海南省重點(diǎn)中學(xué)2025屆高考仿真模擬生物試卷含解析

海南省重點(diǎn)中學(xué)2025屆高考仿真模擬生物試卷請(qǐng)考生注意：1．請(qǐng)用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請(qǐng)用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．生物興趣小組模擬赫爾希和蔡斯做了噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．a(chǎn)中放射性與②過程有關(guān)B．理論上b中不應(yīng)具有放射性C．若b中有放射性，可能與①過程培養(yǎng)時(shí)間過長有關(guān)D．上述實(shí)驗(yàn)過程不能證明DNA是遺傳物質(zhì)2．如果給人體注射滅活的甲型H1N1流感病毒，可預(yù)防甲型H1N1流感，那么滅活病毒在體內(nèi)引起的免疫反應(yīng)，正確的是A．B細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)B細(xì)胞，能使靶細(xì)胞裂解B．吞噬細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)細(xì)胞，能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體C．T細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)T細(xì)胞，能釋放淋巴因子D．淋巴細(xì)胞吞噬該病毒后形成記憶細(xì)胞，能釋放白細(xì)胞介素3．我們經(jīng)常在媒體上看到“生態(tài)平衡”的概念，下列關(guān)于“生態(tài)平衡”和“生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性”的敘述中，不正確的是()A．生態(tài)平衡是生態(tài)系統(tǒng)發(fā)展到一定階段，生態(tài)系統(tǒng)保持其結(jié)構(gòu)與功能的穩(wěn)定狀態(tài)B．生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性是生態(tài)系統(tǒng)具有的保持和恢復(fù)其結(jié)構(gòu)與功能相對(duì)穩(wěn)定的能力C．生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力是生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性和生態(tài)平衡的基礎(chǔ)D．生態(tài)平衡與生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性沒有關(guān)系4．用體外實(shí)驗(yàn)方法可以合成核酸?已知新冠病毒2019—nCoV是一種新型RNA病毒，能夠攻擊人體的肺細(xì)胞，若要在體外利用同位素標(biāo)記法來探究該類病毒是否存在逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象，則所需的材料組合是（）①同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸②同位素標(biāo)記的尿嘧啶核糖核苷酸③2019—nCoV的RNA④除去了DNA和RNA的肺細(xì)胞裂解液⑤相應(yīng)的逆轉(zhuǎn)錄酶A．①③④⑤ B．②③④⑤ C．①③⑤ D．②③④5．云南多山、多河谷，環(huán)境往往相互隔離?？茖W(xué)家在研究云南稻種資源的基礎(chǔ)上，提出了亞洲栽培稻分類體系，將亞洲稻分為“亞洲栽培稻一亞種一生態(tài)群一生態(tài)型一品種”5級(jí)。該體系形成過程中沒有發(fā)揮作用的是（）A．基因突變 B．自然選擇 C．地理隔離 D．生殖隔離6．如圖為某基因型為AaBb的動(dòng)物部分組織切片顯微圖像，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．該組織切片來源于卵巢B．甲細(xì)胞中有2套遺傳信息C．丙細(xì)胞基因型為AABB或AAbb或aaBB或aabbD．按分裂過程判斷，圖中標(biāo)號(hào)的先后順序?yàn)榧住叶?、綜合題：本大題共4小題7．（9分）如圖為某犢牛的培育過程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：（1）供體牛和受體牛的要求分別是__________和__________。沖卵實(shí)質(zhì)上是用特定裝置，將供體母牛子宮內(nèi)的__________沖洗出來。（2）適宜于牛的胚胎移植的時(shí)期有__________期。（3）同期發(fā)情處理是給供、受體母牛注射__________，目的是__________________________。該犢牛的性別為__________。8．（10分）甲、乙兩圖分別表示光照強(qiáng)度和空氣中CO2含量對(duì)某綠色植物光合作用的影響，丙圖表示一天內(nèi)某時(shí)間段蔬菜大棚內(nèi)CO2濃度隨時(shí)間的變化曲線。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題。（1）甲圖中的B點(diǎn)與乙、丙圖中的________點(diǎn)葉肉細(xì)胞所處的生理狀態(tài)相同，此時(shí)細(xì)胞中能產(chǎn)生ATP的部位有________________；如果在缺鎂的條件下，G點(diǎn)將向________方移動(dòng)。（2）C點(diǎn)與B點(diǎn)相比較，葉綠體基質(zhì)中C3的含量________（填“較多”、“較少”或“不變）。（3）甲圖中A點(diǎn)所進(jìn)行的生理反應(yīng)表達(dá)式為____________________________。（4）光合作用在遇到一定限制因素時(shí)，其速率將不再增加，圖中限制E點(diǎn)的外界因素是__________________________。（5）據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)土壤干旱時(shí)，植物根細(xì)胞會(huì)迅速合成某種化學(xué)物質(zhì)X。有人推測(cè)根部合成的X運(yùn)輸?shù)饺~片，能調(diào)節(jié)氣孔的開閉。他們做了如下實(shí)驗(yàn)：從該植株上剪取大小和生理狀態(tài)一致的3片葉，分別將葉柄下部浸在不同濃度X的培養(yǎng)液中，以分析葉片中X物質(zhì)濃度與氣孔開放程度之間的關(guān)系。一段時(shí)間后，可以測(cè)得有關(guān)數(shù)據(jù)。以上方案有不完善的地方，請(qǐng)指出來并改正。①_______________________________；②__________________________________。9．（10分）凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶，研究人員利用基因工程技術(shù)，將編碼該酶的基因轉(zhuǎn)移到了微生物細(xì)胞中并使之表達(dá)。如圖表示EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶在質(zhì)粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位點(diǎn)．回答下列問題：（1）根據(jù)圖中EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶的切割位點(diǎn)分析，該工程中最不適宜用來切割外源DNA獲取目的基因的限制酶是_____，將切割后的質(zhì)粒和目的基因連接起來需要_____酶．構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在目的基因前要加上特殊的啟動(dòng)子，它是_____識(shí)別和結(jié)合的部位。（2）工業(yè)化生產(chǎn)過程中，若采用重組大腸桿菌生產(chǎn)凝乳酶，該過程中將目的基因?qū)舜竽c桿菌前，常常用_____處理細(xì)胞，使之處于一種能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為_____細(xì)胞。（3）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該凝乳酶第20位和第24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼幔浯呋芰⑻岣?倍?？茖W(xué)家可以生產(chǎn)上述高效凝乳酶的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是_____。該生物工程技術(shù)對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)和改造，必須通過基因來完成，原因是_____。10．（10分）普通牛奶賴氨酸含量低，為提高牛奶中賴氨酸的含量，利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，得到了一頭轉(zhuǎn)入外源賴氨酸基因的奶牛，預(yù)計(jì)將來其分泌的乳汁中含有更多的賴氨酸。下圖為培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的技術(shù)流程圖：（1）在過程①用到的兩種工具酶中，對(duì)核苷酸序列有嚴(yán)格要求的工具酶是______________，其作用的對(duì)象是兩個(gè)脫氧核苷酸之間的_______________鍵。（2）在基因表達(dá)載體中，目的基因的首端必須含有________，它是__________識(shí)別和結(jié)合的部位。（3）過程②中為獲得能大量產(chǎn)生賴氨酸的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達(dá)載體導(dǎo)入的受體細(xì)胞是_______________，常用的導(dǎo)入方法是________________法。（4）將該受體細(xì)胞培育成為一頭奶牛還需要的技術(shù)有：___________、_______________。（5）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)環(huán)境中除須提供O2外還須混入一定量的_____，混入的氣體的主要作用是_________________。為保證被培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，可以在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的___________，以防培養(yǎng)過程中的污染。11．（15分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達(dá)到防治目的，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種?；卮鹣铝袉栴}：（1）通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴(kuò)增出cDNA。在PCR過程中，兩個(gè)引物是_____酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動(dòng)物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測(cè)抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測(cè)方法是_____。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、C【解析】

1.T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟：分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測(cè)上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。2.上清液和沉淀物中都有放射性的原因分析：①用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌，上清液中有少量放射性的原因：a．保溫時(shí)間過短，部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)離心后分布于上清液中，使上清液出現(xiàn)放射性。b．保溫時(shí)間過長，噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖后釋放子代，經(jīng)離心后分布于上清液中，也會(huì)使上清液的放射性含量升高。②用35S標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌，沉淀物中也有少量放射性的原因：由于攪拌不充分，有少量35S的噬菌體蛋白質(zhì)外殼吸附在細(xì)菌表面，隨細(xì)菌離心到沉淀物中，使沉淀物中出現(xiàn)少量的放射性。【詳解】A、35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，噬菌體侵染細(xì)菌時(shí)，蛋白質(zhì)外殼沒有進(jìn)入細(xì)菌，經(jīng)②過程攪拌離心后含35S的蛋白質(zhì)外殼分布在上清液中，所以a中放射性與②過程有關(guān)，A正確；B、35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，蛋白質(zhì)外殼不進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞中，所以離心后，理論上b中不應(yīng)具有放射性，B正確；C、35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，噬菌體侵染細(xì)菌時(shí)，蛋白質(zhì)外殼留在外面，經(jīng)攪拌后與細(xì)菌分開，所以若b中含有放射性，說明攪拌不充分，與培養(yǎng)時(shí)間過長無關(guān)，C錯(cuò)誤；D、由于蛋白質(zhì)外殼沒有進(jìn)入細(xì)菌，又沒有標(biāo)記噬菌體DNA的組做對(duì)照，所以不能證明DNA是遺傳物質(zhì)，D正確。故選C。2、C【解析】

第三道防線的“作戰(zhàn)部隊(duì)”主要是眾多的淋巴細(xì)胞。其中B細(xì)胞主要靠產(chǎn)生“抗體”作戰(zhàn)，這種方式稱為體液免疫；T細(xì)胞主要靠直接接觸靶細(xì)胞“作戰(zhàn)”，這種方式稱為細(xì)胞免疫。【詳解】A、B細(xì)胞受到抗原刺激，產(chǎn)生效應(yīng)B細(xì)胞核記憶細(xì)胞，效應(yīng)B細(xì)胞分泌抗體，不能使靶細(xì)胞裂解，A錯(cuò)誤；B、吞噬細(xì)胞在特異性免疫中起到攝取、處理和呈遞抗原的作用，B錯(cuò)誤；C、T細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)T細(xì)胞，能釋放淋巴因子，C正確；D、吞噬細(xì)胞接受刺激后，攝取處理抗原，使其抗原決定簇暴露出來，呈遞給T細(xì)胞，T細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分化形成記憶細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選C。3、D【解析】生態(tài)平衡是指生態(tài)系統(tǒng)中各種生物的數(shù)量和比例總是保持在相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)；在自然狀態(tài)下，生態(tài)系統(tǒng)是穩(wěn)定的，并具有保持和恢復(fù)其結(jié)構(gòu)和功能相對(duì)穩(wěn)定的能力，所以A、B正確；生態(tài)系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)能力，自我調(diào)節(jié)能力是生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性和生態(tài)平衡的基礎(chǔ)，C正確；由于生態(tài)系統(tǒng)的自動(dòng)調(diào)節(jié)能力是有一定限度的，與生物的種類和數(shù)量有關(guān)，生物的數(shù)量和種類越多，調(diào)節(jié)能力越強(qiáng)，如果人類的干預(yù)超過了這個(gè)限度，生態(tài)系統(tǒng)就會(huì)遭到破壞，D錯(cuò)誤。4、A【解析】

逆轉(zhuǎn)錄過程需要以RNA為模板，四種脫氧核苷酸為原料，逆轉(zhuǎn)錄酶和ATP等條件。【詳解】①逆轉(zhuǎn)錄過程是由RNA形成DNA的過程，需要以同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸為原料，①正確；②逆轉(zhuǎn)錄過程是由RNA形成DNA的過程，不需要同位素標(biāo)記的尿嘧啶核糖核苷酸，②錯(cuò)誤；③逆轉(zhuǎn)錄過程需要以2019—nCoV的RNA為模板，③正確；④除去了DNA和RNA的肺細(xì)胞裂解液中含有ATP，可為逆轉(zhuǎn)錄過程提供能量，④正確；⑤由于宿主細(xì)胞不含逆轉(zhuǎn)錄酶，所以需要額外加入相應(yīng)的逆轉(zhuǎn)錄酶，⑤正確。綜上分析，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。5、D【解析】

亞洲栽培稻分類體系，可能發(fā)生了基因突變，云南多山、多河谷，環(huán)境往往相互隔離，是一種地理隔離，且不同的環(huán)境選擇的水稻品種可能也有差別?！驹斀狻可掣綦x會(huì)產(chǎn)生新的物種，但該過程中并沒有產(chǎn)生新的物種。故選D。6、B【解析】

分析圖：動(dòng)物組織切片顯微圖象表明細(xì)胞正在進(jìn)行減數(shù)分裂；甲處于減數(shù)第一次分裂中期、乙處于減數(shù)第二次分裂后期、丙處于減數(shù)第二次分裂前期?！驹斀狻緼、據(jù)圖中乙細(xì)胞可知，細(xì)胞質(zhì)不均等分裂，該動(dòng)物為雌性動(dòng)物，且進(jìn)行減數(shù)分裂，該組織切片來源于卵巢，A正確；B、甲細(xì)胞中有2個(gè)染色體組，4套遺傳信息，B錯(cuò)誤；C、丙細(xì)胞正在進(jìn)行減數(shù)第二次分裂，所以其基因型為AABB或AAbb或aaBB或aabb，C正確；D、按分裂過程判斷，圖中標(biāo)號(hào)的先后順序?yàn)榧住?，D正確。故選B。【點(diǎn)睛】本題結(jié)合圖解，考查細(xì)胞的減數(shù)分裂，要求考生識(shí)記細(xì)胞減數(shù)分裂不同時(shí)期的特點(diǎn)，掌握減數(shù)分裂過程中染色體和DNA含量變化規(guī)律，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。二、綜合題：本大題共4小題7、遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)良健康的體質(zhì)正常繁殖能力（早期）胚胎囊胚或桑椹胚激素使供受體生殖器官的生理環(huán)境相同雌性或雄性（不能確定）【解析】

1、胚胎移植的基本程序：①對(duì)供、受體的選擇和處理（用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。2、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對(duì)外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響?！驹斀狻浚?）對(duì)供體的要求是遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)良，對(duì)受體牛的要求是健康的體質(zhì)和正常繁殖能力。沖卵是將供體母牛子宮內(nèi)的早期胚胎沖洗出來。（2）適宜胚胎移植的時(shí)期是桑椹胚或囊胚期。（3）為了使供受體生殖器官的生理環(huán)境相同，需要給供、受體母牛注射激素。該犢牛的性別取決于配種時(shí)的受精情況，雌雄各有1/2概率，所以其性別不確定?！军c(diǎn)睛】本題考查了體外受精和胚胎移植的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記胚胎移植的基本程序和意義，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的目的，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題。8、D、G線粒體葉綠體細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)右上較少溫度、光照強(qiáng)度等樣本量太少應(yīng)取大小和生理狀態(tài)一致的葉片若干、平均分成三組缺乏空白對(duì)照，應(yīng)增加一組，將葉片的葉柄浸在不含X的培養(yǎng)液中【解析】

1、影響光合作用的環(huán)境因素包括：光照強(qiáng)度、溫度、二氧化碳濃度等。2、分析圖解：圖甲中，隨著光照強(qiáng)度的逐漸增強(qiáng)，二氧化碳吸收量逐漸增加，但是到C點(diǎn)時(shí)達(dá)到光飽和點(diǎn)；圖中A點(diǎn)時(shí)，光照強(qiáng)度為0，此時(shí)細(xì)胞只進(jìn)行呼吸作用；B點(diǎn)時(shí)二氧化碳吸收量為0，表明此時(shí)光合作用強(qiáng)度等于呼吸作用強(qiáng)度。乙圖中，隨著二氧化碳濃度的增加，二氧化碳吸收量逐漸增加，但是到E點(diǎn)時(shí)達(dá)到飽和點(diǎn)；D點(diǎn)時(shí)也表示光合作用強(qiáng)度等于呼吸作用強(qiáng)度。丙圖中，二氧化碳濃度上升表示光合作用小于呼吸作用或只進(jìn)行呼吸作用；曲線下降時(shí)，光合作用大于呼吸作用；G點(diǎn)為二氧化碳濃度的平衡點(diǎn)，此時(shí)光合作用強(qiáng)度等于呼吸作用強(qiáng)度?！驹斀狻浚?）甲圖中的B點(diǎn)時(shí)二氧化碳吸收量為0，表明此時(shí)光合作用強(qiáng)度等于呼吸作用強(qiáng)度，可對(duì)應(yīng)乙圖中D點(diǎn)；丙圖表示一天內(nèi)某時(shí)間段蔬菜大棚內(nèi)CO2濃度隨時(shí)間的變化曲線，F(xiàn)G段二氧化碳濃度不斷上升，表明光合作用小于呼吸作用，而GH段二氧化碳含量不斷減少，表明光合作用大于呼吸作用，因此平衡點(diǎn)G點(diǎn)時(shí)光合作用剛好等于呼吸作用。由于這三點(diǎn)均表示光合作用和呼吸作用同時(shí)進(jìn)行，因此細(xì)胞中能產(chǎn)生ATP的部位有線粒體、葉綠體、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。鎂是合成葉綠素的原料，缺鎂葉綠素的合成受阻，光合作用減弱，導(dǎo)致G點(diǎn)向右上方移動(dòng)。（2）C點(diǎn)與B點(diǎn)相比較，C點(diǎn)光照強(qiáng)度增加，則光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP和[H]將增多，這將促進(jìn)暗反應(yīng)中三碳化合物的還原，因此短時(shí)間內(nèi)葉綠體基質(zhì)中三碳化合物的含量減少。（3）甲圖中A點(diǎn)的光照強(qiáng)度為零，此時(shí)植物只進(jìn)行呼吸作用，在氧氣的參與下分解有機(jī)物為二氧化碳和水，同時(shí)釋放能量的過程，反應(yīng)式為：。（4）圖乙中E點(diǎn)時(shí)光合作用達(dá)到飽和點(diǎn)，即二氧化碳濃度升高不會(huì)影響光合速率的改變，因此限制E點(diǎn)的外界因素可能是溫度、光照強(qiáng)度等。（5）根據(jù)重復(fù)性原則和對(duì)照原則，以上方案不完善的地方及改正為：①樣本量太少，應(yīng)取大小和生理狀態(tài)一致的葉片若干、平均分成三組②缺乏空白對(duì)照，應(yīng)增加一組，將葉片的葉柄浸在不含X的培養(yǎng)液中。【點(diǎn)睛】結(jié)合光合作用和呼吸作用的影響因素分析題圖是解題的關(guān)鍵。9、EcoRⅠDNA連接酶RNA聚合酶Ca2+感受態(tài)蛋白質(zhì)工程基因決定蛋白質(zhì)【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）含有目的基因的外源DNA分子上含有EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶的切割位點(diǎn)，其中EcoRⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，用該酶切割會(huì)破壞目的基因，因此不能用該酶切割；將切割后的質(zhì)粒和目的基因連接起來需要DNA連接酶．啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程。（2）將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca2+處理細(xì)胞，使之處于一種能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。（3）生產(chǎn)上述高效凝乳酶需要對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，因此需要采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)；由于基因決定蛋白質(zhì)，因此該生物工程技術(shù)對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)和改造，必須通過基因來完成?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。10、限制性內(nèi)切酶（限制酶）磷酸二酯啟動(dòng)子RNA聚合酶受精卵顯微注射早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植CO2維持培養(yǎng)液的pH抗生素【解析】

1．基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2.胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序?！驹斀狻浚?）過程①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，在該過程中用到限制酶和DNA連接酶，限制酶能識(shí)別雙鏈DNA中特定的核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。（2）一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，啟動(dòng)子位于目的基因的首端，是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，并驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。（3）本實(shí)驗(yàn)的最終目標(biāo)獲得能大量產(chǎn)生賴氨酸的轉(zhuǎn)基因牛，因此，過程②（目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞）中的受體細(xì)胞應(yīng)該是受精卵，常用顯微注射法將目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入。（4）圖中的受體細(xì)胞為受精卵，將該受體細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成適宜階段的早期胚胎，然后通過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎置入經(jīng)過同期發(fā)情處理的受體牛子宮內(nèi)，完成胚胎發(fā)育過程。（5）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)環(huán)境中除須提供O2外還須混入一定量的CO2，CO2能維持培養(yǎng)液的pH。培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞需要處于無菌、無毒的環(huán)境，因此通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以保證培養(yǎng)過程中的無菌、無毒環(huán)境?！军c(diǎn)睛】熟知基因工程的原理和步驟是解答本題的關(guān)鍵！掌握轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培育的各個(gè)流程以及各流程涉及的操作要點(diǎn)是解答本題的另一關(guān)鍵！11、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【解析】

1、有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）