

C.利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細胞

D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞

2.(2023?海南?高考真題)某團隊通過多代細胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干

細胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎Ｏ铝杏嘘P(guān)敘述錯誤的是()

A.營養(yǎng)供應(yīng)充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細胞不會發(fā)生接觸抑制

B.獲得XO胚胎干細胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異

C.XO胚胎干細胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎倪^程發(fā)生了細胞分化

D.若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法獲得有功能的卵母細胞用于繁育

3.(2023?湖南?統(tǒng)考高考真題)某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?；卮鹣?/p>

列問題：

(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細菌，培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水和—o

(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽抱桿菌H,其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測該抗菌肽

對的抑制效果較好，若要確定其有抑菌效果的最低濃度，需在________Ng-mL-i濃度區(qū)間進

一步實驗。

抗菌肽濃度/(ng-mL-1)

測試菌

55.2027.6013.806.903.451.730.86

金黃色葡萄球菌-----++

枯草芽抱桿菌-----++

禾谷鐮抱菌-++++++

假絲酵母-++++++

注：“+”表示長菌，表示未長菌。

(3)研究人員利用解淀粉芽抱桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基

因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)

生淀粉酶M。分析可能的原因是（答出兩點即可）。

（4）研究人員通過肺上皮干細胞誘導(dǎo)生成肺類器官，可自組裝或與成熟細胞組裝成肺類裝配體，如圖所示。

肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及—（答出兩點）等基本條件。肺類裝配體

形成過程中是否運用了動物細胞融合技術(shù)—（填“是"或"否"）o

修炎器官A附奧；Hl'BV

I共培養(yǎng)II技培養(yǎng)I

?繇

“類裝N體1Ml類裝配體2

（5）耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是一種耐藥菌，嚴重危害人類健康。科研人員擬用MRSA感染肺

類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽抱桿菌H抗菌肽是否對MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實驗

材料中必備的是。

①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體②MRSA感染的肺類裝配體③解淀粉芽抱桿菌H抗菌肽④生理

鹽水⑤青霉素（抗金黃色葡萄球菌的藥物）⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物）

4.（2023?湖北?統(tǒng)考高考真題）某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴重。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原

來制備單克隆抗體，以期快速檢測該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示。

單克隆抗體篩選<—雜交瘤細胞篩選

回答下列問題：

（1）與小鼠骨髓瘤細胞融合前，己免疫的脾細胞（含漿細胞）（填“需要”或“不需要”）通過原代培養(yǎng)擴

大細胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進細胞融合，該過程中PEG對細胞膜的作用是o

（2）在雜交瘤細胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基），該培養(yǎng)基對和_____生長

具有抑制作用。

（3）單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進行雜交，其目的是o

(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是

OHOHPP

5,-rH'i?Il?????3,\IIIIIrn3,

3,??iiiU"ill5，31IIIIIIIIIII1.5,

OHOHPP

①②

POHOHP

3,

5，TT7'IIIIIn..ri3/^TT^'lIIIIITT7

3,I□III]JIIII5，3>IIIIII1^1IIII5>

OHPPOH

④

K2022年高考真題U

5.（2022?遼寧?統(tǒng)考高考真題）二甲基亞颯（DMSO）易與水分子結(jié)合，常用作細胞凍存的滲透性保護劑。

干細胞凍存復(fù)蘇后指標(biāo)檢測結(jié)果見下表。下列敘述錯誤的是（）

凍存劑

合成培養(yǎng)基+DMSO合成培養(yǎng)基+DMSO+血清

指標(biāo)

Gi期細胞數(shù)百分比（％）65.7879.85

活細胞數(shù)百分比（％）15.2941.33

注：細胞分裂間期分為Gi期、S期（DNA復(fù)制期）和G2期

A.凍存復(fù)蘇后的干細胞可以用于治療人類某些疾病

B.Gi期細胞數(shù)百分比上升，導(dǎo)致更多干細胞直接進入分裂期

C.血清中的天然成分影響Gi期，增加干細胞復(fù)蘇后的活細胞數(shù)百分比

D.DMSO的作用是使干細胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水

6.（2022.江蘇.統(tǒng)考高考真題）航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細胞跳動的視頻。下

列相關(guān)敘述正確的是（）

A.培養(yǎng)心肌細胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌

B.培養(yǎng)心肌細胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳

C.心肌細胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖

D.心肌細胞在神經(jīng)細胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動

7.（2022?福建?統(tǒng)考高考真題）我國科研人員在航天器微重力環(huán)境下對多能干細胞的分化進行了研究，發(fā)現(xiàn)

與正常重力相比，多能干細胞在微重力環(huán)境下加速分化為功能健全的心肌細胞。下列敘述錯誤的是（）

A.微重力環(huán)境下多能干細胞和心肌細胞具有相同的細胞周期

B.微重力環(huán)境下進行人體細胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液

C.多能干細胞在分化過程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變

D.該研究有助于了解微重力對細胞生命活動的影響

8.（2022?湖北?統(tǒng)考高考真題）某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元

生長緩慢，其原因不可能的是（）

A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封

C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性

9.（2022?湖北?統(tǒng)考高考真題）滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實驗中常見的操作。下列敘述正確的是（）

A.動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行

B.微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進行滅菌

D.可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌

10.（2022?山東?高考真題）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后

重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（）

LA

抗體1抗體2抗體3

A.雙抗可同時與2種抗原結(jié)合

B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞

C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原

D.同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞

11.（2022.江蘇?統(tǒng)考高考真題）下圖表示利用細胞融合技術(shù)進行基因定位的過程，在人-鼠雜種細胞中人的

染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進行基因定位?，F(xiàn)檢測細胞I、II、III中人的4種酶活性，

只有n具有芳燒羥化酶活性，只有iii具有胸音激酶活性，I、iii都有磷酸甘油酸激酶活性，I、II、in均

有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

保留的人IIIin

類染色體X,112,11

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合

B.細胞I、II、III分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細胞

C.芳煌羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上

D.胸背激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上

12.(2022?浙江?統(tǒng)考高考真題)回答下列(一)、(-)小題：

(-)紅曲霉合成的紅曲色素是可食用的天然色素，具有防腐、降脂等功能。研究者進行了紅曲色素的提

取及紅色素的含量測定實驗，流程如下：

(1)取紅曲霉菌種斜面，加適量_________洗下菌苔，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得菌種。經(jīng)

液體發(fā)酵，收集紅曲霉菌絲體，紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合，經(jīng)浸提、,獲得的上清液即

為紅曲色素提取液。為進一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細胞進行處理。

(2)紅曲色素包括紅色素、黃色素和橙黃色素等，紅色素在390nm、420nm和505nm波長處均有較大吸收峰。

用光電比色法測定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時，通常選用505nm波長測定的原因是。測

定時需用作空白對照。

(3)生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘渣，經(jīng)處理后作為飼料添加劑或有機肥，這屬于廢棄物的無害化和一

處理。

(二)我國在新冠疫情方面取得了顯著的成效，但全球疫情形勢仍然非常嚴峻、尤其是病毒出現(xiàn)了新變異

株一德爾塔、奧密克戎，更是威脅著全人類的生命健康。

(4)新冠病毒核酸定性檢測原理是：以新冠病毒的單鏈RNA為模板，利用酶合成DNA,經(jīng)PCR擴

增，然后在擴增產(chǎn)物中加入特異的,如果檢測到特異的雜交分子則核酸檢測為陽性。

(5)接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制備技術(shù)要點是：將腺病毒的復(fù)制基因敲除；

以新冠病毒的_______基因為模板合成的DNA插入腺病毒基因組，構(gòu)建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細

胞內(nèi)表達產(chǎn)生新冠病毒抗原，從而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)。在此過程中，腺病毒的作用是作為基因工程中目

的基因的=將腺病毒復(fù)制基因敲除的目的是。

(6)單克隆抗體有望用于治療新冠肺炎。單克隆抗體的制備原理是：取免疫陽性小鼠的細胞與骨

髓瘤細胞混合培養(yǎng)，使其融合，最后篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。與植物組織培養(yǎng)相比，雜交瘤

細胞擴大培養(yǎng)需要特殊的成分，如胰島素和o

13.(2022?福建?統(tǒng)考高考真題)美西嫄具有很強的再生能力。研究表明，美西螺的巨噬細胞在斷肢再生的

早期起重要作用。為研究巨噬細胞的作用機制，科研人員制備了抗巨噬細胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗

體，具體方法如下?；卮鹣铝袉栴}：

(一)基因工程抗原的制備

⑴根據(jù)美西螺CD14基因的核昔酸序列，合成引物，利用PCR擴增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引

物的3，一OH與加入的脫氧核甘酸的5，一P形成磷酸二酯鍵，則新合成鏈的延伸方向是(填

XholSall

JCD141

-CTCGAG—

8GAGCTC一

-GTCGAC-

—CAGCTG—

t

⑵載體和CD14片段的酶切位點及相應(yīng)的酶切抗性基因序列如圖1所示。用XhoI和Sal1分別酶切CD14

和載體后連接，CD14接入載體時會形成正向連接和反向連接的兩種重組DNA.可進一步用這兩種限制酶

對CD14的連接方向進行鑒定，理由是。

培養(yǎng)能表達CD14蛋白的大腸桿菌，分離純化目的蛋白。

(二)抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示：

W霜廿q—*w蕓%一承三7^Y^k丫Y

珊胞特緘蕊先承7崎戶⑥YY

WSP2磔田胞

國圖2

(3)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射—和.

(4)步驟②所用的SP2/0細胞的生長特點是一

(5)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中，根據(jù)抗原一抗體雜交原理，需加入①進行專一抗體檢測,檢測過

程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細胞不能分泌抗CD14抗體，原因是②。

(6)步驟⑥從一中提取到大量的抗CD14抗體，用于檢測巨噬細胞。

14.(2022?遼寧?統(tǒng)考高考真題)某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中，需要表達N蛋白胞外段，制備相

應(yīng)的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。

I.N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1

蛋白胞外段基因脂質(zhì)器|病毒包|組裝收集|

Nr|密包細胞AN蛋白胞外段

重組慢病毒質(zhì)粒導(dǎo)入|囊細胞|釋放|麗嘉|表達、純化

圖1

(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時，選用氨革青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，目的是O用脂質(zhì)體將重組慢

病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細胞，質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體(填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之

間”)。

(2)質(zhì)粒在包裝細胞內(nèi)組裝出由_________組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細胞進而表達并分離、純化N蛋

白胞外段。

II.N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2

圖2

(3)用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進行免疫后，取小鼠脾組織用酶處理，制成細胞懸液，置于含

有混合氣體的中培養(yǎng)，離心收集小鼠的B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞進行融合。

(4)用選擇性培養(yǎng)基對融合后的細胞進行篩選，獲得雜交瘤細胞，將其接種到96孔板，進行培養(yǎng)。

用技術(shù)檢測每孔中的抗體，篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細胞

株，經(jīng)體外擴大培養(yǎng)，收集,提取單克隆抗體。

(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合，形成,實現(xiàn)特異性治療。

15.(2022?海南?統(tǒng)考高考真題)以我國科學(xué)家為主的科研團隊將OSNL(即4個基因Oct4/Sox2/Nanog

/Lin28A的縮寫)導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細胞(CEFs),誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS

分化為誘導(dǎo)原始生殖細胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中，最終獲得具有黑

羽雞遺傳特性的后代，實驗流程如圖?；卮鹣铝袉栴}。

白羽雞黑羽雞

(受體)(供體)

OSNI^-雞胚成纖維細胞

(CEFs)

誘導(dǎo)多能干細胞

注射到受體I(iPS)

當(dāng)胚血管中初誘導(dǎo)原始生殖細胞

(iPGCs)

(l)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的，為了獲得單細胞懸液，雞胚組織剪碎后需用

處理。動物細胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加等天然成分，以滿足細胞對某些細胞因子的

需求。

(2)體外獲取OSNL的方法有(答出1種即可)。若要在CEFs中表達外源基因的蛋白，需構(gòu)建

基因表達載體，載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動子和等。啟動子是

識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動o

(3)iPS細胞和iPGCs細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是o

(4)誘導(dǎo)iPS細胞的技術(shù)與體細胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是o

(5)該實驗流程中用到的生物技術(shù)有(答出2點即可)。

K2021年高考真題U

16.（2021?湖北?統(tǒng)考高考真題）自青霉素被發(fā)現(xiàn)以來，抗生素對疾病治療起了重要作用。目前抗生素的不

合理使用已經(jīng)引起人們的關(guān)注。下列關(guān)于抗生素使用的敘述，正確的是（）

A.作用機制不同的抗生素同時使用，可提高對疾病的治療效果

B.青霉素能直接殺死細菌，從而達到治療疾病的目的

C.畜牧業(yè)中為了防止牲畜生病可大量使用抗生素

D.定期服用抗生素可預(yù)防病菌引起的腸道疾病

17.（2021?山東?統(tǒng)考高考真題）一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)

生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，

可利用該小鼠的免疫細胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的

是（）

A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大

B.單抗制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合

C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗

D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況

18.（2021?浙江?統(tǒng)考高考真題）下圖為動物成纖維細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）

①切取組織②制備細胞懸浮液③原代培養(yǎng)④傳代培養(yǎng)

A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進行

B.步驟②中用鹽酸溶解細胞間物質(zhì)使細胞分離

C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理

D.步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細胞轉(zhuǎn)化

19.（2021?重慶?高考真題）為了研究PDCD4基因?qū)π∈笞訉m內(nèi)膜基質(zhì)細胞凋亡的影響，進行了相關(guān)實驗。

（1）取小鼠子宮時，為避免細菌污染，手術(shù)器具應(yīng)進行處理；子宮取出剪碎后，用處理一定時間，

可獲得分散的子宮內(nèi)膜組織細胞，再分離獲得基質(zhì)細胞用于培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)有（填寫兩種）；培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%,其主要作用是o

（3）在含PDCD4基因的表達載體中，啟動子的作用是。為了證明PDCD4基因?qū)|(zhì)細胞凋

亡的作用，以含PDCD4基因的表達載體和基質(zhì)細胞的混合培養(yǎng)為實驗組，還應(yīng)設(shè)立兩個對照組，分別

為。經(jīng)檢測，實驗組中PDCD4表達水平和細胞凋亡率顯著高于對照組，說明

該基因?qū)|(zhì)細胞凋亡具有（填“抑制”或“促進”）作用。

20.（2021.江蘇?高考真題）根據(jù)新冠病毒致病機制及人體免疫反應(yīng)特征研制新冠疫苗，廣泛接種疫苗可以

快速建立免疫屏障，阻擊病毒擴大。圖1為新冠病毒入侵細胞后的增殖示意圖，圖2為人體免疫應(yīng)答產(chǎn)生

抗體的一般規(guī)律示意圖。請據(jù)圖回答下列問題。

抗

體

濃

度

⑴圖1中，新冠病毒通過S蛋白與細胞表面的ACE2受體結(jié)合，侵入細胞釋放出病毒的（+）RNA,在宿主

細胞中經(jīng)合成病毒的RNA聚合酶。

（2）在RNA聚合酶的作用下，病毒利用宿主細胞中的原料，按照原則合成（-）RNAo隨后大量合

成新的（+）RNAo再以這些RNA為模板，分別在_________大量合成病毒的N蛋白和S、M、E蛋白。

（3）制備病毒滅活疫苗時，先大量培養(yǎng)表達的細胞，再接入新冠病毒擴大培養(yǎng)，滅活處理后制備疫

苗。細胞培養(yǎng)時需通入CO2,其作用是=

（4）制備S蛋白的mRNA疫苗時，體外制備的mRNA常用脂質(zhì)分子包裹后才用于接種。原因一是人體血液

和組織中廣泛存在_______,極易將裸露的mRNA水解，二是外源mRNA分子不易進入人體細胞產(chǎn)生抗原。

（5）第一次接種疫苗后，人體內(nèi)識別到S蛋白的B細胞，經(jīng)過增殖和分化，形成的細胞可合成并分泌

特異性識別的IgM和IgG抗體（見圖2）,形成的細胞等再次接觸到S蛋白時，發(fā)揮免疫保

護作用。

（6）有些疫苗需要進行第二次接種，據(jù)圖2分析進行二次接種的意義是。

21.（2021?湖南?統(tǒng)考高考真題）M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外

源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)

基因克隆動物A,流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

胚

胚

胎

胎

移

代

早

培

克

植

孕

期

隆

’

母

胚

->動

親

胎

物

A

M基因

（1）在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是,這類酶能將特定部位的兩

個核甘酸之間的斷開。

（2）在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的

是O

（3）與胚胎細胞核移植技術(shù)相比，體細胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是o從早期胚胎中分離

獲得的胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為（答出兩點即可），功能上具有o

（4）鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，篩選融合雜種細胞，制備

M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路o

（2020年高考真題U

22.（2020?海南?統(tǒng)考高考真題）將人細胞與小鼠細胞融合得到的人-鼠雜種細胞進行長期培養(yǎng)，雜種細胞隨

機丟失一部分人的染色體后，染色體數(shù)目會保持穩(wěn)定。選取三種雜種細胞，對編碼人的芳崎羥化酶（AHH）

和磷酸甘油酸激酶（PGK）的基因進行染色體定位研究，結(jié)果如表（“+”表示有，表示無）。

人的染色體

雜種細胞AHHPGK

2號11號17號X

甲—+—+—+

乙++———+—

丙—+++—+

下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.聚乙二醇可誘導(dǎo)入細胞與小鼠細胞融合

B.培養(yǎng)雜種細胞時，通常需在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素

C.編碼AHH的基因在11號染色體上

D.編碼PGK的基因在X染色體上

23.（2020.北京?統(tǒng)考高考真題）人體感染新冠病毒后，機體會產(chǎn)生多種特異性抗體。我國科學(xué)家從康復(fù)者

的漿細胞中克隆出針對病毒表面抗原的抗體基因相關(guān)序列，構(gòu)建表達載體并在相應(yīng)系統(tǒng)中表達，可制備出

全人源單克隆抗體。以下表述錯誤的是（）

A.該單抗可直接用于新冠病毒的核酸檢測

B.在該單抗制備過程中利用了基因工程技術(shù)

C.該單抗可與新冠病毒相應(yīng)蛋白特異性結(jié)合

D.可用抗原-抗體反應(yīng)檢測抗體基因表達產(chǎn)物

24.（2020?天津?統(tǒng)考高考真題）在克隆哺乳動物過程中，通常作為核移植受體細胞的是去核的（）

A.卵原細胞

B.初級卵母細胞

C.次級卵母細胞

D.卵細胞

25.（2020?浙江?高考真題）下列關(guān)于病毒的敘述，錯誤的是（）

A.有的病毒經(jīng)滅活處理后，可用于細胞工程中介導(dǎo)動物細胞的融合

B.適當(dāng)增加機體內(nèi)參與免疫的細胞數(shù)量與活性，可提高對新型冠狀病毒的抵御能力

C.在某人的分泌物中檢測到新型冠狀病毒，推測該病毒的增殖不依賴于宿主細胞

D.用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力，原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性

26.（2020?江蘇?統(tǒng)考高考真題）新型冠狀病毒可通過表面的棘突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的

ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗

體可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。圖2為篩選、制備

抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

圖1圖2

（1）圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細胞表面，被細胞表面的受體

識別后激活該細胞。

（2）B細胞識別入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，經(jīng)過細胞的,形成細胞。

（3）為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測病毒的:

采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測O

（4）據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞，再提取

激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得細胞。因為同一種抗原可能激活

細胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細胞株。

27.（2020?全國?統(tǒng)考高考真題）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實

驗流程。

回答下列問題:

（1）上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是0

（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：0

（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬

于，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結(jié)果是0圖中篩選2含多次篩選，篩選所

依據(jù)的基本原理是o

（4）若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有（答出2

點即可）。

H2019年高考真題』

30.（2019?江蘇?統(tǒng)考高考真題）下圖為雜交瘤細胞制備示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃喋吟磷酸核糖轉(zhuǎn)

移酶（HGPRT）在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長。下列敘述正確的是

免疫B細胞骨髓瘤細胞

HGPRT+,_人HGPRT'

/培養(yǎng)疝

盤睫融合的細胞培霆之亡

A.可用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)細胞融合

B.兩兩融合的細胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長

C.雜交瘤細胞需進一步篩選才能用于生產(chǎn)

D.細胞膜的流動性是細胞融合的基礎(chǔ)

考點2植物細胞工程

（2023年高考真題U

1.（2023?山東?高考真題）利用植物細胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖，可

獲得植物細胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（）

A.利用該技術(shù)可獲得某些無法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物

B.植物細胞體積小，故不能通過該技術(shù)進行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)

C.次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細胞進行培養(yǎng)

D.該技術(shù)主要利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件提高單個細胞中次生代謝物的含量

2.（2023?浙江?統(tǒng)考高考真題）植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中常添加蔗糖，植物細胞利用蔗糖的方式如圖

所示。

下列敘述正確的是（）

A.轉(zhuǎn)運蔗糖時，共轉(zhuǎn)運體的構(gòu)型不發(fā)生變化

B.使用ATP合成抑制劑，會使蔗糖運輸速率下降

C.植物組培過程中蔗糖是植物細胞吸收的唯一碳源

D.培養(yǎng)基的pH值高于細胞內(nèi)，有利于蔗糖的吸收

3.（2023?廣東?統(tǒng)考高考真題）人參皂昔是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生

愈傷組織并進行細胞融合，以提高人參皂昔的產(chǎn)率。下列敘述脩誤的是（）

A.細胞融合前應(yīng)去除細胞壁

B.高Ca2+—高pH溶液可促進細胞融合

C.融合的細胞即為雜交細胞

D.雜交細胞可能具有生長快速的優(yōu)勢

4.（2023?湖北?統(tǒng)考高考真題）栽培稻甲產(chǎn)量高、品質(zhì)好，但每年只能收獲一次。野生稻乙種植一次可連續(xù)

收獲多年，但產(chǎn)量低。中國科學(xué)家利用栽培稻甲和野生稻乙雜交，培育出兼具兩者優(yōu)點的品系丙，為全球

作物育種提供了中國智慧。下列敘述錯誤的是（）

A.該成果體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值

B.利用體細胞雜交技術(shù)也可培育出品系丙

C.該育種技術(shù)為全球農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新思路

D.品系丙的成功培育提示我們要注重野生種質(zhì)資源的保護

5.（2023?海南?高考真題）基因遞送是植物遺傳改良的重要技術(shù)之一，我國多個實驗室合作開發(fā)了一種新型

基因遞送系統(tǒng)（切一浸一生芽Cut-Dip-Budding,簡稱CDB法）。圖1與圖2分別是利用常規(guī)轉(zhuǎn)化法和CDB

法在某植物中遞送基因的示意圖。

|植株B|

切斷根莖

.連接處

植株上半部分侵入含

建組建體的農(nóng)桿菌菌淞

般傷組織I

愈傷組織與含重組載|植株長出毛狀冠］

體的農(nóng)桿中共培養(yǎng)I篩選剪切

生芽、生根|陽性毛狀根段|

篩選I生芽盆栽

I轉(zhuǎn)化看株A||轉(zhuǎn)化廟株B|

圖1圖2

回答下列問題。

(1)圖1中，從外植體轉(zhuǎn)變成愈傷組織的過程屬于—；從愈傷組織到幼苗的培養(yǎng)過程需要的激素有生長素

和—，該過程還需要光照，其作用是—o

(2)圖1中的愈傷組織，若不經(jīng)過共培養(yǎng)環(huán)節(jié)，直接誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的植株可以保持植株A的—。圖1中，

含有外源基因的轉(zhuǎn)化植株A若用于生產(chǎn)種子，其包裝需標(biāo)注—。

(3)圖1與圖2中，農(nóng)桿菌侵染植物細胞時，可將外源基因遞送到植物細胞中的原因是—o

(4)已知某酶(PDS)缺失會導(dǎo)致植株白化。某團隊構(gòu)建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體

(含有綠色熒光蛋白標(biāo)記基因)，利用圖2中的CDB法將該重組載體導(dǎo)入植株B,長出毛狀根，成功獲得

轉(zhuǎn)化植株B.據(jù)此分析，從毛狀根中獲得陽性毛狀根段的方法是—，圖2中，鑒定導(dǎo)入幼苗中的基因編

輯載體是否成功發(fā)揮作用的方法是一，依據(jù)是—o

(5)與常規(guī)轉(zhuǎn)化法相比，采用CDB法進行基因遞送的優(yōu)點是—(答出2點即可)。

6.(2023?浙江?統(tǒng)考高考真題)賴氨酸是人體不能合成的必需氨基酸，而人類主要食物中的賴氨酸含量很低，

利用生物技術(shù)可提高食物中賴氨酸含量?；卮鹣铝袉栴}：

(1)植物細胞合成的賴氨酸達到一定濃度時，能抑制合成過程中兩種關(guān)鍵酶的活性，導(dǎo)致賴氨酸含量維持在

一定濃度水平，這種調(diào)節(jié)方式屬于。根據(jù)這種調(diào)節(jié)方式，在培養(yǎng)基中添加,用于篩選經(jīng)人工誘變

的植物懸浮細胞，可得到抗賴氨酸類似物的細胞突變體，通過培養(yǎng)獲得再生植株。

(2)隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)與動物細胞工程結(jié)合和發(fā)展，2011年我國首次利用轉(zhuǎn)基因和體細胞核移植技術(shù)成功培育

了高產(chǎn)賴氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛。其基本流程為：

①構(gòu)建乳腺專一表達載體。隨著測序技術(shù)的發(fā)展，為獲取富含賴氨酸的酪蛋白基因(目的基因)，可通過檢

索獲取其編碼序列，用化學(xué)合成法制備得到。再將獲得的目的基因與含有乳腺特異性啟動子的相應(yīng)載

體連接，構(gòu)建出乳腺專一表達載體。

②表達載體轉(zhuǎn)入牛胚胎成纖維細胞(BEF)。將表達載體包裹到磷脂等構(gòu)成的脂質(zhì)體內(nèi)，與BEF膜發(fā)生____,

表達載體最終進入細胞核，發(fā)生轉(zhuǎn)化。

③核移植。將轉(zhuǎn)基因的BEF作為核供體細胞，從牛卵巢獲取卵母細胞，經(jīng)體外培養(yǎng)及去核后作為o將

兩種細胞進行電融合，電融合的作用除了促進細胞融合，同時起到了____重組細胞發(fā)育的作用。

④重組細胞的體外培養(yǎng)及胚胎移植。重組細胞體外培養(yǎng)至____，植入代孕母牛子宮角，直至小牛出生。

⑤檢測。DNA水平檢測：利用PCR技術(shù)，以非轉(zhuǎn)基因牛耳組織細胞作為陰性對照，以為陽性對照，

檢測到轉(zhuǎn)基因牛耳組織細胞中存在目的基因。RNA水平檢測：從非轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細胞、轉(zhuǎn)基因牛

乳汁中的脫落細胞和轉(zhuǎn)基因牛耳組織細胞，提取總RNA,對總RNA進行處理，以去除DNA污染，

再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA,并以此為,利用特定引物擴增目的基因片段。結(jié)果顯示目的基因在轉(zhuǎn)基因牛

乳汁中的脫落細胞內(nèi)表達，而不在牛耳組織細胞內(nèi)表達，原因是什么？o

7.(2023?浙江?統(tǒng)考高考真題)甲植物細胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研

究小組用甲、乙兩種植物細胞進行體細胞雜交相關(guān)研究，基本過程包括獲取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、

篩選融合細胞、雜種植株再生和鑒定，最終獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)根據(jù)研究目標(biāo)，在甲、乙兩種植物細胞進行體細胞雜交前，應(yīng)檢驗兩種植物的原生質(zhì)體是否具備

的能力。為了便于觀察細胞融合的狀況，通常用不同顏色的原生質(zhì)體進行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼

苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的為外植體。

(2)植物細胞壁的主要成分為和果膠，在獲取原生質(zhì)體時，常采用相應(yīng)的酶進行去壁處理。在原生

質(zhì)體融合前，需對原生質(zhì)體進行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的失活。對處理后的原生

質(zhì)體在顯微鏡下用計數(shù)，確定原生質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體1：1混合后，通過添加適宜濃度的PEG

進行融合；一定時間后，加入過量的培養(yǎng)基進行稀釋，稀釋的目的是。

(3)將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，

并獨立生長、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細胞源于o下列各項中能說明這些愈傷組

織只能來自于雜種細胞的理由是哪幾項？

A.甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無法正常生長、分裂

B.同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長、分裂

C.培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細胞才能正常生長、分裂

D.雜種細胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長、分裂

(4)愈傷組織經(jīng)可形成胚狀體或芽。胚狀體能長出________,直接發(fā)育形成再生植株。

(5)用PCR技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細胞核具有特異性DNA序列a,乙植物細胞質(zhì)具有特異性DNA

序列b；Mi、M2為序列a的特異性引物，Ni、N2為序列b的特異性引物。完善實驗思路：

I.提取純化再生植株的總DNA,作為PCR擴增的o

II.將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系，為特異性引物，擴增序列a；用同樣的方法擴增序列b。

III.得到的2個PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)后，若每個PCR擴增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的個條

帶，則可初步確定再生植株來自于雜種細胞。

K2022年高考真題』

8.(2022.重慶?統(tǒng)考高考真題)植物體細胞通常被誘導(dǎo)為愈傷組織后才能表現(xiàn)全能性。研究發(fā)現(xiàn)，愈傷組織

的中層細胞是根或芽再生的源頭干細胞，其在不同條件下，通過基因的特異性表達調(diào)控生長素、細胞分裂

素的作用，表現(xiàn)出不同的效應(yīng)(見如表)。已知生長素的生理作用大于細胞分裂素時有利于根的再生；反之，

有利于芽的再生。下列推論不合理的是()

條件基因表達產(chǎn)物和相互作用效應(yīng)

①WOX5維持未分化狀態(tài)

②WOX5+PLT誘導(dǎo)出根

③WOX5+ARR2,抑制ARR5誘導(dǎo)出芽

A.WOX5失活后，中層細胞會喪失干細胞特性

B.W0X5+PLT可能有利于愈傷組織中生長素的積累

C.ARR5促進細胞分裂素積累或提高細胞對細胞分裂素的敏感性

D.體細胞中生長素和細胞分裂素的作用可能相互抑制

9.（2022?遼寧?統(tǒng)考高考真題）藍莓細胞富含花青素等多酚類化合物。在藍莓組織培養(yǎng)過程中，外植體切口

處細胞被破壞，多酚類化合物被氧化成褐色酶類化合物，這一過程稱為褐變。褐變會引起細胞生長停滯甚

至死亡，導(dǎo)致藍莓組織培養(yǎng)失敗。下列敘述錯誤的是（）

A.花青素通常存在于藍莓細胞的液泡中

B.適當(dāng)增加培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基的頻率以減少褐變

C.在培養(yǎng)基中添加合適的抗氧化劑以減少褐變

D.宜選用藍莓成熟葉片為材料制備外植體

10.（2022.浙江?高考真題）下列關(guān)于菊花組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）

A.用自然生長的莖進行組培須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒

B.培養(yǎng)瓶用專用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶內(nèi)外的氣體交換

C.組培苗鍛煉時采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是蛭石帶菌量低且營養(yǎng)豐富

D.不帶葉片的菊花幼莖切段可以通過器官發(fā)生的途徑形成完整的菊花植株

11.（2022?浙江?統(tǒng)考高考真題）農(nóng)作物秸稈的回收利用方式很多，其中之一是將秸稈碎化后作為食用菌的

栽培基質(zhì)。碎化秸稈中纖維所起的作用，相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的（）

A.瓊脂+蔗糖B.蔗糖+激素C.激素+無機鹽D,無機鹽+瓊脂

12.（2022?重慶?統(tǒng)考高考真題）改良水稻的株高和產(chǎn)量性狀是實現(xiàn)袁隆平先生“禾下乘涼夢”的一種可能途徑。

研究人員克隆了可顯著增高和增產(chǎn)的eui基因，并開展了相關(guān)探索。

（1）花藥培養(yǎng)能縮短育種年限，原因是o在步驟I的花藥培養(yǎng)過程中，可產(chǎn)生單倍體愈傷組織，將其

培養(yǎng)于含的培養(yǎng)基上，可促進產(chǎn)生二倍體愈傷組織。I中能用于制造人工種子的材料是o

（2）步驟H中，eui基因克隆于cDNA文庫而不是基因組文庫，原因是；在構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時使用的

工具酶有o為篩選含重組Ti質(zhì)粒的菌株，需在培養(yǎng)基中添加o獲得的農(nóng)桿菌菌株經(jīng)鑒定后,

應(yīng)侵染I中的,以獲得轉(zhuǎn)基因再生植株。再生植株是否含有eui基因的鑒定方法是,移栽后

若發(fā)育為更高且豐產(chǎn)的稻株，則可望“禾下乘涼”。

[[2021年高考真題』

13.（2021.江蘇.高考真題）植物組織培養(yǎng)技術(shù)常用于商業(yè)化生產(chǎn)：其過程一般為:無菌培養(yǎng)物的建立—培養(yǎng)

物增殖一生根培養(yǎng)一試管苗移栽及鑒定。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.為獲得無菌培養(yǎng)物，外植體要消毒處理后才可接種培養(yǎng)

B.組織培養(yǎng)過程中也可無明顯愈傷組織形成，直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)

C.提高培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的比值，有利于誘導(dǎo)生根

D.用同一植株體細胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗不會出現(xiàn)變異

14.（2021.福建?統(tǒng)考高考真題）科研人員利用植物體細胞雜交技術(shù)培育矮牽牛新品種，技術(shù)流程示意圖如

下。

下列敘述正確的是（）

A.愈傷組織是幼嫩葉片通過細胞分化形成的

B.獲得的雜種植株都能表現(xiàn)雙親的優(yōu)良性狀

C.可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合和細胞壁再生

D.用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質(zhì)體

15.（2021?湖北?統(tǒng)考高考真題）月季在我國享有“花中皇后”的美譽。為了建立月季某新品種的快速繁殖體系，

以芽體為外植體，在MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA和IBA進行芽體增殖實驗，芽分化率（％）結(jié)果如

表。

IBA/(mg-L1)

6-BA/(mg-L-1)

0.10.20.30.40.5

1.03163584941

2.04095766950

3.03775645441

4.02535313025

5.08211284

關(guān)于上述實驗，下列敘述錯誤的是（）

A.6-BA濃度大于4.OmgL-i時，芽分化率明顯降低

B.6-BA與IBA的比例為10：1時芽分化率均高于其他比例

C.在培養(yǎng)基中同時添加適量的6-BA和IBA,可促進芽分化

D.2.OmgL-16-BA和0.2mg.L"IBA是實驗處理中芽分化的最佳組合

16.（2021?北京?統(tǒng)考高考真題）研究者擬通過有性雜交的方法將簇毛麥（2n=14）的優(yōu)良性狀導(dǎo)入普通小麥

（2n=42）中