@綜合實驗剖析

實驗七綜合實驗實驗?zāi)康?.學(xué)習(xí)并掌握小鼠旋轉(zhuǎn)桿平衡實驗、跳臺回避實驗以及無創(chuàng)血壓測試方法2.了解各個測試指標(biāo)的意義實驗原理1.旋轉(zhuǎn)桿平衡實驗是測試小鼠肌肉協(xié)調(diào)性、疲勞的經(jīng)典實驗。實驗所使用的疲勞轉(zhuǎn)棒儀可用于研究藥物對動作協(xié)調(diào)性和抗疲勞特性的影響。2.跳臺回避實驗屬一次性刺激回避反應(yīng)實驗，是衡量小鼠智能優(yōu)劣的一種方法。通過給予小鼠厭惡刺激，觀察小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。3.無創(chuàng)血壓測量通過大、小鼠尾動脈固定，通過壓力感應(yīng)裝置檢測血壓變化特點，采用計算機分析可以獲得動物的收縮壓、舒張壓及脈搏波頻率變化的系列數(shù)據(jù)。實驗對象小鼠實驗儀器ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀STD-88通道大小鼠跳臺實驗系統(tǒng)大小鼠無創(chuàng)血壓測定系統(tǒng)計算機實驗步驟一、旋轉(zhuǎn)桿平衡實驗訓(xùn)練階段：1.將動物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移入實驗操作室，適應(yīng)60min。2.將旋轉(zhuǎn)杠的速度調(diào)至24r/min，打開旋轉(zhuǎn)設(shè)置裝置，置動物與旋轉(zhuǎn)桿上，測定其從旋轉(zhuǎn)桿上滑落的時間，即潛伏期。設(shè)定最長潛伏期為60s。3.每天每只動物訓(xùn)練4次，每次間隔5-10min，連續(xù)訓(xùn)練3天。4.訓(xùn)練結(jié)束后，將動物送回飼養(yǎng)室，以70%的乙醇清潔訓(xùn)練裝置。測試階段:將動物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移入實驗操作室，適應(yīng)60min。打開旋轉(zhuǎn)設(shè)置裝置，測定動物在不同旋轉(zhuǎn)速度下的潛伏期，轉(zhuǎn)速分別為5、8、15、20、24、31、33、44r/min。每個速度測定兩次，在計算時取其平均值。測試結(jié)束后，將動物送回飼養(yǎng)室，以70%的乙醇清潔訓(xùn)練裝置。編號58152024313344CE12CE19CE20CE21CE25AE6AE9AE11AE14AE15二、跳臺回避實驗系統(tǒng)1.打開SDT-8跳臺實驗視頻分析系統(tǒng)軟件，點擊“打開攝像頭”按鈕，再打開實驗箱，將其中所有的跳臺全部翻面，使背面黑色的部分朝上并靠角落放置，再關(guān)閉試驗箱。點擊“曝光+”和“曝光-”兩個按鈕調(diào)節(jié)曝光強度，使軟件自動識別到跳臺區(qū)域，點擊“區(qū)域設(shè)定”按鈕。設(shè)定完畢后，將所有跳臺翻面，使黑色部分朝下置放，使得區(qū)域設(shè)定后倒置跳臺時將跳臺卡入從右上角開始的第二根刺激棒內(nèi)便能保證其放回原位置。關(guān)閉試驗箱。2.實驗包括兩次相隔60min的電擊訓(xùn)練和一次24h后的記憶保持實驗。①電擊訓(xùn)練：將小鼠放置于跳臺之上，當(dāng)它往下跳至刺激柵極時，給予能夠引起小鼠發(fā)聲和退縮的最小電壓（28V）的電擊。將小鼠放回籠內(nèi)，清潔箱體。1h后重復(fù)上述訓(xùn)練，記錄跳臺潛伏期。如果小鼠在跳臺上的滯留時間超過60s，即認(rèn)為它已經(jīng)記住先前的厭惡刺激，不給電擊，放回籠內(nèi)；如果小鼠跳臺潛伏期少于60s，則在1h后再次重復(fù)訓(xùn)練一次。如仍不達(dá)標(biāo)，則予以淘汰。②記憶保持實驗：在第一次訓(xùn)練后的24h進(jìn)行。方法與訓(xùn)練相同，但不給電擊。記錄小鼠從跳臺跳下的錯誤次數(shù)。如小鼠300s后仍不跳下跳臺，則終止實驗。實驗除記錄錯誤次數(shù)外，還記錄達(dá)到回避標(biāo)準(zhǔn)的動物數(shù)。達(dá)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)為：“記憶保持測試”的潛伏期大于“第二次訓(xùn)練”潛伏期的3倍且超過60s。以錯誤反應(yīng)次數(shù)為判斷記憶力的定性指標(biāo)，達(dá)標(biāo)動物的百分比為記憶的定量指標(biāo)。編號潛伏期錯誤次數(shù)編號潛伏期錯誤次數(shù)CE12AE6CE19AE9CE20AE11CE21AE14CE25AE15三、大小鼠無創(chuàng)血壓測試預(yù)熱無創(chuàng)血壓測試儀，使箱體溫度達(dá)到37℃將小鼠的四肢和頭部固定住固定裝置中，將加壓裝置和壓力傳感器固定在小鼠尾部，放入箱體使其適應(yīng)環(huán)境通過充氣、放氣對尾動脈加壓和釋壓的同時監(jiān)測血流信號，得出血壓值測量記錄平均動脈壓、收縮壓、舒張壓和心率編號血壓心率編號血壓心率CE12AE6CE