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文檔簡介
陜西省富平縣富平中學2025屆高三第二次調(diào)研生物試卷請考生注意:1.請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上,請用0.5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2.答題前,認真閱讀答題紙上的《注意事項》,按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.人腦內(nèi)有一種“沉默突觸”,它具有突觸結(jié)構(gòu),但沒有信息傳遞的功能。你推測最不可能的原因是()A.突觸小體中沒有突觸小泡 B.突觸前膜無法釋放神經(jīng)遞質(zhì)C.突觸間隙不存在水解神經(jīng)遞質(zhì)的酶 D.突觸后膜缺乏相應(yīng)的受體2.下列關(guān)于激素、酶和神經(jīng)遞質(zhì)的敘述,正確的是()A.激素和酶一經(jīng)靶細胞接受并起作用后就被滅活了B.激素和神經(jīng)遞質(zhì)都可以作為信息分子調(diào)節(jié)生命活動C.激素和酶都是蛋白質(zhì),能產(chǎn)生酶的細胞一定能產(chǎn)生激素D.酶和神經(jīng)遞質(zhì)都能降低化學反應(yīng)活化能,因此具有高效性3.將活的紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞置于蔗糖溶液中,短時間后細胞形態(tài)不再發(fā)生變化,則此時()A.細胞必定處于質(zhì)壁分離狀態(tài) B.細胞液中的蔗糖濃度比實驗開始時高C.可在光鏡下觀察到水分子在進出細胞 D.細胞液與蔗糖溶液可能仍存在濃度差4.已知某閉花受粉植物高莖對矮莖為顯性,紅花對白花為顯性,兩對性狀獨立遺傳。用純合的高莖紅花與矮莖白花雜交,F(xiàn)1自交,播種所有的F2,假定所有的F2植株都能成活,F(xiàn)2植株開花時,拔掉所有的白花植株,假定剩余的每株F2自交收獲的種子數(shù)量相等,且F3的表現(xiàn)性符合遺傳的基本定律。從理論上講F3中表現(xiàn)白花植株的比例為A.1/4 B.1/6 C.1/8 D.1/165.下列有關(guān)人體中激素的敘述,正確的是()A.運動時腎上腺素水平升高,使心率加快,說明激素是一類高能化合物B.饑餓時胰高血糖素水平升高,促進糖原分解,說明激素有催化的作用C.進食后胰島素水平升高,促進細胞攝取葡萄糖,說明教素有調(diào)節(jié)作用D.青春期性激素水平升高,促進機體發(fā)育,說明激素是細胞的結(jié)構(gòu)組分6.井岡霉素是目前防治水稻紋枯病的主要農(nóng)藥,由于多年的單一使用,部分地區(qū)紋枯病菌對其產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。以下敘述不正確的是()A.井岡霉素使紋枯病菌發(fā)生基因突變B.紋枯病菌突變導(dǎo)致基因庫發(fā)生改變C.井岡霉素對紋枯病菌的抗藥性具有選擇作用D.水稻與紋枯病菌之間存在共同(協(xié)同)進化7.蛋白質(zhì)是生命活動的主要承擔者。下列關(guān)于蛋白質(zhì)的說法,正確的是()A.生物膜外側(cè)上均有糖蛋白,其主要作用是參與信息交流B.細胞中核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體都參與了蛋白質(zhì)的加工和運輸C.胰島B細胞的細胞膜上沒有運輸胰島素的載體蛋白,有感受血糖的受體蛋白D.溶酶體的膜不會被自身水解酶破壞,是因為不含有蛋白酶8.(10分)如圖中的甲、乙、丙分別代表人體液中物質(zhì)交換、食物網(wǎng)中能量流動、生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的示意圖。據(jù)此,下列說法中正確的是()A.甲圖D與B間不能直接進行物質(zhì)交換,D與A之間才能直接進行物質(zhì)交換B.因捕食關(guān)系而建立的食物鏈中,能量最少的是丙圖中的B所處的營養(yǎng)級C.從研究內(nèi)容來看,甲屬于生命系統(tǒng)的個體水平,乙、丙都屬于群落水平D.能量傳遞效率按10%計算,乙圖中B取食A占的比例由1/1調(diào)整為5/6,則A供養(yǎng)的B數(shù)量是原來的1.1倍二、非選擇題9.(10分)咔唑(含N有機物)具有潛在致癌性,且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定難以清除。為了獲得高效降解咔唑的微生物,研究人員設(shè)計了如圖所示的實驗方案(①~⑦表示相應(yīng)的標注操作過程)。請回答下列問題。(1)圖示所用的“CNFM+咔唑”培養(yǎng)基,屬于_________培養(yǎng)基。(2)②操作的接種采用______(實驗器具)。(3)④操作的接種采用_______方法,其中平板培養(yǎng)的目的是________。(4)在相同、適應(yīng)環(huán)境中進行上述“多瓶培養(yǎng)”操作,可以初步確定_________的錐形瓶中含有高效降解咔唑的微生物。(5)為鑒定下圖1平板中的微生物種類,可作為鑒定依據(jù)的有______。(6)為了將圖1培養(yǎng)基中的真菌與細菌分離,新制了PDA培養(yǎng)基(含馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、蒸餾水)并加入青霉素(抑制細菌細胞壁的合成)。接種時用絨布輕按圖1培養(yǎng)基表面,使絨布面沾上菌落,再將絨布輕按在新制培養(yǎng)基表面,培養(yǎng)結(jié)果如圖2所示①比較圖1、2可知,圖1中菌落______(填編號)為細菌,判斷理由是______。②圖2中出現(xiàn)菌落5的原因可能是______(寫出三種)。10.(14分)研究發(fā)現(xiàn),牛的瘤胃中含有多種纖維素分解菌,這些纖維素分解菌可用于分解秸稈等廢棄物。某科研小組按以下實驗流程分離獲取了牛瘤胃中的纖維素酶高產(chǎn)菌株。(1)纖維素酶是由多種酶組成的復(fù)合酶,其中能催化纖維二糖水解的是________。纖維素酶的測定方法,一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的_______進行定量測定。(2)步驟A是_____________,可以通過此步驟增加______________________。(3)科研小組的某個同學將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中,調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件,并持續(xù)通入無菌空氣,結(jié)果一段時間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒有菌種,原因是_________。(4)按照修正后的實驗方法,研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩選到了幾株有透明圈的菌落(如圖)。圖中透明圈的大小與纖維素酶的________有關(guān);圖中降解纖維素能力最強的菌株是____________。(5)現(xiàn)利用稀釋涂布平板法測定該目的菌的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下4個平板上均接種0.1ml樣品溶液,菌落數(shù)分別為156、178、486、191,通過計算得知原樣品溶液中每毫升含有目的菌1.75×108個,則稀釋倍數(shù)是________________。11.(14分)利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白,近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1表示基因工程常用的一種質(zhì)粒。回答有關(guān)問題:(1)SphⅠ和SacⅠ兩種限制酶識別并切割不同的DNA序列,將目的基因和質(zhì)粒都通過SphⅠ和SacⅠ切割,可以避免_______________。拼接成重組質(zhì)粒,需要加入_______________酶才能完成。(2)各限制酶在該質(zhì)粒上分別只有一處識別序列,有關(guān)質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度如下表所示。已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0.5kb,則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長度為_____kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2.4kb(圖1所示),結(jié)合圖2分析目的基因上ClaI、PstⅠ兩種限制酶的切割位點分別為___________(填“a和b”或“b和a”)。質(zhì)粒重組質(zhì)粒BglⅡ6.0kb7.1kbClaⅠ6.0kb2.3kb,4.8kbPstⅠ6.0kb1.5kb,5.6kb(3)在篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體菌時,培養(yǎng)基中加入適量的________________,使導(dǎo)入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都能在該培養(yǎng)基上生長。為了進一步篩選,可以利用抗原-抗體雜交的方法,若出現(xiàn)______________,則該受體菌可以作為工程菌。(4)若要對藥用蛋白的結(jié)構(gòu)進行改造,可利用____________工程對目的基因進行修飾。12.科學工作者欲培育能產(chǎn)生含鐵量較高的轉(zhuǎn)基因花生新品種,Ti質(zhì)粒中含有潮霉素抗性基因,具體步驟如圖:(1)完整的Ti質(zhì)粒除了圖示結(jié)構(gòu)外,還應(yīng)該包括啟動子、終止子等,其中啟動子位于基因的首段,它的作用是_____________________________________________________________________。(2)若鐵結(jié)合蛋白基因來自菜豆,獲取該目的基因需要用到的工具酶的特點是_______________________________________________________________________________________。(3)圖中將目的基因(鐵結(jié)合蛋白基因)導(dǎo)入受體細胞的方法為______________;為確定轉(zhuǎn)基因花生是否培育成功,首先應(yīng)檢測___________,這是目的基因能否在受體細胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵;其次,利用___________檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA;最后,利用抗原—抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。(4)圖中用到的植物細胞工程技術(shù)是_______________________________,培養(yǎng)基1中經(jīng)過脫分化得到愈傷組織,培養(yǎng)基2中篩選的方法是在培養(yǎng)基中加入一定量的_________________,培養(yǎng)基3的作用是______________________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】
“沉默突觸”只有突觸結(jié)構(gòu)而沒有傳遞功能,表明興奮無法在突觸中傳遞,造成原因有兩種,一種是突觸無法釋放相應(yīng)的神經(jīng)遞質(zhì),另一種是突觸前膜可以釋放神經(jīng)遞質(zhì),但由于突觸后膜上沒有相應(yīng)的受體?!驹斀狻緼、神經(jīng)遞質(zhì)只存在于突觸前膜的突觸小泡內(nèi),突觸小體中沒有突觸小泡可能會造成沉默突觸,A正確;B、神經(jīng)遞質(zhì)只能由突觸前膜釋放,然后作用于突觸后膜上,突觸前膜無法釋放神經(jīng)遞質(zhì)可能會造成突觸沉默,B正確;C、突觸間隙不存在水解神經(jīng)遞質(zhì)的酶,不影響神經(jīng)遞質(zhì)傳遞信息,C錯誤,D、神經(jīng)遞質(zhì)只有與突觸后膜上的特異性受體結(jié)合才能使下一個神經(jīng)元產(chǎn)生興奮或抑制,因此突觸后膜缺乏相應(yīng)的受體,則突觸沒有信息傳遞的功能,D正確。故選C?!军c睛】熟記并理解神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)、興奮在神經(jīng)元之間傳遞的過程是正確解答此類問題的前提。在此基礎(chǔ)上以題意“沉默突觸具有突觸結(jié)構(gòu),但沒有信息傳遞的功能”為解題的切入點進行分析,即可作出準確的判斷。2、B【解析】
酶和激素的區(qū)別和聯(lián)系:區(qū)別酶激素來源所有活細胞植物:一定部位的活細胞產(chǎn)生;動物:由內(nèi)分泌腺細胞產(chǎn)生本質(zhì)有機物,大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),少量的酶屬于RNA有機物,如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸的衍生物等生理作用催化功能調(diào)節(jié)功能作用范圍與特點在細胞內(nèi)或分泌到細胞外催化特定的化學反應(yīng),具有功能的專一性通過體液運輸,作用于相應(yīng)的靶器官,具有作用部位的特異性,但一種激素可以有多種功能作用條件受pH、溫度等因素的影響與神經(jīng)系統(tǒng)密切聯(lián)系相同點微量,作用大,屬于高效能物質(zhì),聯(lián)系激素對新陳代謝具有調(diào)節(jié)作用,離不開酶的催化;激素可以激活酶的活性;酶和激素的合成與分泌在一定程度上相互影響?!驹斀狻緼、激素一經(jīng)靶細胞接受并起作用后就被滅活了,而酶作用后不被滅活,A錯誤;B、激素是體液中重要的信息分子,而神經(jīng)遞質(zhì)是興奮在細胞間傳遞的化學信號,二者都可以作為信息分子調(diào)節(jié)生命活動,B正確;C、激素和酶不都是蛋白質(zhì),能產(chǎn)生激素的細胞一定能產(chǎn)生酶,C錯誤;D、酶能降低化學反應(yīng)活化能,而神經(jīng)遞質(zhì)能傳遞調(diào)節(jié)生命活動的信號,D錯誤。故選B。3、D【解析】
將活的紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞置于蔗糖溶液中,短時間后細胞形態(tài)不再發(fā)生變化時的狀態(tài)為滲透平衡狀態(tài),由于蔗糖溶液未知,故無法判斷處于平衡狀態(tài)之前的水分子的流動方向,即無法判斷該洋蔥也外表皮細胞是失水還是吸水。【詳解】A、蔗糖溶液濃度未知,洋蔥表皮細胞可能失水,也可能吸水,A錯誤;B、短時間后基本無蔗糖分子進入細胞液內(nèi),B錯誤;C、顯微鏡下觀察不到水分子的運動,C錯誤;D、植物細胞達到平衡狀態(tài)時,細胞液與蔗糖溶液可能無濃度差,也可能存在濃度差,D正確。故選D。4、B【解析】
假設(shè)紅花顯性基因為R,白花隱性為r,F(xiàn)1全為紅花Rr,F(xiàn)1自交,所得F2紅花的基因型為1/3RR、2/3Rr,去掉白花,F(xiàn)2紅花自交出現(xiàn)白花的比例為2/3×1/4=1/6,B正確。故選B。5、C【解析】
激素種類多、高效微量,既不組成細胞結(jié)構(gòu),又不提供能量,也不起催化作用,而是隨著體液運輸?shù)桨屑毎?,使靶細胞原有的生理活動發(fā)生變化;激素是調(diào)節(jié)生命活動的信息分子。【詳解】A、激素是調(diào)節(jié)生命活動的信息分子,不為細胞代謝提供能量,不是高能化合物,A錯誤;B、具有催化作用的是酶,激素沒有催化作用,B錯誤;C、進食后,血糖濃度升高,胰島B細胞分泌的胰島素增加,促進細胞攝取葡萄糖,說明教素有調(diào)節(jié)作用,C正確;D、激素是調(diào)節(jié)生命活動的信息分子,不能作為細胞的結(jié)構(gòu)組分,D錯誤。故選C。6、A【解析】
基因突變是不定向的,基因突變可以為生物進化提供原材料,通過自然選擇的作用使能適應(yīng)環(huán)境的突變積累?!驹斀狻緼C、基因突變在井岡霉素使用之前就已存在,井岡霉素的使用只是起選擇作用,將耐藥個體選擇并保留下來,A錯誤、C正確;B、紋枯病菌突變會出現(xiàn)新的基因,會導(dǎo)致基因庫發(fā)生改變,B正確;D、紋枯病菌抗藥性增強,會導(dǎo)致不抗病的水稻死亡,進而保留下抗菌個體,故水稻與紋枯病菌之間存在共同(協(xié)同)進化,D正確。故選A?!军c睛】解答A選項需要明確選擇與變異的關(guān)系:變異在前,選擇在后。7、C【解析】
蛋白質(zhì)的功能-生命活動的主要承擔者:①構(gòu)成細胞和生物體的重要物質(zhì),即結(jié)構(gòu)蛋白,如羽毛、頭發(fā)、蛛絲、肌動蛋白;②催化作用:如絕大多數(shù)酶;③傳遞信息,即調(diào)節(jié)作用:如胰島素、生長激素;④免疫作用:如免疫球蛋白(抗體);⑤運輸作用:如紅細胞中的血紅蛋白?!驹斀狻緼、不是所有的生物膜上均有糖蛋白,例如葉綠體類囊體薄膜,A錯誤;B、核糖體沒有參與蛋白質(zhì)的加工和運輸,其功能是合成蛋白質(zhì),B錯誤;C、胰島B細胞分泌胰島素的方式是胞吐,不需要載體蛋白的協(xié)助,血糖濃度過高會刺激胰島B細胞分泌胰島素,所以胰島B細胞上有感受血糖的受體蛋白,C正確;D、溶酶體內(nèi)的水解酶含有蛋白酶,D錯誤。故選C。【點睛】本題結(jié)合血糖調(diào)節(jié)的過程、分泌蛋白的合成過程、溶酶體和生物膜進行綜合考查,需要考生識記相關(guān)知識。8、D【解析】
分析甲圖:甲圖代表人體液中物質(zhì)交換示意圖,其中A為組織液、B為淋巴、C為血漿、D為細胞內(nèi)液。分析乙圖:乙圖代表食物網(wǎng)中能量流動示意圖,其中A為生產(chǎn)者、B和C為消費者。分析丙圖:丙圖代表生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的示意圖,其中A為生產(chǎn)者、B為分解者、C為消費者、D為大氣中的二氧化碳庫?!驹斀狻緼、甲圖中D為細胞內(nèi)液,B為淋巴,淋巴細胞生活在淋巴液中,淋巴細胞的細胞內(nèi)液可與淋巴直接進行物質(zhì)交換,A錯誤;B、圖丙中B是分解者,不參與食物鏈的組成,因捕食關(guān)系而建立的食物鏈中,能量最少的是丙圖中的C所處的營養(yǎng)級,B錯誤;C、乙表示食物鏈,只包含生產(chǎn)者和消費者,還缺少分解者,因此不能構(gòu)成群落;丙中包括生物成分和非生物成分,屬于生態(tài)系統(tǒng)水平,C錯誤;D、乙圖中B從上一營養(yǎng)級獲得的能量中,當A占的比例為1/1時,則C占的比例也為1/1,設(shè)B體重增加X,按照能量傳遞效率10%計算,從A→C→B這條食物鏈,需要A的量為1/1X÷10%÷10%,即50X;按照A→B這條食物鏈,需要A的量為1/1X÷10%,即5X,則總共消耗A的量為55X。同理,設(shè)調(diào)整比例后B體重增加Y,當A占的比例為5/6時,則C占的比例為1/6,總共消耗A的量為1/6Y÷10%÷10%+5/6Y÷10%=15Y,由于B取食的比例調(diào)整前后,A的同化量不變,所以55X=15Y,Y/X=1.1,即B取食A占的比例由1/1調(diào)整為5/6后,A供養(yǎng)的B數(shù)量是原來的1.1倍,D正確。
故選D。二、非選擇題9、選擇移液管稀釋涂布平板法篩選出高效降解咔唑的微生物含咔唑濃度最低的菌落的大小、形狀、顏色和表面情況等3、4細菌無法在含青霉素的培養(yǎng)基中生長絨布未滅菌、被抗青霉素細菌污染、培養(yǎng)基滅菌不徹底【解析】
閱讀題干和題圖可知,本題是利用微生物培養(yǎng)的知識分離高效降解有機污染物的細菌,先分析題圖了解分離高效降解有機污染物的內(nèi)容,然后根據(jù)問題的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識點分析解答。【詳解】(1)圖示所用的“CNFM+咔唑”培養(yǎng)基,只允許分解咔唑的微生物生長,具有選擇性,屬于選擇培養(yǎng)基;(2)從三角錐形瓶中準確移取一定體積的液體所用的儀器為移液管;(3)從錐形瓶中取菌液接種,用稀釋涂布平板法可使接種細菌逐漸稀釋,經(jīng)適宜條件培養(yǎng),可能形成單個、獨立的菌落;再利用含咔唑的固體培養(yǎng)基進行二次篩選,可以獲得高效降解咔唑的微生物;(4)在相同、適應(yīng)環(huán)境中進行多瓶培養(yǎng)操作,瓶中咔唑的剩余量可以初步反應(yīng)篩選的微生物對咔唑的降解能力,剩余咔唑量最低的錐形瓶中,篩選的微生物的降解能力最高;(5)菌落特征是細菌分類的依據(jù)之一,所以可以通過觀察菌落特征鑒定或區(qū)分不同的菌種,如顏色、大小、干濕、氣味、表面情況等;(6)①由于細菌無法在含青霉素的培養(yǎng)基中生長,所圖1中的菌落3、4為細菌。②圖2中出現(xiàn)新菌落5的原因可能是絨布未滅菌、或被抗青霉素細菌污染、或培養(yǎng)基滅菌不徹底?!军c睛】識記微生物常用的接種方法,掌握培養(yǎng)基的分類,根據(jù)題干情境準確作答。10、葡萄糖苷酶葡萄糖選擇培養(yǎng)纖維素分解菌的濃度瘤胃中的微生物為厭氧型,不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖產(chǎn)量和活性菌2105【解析】
纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶,能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖。纖維素分解菌常采用剛果紅染液進行鑒定,剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色物質(zhì),纖維素分解菌由于能夠?qū)⒗w維素分解而在平板上的菌落周圍出現(xiàn)無色的透明圈,透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少。微生物培養(yǎng)基的滅菌方法常采用高壓蒸汽滅菌法滅菌,接種方法常用稀釋涂布平板法和平板劃線法。微生物的培養(yǎng)基的主要成分包括碳源、氮源、水和無機鹽,有的還有特殊營養(yǎng)物質(zhì)(生長因子、維生素)?!驹斀狻浚?)纖維素酶是一種復(fù)合酶,包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三種,其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶。一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定。(2)牛胃取樣后,使用選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng),目的是增加纖維素分解菌(或目的菌)的濃度,因此步驟A是選擇培養(yǎng)。(3)由于瘤胃中的微生物為厭氧型,不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖,所以將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中,調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件,并持續(xù)通入無菌空氣,一段時間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒有菌種。(4)按照修正后的實驗方法,研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩選到了幾株有透明圈的菌落(如圖)。圖中透明圈的大小可以反應(yīng)纖維素分解菌產(chǎn)生的酶的多少(產(chǎn)量)及酶的活性;圖中菌2周圍的透明圈最大,降解纖維素能力最強。(5)用于計數(shù)細菌菌落的常用方法是稀釋涂布平板法,統(tǒng)計的菌落數(shù)應(yīng)介于30~300之間,故選擇細菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù),每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細菌數(shù)目,所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為(156+178+191)÷3÷0.1稀釋倍數(shù)=1.75×108,因此稀釋倍數(shù)=105?!军c睛】結(jié)合培養(yǎng)基的配制、菌株的篩選與鑒定等分析題意和題圖。11、目的基因和切割后質(zhì)粒的自身環(huán)化DNA連接1.6a和b氨芐青霉素雜交帶(抗原-抗體復(fù)合物)蛋白質(zhì)(第二代基因)【解析】
基因工程的工具酶有限制酶和DNA連接酶,一般用同種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因,但容易造成自身環(huán)化現(xiàn)象?!驹斀狻浚?)目的基因通過SphⅠ和SacⅠ切割產(chǎn)生的末端不同,可避免自身環(huán)化,質(zhì)粒通過SphⅠ和SacⅠ切割,可避免切割后的質(zhì)粒重新結(jié)合而環(huán)化;目的基因和質(zhì)粒結(jié)合,需要DNA連接酶連接磷酸二酯鍵將缺口連接起來。(2)根據(jù)表格信息,質(zhì)粒為6.0kb,減去被切除的長度為0.5kb的片段,則剩余的為5.5kb,而重組質(zhì)粒為7.1kb,說明插入的目的基因長度為7.1-5.5=1.6(kb);質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長度為2.4kb,減去被切取的片段長度為0.5kb后為1.9kb,插入的目的基因長度為1.6kb,所以重組質(zhì)粒上含抗四環(huán)素基因的ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域長度為1.9+1.6=3.5(kb),又根據(jù)表格信息,通過ClaⅠ切割重組質(zhì)粒,產(chǎn)生了2.3kb片段,通過PstⅠ切割重組質(zhì)粒,產(chǎn)生了1.5kb片段。設(shè)PstⅠ切割位點為a,ClaⅠ切割位點為b,則會出現(xiàn)圖3中所示結(jié)果,而2.3+1.5=3.8,3.8﹥3.6,說明a為ClaI切割位點、b為PstⅠ切割位點,反之則不成立。(3)重組質(zhì)粒的抗四環(huán)素基因已經(jīng)由于目的基因的插入而破壞,但氨芐青霉素基因完整,培養(yǎng)基中若加入適量的氨芐青霉素,含普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的受體菌都能存活,而沒有導(dǎo)入質(zhì)粒的細菌會死亡而淘汰;若受體菌成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒,并且目的基因正常表達,則可以產(chǎn)生所需的藥用
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