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15I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAM/TC1本文件主要起草單位:內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、內(nèi)蒙古杜美牧業(yè)生物科技有限公1羊多殺性巴氏桿菌病診斷技術(shù)GB/T4789.28食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和屬于巴氏桿菌科,巴氏桿菌屬,革蘭氏陰性球桿菌或短桿狀菌,兩端鈍圓,無(wú)莢膜。根據(jù)莢膜抗原可分為A、B、D、E、F5種血清型,5種莢膜血清型的基因分別為hyaD-hyaC、bcbD、dcbF、ecbJ、fcb綿羊山羊均可發(fā)病,綿羊比山羊易感,羔羊、23旋轉(zhuǎn)棉拭子旋轉(zhuǎn)2~3圈,當(dāng)羊出現(xiàn)噴嚏反射后,輕輕抽出棉拭子。在2℃~8℃下24h內(nèi)完成送檢工作。如樣品不能及時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)置于-20℃以對(duì)病死羊主要采集其氣管和肺臟等組織,置于無(wú)菌密封袋或采樣杯;在2℃~8℃下24h內(nèi)完成為革蘭氏陰性菌,菌體呈球桿狀或短桿狀,兩端鈍圓將鼻腔拭子樣品置于5mL5%馬血清的胰蛋白胨大豆肉于含5%馬血清的胰蛋白胨大豆瓊脂平板或普通瓊脂用經(jīng)火焰滅菌并冷卻的接種環(huán)蘸取病料內(nèi)部組織后劃線接種于含5%馬血清的胰蛋白胨大豆瓊脂平板或普通瓊脂綿羊血平板,按照附錄A的要求,于37℃培養(yǎng)16h~20416SrRNAPCR產(chǎn)物凝膠電泳成像符合5.1、5.2.5、5.2.6、5.2.7,判定為羊多殺性巴5A.1普通瓊脂綿羊血平板A.1.1成份A.25%馬血清的胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基A.2.1成份A.35%馬血清的胰蛋白胨大豆肉湯A.3.1成份67ACGCGTCGACAGAGTTTGAT
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