河南省漯河市第五高級中學2025屆高考全國統(tǒng)考預測密卷生物試卷含解析

河南省漯河市第五高級中學2025屆高考全國統(tǒng)考預測密卷生物試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列各項中，幼苗將向光彎曲生長的是（）A． B．C． D．2．下列不屬于次生演替實例的是（）A．原始森林演變?yōu)榇紊?B．廢棄的農(nóng)田雜草叢生形成草地C．過度放牧的草原演變?yōu)榛哪?D．溫帶草原面貌從夏季到冬季發(fā)生改變3．科學家利用R型和S型肺炎雙球菌進行如圖所示實驗，試管中添加R型菌、S型菌提取物及細菌培養(yǎng)液，下列敘述正確的是（）A．E組試管中可觀察到光滑型菌落，其余各組試管中只能觀察到粗糙型菌落B．應該用研磨方法殺死S型菌，不能用加熱方法，否則實驗結(jié)果將發(fā)生改變C．實驗結(jié)果證明DNA能進入R型菌體內(nèi)，而蛋白質(zhì)等無法進入R型菌體內(nèi)D．為使實驗結(jié)果更加明顯，可采用提高物質(zhì)分離純度及加入氯化鈣等措施4．研究人員對某哺乳動物細胞分裂中染色體形態(tài)、數(shù)目和分布進行了觀察分析，圖1和圖2為其細胞分裂兩個不同時期的示意圖（僅示部分染色體），圖3表示細胞分裂不同時期染色體與核DNA數(shù)目比。下列敘述正確的是（）A．圖1細胞處于減數(shù)第一次分裂后期，細胞中有4個染色體組B．若圖2細胞來自圖1細胞，則其產(chǎn)生的子細胞是卵細胞和極體C．圖3中B→C的原因是DNA復制，E→F的原因是膜向內(nèi)凹陷縊裂D．圖1處于圖3中的CE段，圖2處于圖3中的FG段5．在2019年女排世界杯上，中國女排以十一連勝的優(yōu)異成績，衛(wèi)冕了世界冠軍。在比賽過程中，運動員機體不會發(fā)生的反應是A．肝糖原分解速度加快，維持血糖平衡B．垂體釋放抗利尿激素增加，形成尿液減少C．下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞興奮，汗液分泌增加D．產(chǎn)生大量乳酸，使內(nèi)環(huán)境pH顯著降低6．下圖是細胞膜的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖，①~③表示構(gòu)成細胞膜的結(jié)構(gòu)，下列敘述錯誤的是（）A．組成結(jié)構(gòu)③的物質(zhì)中含有甘油基團B．結(jié)構(gòu)②不可能起著生物催化劑的作用C．結(jié)構(gòu)③也具有選擇透性D．在效應細胞毒性T細胞中，結(jié)構(gòu)①可能會識別抗原-MHC復合體二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）波爾山羊被稱為世界“肉用山羊之王”，某公司通過胚胎工程技術(shù)能快速繁殖大量波爾山羊?；卮鹣铝袉栴}：(1)山羊體外受精主要包括__________和受精等幾個主要步驟。用__________(填激素名稱)處理方法促進其排卵，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。精子獲能處理通常采用培養(yǎng)法和_________________。(2)培養(yǎng)早期胚胎時，所用培養(yǎng)液的成分比較復雜，除了一些___________類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。不同胚胎移植時間一般不同，山羊一般要培養(yǎng)到___________階段才能進行移植。，(3)為了使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致，處理方法是_________________。(4)移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是____________________。8．（10分）某研究小組利用“濾膜法”對受污染的河流水體進行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測定?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究人員向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍水溶液后，裝人圖甲所示的試管中，再將污水樣滴加進去振蕩搖勻，一段時間后，若觀察到溶液顏色變化情況為_________，，說明微生物在培養(yǎng)過程中產(chǎn)生了CO2。若要用重鉻酸鉀檢測微生物在培養(yǎng)過程中是否產(chǎn)生了酒精，具體做法是_________。(2)利用圖乙所示的“濾膜法”測定大腸桿菌的數(shù)目時，應先制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的滅菌方法是_________，滅菌后待培養(yǎng)基冷卻至_________℃左右時，在_________附近倒平板。(3)圖乙中濾膜的孔徑應_________(填“大于”“小于”或“等于”)大腸桿菌。若將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間，然后統(tǒng)計_________色的菌落數(shù)目，就可估算出單位體積樣品中大腸桿菌的數(shù)目，但這樣得到的統(tǒng)計值往往要比實際值低，原因是_________。9．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學技術(shù)。請結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導致細胞死亡。（1）將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導入胚胎干細胞，這樣打靶載體和與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細胞”或“生殖細胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。10．（10分）神經(jīng)纖毛蛋白-1（NRP-1）是血管內(nèi)皮生長因子的新型受體，經(jīng)實驗證明，與正常組織細胞相比，NRP-1在乳腺癌（MCF7）細胞中高表達，通過參與多種信號轉(zhuǎn)導來促進腫瘤血管的生成，進而促進腫瘤體積的增長。本研究將為NRP-1單克隆抗體靶向治療乳腺癌提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。（1）取乳腺癌（MCF7）組織塊，運用____________________技術(shù)獲得MCF7細胞用于后續(xù)實驗。用人的_____________________蛋白對小鼠進行注射，使小鼠產(chǎn)生免疫反應，制備雜交瘤細胞，將雜交瘤細胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，吸取培養(yǎng)孔中的________________（填上清液或沉淀細胞），應用_________________技術(shù)進行抗體陽性檢測。經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng)，獲得NRP-1單克隆抗體（NRP-1MAb）。（2）將MCF7細胞制成單細胞懸液，等量注入4組裸鼠（即無胸腺裸鼠）右前腋下，接種后3天開始給藥NRP-1單克隆抗體（NRP-1MAb），共給藥7次，對照組注射等量的生理鹽水。每隔5天測算一次腫瘤的體積，如下圖所示：從上圖中可以看出_________________________（3）結(jié)合題干信息，綜合以上研究請你推測NRP-1MAb抑制腫瘤的作用機理是_____________________。（4）注射不同劑量NRP-1MAb33天后，剝離腫瘤組織稱重，實驗結(jié)果如下圖：從該結(jié)果中可以看出___________________________。綜合比較（3）和（5）的實驗結(jié)果，可見中高劑量和低劑量的NRP-1MAb在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上出現(xiàn)了不一致性。通過實驗研究，有助于指導實踐中科學用藥。11．（15分）凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶，研究人員利用基因工程技術(shù)，將編碼該酶的基因轉(zhuǎn)移到了微生物細胞中并使之表達。如圖表示EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶在質(zhì)粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位點．回答下列問題：（1）根據(jù)圖中EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶的切割位點分析，該工程中最不適宜用來切割外源DNA獲取目的基因的限制酶是_____，將切割后的質(zhì)粒和目的基因連接起來需要_____酶．構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在目的基因前要加上特殊的啟動子，它是_____識別和結(jié)合的部位。（2）工業(yè)化生產(chǎn)過程中，若采用重組大腸桿菌生產(chǎn)凝乳酶，該過程中將目的基因?qū)舜竽c桿菌前，常常用_____處理細胞，使之處于一種能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為_____細胞。（3）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該凝乳酶第20位和第24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，其催化能力將提?倍。科學家可以生產(chǎn)上述高效凝乳酶的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是_____。該生物工程技術(shù)對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的設(shè)計和改造，必須通過基因來完成，原因是_____。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】圖中幼苗沒有尖端，不能產(chǎn)生生長素，所以幼苗不生長，A錯誤；圖中幼苗尖端不能感受光刺激，表現(xiàn)為直立生長，B錯誤；圖中幼苗的尖端可以感受單側(cè)光的刺激，所以表現(xiàn)為向光生長，C正確；圖中幼苗沒有感受光刺激的尖端，但是有含有生長素的瓊脂塊，所以幼苗表現(xiàn)為直立生長，D錯誤?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是根據(jù)有無尖端或者生長素判斷植物是否生長，有無單側(cè)光和尖端判斷植物是否彎曲生長。2、D【解析】

群落演替：隨著時間的推移，一個群落被另一個群落代替的過程。初生演替指在一個從來沒有植被覆蓋的地面，或者原來存在植被，但是被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替，如在沙丘、火山巖、冰川泥進行的演替。次生演替指在原有植被雖已不存在，但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體（如能發(fā)芽的地下莖）的地方發(fā)生的演替，如火災后的草原、過量砍伐的森林、棄耕的農(nóng)田上進行的演替。【詳解】A、原始森林演變?yōu)榇紊质菑挠猩锏娜郝溟_始的演替，屬于次生演替，A不符合題意；B、廢棄的農(nóng)田中保留有原有土壤條件、含有生物的種子等，故廢棄的農(nóng)田中雜草叢生形成草地屬于次生演替，B不符合題意；C、過度放牧的草原演變?yōu)榛哪矊儆谑菑挠猩锏娜郝溟_始的演替，屬于次生演替，C不符合題意；D、溫帶草原面貌從夏季到冬季發(fā)生改變屬于群落的時間結(jié)構(gòu)，不屬于次生演替，D符合題意。故選D?！军c睛】本題考查群落演替的相關(guān)知識，要求考生識記演替的類型及實例，屬于考綱識記層次的考查。3、D【解析】

據(jù)圖分析，圖示為肺炎雙球菌的體外轉(zhuǎn)化實驗，其中A、B、C、D管加入的分別是S型細菌的多糖、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA，都不是轉(zhuǎn)化因子，因此四支試管中都只有R型細菌；E試管中加入的是S型細菌的DNA，是轉(zhuǎn)化因子，因此該試管中會出現(xiàn)R型細菌和S型細菌；F試管中DNA被DNA酶水解，不能將R型細菌轉(zhuǎn)化為S型細菌?！驹斀狻緼、菌落的特征應該在固體培養(yǎng)基上才能觀察到，而圖示試管中為液體培養(yǎng)基，A錯誤；B、該實驗不能破壞S型細菌的化學成分，因此不能研磨，該實驗應該用到分離提純技術(shù)，B錯誤；C、實驗結(jié)果證明DNA能將R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌，而蛋白質(zhì)等不能將R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌，但是不能證明S型菌的各種成分是否能進入R型菌，C錯誤；D、為使實驗結(jié)果更加明顯，可采用提高物質(zhì)分離純度及加入氯化鈣等措施，D正確。故選D。4、B【解析】

分析圖示可知，圖1細胞內(nèi)同源染色體正在分離且細胞質(zhì)不均等分裂，屬于初級卵母細胞，正處在減數(shù)第一次分裂的后期；圖2細胞內(nèi)無同源染色體且染色體的著絲點排列在赤道板上，屬于減數(shù)第二次分裂的中期；圖3為細胞分裂不同時期染色體與核DNA數(shù)目比，AB段DNA：染色體=1:1，處于間期中的G1期，BC段表示S期DNA的復制，復制后DNA：染色體=1:2，CE段可以表示含有姐妹染色單體的時期，包括有絲分裂的前、中期以及減數(shù)第一次分裂時期和減數(shù)第二次分裂的前、中期；EF時發(fā)生著絲點分裂，使得DNA：染色體=1:1，F(xiàn)G段可以表示有絲分裂的后期、末期和減數(shù)第二次分裂的后期和末期?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析可知，圖1細胞處于減數(shù)第一次分裂后期，細胞中有2個染色體組，A錯誤；B、根據(jù)以上分析可知，圖1細胞為初級卵母細胞，若圖2細胞來自圖1細胞，則其產(chǎn)生的子細胞是卵細胞和極體，B正確；C、根據(jù)以上分析可知，圖3中B→C的原因是DNA復制，E→F的原因是著絲點分裂所致，C錯誤；D、圖1處于減數(shù)第一次分裂的后期，處于圖3中的CE段，圖2處于減數(shù)第二次分裂的中期，屬于圖3中的CE段，D錯誤。故選B。5、D【解析】

運動員劇烈運動時，（1）機體產(chǎn)熱大量增加，通過神經(jīng)調(diào)節(jié)，引起皮膚毛細血管舒張和汗腺分泌增強，導致散熱加快以維持體溫的相對恒定。（2）機體大量出汗導致失水較多，刺激滲透壓感受器，引起垂體釋放抗利尿激素，繼而促進腎小管、集合管對水的重吸收，以維持體內(nèi)的水鹽平衡。（3）機體血糖大量消耗，血糖含量降低時，胰島A細胞分泌的胰高血糖素增加，腎上腺髓質(zhì)分泌的腎上腺素增加，使血糖快速補充。（4）比賽結(jié)束后，運動員可適量補充水分以消除由于細胞外液中滲透壓升高引起的渴感。【詳解】A、由于參加比賽是高強度的運動，消耗了大量的能量，為補充機體血糖的穩(wěn)定，應該會肝糖原分解速度加快，以維持血糖平衡的現(xiàn)象，A正確；B、運動員在高強度運動后，會分泌大量的汗液，使得機體細胞外液的滲透壓升高，刺激下丘腦的滲透壓感受器，合成并分泌抗利尿激素，并由垂體釋放出來，促進了腎小管和集合管對水的重吸收，導致尿液減少，B正確；C、由于運動，機體產(chǎn)熱量增加，體溫上升，刺激下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞興奮，引起汗液分泌增加以增加散熱，維持體溫的恒定，C正確；D、在運動過程中，由于無氧呼吸對能量的補充，機體會產(chǎn)生大量乳酸，但由于內(nèi)環(huán)境中存在緩沖物質(zhì)能夠?qū)H做出調(diào)節(jié)，內(nèi)環(huán)境pH不會顯著降低，D錯誤。故選D。6、B【解析】

據(jù)圖分析，圖示為細胞膜的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖，其中結(jié)構(gòu)①表示糖蛋白，位于細胞膜的外側(cè)；結(jié)構(gòu)②表示蛋白質(zhì)，其種類和數(shù)量與細胞膜功能的復雜程度有關(guān)；結(jié)構(gòu)③表示磷脂雙分子層，是細胞膜的基本骨架?！驹斀狻緼、結(jié)構(gòu)③是磷脂雙分子層，由兩層磷脂分子組成，而磷脂分子含有甘油基團，A正確；B、結(jié)構(gòu)②是膜蛋白，可能是酶，因此可能起著生物催化劑的作用，B錯誤；C、結(jié)構(gòu)③是磷脂雙分子層，也具有選擇透性，C正確；D、在效應細胞毒性T細胞中，結(jié)構(gòu)①糖蛋白可能會識別抗原-MHC復合體，D正確。故選B。【點睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握細胞膜的結(jié)構(gòu)與功能，準確識別圖中各個數(shù)字代表的結(jié)構(gòu)的名稱，回憶各個結(jié)構(gòu)的功能，明確細胞膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量越多，細胞膜的功能越復雜。二、綜合題：本大題共4小題7、卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能促性腺激素化學誘導法無機鹽和有機鹽桑椹胚階段或囊胚階段對供體和受體母畜進行同期發(fā)情處理受體子宮對外來胚胎不發(fā)生排斥反應【解析】

胚胎移植的基本程序：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用性激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑棋或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查?！驹斀狻浚?）山羊體外受精主要包括卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能以及受精等幾個主要步驟。用促性腺激素處理方法促進其排卵，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。精子獲能處理通常采用培養(yǎng)法和化學誘導法，化學誘導法即將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中獲能。（2）培養(yǎng)早期胚胎時，所用培養(yǎng)液除了一些無機鹽和有機鹽類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。不同胚胎移植時間一般不同，山羊一般要培養(yǎng)到桑樵胚階段或囊胚階段才能進行移植。（3）為了使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致，處理方法是對供體和受體母畜進行同期發(fā)情處理。（4）移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是受體子宮對外來胚胎不發(fā)生排斥反應?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記體外受精的具體過程；識記核移植的過程及相關(guān)應用；識記胚胎移植的生理學基礎(chǔ)及應用，能結(jié)合所學的知識準確答題。8、由藍變綠再變黃取2mL培養(yǎng)液的濾液注入干凈的試管中，再向試管中滴加0.5mL溶有重鉻酸鉀的濃硫酸溶液，振蕩搖勻后規(guī)察溶液顔色的變化高壓蒸汽滅菌50酒精燈火焰小于黑兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落【解析】

二氧化碳可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃，酒精可以使得重鉻酸鉀溶液由橙色變?yōu)榛揖G色；伊紅為酸性染料，美藍為堿性染料，大腸桿菌在含有伊紅美藍培養(yǎng)基上形成的菌落呈深紫色（黑色），并有金屬光澤，伊紅-美藍是專一鑒別大腸桿菌的指示劑；常用的純化微生物時的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法?！驹斀狻浚?）微生物細胞呼吸產(chǎn)生的CO2可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃；微生物無氧呼吸產(chǎn)生的酒精可以用重鉻酸鉀進行檢測，即取2mL培養(yǎng)液的濾液注入干凈的試管中，再向試管中滴加0.5mL溶有重鉻酸鉀的濃硫酸溶液，振蕩搖勻后規(guī)察溶液顔色的變化。（2）微生物培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近進行倒平板。（3）分析圖解可知，實驗將待測水樣進行過濾，得到的濾膜進行微生物培養(yǎng)，因此水中的大腸桿菌應留在濾膜上，即圖乙中濾膜的孔徑應小于大腸桿菌；在伊紅美藍培養(yǎng)基上，可以鑒定出菌落為黑色的具有金屬光澤的大腸桿菌菌落，因此該小組通過統(tǒng)計黑色菌落的數(shù)目，計算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目。由于培養(yǎng)基中兩個或多個大腸桿菌連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落，因此理論上他們的統(tǒng)計值比實際值偏低?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握二氧化碳、酒精以及大腸桿菌鑒定的原理，能夠分析利用稀釋涂布平板法計數(shù)會導致結(jié)果偏小的原因。9、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）分析題圖可知，將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導入胚胎干細胞，這樣打靶載體與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導致細胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞（或克隆）培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細胞恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。【點睛】本題考查基因工程的原理及技術(shù)以及胚胎工程的有關(guān)知識，重點考查基因工程的操作步驟，要求考生識記基因表達載體的構(gòu)建過程，識記胚胎工程的操作過程，屬于考綱識記層次的考查。10、動物細胞培養(yǎng)神經(jīng)纖毛蛋白-1（NRP-1）上清液抗原—抗體雜交NRP-1MAb能夠有效地降低腫瘤的體積，中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著NRP-1在MCF7細胞中高表達，NRP-1MAb與NRP-1特異性結(jié)合，阻斷了血管內(nèi)皮生長因子與NRP-1的結(jié)合，抑制了腫瘤血管生成，進而降低了腫瘤的體積NRP-1MAb能夠有效地降低腫瘤組織的重量，中、高劑量抗體的降低效果稍微沒有低濃度的好，不同劑量降低效果的差異并不顯著【解析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體?！驹斀狻浚?）取乳腺癌組織塊，通過動物細胞培養(yǎng)技術(shù)獲得MCF7細胞用于后續(xù)實驗；用人的神經(jīng)纖毛蛋白對小鼠進行注射使小鼠產(chǎn)生免疫反應；抗體較輕，會留在上清液中，故要吸取培養(yǎng)孔中的上清液；應用抗原-抗體雜交技術(shù)進行抗體陽性檢測；（2）根據(jù)題圖分析可知，經(jīng)過給藥NRP-1MAb處理的腫瘤體積均小于對照組，說明NRP-1MAb能夠有效地降低腫瘤組織的重量且中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著；（3）已知NRP-1在乳腺癌（MCF7）細胞中高表達，通過參與多種信號轉(zhuǎn)導來促進腫瘤血管的生成，進而促進腫瘤體積的增長，而NRP-1單克隆