高考生物一輪復(fù)習(xí)方案 1-3 生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 新人教版選修1

第3講生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用(1)從生物材料中提取某些特定的成分(2)植物的組織培養(yǎng)(3)蛋白質(zhì)的提取和分離(4)PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用(5)DNA的粗提取與鑒定知識(shí)點(diǎn)一植物的組織培養(yǎng)技術(shù)1．菊花的組織培養(yǎng)(1)理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的①________(2)基本過(guò)程：外植體eq\o(→,\s\up7(②))愈傷組織eq\o(→,\s\up7(③))幼苗→移栽(3)影響因素eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(材料：④、⑤、保存時(shí)間長(zhǎng)短等,營(yíng)養(yǎng)\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(大量元素,⑥)),有機(jī)營(yíng)養(yǎng)：⑦、⑧、⑨、肌醇以及蔗糖等)),激素：\o(○,\s\up1(10))和?,pH：?左右,溫度：18～22℃,光照：每日光照12h))(4)實(shí)驗(yàn)操作步驟：制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→?________→培養(yǎng)→?________→栽培比一比：MS培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基有何主要不同？2．月季的花藥培養(yǎng)(1)理論基礎(chǔ)：花粉具有?________(2)花粉發(fā)育過(guò)程：?________、?________、?_________等階段(3)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：(4)操作關(guān)鍵eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(選材\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(1要選擇\o(○,\s\up1(22))、\o(○,\s\up1(23))的花蕾,2花粉最好處于\o(○,\s\up1(24))，花藥培養(yǎng)的成功率最高,3確定花粉的發(fā)育時(shí)期最常用的方法是\o(○,\s\up1(25))和\o(○,\s\up1(26))，,可以將細(xì)胞核分別染成\o(○,\s\up1(27))色和\o(○,\s\up1(28))色)),接種\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(1剝離花藥盡量不損傷花藥，否則接種后容易\o(○,\s\up1(29)),2要\o(○,\s\up1(30))，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于,\o(○,\s\up1(31))或\o(○,\s\up1(32))的形成)),培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)一段時(shí)間后開裂，\o(○,\s\up1(33))或釋放出胚狀體。,要將前者及時(shí)轉(zhuǎn)移到\o(○,\s\up1(34))，,如釋放出胚狀體，要盡快在花藥開裂后，將\o(○,\s\up1(35))，,分別移植到新的培養(yǎng)基上))看一看：植物組織培養(yǎng)與花藥培養(yǎng)技術(shù)有何相同與不同？知識(shí)點(diǎn)二蛋白質(zhì)的提取和分離、PCR技術(shù)1．血紅蛋白的提取和分離(1)凝膠色譜法：也稱分配色譜法，是根據(jù)eq\o(○,\s\up1(36))______________分離蛋白質(zhì)的方法。相對(duì)分子質(zhì)量較小的移動(dòng)速度較慢，而相對(duì)分子質(zhì)量較大的無(wú)法eq\o(○,\s\up1(37))__________，移動(dòng)速度較快(2)緩沖溶液：能夠抵制外界的eq\o(○,\s\up1(38))________對(duì)溶液pH的影響，維持pHeq\o(○,\s\up1(39))________(3)電泳：帶電粒子在eq\o(○,\s\up1(40))________的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程(4)樣品處理：紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析eq\o(○,\s\up1(41))________：凝膠色譜柱的制作→eq\o(○,\s\up1(42))________→樣品的加入和洗脫→SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳思一思：用豬的血液與雞的血液提取血紅蛋白哪個(gè)效果更好？2．多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段(1)PCR原理：在一定的緩沖溶液中提供eq\o(○,\s\up1(43))________，分別與兩條模板鏈結(jié)合的兩種引物，eq\o(○,\s\up1(44))__________________，同時(shí)控制溫度使DNA復(fù)制在eq\o(○,\s\up1(45))__________反復(fù)進(jìn)行(2)PCR的反應(yīng)過(guò)程：變性→eq\o(○,\s\up1(46))________→延伸知識(shí)點(diǎn)三植物有效成分的提取1．植物芳香油的提取(1)植物芳香油的提取方法：蒸餾、eq\o(○,\s\up1(47))________和eq\o(○,\s\up1(48))________等(2)水蒸氣蒸餾法原理是：利用eq\o(○,\s\up1(49))________將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會(huì)重新分出eq\o(○,\s\up1(50))________________。根據(jù)蒸餾過(guò)程中原料放置的位置，可以將水蒸氣蒸餾法劃分為eq\o(○,\s\up1(51))__________________、eq\o(○,\s\up1(52))________和eq\o(○,\s\up1(53))________(3)萃取法：將粉碎、干燥的植物原料用eq\o(○,\s\up1(54))________浸泡，使芳香油溶解在eq\o(○,\s\up1(55))________中的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后，只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，就可以獲得純凈的植物芳香油了eq\a\vs4\al(4提取玫瑰精油,的實(shí)驗(yàn)流程)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(,))(5)提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn)流程eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(石灰水浸泡→\o(○,\s\up1(57))→壓榨過(guò)濾,,橘皮油←再次過(guò)濾←\o(○,\s\up1(58))))2．胡蘿卜素的提取eq\a\vs4\al(1提取胡蘿卜,素的方法)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(從植物中提取,從大面積養(yǎng)殖的\o(○,\s\up1(59))中獲得,利用\o(○,\s\up1(60))的發(fā)酵生產(chǎn)))eq\a\vs4\al(2提取胡蘿卜素,的實(shí)驗(yàn)流程)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(胡蘿卜→粉碎→\o(○,\s\up1(61))→\o(○,\s\up1(62)),,胡蘿卜素←\o(○,\s\up1(63))←過(guò)濾))議一議：水中蒸餾、水上蒸餾、水氣蒸餾的區(qū)別有哪些？菊花莖與月季花藥組織培養(yǎng)的比較菊花莖的組織培養(yǎng)月季花藥組織培養(yǎng)理論依據(jù)植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性材料選取未開花植株莖上部新萌生的側(cè)枝完全未開放的花蕾光照狀況每日用日光燈照射12h開始不需要光照，幼小植株形成后需要光照操作流程制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培選材→材料消毒→接種和培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育影響因素選材、營(yíng)養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等基本過(guò)程脫分化、再分化1．引物是指能夠與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的一小段單鏈DNA或RNA。2．DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的DNA序列，使這段固定長(zhǎng)度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。3．影響萃取的因素(1)主要因素：萃取劑的性質(zhì)和使用量。(2)次要因素：原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間等條件。4．萃取過(guò)程注意事項(xiàng)(1)由于有機(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸，因此萃取過(guò)程中應(yīng)避免使用明火加熱，采用水浴加熱。(2)為防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)，還要在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置。胡蘿卜素萃取裝置水蒸氣蒸餾裝置自我校對(duì)：①全能性②脫分化③再分化④種類⑤年齡⑥微量元素⑦維生素⑧甘氨酸⑨煙酸eq\o(○,\s\up1(10))生長(zhǎng)素?細(xì)胞分裂素?5.8?接種?移栽?全能性?四分體時(shí)期?單核期?雙核期?脫分化?胚狀體eq\o(○,\s\up1(21))愈傷組織eq\o(○,\s\up1(22))初花期eq\o(○,\s\up1(23))完全未開放eq\o(○,\s\up1(24))單核期(細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期)eq\o(○,\s\up1(25))醋酸洋紅法eq\o(○,\s\up1(26))焙花青—鉻礬法eq\o(○,\s\up1(27))紅eq\o(○,\s\up1(28))藍(lán)黑eq\o(○,\s\up1(29))從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織eq\o(○,\s\up1(30))徹底去除花絲eq\o(○,\s\up1(31))愈傷組織eq\o(○,\s\up1(32))胚狀體eq\o(○,\s\up1(33))長(zhǎng)出愈傷組織eq\o(○,\s\up1(34))分化培養(yǎng)基上eq\o(○,\s\up1(35))幼小植株分開eq\o(○,\s\up1(36))相對(duì)分子質(zhì)量的大小eq\o(○,\s\up1(37))進(jìn)入凝膠內(nèi)部eq\o(○,\s\up1(38))酸和堿eq\o(○,\s\up1(39))基本不變eq\o(○,\s\up1(40))電場(chǎng)eq\o(○,\s\up1(41))凝膠色譜操作eq\o(○,\s\up1(42))凝膠色譜柱的裝填eq\o(○,\s\up1(43))DNA模板e(cuò)q\o(○,\s\up1(44))四種脫氧核苷酸、耐熱的DNA聚合酶eq\o(○,\s\up1(45))體外eq\o(○,\s\up1(46))復(fù)性eq\o(○,\s\up1(47))壓榨eq\o(○,\s\up1(48))萃取eq\o(○,\s\up1(49))水蒸氣eq\o(○,\s\up1(50))油層和水層eq\o(○,\s\up1(51))水中蒸餾eq\o(○,\s\up1(52))水上蒸餾eq\o(○,\s\up1(53))水氣蒸餾eq\o(○,\s\up1(54))有機(jī)溶劑eq\o(○,\s\up1(55))有機(jī)溶劑eq\o(○,\s\up1(56))水蒸氣蒸餾eq\o(○,\s\up1(57))漂洗eq\o(○,\s\up1(58))靜置eq\o(○,\s\up1(59))巖藻e(cuò)q\o(○,\s\up1(60))微生物eq\o(○,\s\up1(61))干燥eq\o(○,\s\up1(62))萃取eq\o(○,\s\up1(63))濃縮比一比：微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，包括植物生長(zhǎng)必需的大量元素和微量元素?？匆豢矗合嗤c(diǎn)：培養(yǎng)基配制方法、無(wú)菌技術(shù)及接種操作等基本相同。不同點(diǎn)：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需要先選擇時(shí)期適宜的花蕾，花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時(shí)更換培養(yǎng)基，花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。思一思：用豬的血液；因?yàn)樨i的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核和細(xì)胞器，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，血紅蛋白含量豐富，便于提取血紅蛋白。議一議：(1)這三種方法的基本原理相同，但原料放置位置不同。①水中蒸餾：原料放在蒸餾容器的水中，水要完全浸沒(méi)原料。②水上蒸餾：容器中水的上方有篩板，原料放在篩板上，水量以沸騰時(shí)不浸濕原料為宜。③水氣蒸餾：蒸餾容器下方有一排氣孔，連接外源水蒸氣，上方有篩板，上面放原料。(2)各自特點(diǎn)：水中蒸餾設(shè)備簡(jiǎn)單、成本低、易操作，而水上蒸餾和水氣蒸餾時(shí)間短，出油率高。植物的組織培養(yǎng)技術(shù)高考地位：5年12考全國(guó)課標(biāo)卷、山東卷、江蘇卷，江蘇卷，全國(guó)課標(biāo)卷、安徽卷、浙江卷……一、植物組織培養(yǎng)的過(guò)程1．菊花組織培養(yǎng)過(guò)程菊花組織脫分化,形成愈傷組織再分化,長(zhǎng)出叢芽→生根移栽,菊花植株。2．月季的花藥培養(yǎng)二、影響植物組織培養(yǎng)的因素及成功的關(guān)鍵1．影響因素(1)內(nèi)部因素：材料的選取。(2)外部因素：營(yíng)養(yǎng)成分的種類及配比；植物激素的用量及使用順序；pH、溫度、光照等。2．獲得成功的關(guān)鍵(1)植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗逆性差，對(duì)培養(yǎng)條件要求較高。(2)培養(yǎng)材料一旦被微生物污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。原因是微生物增殖快，生長(zhǎng)迅速，消耗養(yǎng)分多，并產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料。(3)無(wú)菌技術(shù)主要包括對(duì)操作空間、實(shí)驗(yàn)用具、實(shí)驗(yàn)材料以及操作者的消毒滅菌。提醒一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物被污染，特別是真菌性污染，一定不要打開培養(yǎng)瓶。應(yīng)先將被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，然后再打開培養(yǎng)瓶進(jìn)行清理。三、植物激素在組織培養(yǎng)過(guò)程中的重要作用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，其作用及特點(diǎn)為：1．在生長(zhǎng)素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。2．使用順序不同，結(jié)果不同(具體如下表)使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂又分化同時(shí)使用分化頻率提高3.用量比例不同，結(jié)果也不同eq\a\vs4\al(\f(生長(zhǎng)素用量,細(xì)胞分裂素用量),的比值)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(①高：利于根的分化、抑制芽的形成,②低：利于芽的分化、抑制根的形成,③適中：促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)))(1)在剝離花藥時(shí)，要盡量不損傷花藥，否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織，同時(shí)還要徹底去除花絲，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。(2)花藥開裂長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體時(shí)，應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上?！铩锉静糠謨?nèi)容與必修內(nèi)容細(xì)胞分化有密切關(guān)系，是高考命題的熱點(diǎn)，命題多考查植物組織培養(yǎng)基成分與作用、微型繁殖技術(shù)、脫毒苗培養(yǎng)、名貴中藥材工廠化生產(chǎn)等具體實(shí)例，復(fù)習(xí)中應(yīng)多加關(guān)注?！镜淅?】(·課標(biāo)，39)為了探究6BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6BA和IAA，配制成四種培養(yǎng)基(見下表)，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表。培養(yǎng)基編號(hào)濃度/(mg·L－1)m/%n/個(gè)6BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列問(wèn)題。(1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽的元素可分為__________和__________兩類。上述培養(yǎng)基中，6BA屬于________類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。(2)在該實(shí)驗(yàn)中，自變量是________，因變量是________，自變量的取值范圍是________。(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是________號(hào)培養(yǎng)基。(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入________(填“6BA”或“IAA”)。解析本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。(1)植物組織培養(yǎng)常用MS培養(yǎng)基，其中，無(wú)機(jī)鹽的元素可分為大量元素和微量元素兩類，前者如N、P、K、Ca、Mg、S等，后者如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo等。MS培養(yǎng)基中還常需要添加能誘導(dǎo)細(xì)胞分裂、脫分化、再分化的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，常用的生長(zhǎng)素有2,4D、IAA、NAA等，常用的細(xì)胞分裂素有6BA、KT等。(2)該實(shí)驗(yàn)中，各組6BA濃度均為0.5mg/L，IAA的濃度不相同，故自變量為IAA濃度，IAA濃度范圍為0～0.5mg/L。據(jù)表可知，該實(shí)驗(yàn)因變量是再生叢芽外植體的比率(m)以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)。(3)由表格中的數(shù)據(jù)可知，1號(hào)培養(yǎng)基誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少。(4)生長(zhǎng)素常用于誘導(dǎo)細(xì)胞分裂和根的分化，6BA一般用于誘導(dǎo)植物的愈傷組織分化出叢芽，故誘導(dǎo)菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入6BA。答案(1)大量元素微量元素細(xì)胞分裂素(3)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)0～0.5mg/L(3)1(4)6BA多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段eq\x(\a\vs4\al(高考地位：5年7考)\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(\a\vs4\al(江蘇卷，江蘇卷、安徽卷，廣東卷……))))1．細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與體外DNA擴(kuò)增(PCR技術(shù))的比較細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR不同點(diǎn)解旋解旋酶，邊解旋邊復(fù)制80～100℃高溫解旋，雙鏈完全分開酶解旋酶，DNA聚合酶，DNA連接酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA或RNA能量ATP不加溫度體內(nèi)溫和條件高溫子鏈合成一條鏈連續(xù)(先導(dǎo)鏈)，另一條鏈不連續(xù)，先合成片段，再由DNA連接酶連接(滯后鏈)兩條子鏈均連續(xù)合成相同點(diǎn)①提供DNA模板②四種脫氧核苷酸作原料③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端2.PCR反應(yīng)的過(guò)程及結(jié)果(1)PCR反應(yīng)過(guò)程①變性：當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，(如下圖)。②復(fù)性：系統(tǒng)溫度下降至50℃左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，(如下圖)。③延伸：當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸(A、T、G、C)在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，(如下圖)。(2)結(jié)果①PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性、延伸三步。②兩引物之間的固定長(zhǎng)度的DNA序列呈指數(shù)擴(kuò)增。提醒DNA復(fù)制需要引物的原因：DNA聚合酶不能從5′端開始合成DNA，而只能從3′端延伸DNA鏈。本知識(shí)點(diǎn)高考未曾單獨(dú)考，往往與基因工程等內(nèi)容綜合起來(lái)考查，復(fù)習(xí)中不容忽視?！镜淅?】(·濰坊模考)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模ǔ_______的末端稱為5′端，當(dāng)引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后，DNA聚合酶就能從引物的________開始延伸DNA鏈。(2)PCR利用了DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問(wèn)題，但又導(dǎo)致了DNA聚合酶失活的新問(wèn)題。到20世紀(jì)80年代，科學(xué)家從一種Taq細(xì)菌中分離到________，它的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用解決了上述問(wèn)題。要將Taq細(xì)菌從其他普通的微生物中分離出來(lái)，所用的培養(yǎng)基叫________。(3)PCR的每次循環(huán)可以分為________三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請(qǐng)計(jì)算在5次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有________個(gè)這樣的DNA片段。(4)簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的主要應(yīng)用：________________________(要求至少答兩項(xiàng))。答案(1)磷酸基團(tuán)3′端(2)耐高溫的TaqDNA聚合酶選擇培養(yǎng)基(3)變性、復(fù)性和延伸32(4)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測(cè)定等蛋白質(zhì)的提取和分離(以血紅蛋白的提取和分離為例)eq\x(\a\vs4\al(高考地位：5年1考)\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(\a\vs4\al(廣東理綜))))1．常用的蛋白質(zhì)分離方法(1)凝膠色譜法①識(shí)圖凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理②分析比較列表如下：蛋白質(zhì)比較相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小凝膠內(nèi)部排阻在凝膠顆粒外面，迅速通過(guò)進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，被滯留運(yùn)動(dòng)方式垂直向下垂直向下和無(wú)規(guī)則擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)路程較短較長(zhǎng)洗脫次序先流出后流出(2)電泳法原理①在一定pH下，一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解離的基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電，在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。②由于分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速率，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。2．血紅蛋白的提取和分離3．結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(1)血紅蛋白的提取和分離時(shí)紅細(xì)胞分層不明顯，可能是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的原因。此外，離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。(2)凝膠的裝填標(biāo)準(zhǔn)是緊密、均勻。如果色帶均勻、狹窄、平整，說(shuō)明凝膠色譜柱的性能良好。如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時(shí)要重新裝柱。(3)G75：“G”代表凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5g。(4)裝填完后，立即用洗脫液洗脫的目的是使凝膠裝填緊密。(5)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固；低速、短時(shí)離心防止白細(xì)胞沉淀；緩慢攪拌防止紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。(6)檢測(cè)血紅蛋白的分離是否成功的方法：如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說(shuō)明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。本考點(diǎn)高考命題較少涉及，為冷考點(diǎn)，復(fù)習(xí)時(shí)還應(yīng)熟悉血紅蛋白提取和分離的程序和原理?！镜淅?】血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中O2和部分CO2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問(wèn)題。(1)將實(shí)驗(yàn)流程圖補(bǔ)充完整：A為________，B為________。凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)________分離蛋白質(zhì)的有效方法。(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除________，洗滌次數(shù)過(guò)少，無(wú)法除去________；離心速率過(guò)快和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使________一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是________。釋放血紅蛋白的過(guò)程中起作用的是________________________________________________________________________。(3)在洗脫過(guò)程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是________________________________________________________________________。如果紅色區(qū)帶________________________________________________________________________，說(shuō)明色譜柱制作成功。答案(1)血紅蛋白的釋放樣品的加入和洗脫相對(duì)分子質(zhì)量的大小(2)雜蛋白(血漿蛋白)血漿蛋白白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞離心后的上清液中沒(méi)有黃色蒸餾水和甲苯(3)準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)的一致均勻一致的移動(dòng)植物有效成分的提取eq\x(\a\vs4\al(高考地位：5年4考)\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(\a\vs4\al(海南卷，全國(guó)課標(biāo)卷……))))1．幾種物質(zhì)的提取方法、原理及步驟提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟血紅蛋白凝膠色譜法、電泳法①根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大??；②各種分子帶電性質(zhì)差異以及分子本身大小、形狀的不同eq\a\vs4\al(①樣品處理,②粗提取,③純化,④純度鑒定)玫瑰精油水蒸氣蒸餾法利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)eq\a\vs4\al(①水蒸氣蒸餾,②分離油層,③除水、過(guò)濾)橘皮精油壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油eq\a\vs4\al(①石灰水浸泡、漂洗；,②壓榨、過(guò)濾、靜置；,③再次過(guò)濾)胡蘿卜素萃取法使提取物溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)后得到提取物eq\a\vs4\al(①粉碎、干燥,②萃取、過(guò)濾,③濃縮)不同物質(zhì)的提取是根據(jù)其理化性質(zhì)的不同來(lái)進(jìn)行的，因此在提取物質(zhì)時(shí)，應(yīng)先確定該物質(zhì)的理化性質(zhì)，然后再選擇適宜的提取方法進(jìn)行提取。2．實(shí)驗(yàn)流程設(shè)計(jì)(1)玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)流程鮮玫瑰花＋清水(1∶4)→水蒸氣蒸餾→油水混合物eq\o(→,\s\up7(加入NaCl))分離油層eq\o(→,\s\up7(加入無(wú)水Na2SO4))除水eq\o(→,\s\up7(過(guò)濾))玫瑰油。(2)橘皮精油的提取實(shí)驗(yàn)流程石灰水浸泡橘皮→漂洗→壓榨→過(guò)濾→靜置→再次過(guò)濾→橘皮油。(3)胡蘿卜素的提取實(shí)驗(yàn)流程胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過(guò)濾→濃縮→胡蘿卜素。水中蒸餾對(duì)于柑橘和檸檬等原料不適用。因?yàn)樗姓麴s會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解。3．用層析法鑒定時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題(1)選擇干凈的濾紙，為防止操作時(shí)濾紙的污染，應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙，可以戴手套進(jìn)行操作。(2)點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)注意點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大(直徑應(yīng)小于0.5cm)，如果用吹風(fēng)機(jī)吹干，溫度不宜過(guò)高，否則斑點(diǎn)會(huì)變黃。(3)將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀，卷紙時(shí)注意濾紙兩邊不能互相接觸，以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，使溶劑前沿不齊，影響結(jié)果。eq\a\vs4\al(本考點(diǎn)高考命題頻率較低，且有些省份不作要求，復(fù)習(xí)時(shí)根據(jù)本省具體情況進(jìn)行取舍。)【典例4】(·海南)許多植物含有天然香料，如薄荷葉中含有薄荷油。現(xiàn)用薄荷葉提取薄荷油。回答下列問(wèn)題。(1)薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì)。提取薄荷油時(shí)應(yīng)選用________(鮮、干)薄荷葉作原料，其原因是________________________________________________________________________。(2)用萃取法提取薄荷油時(shí)，采用的溶劑是________，原理是________________。(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時(shí)，在油水混合物中加入氯化鈉的作用是________。常用于分離油層和水層的器皿是________。分離出的油層中加入無(wú)水硫酸鈉的作用是________，除去固體硫酸鈉的常用方法是________。解析本題考查植物芳香油的提取，同時(shí)考查識(shí)記和理解能力及解決實(shí)際問(wèn)題的能力。(2)用萃取法提取薄荷油時(shí)，采用的溶劑是酒精，利用的原理是芳香油易溶于有機(jī)溶劑。(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時(shí)，在油水混合物中加入氯化鈉，可以使薄荷油與水出現(xiàn)明顯的分層，然后用分液漏斗將這兩層分開。在分離出的油層中加入無(wú)水硫酸鈉，可以將其中的水分去除，放置過(guò)夜，再通過(guò)過(guò)濾除去固體硫酸鈉，就可以得到薄荷油。答案(1)鮮薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì)，鮮薄荷葉才含薄荷油(2)酒精薄荷油易溶于有機(jī)溶劑酒精中(3)使油水混合物分層分液漏斗除水過(guò)濾法植物組織培養(yǎng)技術(shù)1.(·山東理綜，34)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如下圖。(1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的________和________過(guò)程。(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是______。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)時(shí)，有利于芽的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí)，應(yīng)采取的滅菌方法是________。(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是________。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí)，常用的酶是______和纖維素酶。(4)提取辣椒素過(guò)程中，萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置，其目的是________。解析此題借助辣椒素的提取與分離考查植物組織培養(yǎng)知識(shí)。(1)由外植體培養(yǎng)成脫毒苗的過(guò)程為植物組織培養(yǎng)過(guò)程，需經(jīng)過(guò)脫分化、再分化兩個(gè)階段。(2)植物組織的培養(yǎng)常用固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基常用的凝固劑是瓊脂。植物組織培養(yǎng)時(shí)，常用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化，當(dāng)細(xì)胞分裂素較多時(shí)，利于芽的分化；當(dāng)生長(zhǎng)素較多時(shí)，利于根的分化。培養(yǎng)基的徹底滅菌常用高壓蒸汽滅菌法。(3)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最強(qiáng)，操作者和外植體的消毒常用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精。將愈傷組織分離成單個(gè)細(xì)胞常用纖維素酶和果膠酶。(4)辣椒素的提取常用有機(jī)溶劑，為防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)，提取辣椒素過(guò)程中，在萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置。答案(1)脫分化(或去分化)再分化(2)瓊脂低高壓蒸汽滅菌(3)70%果膠酶(4)防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)2．(·江蘇單科，31)某研究組對(duì)秈稻開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究，請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)2,4D常用于秈稻愈傷組織的誘導(dǎo)，對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化，在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需________(填“升高”、“保持”或“降低”)2,4D的濃度。(2)當(dāng)秈稻愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí)，出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，但不能繼續(xù)出芽，通常在培養(yǎng)基中添加________________________，以促進(jìn)幼苗形成。(3)研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是________(填下列序號(hào))。①綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散②剛?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離③胚狀體細(xì)胞中有葉綠體④分化的愈傷組織內(nèi)各細(xì)胞的形態(tài)大小一致(4)經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的秈稻葉綠素突變體，其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對(duì)照，葉綠素總量不變。某同學(xué)用________(填序號(hào)：①綠色②紅色③藍(lán)紫色④黃色)光照射突變體和對(duì)照葉片，檢測(cè)到兩者光合放氧速率差異不大。若取等量色素提取液進(jìn)行層析，會(huì)發(fā)現(xiàn)突變體第________條色素帶(自上而下)窄于對(duì)照組。(5)胚乳(3n)由一個(gè)精子與兩個(gè)極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導(dǎo)愈傷組織，培育三倍體，需適時(shí)剔除胚，以免胚的存在影響愈傷組織細(xì)胞的________，還可避免再生苗中混有________。解析本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。(1)因2,4D能抑制形態(tài)的發(fā)生，所以在促進(jìn)愈傷組織再分化時(shí)，分化培養(yǎng)基中應(yīng)降低2,4D的濃度。(2)添加適量的生長(zhǎng)素利于愈傷組織再分化出芽，促進(jìn)幼苗的形成。(3)有分生能力的綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列緊密；剛?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細(xì)胞還沒(méi)有再生細(xì)胞壁，不能發(fā)生質(zhì)壁分離；愈傷組織由無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞構(gòu)成，其內(nèi)的細(xì)胞形態(tài)大小不一致；因胚狀體細(xì)胞中有具有分生能力的綠色芽點(diǎn)，用顯微鏡可觀察到胚狀體細(xì)胞中有葉綠體。(4)因秈稻葉綠素突變體中葉綠素a與葉綠素b的比值增大而葉綠素總量不變，所以突變體中葉綠素a增加，葉綠素b減少，則自上而下第4條色素帶變窄；因葉綠素a、b主要吸收紅光和藍(lán)紫光，對(duì)綠光和黃光吸收較少，所以用綠光和黃光照射突變體和對(duì)照葉片，檢測(cè)到兩者放氧速率差別不大。(5)胚由二倍體細(xì)胞組成，在培育三倍體時(shí)，需要剔除種子中的胚，以免胚的存在影響愈傷組織細(xì)胞的增殖與分化，還可避免出現(xiàn)二倍體幼苗。答案(1)降低(2)適量的生長(zhǎng)素(3)③(4)①④4(5)增殖與分化二倍體幼苗特定成分的提取與分離3.(·江蘇單科，18)下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是()。A．洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B．將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)C．常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取D．用玻棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致DNA獲得量減少解析本題考查DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)。洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但對(duì)DNA在NaCl溶液中的溶解度無(wú)影響，故A錯(cuò)誤；DNA絲狀物需先溶解在適宜濃度的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，混合均勻后沸水浴，待冷卻后溶液變藍(lán)，故B錯(cuò)誤；常溫下菜花勻漿中有些水解酶可能會(huì)使DNA水解而影響DNA的提取，故C正確；用玻棒朝一個(gè)方向緩慢攪拌可減輕對(duì)DNA分子的破壞，有利于DNA分子的提取，故D錯(cuò)誤。答案C4．(·廣東理綜，5)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是()。A．洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂B．豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少C．血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過(guò)程的監(jiān)測(cè)D．在凝膠色譜法分離過(guò)程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動(dòng)慢解析豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少，是提純血紅蛋白的理想材料。提純血紅蛋白分四步：紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析，其中洗滌紅細(xì)胞時(shí)，要用生理鹽水反復(fù)洗滌，既要將紅細(xì)胞洗滌干凈，又要不破壞紅細(xì)胞，然后再用蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白。分離提純血紅蛋白時(shí)用凝膠色譜法，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)分離蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)移動(dòng)速度較快；血紅蛋白的顏色可用于觀察紅色區(qū)帶的移動(dòng)情況，并據(jù)此判斷分離效果。故D不正確。答案D5．(·全國(guó)新課標(biāo)，37)下列是與芳香油提取相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答。(1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取，其理由是玫瑰精油具有________________的性質(zhì)。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液________(是、不是)純的玫瑰精油，原因是________________________________________________________________________。(2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時(shí)，蒸餾過(guò)程中，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和________。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢(shì)是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，則精油提取量會(huì)________________________________________________________________________，原因是________________________________________________________________________。(4)密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時(shí)最好存放在溫度________的地方，目的是________________________________________________________________________。(5)某植物花中精油的相對(duì)含量隨花的不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的變化趨勢(shì)如圖所示。提取精油時(shí)采摘花的最合適時(shí)間為________d左右。(6)從薄荷葉中提取薄荷油時(shí)________(能、不能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是________________________________________________________________________。解析(1)由玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定(耐一定程度高溫)、易揮發(fā)(水蒸氣可以將精油攜帶出來(lái))、難溶于水(冷卻后油水會(huì)重新分層)，所以玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取。(2)當(dāng)水和原料量一定時(shí)，影響精油提取量的主要因素有蒸餾時(shí)間和蒸餾溫度，在一定的時(shí)間內(nèi)隨著蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)提取量不斷增加，一定時(shí)間后不再增加。如果蒸餾溫度過(guò)高，提取量也會(huì)減少。(3)如果蒸餾過(guò)程中不進(jìn)行冷卻，部分精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)，則精油提取量會(huì)下降。(4)玫瑰精油具有揮發(fā)性，瓶裝精油時(shí)若密封不嚴(yán)，需要低溫保存，以減少揮發(fā)。(5)分析圖示可知，在該植物花的蓓蕾期與開放期之間(即a時(shí)期)精油含量最高。(6)由于薄荷油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似，易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，故可以用水蒸氣蒸餾法提取。答案(1)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定不是玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，所得到的是油水混合物(2)蒸餾溫度在一定的時(shí)間內(nèi)提取量隨蒸餾時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，一定時(shí)間后提取量不再增加(3)下降部分精油會(huì)隨水蒸氣揮發(fā)而流失(4)較低減少揮發(fā)(或防止揮發(fā))(5)a(6)能薄荷油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似(時(shí)間：45分鐘)A級(jí)基礎(chǔ)演練1．(·南京名校階段考試)提取胡蘿卜素和提取玫瑰油時(shí)都需要加熱，但用萃取法提取胡蘿卜素時(shí)，采用的是水浴加熱法，而用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰油時(shí)是直接加熱，其原因是()。A．前者需保持恒溫，后者不需要恒溫B．前者容易蒸發(fā)，后者不容易蒸發(fā)C．胡蘿卜素不耐高溫，玫瑰油耐高溫D．前者燒瓶里含有機(jī)溶劑，易燃易爆，后者是水解析用萃取法提取胡蘿卜素時(shí)，由于在燒瓶中加入的萃取劑含石油醚等有機(jī)溶劑，而有機(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱，容易引起燃燒、爆炸，因此用水浴加熱。用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰油時(shí)，燒瓶?jī)?nèi)加入的是水，可以直接加熱。答案D2．(·浙江四校調(diào)研)在菊花的組織培養(yǎng)操作完成了3～4d后，觀察同一溫室中的外植體，發(fā)現(xiàn)有的瓶?jī)?nèi)外植體正常生長(zhǎng)，有的瓶?jī)?nèi)外植體死亡，你認(rèn)為外植體死亡的原因不可能是()。A．培養(yǎng)條件，比如pH、溫度等不適宜B．接種時(shí)外植體未消毒C．接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體D．將外植體倒插入培養(yǎng)基中解析一般來(lái)講，進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)條件應(yīng)是相同的。答案A3．紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液來(lái)提取和分離血紅蛋白。下列對(duì)血紅蛋白提取和分離的敘述，錯(cuò)誤的是()。A．血紅蛋白的提取和分離一般按照“樣品處理→粗提取→純化→純度鑒定”處理B．純化過(guò)程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液C．粗分離時(shí)透析的目的是去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)D．可經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定解析應(yīng)用蒸餾水充分溶脹凝膠來(lái)配制凝膠懸浮液。答案B4．(·遼寧沈陽(yáng)、大連第二次聯(lián)考，39)請(qǐng)回答下列與菊花莖段組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作有關(guān)的問(wèn)題。(1)由于菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易，故在配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，________(必需添加、不必添加)植物激素。培養(yǎng)基配制完畢后，還需進(jìn)行________滅菌。(2)應(yīng)選用生理狀況好的菊花嫩枝莖段作為________，這是因?yàn)槠涓菀妆徽T導(dǎo)________________________________________________________________________。(3)菊花莖段在接種前要用適當(dāng)濃度的________溶液進(jìn)行表面消毒。(4)接種前，工作臺(tái)要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭一遍。之后，所有的接種操作都必須在________旁進(jìn)行，并且每次使用器械后，都需要用________滅菌。(5)接種后的錐形瓶最好放在________中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間應(yīng)注意事項(xiàng)主要有：定期________、控制好________，并每日給予適當(dāng)時(shí)間光照。解析(1)菊花莖段自身能合成植物激素，因此培養(yǎng)基中不必添加植物激素，培養(yǎng)基配制完畢需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。(2)外植體的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗因此應(yīng)選擇容易被誘導(dǎo)脫分化和再分化的菊花嫩枝作為外植體。(3)為防止微生物污染，菊花莖段在接種前要用適當(dāng)濃度的酒精和氯化汞溶液進(jìn)行表面消毒。(4)為避免接種前、接種中污染外植體以及接種后污染環(huán)境，因此接種前，工作臺(tái)要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭一遍，接種過(guò)程中所有的接種操作都必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行，并且每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌。(5)外植體在培養(yǎng)過(guò)程中要保持無(wú)菌環(huán)境，控制好溫度，并給予適當(dāng)光照。答案(1)不必添加高壓蒸汽(2)外植體脫分化和再分化(3)酒精和氯化汞(4)酒精燈火焰灼燒(5)無(wú)菌箱消毒培養(yǎng)溫度B級(jí)智能提升5．如圖為提取胡蘿卜素的裝置圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)[⑤]________的作用是________________________________________________________________________。(2)[④]________內(nèi)加入的萃取液一般是________，原料在加入前，一般要進(jìn)行________、________處理。(3)該萃取過(guò)程采用的是水浴加熱，其目的是________________________________________________________________________。(4)為了取得最佳萃取效果，萃取的時(shí)間應(yīng)該________(“長(zhǎng)”或“短”)。解析圖示裝置為萃取裝置，其中⑤為冷凝管，其作用是降溫，以防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)，④是燒瓶，其內(nèi)裝有萃取劑，胡蘿卜素的適宜萃取劑是石油醚，為防止有機(jī)溶劑明火加熱時(shí)引起燃燒、爆炸，萃取時(shí)有必要采用水浴加熱，而不用明火加熱。答案(1)冷凝管降溫，防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)(2)燒瓶石油醚粉碎干燥(3)避免有機(jī)溶劑明火加熱引起燃燒、爆炸(4)長(zhǎng)6．在進(jìn)行DNA親子鑒定時(shí)，需大量的DNA。PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))可以使樣品DNA擴(kuò)增，獲得大量DNA克隆分子。該技術(shù)的原理是利用DNA的半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖，圖中黑色長(zhǎng)方形是引物)。在很短的時(shí)間內(nèi)將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。(1)圖中的變性、延伸分別是指________________________________________________________________________、________________________________________________________________________。(2)假設(shè)PCR反應(yīng)中的DNA模板為P，第一輪循環(huán)的產(chǎn)物2個(gè)子代DNA為N1，第二輪的產(chǎn)物4個(gè)子代DNA為N2，N1、N2中分別含有模板DNA單鏈的DNA分別有________個(gè)、________個(gè)。若繼續(xù)循環(huán)，該DNA片段共經(jīng)過(guò)30次循環(huán)后能形成________個(gè)