【動物科學(xué)實驗設(shè)計1800字】

動物科學(xué)實驗設(shè)計目錄TOC\o"1-2"\h\u31442動物科學(xué)實驗設(shè)計 143531.實驗設(shè)計 168471.1實驗材料 1139071.2實驗原理 182231.3實驗方案設(shè)計 1144181.4肝臟標(biāo)本的采集及大體觀察 234341.6脂肪肝指數(shù)分析 265891.7圖像分析 3255692.總結(jié) 316973參考文獻(xiàn)： 3摘要：實驗一般是開展研究的重要手段，通過合理的實驗設(shè)計，能夠更好地實現(xiàn)理論驗證。實驗結(jié)果也能為理論提供強大的支持，增加理論的說服力。本次為了更好地進(jìn)行動物科學(xué)實驗研究，以家兔為研究對象，通過分組法、控制變量法，對家兔脂肪肝研究進(jìn)行了相應(yīng)的實驗設(shè)計。關(guān)鍵詞：家兔；脂肪肝；實驗1.實驗設(shè)計1.1實驗材料本次實驗對象為家兔，通過市場購買20只家兔，雌雄各10只。1.2實驗原理通過控制家兔食用飼料的種類，改變飼料當(dāng)中膽固醇，脂肪酸成分的含量，在相同時間，相同環(huán)境下，培養(yǎng)相同周期的時間，觀察兔子的基本情況，最后利用顯微光景，觀察不同環(huán)境培養(yǎng)下家兔脂肪肝切片的情況。1.3實驗方案設(shè)計本次實驗分為5組，在相同的環(huán)境下，養(yǎng)殖家兔100天，并且在100天時間內(nèi)給家兔喂食膽固醇，脂肪酸含量不同的飼料。具體實驗步驟如下：步驟一：將20只家兔分為五組，每一組4只，分別編號A,B,C,D，E，每組當(dāng)中兩只雄兔，兩只雌兔。步驟二：選擇相同飼料，添加定量的膽固醇，脂肪酸成分，設(shè)計五組，膽固醇和脂肪酸含量從0.1g到0.5g含量遞增。步驟三：在相同環(huán)境下，對20只家兔進(jìn)行養(yǎng)殖，觀察100天，100天后家兔的基本情況，并且通過切片的方式觀察脂肪肝的基本情況。表1家兔脂肪肝的動物實驗設(shè)計表家兔組別膽固醇含量（g）脂肪酸含量（g）100天后家兔脂肪肝情況A0.10.1B0.20.2C0.30.3D0.40.4E0.50.51.4肝臟標(biāo)本的采集及大體觀察實驗結(jié)束時，禁食12小時，于處死動物前稱量體重，采用氯胺酮全身麻醉處死動物，開腹取出肝臟，稱量肝臟濕重，觀察肝臟大小、形態(tài)、顏色、表面光滑度、葉間裂寬度、邊緣銳利度及切面情況。進(jìn)行左、右葉肝組織冰凍切片SudanIV脂肪染色。同時留取10%福爾馬林固定標(biāo)本肝組織標(biāo)本，經(jīng)常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋、切片（片厚4～6μm），分別進(jìn)行HE及Masson’s三色染色。

1.5肝脂肪變程度及肝臟指數(shù)分析根據(jù)SudanIV染色標(biāo)本光鏡下脂肪變肝細(xì)胞面積分為4度：正常肝臟，脂肪變面積<10%；1＋度：脂肪變面積10%～33%，為輕微脂肪變性；2+度：輕度脂肪肝、脂肪變面積33%~50%；3+度：中度脂肪肝、脂肪變面積50%~66%；4+度：嚴(yán)重脂肪肝、66%以上肝細(xì)胞脂肪變性。1.6脂肪肝指數(shù)分析正常肝臟的肝小葉構(gòu)造完整，肝細(xì)胞索排有序，肝細(xì)胞中偶有脂滴。實驗組形成脂肪變，主要表現(xiàn)為小泡。輕度脂肪肝主要由腺泡III帶和IV染色肝細(xì)胞內(nèi)散布著大小比較均勻、直徑3~5μm的鮮紅脂滴組成；中度脂肪肝脂肪變50%以上，隨脂質(zhì)的積累，脂滴可有融合，胞核偏位或脂滴圍繞細(xì)胞核形成“梅花樣”改變；重度脂肪肝全小葉布滿脂滴，肝細(xì)胞脹大、竇間隙變窄，細(xì)胞核和細(xì)胞器被脂滴擠壓移位至細(xì)胞邊緣，H&E染色可呈“泡沫狀”，或細(xì)胞核被擠壓移位呈“印戒樣”，可為正常肝細(xì)胞大小的4～5倍，細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)不能辨認(rèn)；輕、中、重度脂肪肝均可發(fā)生不同程度的肝小葉內(nèi)炎癥，肝細(xì)胞濁腫、氣球樣變、點或灶狀壞死及中性粒細(xì)胞或淋巴細(xì)胞浸潤，中、重度脂肪肝多伴有不同程度纖維化。根據(jù)IV染色冰凍切片光鏡下脂肪變面積分組結(jié)果，進(jìn)行圖像分析，正常肝組織肝細(xì)胞內(nèi)偶見脂肪滴，Aa<10%，輕、中、重度脂肪肝Aa值依次為10%～25%，26%～35%，>35%。1.7圖像分析用圖像中心真彩色病理圖像分析系統(tǒng)對家兔IV染色病理切片。方法：選擇左、右肝葉染色較好的肝組織切片，在低倍光鏡下取每片隨機取5個視場，選擇單色分割分析法測量各視場內(nèi)脂滴在總視場內(nèi)的比例〔單位測試面積上被測物的面積（positiveareainmeasurementarea，Aa）＝陽性目標(biāo)總面積/統(tǒng)計場總面積×100%〕，取10個視野Aa的均值作為觀測值。

1.8數(shù)值的統(tǒng)計與分析所測得數(shù)值全部數(shù)據(jù)輸入計算機，采用SAS8.2版，單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計處理，兩組均數(shù)差異的比較采用Fisher’sLSD法，P<0.05確定有統(tǒng)計意義。2.總結(jié)本次動物科學(xué)實驗設(shè)計，主要模擬家兔脂肪肝檢測。通過分組實驗的形式，將20只家兔分為A、B、C、D、E等5個組別，同時通過控制唯一變量，觀察不同地組別的動物相關(guān)指標(biāo)有何變化，進(jìn)而根本變化數(shù)據(jù)得出相應(yīng)的結(jié)論。為保證科學(xué)的嚴(yán)謹(jǐn)性，分別針對影響家兔脂肪的幾大因素進(jìn)行了詳細(xì)地測量，并制定了測量方法。相對而言，本次實驗設(shè)計較為科學(xué)，能夠準(zhǔn)確地測量出家兔脂肪的變化情況。參考文獻(xiàn)：[1]杜坤,毛初陽,任安勇,等.家兔前