北京市海淀區(qū)2017-2018學(xué)年度高三上學(xué)期期中生物試題

海淀區(qū)高三年級第一學(xué)期期中練習(xí)生物選擇題1.下列細胞結(jié)構(gòu)與其結(jié)構(gòu)中包含的化學(xué)成分，對應(yīng)有誤的是（）A.核糖體——蛋白質(zhì)和RNA B.高爾基體——磷脂和糖類C.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)——磷脂和蛋白質(zhì) D.細胞壁——纖維素和淀粉【答案】D【解析】【分析】1、核糖體由蛋白質(zhì)和rRNA構(gòu)成；是蛋白質(zhì)的合成場所；2、高爾基體由多個扁平囊和囊泡構(gòu)成；對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進行加工、分類、包裝；3、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是由膜連接成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，是細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成、加工以及脂質(zhì)合成車間。【詳解】A、核糖體的主要成分是蛋白質(zhì)和rRNA，A正確；B、高爾基體是具有單層膜的細胞器，與植物細胞壁的形成有關(guān)，而細胞壁的主要成分中纖維素屬于糖類，因此高爾基體中含有蛋白質(zhì)和糖類，B正確；C、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)具有單層膜，主要成分是蛋白質(zhì)和磷脂，C正確；D、細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，D錯誤。故選D。2.藍細菌（藍藻）與酵母菌的相同之處是（）A.都有細胞膜和擬核 B.都能進行細胞呼吸C.都有線粒體和核糖體 D.都能進行光合作用【答案】B【解析】【分析】【詳解】A、酵母菌是真核生物，沒有擬核，A錯誤；

B、藍藻和酵母菌都能夠進行有氧呼吸，B正確；

C、藍藻是原核生物，細胞中沒有線粒體，C錯誤；

D、酵母菌不能進行光合作用，D錯誤。

故選B3.腺相關(guān)病毒（AAV）是一類結(jié)構(gòu)簡單的單鏈DNA病毒，能感染多種動物細胞，但不易引起免疫反應(yīng)。AAV的復(fù)制需要輔助病毒（通常為腺病毒），在缺乏輔助病毒時，AAV整合其基因組到人類第19號染色體的特異性位點，進入潛伏狀態(tài)。下列有關(guān)AAV的敘述，正確的是（）A.是細胞內(nèi)寄生的原核生物 B.遺傳信息傳遞不遵循中心法則C.可作為基因治療的理想載體 D.與雙鏈DNA病毒相比變種少【答案】C【解析】【詳解】腺相關(guān)病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)，不屬于原核生物，A錯誤；所有生物的遺傳信息傳遞都遵循中心法則，B錯誤；基因工程常見的運載體有質(zhì)粒、動植物病毒等，所以腺相關(guān)病毒可作為基因治療的理想載體，C正確；腺相關(guān)病毒（AAV）是一類結(jié)構(gòu)簡單的單鏈DNA病毒，與雙鏈DNA病毒相比更容易發(fā)生變異，D錯誤。4.利用光學(xué)顯微鏡不能觀察到的是（）A.蘇丹Ⅲ染色后花生子葉細胞中有橘黃色顆粒B.高滲溶液處理后的紫色洋蔥細胞發(fā)生質(zhì)壁分離C.溫水處理后的黑藻葉片中的葉綠體具有雙層膜D.龍膽紫染色后根尖分生區(qū)細胞中的染色體【答案】C【解析】【詳解】A、經(jīng)蘇丹Ⅲ染色后的花生子葉細胞中有橘黃色的脂肪顆粒，光學(xué)顯微鏡下可觀察到，A正確；B、高滲溶液處理后細胞失水，光學(xué)顯微鏡下可觀察到原生質(zhì)層與細胞壁逐漸分離，B正確；C、葉綠體的雙層膜結(jié)構(gòu)屬于亞顯微結(jié)構(gòu)，在光學(xué)顯微鏡下觀察不到，C錯誤；D、光學(xué)顯微鏡下可以觀察到被龍膽紫染成深色的染色體，D正確。答案選C。5.下列關(guān)于囊泡運輸?shù)臄⑹?，不正確的是（）A.囊泡膜由單層磷脂分子和蛋白質(zhì)構(gòu)成B.囊泡的融合過程依賴于膜的流動性C.囊泡運輸實現(xiàn)了細胞內(nèi)物質(zhì)的定向轉(zhuǎn)運D.囊泡在細胞內(nèi)的移動過程需要消耗能量【答案】A【解析】【分析】【詳解】A、囊泡膜由雙層磷脂分子和蛋白質(zhì)構(gòu)成，A錯誤；B、囊泡的融合過程依賴于膜的流動性，B正確；C、囊泡運輸實現(xiàn)了細胞內(nèi)物質(zhì)的定向轉(zhuǎn)運，C正確；D、囊泡在細胞內(nèi)的移動過程需要消耗ATP水解釋放的能量，D正確。故選A?！军c睛】6.下列能合成ATP的細胞結(jié)構(gòu)是（）①線粒體內(nèi)膜②線粒體基質(zhì)③葉綠體內(nèi)膜④類囊體膜⑤葉綠體基質(zhì)A.①②③ B.①③④ C.②④⑤ D.①②④【答案】D【解析】【詳解】線粒體內(nèi)膜是有氧呼吸第三階段場所，可以合成大量的ATP，①正確；線粒體基質(zhì)是有氧呼吸第二階段的場所，可以產(chǎn)生少量的ATP，②正確；葉綠體內(nèi)膜不能產(chǎn)生ATP，③錯誤；類囊體膜是光合作用光反應(yīng)的場所，可以產(chǎn)生大量的ATP，④正確；葉綠體基質(zhì)是光合作用暗反應(yīng)的場所，消耗ATP，⑤錯誤。綜上所述，可以產(chǎn)生ATP的是①②④，故選D。7.植物細胞不一定具有的生理過程是A.[H]的生成 B.染色體的復(fù)制 C.ATP與ADP轉(zhuǎn)換 D.氨基酸脫水縮合【答案】B【解析】【分析】本題旨在考查細胞內(nèi)的相關(guān)生理過程?！驹斀狻恐参锛毎麅?nèi)時刻進行的細胞呼吸一定有[H]的生成；染色體的復(fù)制發(fā)生在細胞分裂間期，植物細胞不一定都具有分裂能力；ATP與ADP轉(zhuǎn)換對植物細胞的正常生活來說，是一定時刻不停地發(fā)生并且處于動態(tài)平衡之中；植物細胞內(nèi)一定發(fā)生蛋白質(zhì)的合成過程，即氨基酸脫水縮合；綜上所述，應(yīng)選B?！军c睛】染色體的復(fù)制發(fā)生在細胞分裂間期，植物細胞不一定都具有分裂能力。8.下圖為植物光合作用同化物蔗糖在不同細胞間運輸、轉(zhuǎn)化過程的示意圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是A.蔗糖的水解有利于蔗糖順濃度梯度運輸B.單糖逆濃度梯度轉(zhuǎn)運至薄壁細胞C.ATP生成抑制劑會直接抑制圖中蔗糖的運輸D.蔗糖可通過單糖轉(zhuǎn)運載體轉(zhuǎn)運至薄壁細胞【答案】BCD【解析】【詳解】蔗糖分子通過胞間連絲進行運輸，水解后形成單糖，通過單糖轉(zhuǎn)運載體順濃度梯度運輸，速度加快，A項正確；圖示單糖通過單糖轉(zhuǎn)運載體順濃度梯度轉(zhuǎn)運至薄壁細胞，B項錯誤；圖中蔗糖運輸不消耗能量，單糖順濃度梯度運輸也不消耗能量，故ATP生成抑制劑不會直接抑制圖中蔗糖的運輸，C項錯誤；蔗糖屬于二糖，不能通過單糖轉(zhuǎn)運載體轉(zhuǎn)運至薄壁細胞，D項錯誤。【點睛】本題主要考查物質(zhì)運輸?shù)闹R，解題的關(guān)鍵是要結(jié)合圖示判斷物質(zhì)運輸?shù)姆较?，理解載體的特異性。9.細胞內(nèi)糖分解代謝過程如圖，下列敘述不正確的是（）A.酵母菌細胞能進行過程①和②或過程①和③B.人體所有細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)都能進行過程①C.ATP/ADP的比值增加會降低過程①的速率D.乳酸菌細胞內(nèi)，過程①和過程④均產(chǎn)生[H]【答案】D【解析】【詳解】A、分析題圖可知，①和②過程是有氧呼吸，①和③過程是產(chǎn)生酒精的無氧呼吸，酵母菌是兼性厭氧微生物，既可以進行有氧呼吸，也可以進行無氧呼吸，A正確；B、圖中①表示有氧呼吸和無氧呼吸的第一階段，即糖酵解過程，人體所有細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)都能進行，B正確；C、ATP/ADP的比值增加，說明細胞中ATP消耗少，則會降低過程①的速率，C正確；D、分析題圖可知，④是無氧呼吸的第二階段，不產(chǎn)生[H]，反而消耗第一階段產(chǎn)生的[H]，D錯誤。故選D。10.任何生命系統(tǒng)需要物質(zhì)和能量不斷地輸入，才能維持其結(jié)構(gòu)與功能。下面敘述不正確的是（）A.醋酸桿菌沒有線粒體，利用無氧呼吸獲得繁殖所需的能量B.劇烈運動時，骨骼肌細胞可利用無氧呼吸方式供給能量C.植物體光合速率大于呼吸速率時，積累生長所需的有機物D.生態(tài)系統(tǒng)的能量輸入長期小于輸出，自我調(diào)節(jié)能力趨于降低【答案】A【解析】【詳解】醋酸桿菌屬于原核生物，雖然無線粒體,但是有與有氧呼吸有關(guān)的酶，因此也能進行有氧呼吸獲得能量，A錯誤；劇烈運動時，骨骼肌細胞可利用無氧呼吸方式供給能量，B正確；植物體光合速率大于呼吸速率時，積累生長所需的有機物，C正確；生態(tài)系統(tǒng)的能量流動是逐級遞減的，若能量輸入長期小于輸出，則自我調(diào)節(jié)能力趨于降低，D正確。11.很多生活實例中蘊含著生物學(xué)原理，下列實例和生物學(xué)原理對應(yīng)不準確的是（）A.醋浸泡制成的臘八蒜不易腐敗——pH過低抑制雜菌生長B.優(yōu)良毛霉菌種接種在豆腐上——減少雜菌污染C.果酒制作后期密封發(fā)酵瓶——無氧呼吸促進酵母菌繁殖D.低溫下冷藏蔬菜——降低微生物的繁殖速率【答案】C【解析】【詳解】醋浸泡制成的臘八蒜不易腐敗，是由于pH過低抑制其他雜菌生長，A正確；將優(yōu)良毛霉菌種接種在豆腐上，可以減少雜菌污染，提高腐乳的品質(zhì)，B正確；果酒制作后期密封發(fā)酵瓶，促進酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精，C錯誤；低溫下冷藏蔬菜，以降低微生物的繁殖速率，D正確。12.以下細胞特征中，不屬于癌細胞的是（）A.細胞表面黏連糖蛋白減少 B.具有較小的核/質(zhì)比C.細胞分裂失去次數(shù)限制 D.原癌基因發(fā)生突變【答案】B【解析】【詳解】A、癌細胞表面黏連糖蛋白減少，所以容易擴散和轉(zhuǎn)移，A正確；

B、癌細胞的細胞小，細胞核大，所以具有較大的核/質(zhì)比，B錯誤；

C、癌細胞具有無限增殖的能力，C正確；

D、細胞癌變是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變的結(jié)果，D正確。

故選B。13.下列關(guān)于基因操作工具的敘述，正確的是A.并非所有目的基因都可用PCR方法獲取B.通常以抗生素合成基因作為標(biāo)記基因C.限制酶識別并在特定位置斷開氫鍵D.DNA連接酶可將脫氧核苷酸連接成長鏈【答案】A【解析】【分析】【詳解】用PCR技術(shù)獲取取目的基因需要已知目的基因兩端核苷酸序列，以便制備引物，而并非所有的目的基因都已知其核苷酸序列，A正確；通常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因，B錯誤；限制酶識別并在特定位置斷開磷酸二酯鍵，C錯誤；DNA連接酶可將DNA片段連接起來，D錯誤。14.為使玉米獲得抗除草劑性狀，需進行如圖所示的操作。報告基因的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色。轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長。下列敘述不正確的（）A.篩選1需要用氨芐青霉素培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達載體的農(nóng)桿菌B.篩選2需要用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍色的組織C.報告基因在玉米愈傷組織和農(nóng)桿菌細胞中均能正確表達D.誘導(dǎo)幼胚脫分化形成愈傷組織的培養(yǎng)基需添加植物激素【答案】C【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻緼、據(jù)圖分析可知，質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因，可以作為標(biāo)記基因，因此篩選1需要用氨芐青霉素培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達載體的農(nóng)桿菌，A正確；

B、根據(jù)提供信息可知，報告基因的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色，因此篩選2需要用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍色的組織，B正確；

C、由于基因是選擇性表達的，因此報告基因在玉米的愈傷組織和農(nóng)桿菌細胞中不一定都能正確表達，C錯誤；

D、植物組織培養(yǎng)過程包括脫分化和再分化過程，兩個過程都需要加入植物激素，D正確。

故選C。15.下列關(guān)于克隆技術(shù)的敘述，正確的是（）A.植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的原理都是細胞的全能性B.植物體細胞雜交和動物細胞融合都可以克服生殖隔離得到新個體C.動物細胞工程需要無菌條件下進行，植物細胞工程不需要D.植物組織培養(yǎng)可用于單倍體育種，動物體細胞核移植可以培養(yǎng)克隆動物【答案】D【解析】【詳解】A、植物組織培養(yǎng)的原理是細胞的全能性，動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖，A錯誤；B、動物細胞融合可以形成雜種細胞，但是不能得到新個體，B錯誤；C、植物細胞工程和動物細胞工程都需要在無菌條件下進行，C錯誤；D、植物組織培養(yǎng)可用于單倍體育種，動物體細胞核移植可以培養(yǎng)克隆動物，D正確。答案選D。16.以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.以綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗B.外植體脫分化培養(yǎng)成愈傷組織的過程，需要植物生長調(diào)節(jié)劑的處理C.若用某一細胞進行組織培養(yǎng)，該細胞必須有完整的細胞核和葉綠體D.選用花粉粒進行組織培養(yǎng)，不能獲得與原植株基因型相同的植物體【答案】C【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

1、過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。2、原理：植物細胞的全能性。

3、條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。

4、植物細胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖，作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。【詳解】A.以綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗，A正確；

B.外植體脫分化培養(yǎng)成愈傷組織的過程，需要植物生長調(diào)節(jié)劑的處理，B正確；

C.若用某一細胞進行組織培養(yǎng)，該細胞必須有完整的細胞核，但不需要葉綠體，C錯誤；

D.選用花粉粒進行組織培養(yǎng)，獲得是單倍體植株，不能獲得與原植株基因型相同的植物體，D正確。

故選C。17.下列有關(guān)DNA粗提取與鑒定過程的敘述中，正確的是A.將豬的成熟紅細胞置于清水中，紅細胞漲破后將DNA釋放出來B.用2mol/L的氯化鈉溶液溶解提取物并離心后，須保留上清液C.在提取液中加入75%的冷凍酒精后蛋白質(zhì)會與DNA分離并析出D.將提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后溶液迅速變?yōu)樗{色【答案】B【解析】【分析】1、DNA的溶解性

（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用這一特點，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達到分離目的；

（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離。

2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性

蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響。

3、DNA的鑒定

在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斀狻緼、豬為哺乳動物，其成熟紅細胞不含細胞核和細胞器，不含DNA，A錯誤；B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，氯化鈉溶液為2mol/L時，DNA溶解度最大，所以用2mol/L的氯化鈉溶液溶解提取物并離心后，須保留上清液，B正確；C、DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理，在提取液中加入95%的冷凍酒精后蛋白質(zhì)會與DNA分離并析出，C錯誤；D、需將提取的絲狀物加入2mol/L的NaCl溶液中溶解，再加入二苯胺試劑，混勻后將試管置于沸水中水浴加熱5min，指示劑將變藍，D錯誤。故選B。18.如圖為受精作用及胚胎發(fā)育示意圖，a、b代表兩個發(fā)育時期，下列敘述不正確的是A.①過程發(fā)生同源染色體分離 B.②過程通過有絲分裂增殖C.a時期可分離得到胚胎干細胞 D.①→④細胞分化程度逐漸增大【答案】A【解析】【分析】【詳解】A、①過程表示受精作用，而同源染色體的分離發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，A錯誤；

B、受精卵通過有絲分裂進行卵裂（②過程），B正確；

C、a時期為囊胚期，可分離出得到胚胎干細胞，C正確；

D、①→④細胞分化程度逐漸增大，D正確。故選A。19.用根尖細胞經(jīng)組織培養(yǎng)形成愈傷組織的過程中，不可能會發(fā)生

（）A.細胞失去原有細胞的特征 B.細胞以有絲分裂方式增殖C.細胞的基因選擇性表達 D.細胞的非等位基因重組【答案】D【解析】【詳解】由根尖細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生來路改變，A正確；脫分化過程中細胞細胞通過有絲分裂方式進行增殖，B正確；根尖細胞經(jīng)組織培養(yǎng)形成愈傷組織的過程中，會發(fā)生基因的選擇性表達，C正確；在有絲分裂間期可能會發(fā)生基因突變，在細胞分裂期可能會發(fā)生染色體變異，但不會發(fā)生基因重組，因為基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，D錯誤。20.科研工作者利用禽流感病毒蛋白制備單克隆抗體，下列步驟中敘述正確的是（）A.用動物細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒，通過離心獲得抗原蛋白B.多次注射適宜濃度的抗原免疫小鼠，以獲得更多的漿細胞C.用滅活的病毒誘導(dǎo)漿細胞與禽流感病毒融合得到雜交瘤細胞D.將單個雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔培養(yǎng)可獲得多種單克隆抗體【答案】B【解析】【詳解】A、用動物細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒，通過離心可以獲得更多的禽流感病毒，但是無法得到抗原蛋白，A錯誤；B、多次注射適宜濃度的抗原免疫小鼠，以獲得更多的漿細胞，再由漿細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，最后由雜交瘤細胞產(chǎn)生大量的單一抗體，屬于單克隆抗體，B正確；C、病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)，不能與漿細胞融合形成雜交瘤細胞，C錯誤；D、將單個雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔培養(yǎng)只能獲得一種抗體，D錯誤。答案選B。21.細胞是個復(fù)雜而且精巧的生命系統(tǒng)。某同學(xué)對細胞的認識，不合理的是（）A.細胞體積不能過大——細胞體積越大，相對表面積越小，物質(zhì)交換效率越低B.細胞膜外覆蓋大量糖蛋白——與細胞控制物質(zhì)進出和細胞信息傳遞功能相適應(yīng)C.葉綠體內(nèi)部堆疊大量基粒——集中分布著的酶系催化光反應(yīng)和碳（暗）反應(yīng)進行D.細胞分裂過程中形成紡錘體——排列和平均分配染色體，決定胞質(zhì)分裂的分裂面【答案】C【解析】【詳解】A、細胞體積越大，相對表面積越小，物質(zhì)交換效率越低，因此細胞的體積不能過大，A正確；B、細胞膜外覆蓋大量糖蛋白，與細胞控制物質(zhì)進出和細胞信息傳遞功能相適應(yīng)，B正確；C、葉綠體內(nèi)部堆疊大量基粒分布有大量的與光反應(yīng)有關(guān)的酶和色素，而與暗反應(yīng)有關(guān)的酶分布于葉綠體基質(zhì)中，C錯誤；D、細胞分裂過程中形成的紡錘體，牽引染色體移動，與染色體的排列和平均分配有關(guān)，能夠決定胞質(zhì)分裂的分裂面，D正確。故選C。22.圖中①～④表示某細胞的部分細胞器，下列有關(guān)敘述正確的是（）A.葡萄糖在結(jié)構(gòu)①中分解成CO2和水B.結(jié)構(gòu)③參與該細胞細胞壁的形成C.結(jié)構(gòu)①②③都具有選擇透過性D.結(jié)構(gòu)①和④都能發(fā)生堿基互補配對【答案】D【解析】【詳解】葡萄糖在細胞質(zhì)基質(zhì)中分解產(chǎn)生丙酮酸和還原氫，然后丙酮酸進入①線粒體進一步分解產(chǎn)生二氧化碳和水，A錯誤；圖中③是高爾基體，與植物細胞壁的形成有關(guān)，而圖示細胞有中心體、沒有細胞壁，為動物細胞，B錯誤；結(jié)構(gòu)②是中心體，沒有膜結(jié)構(gòu)，所以沒有選擇透過性，C錯誤；結(jié)構(gòu)①和④分別是線粒體和核糖體，線粒體可以發(fā)生DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯，核糖體可以發(fā)生翻譯，所以兩者都可以發(fā)生堿基互補配對，D正確。23.將A、B兩種物質(zhì)混合，T1時加入酶C。右圖為最適溫度下A、B濃度的變化曲線。下列敘述正確的是（）A.酶C降低了B生成A反應(yīng)的活化能B.該體系中的酶促反應(yīng)速率先快后慢C.酶C活性降低導(dǎo)致T2后B增加緩慢D.適當(dāng)降低反應(yīng)溫度，T1~T2間隔縮短【答案】B【解析】【詳解】T1時加入酶C后，A濃度逐漸降低，B濃度逐漸升高，說明酶C催化物質(zhì)A生成了物質(zhì)B。由于酶能降低化學(xué)反應(yīng)的活化能，因此酶C降低了A生成B這一反應(yīng)的活化能，A錯誤；由圖可知，該體系中酶促反應(yīng)速率先快后慢（減慢的原因是底物減少），B正確；T2后B增加緩慢是反應(yīng)物A減少導(dǎo)致的，C錯誤；圖示是在最適溫度條件下進行的，若適當(dāng)降低反應(yīng)溫度，則酶活性降低，酶促反應(yīng)速率減慢，T1~T2間隔增大，D錯誤?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是根據(jù)進入酶C后兩種物質(zhì)的含量變化判斷反應(yīng)物和產(chǎn)物的種類，明確反應(yīng)速率減慢的原因是反應(yīng)物減少了。24.下圖曲線Ⅰ表示大豆在適宜溫度、CO2濃度為0.03%的環(huán)境中光合作用速率與光照強度的關(guān)系。在Y點時改變了某條件，形成曲線Ⅱ所示的變化。下列分析不合理的是（）A.X→Y，光合作用速率受光照強度制約B.改變水分供應(yīng)可引起曲線Ⅰ和Ⅱ差異C.Q點葉綠體基質(zhì)中C5生成速率低于P點D.P點類囊體膜上生成ATP的速率高于Q點【答案】C【解析】【詳解】據(jù)圖分析，兩條曲線在X→Y段是重疊的，此時限制光合作用的因素是光照強度，A正確；水分是光合作用的原料，因此改變水分供應(yīng)可引起曲線Ⅰ和Ⅱ差異，B正確；與P點相比，Q點光合作用較弱，因此葉綠體基質(zhì)中C5生成速率高于P點，C錯誤；P點光合作用較強，需要的ATP較多，因此類囊體膜上生成ATP的速率高于Q點，D正確?！军c睛】解答本題首先審清題意，然后找出曲線各階段的限制因素。題干中提出實驗條件下溫度適宜，而影響光合作用的環(huán)境因素主要有光照強度、溫度、二氧化碳濃度等，排除了溫度的影響，光照條件是相同的，因此Y點時改變的可能是二氧化碳濃度。Q點的光合速率不再隨著光照強度的增加而增加，而且此時溫度處于最適狀態(tài)，所以限制因素最可能是二氧化碳濃度。25.下圖為某哺乳動物處于不同分裂時期染色體及其上基因示意圖。下列敘述不正確的是（）A.細胞①形成③的過程中發(fā)生等位基因分離B.細胞②中有四對同源染色體，四個染色體組C.細胞④不是③的子細胞，僅有一個染色體組D.細胞④為次級精母細胞，不含同源染色體【答案】D【解析】【分析】分析題圖：①為某哺乳動物體細胞中部分染色體及其上的基因示意圖；②細胞中含有同源染色體，且著絲點分裂，處于有絲分裂后期；③細胞中含有同源染色體，且同源染色體分離，處于減數(shù)第一次分裂后期；④細胞中不含同源染色體，染色體排列在赤道板上，處于減數(shù)第二次分裂中期。【詳解】A、細胞①形成③的過程為減數(shù)第一次分裂，發(fā)生了等位基因的分離和非等位基因的自由組合，A正確；B、細胞②含有同源染色體，著絲點分裂，處于有絲分裂后期，細胞中有四對同源染色體，四個染色體組，B正確；C、根據(jù)圖中染色體的大小和顏色可知，細胞④不是③的子細胞，僅有一個染色體組，C正確；D、由于細胞③中細胞質(zhì)是不均等分裂的，說明該哺乳動物是雌性的，則細胞④為次級卵母細胞，不含同源染色體，D錯誤。故選D。26.秀麗隱桿線蟲的ced3、ced4基因發(fā)生突變失活后，原先應(yīng)該凋亡的131個細胞依然存活；ced9基因突變會導(dǎo)致所有細胞在胚胎期死亡，無法得到成蟲。據(jù)此推測不合理的是（）A.ced3、ced4基因是131個細胞中選擇性表達的基因B.ced9基因在線蟲發(fā)育過程中抑制細胞凋亡C.ced3、ced4基因在線蟲發(fā)育過程中促進細胞凋亡D.ced9基因直接抑制ced3、ced4基因表達【答案】D【解析】【詳解】AC、秀麗隱桿線蟲的ced3、ced4基因發(fā)生突變失活后，原先應(yīng)該凋亡的131個細胞依然存活，說明ced3、ced4基因是131個細胞中選擇性表達的基因，在線蟲發(fā)育過程中會促進細胞凋亡，AC正確；B、ced9基因突變會導(dǎo)致所有細胞在胚胎期死亡，說明ced9基因在線蟲發(fā)育過程中抑制細胞凋亡，B正確；D、根據(jù)題干信息，不能獲得ced9基因的作用是直接抑制ced3、ced4基因表達的信息，D錯誤。故選D。27.研究者連續(xù)培養(yǎng)乳腺癌細胞，取樣測定擁有不同DNA含量的細胞數(shù)目，結(jié)果如右圖所示。長春花堿阻礙紡錘體微管的形成，從而阻斷細胞分裂。若向乳腺癌細胞的培養(yǎng)液中長時間持續(xù)添加長春花堿，用相同方法測定每個細胞DNA含量與細胞數(shù)目，結(jié)果最可能是下圖中的（）A. B. C. D.【答案】D【解析】【詳解】根據(jù)題干信息分析，長春花堿阻礙紡錘體微管的形成，從而阻斷細胞分裂。根據(jù)有絲分裂過程可知，紡錘體微管形成于前期，所以若向乳腺癌細胞的培養(yǎng)液中長時間持續(xù)添加長春花堿，則最終所以細胞將處于有絲分裂前期，即所有細胞中DNA的相對值都是2，故選D。28.從人的胰島B細胞中提取出總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后得到cDNA。以cDNA為模板，利用PCR擴增目的基因，無法得到的是（）A.胰島素基因 B.微管蛋白基因C.RNA聚合酶基因 D.生長激素基因【答案】D【解析】【詳解】人的胰島B細胞可以產(chǎn)生胰島素，所以其胰島素基因是選擇性表達的，可以產(chǎn)生其mRNA，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄后可以獲得胰島素基因，A正確；人的胰島B細胞可以產(chǎn)生微管蛋白，該過程中產(chǎn)生了相應(yīng)的mRNA，則經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄后可以獲得微管蛋白基因，B正確；人的胰島B細胞合成了RNA聚合酶，該過程產(chǎn)生了相應(yīng)的mRNA，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄可以獲得RNA聚合酶基因，C正確；人的胰島B細胞不能產(chǎn)生生長激素，因此不能產(chǎn)生與生長激素相應(yīng)的mRNA，因此也不能產(chǎn)生生長激素基因，D錯誤。29.科研人員通過PCR獲得肝細胞特異性啟動子——白蛋白啟動子，將該啟動子與Cre重組酶基因結(jié)合構(gòu)建表達載體，培育出在肝細胞特異性表達Cre重組酶的轉(zhuǎn)基因小鼠。下列敘述正確的是A.將該表達載體導(dǎo)入肝細胞以獲得轉(zhuǎn)基因小鼠B.PCR獲得白蛋白啟動子需設(shè)計特異性的引物C.構(gòu)建該表達載體需要限制酶和DNA聚合酶D.通過核酸分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否完成表達【答案】B【解析】【詳解】將該表達載體導(dǎo)入受精卵以獲得轉(zhuǎn)基因小鼠，A錯誤；PCR技術(shù)需設(shè)計特異性的引物，B正確；構(gòu)建該表達載體需要限制酶和DNA連接酶，C錯誤；檢測目的基因是否完成表達常用抗原抗體雜交技術(shù)，D錯誤。30.在微生物培養(yǎng)的過程中，需要通過選擇培養(yǎng)或鑒別培養(yǎng)的方法來篩選出目標(biāo)菌種，下列與之相關(guān)的敘述中不正確的是A.纖維素分解菌能夠分解剛果紅染料，從而使菌落周圍出現(xiàn)透明圈B.尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，從而使酚紅指示劑變紅C.在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株D.在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長的乳酸菌菌落周圍會出現(xiàn)“溶鈣圈”【答案】A【解析】【詳解】纖維素分解菌能夠分解纖維素，在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，A錯誤；尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使培養(yǎng)基呈堿性,從而通使酚紅指示劑變紅，B正確；在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株，C正確；在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長的乳酸菌菌落周圍會出現(xiàn)“溶鈣圈”，D正確。三、非選擇題31.線粒體是細胞中最重要的細胞器之一。線粒體在細胞內(nèi)是高度動態(tài)變化的，在細胞內(nèi)不斷分裂、融合，這一過程是由多種蛋白質(zhì)精確調(diào)控完成的。（1）線粒體是_________的主要場所，其內(nèi)膜向內(nèi)折疊形成嵴，從而可以_________，有利于酶的附著。（2）真核細胞中線粒體的數(shù)目與其代謝強度成正比，一些衰老的線粒體也會被_________消化清除，所以線粒體的分裂在真核細胞內(nèi)經(jīng)常發(fā)生。（3）研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線粒體的分裂有關(guān)，過程如下圖所示。①由圖可知，馬達蛋白牽引著線粒體沿著_________運輸?shù)絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)。②研究發(fā)現(xiàn)，細胞內(nèi)Ca2+離子主要儲存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，在細胞質(zhì)基質(zhì)中濃度較低，而馬達蛋白表面有Ca2+離子結(jié)合位點。據(jù)此推測，受到調(diào)控信號的刺激后，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)_________，進而使線粒體在細胞內(nèi)移動。③由圖可知，_________形成細管狀結(jié)構(gòu)纏繞線粒體，使線粒體局部收縮，同時募集細胞質(zhì)中游離的_________，在收縮部位形成蛋白復(fù)合物，不斷收縮使線粒體斷開?！敬鸢浮竣?有氧呼吸②.增大膜面積③.溶酶體④.細胞骨架⑤.釋放Ca2+離子，使細胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)Ca2+離子濃度升高，Ca2+離子與馬達蛋白結(jié)合⑥.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（膜）⑦.M蛋白與D蛋白【解析】【分析】真核細胞中的線粒體是有氧呼吸的主要場所，其結(jié)構(gòu)包括雙層膜、嵴和基質(zhì)。據(jù)題（3）圖分析，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜形成細管狀結(jié)構(gòu)纏繞線粒體，使線粒體局部收縮，分裂形成兩個線粒體?！驹斀狻浚?）線粒體是有氧呼吸的主要場所，其內(nèi)膜向內(nèi)折疊形成嵴，從而增大膜面積，有利于與有氧呼吸有關(guān)酶的附著。（2）細胞中衰老的線粒體會被溶酶體中的水解酶分解。（3）①由圖可知，馬達蛋白牽引著線粒體沿著細胞骨架運輸?shù)絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)。②根據(jù)題意分析，受到調(diào)控信號的刺激后，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)釋放Ca2+離子，使細胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)Ca2+離子濃度升高，Ca2+離子與馬達蛋白結(jié)合進而使線粒體在細胞內(nèi)移動。③根據(jù)以上分析已知，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜形成細管狀結(jié)構(gòu)纏繞線粒體，使線粒體局部收縮，同時募集細胞質(zhì)中游離的M蛋白與D蛋白，在收縮部位形成蛋白復(fù)合物，不斷收縮使線粒體斷開?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是分析題圖，判斷線粒體分裂與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜之間的關(guān)系，以及與M蛋白、D蛋白的關(guān)系。32.鐵皮石斛為我國傳統(tǒng)名貴中藥材，研究人員對它的栽培條件進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如下。處理L1L2L3W1W2W3W1W2W3W1W2W3干重/g2.913.432.312.583.792.861.932.342.41注：1．L1、L2和L3分別代表光照強度為360、240和120μmol/（m2·s）。2．W1、W2和W3分別代表基質(zhì)含水量為基質(zhì)最大持水量的100%、70%和40%。（1）該實驗研究了_________對鐵皮石斛光合作用的影響。（2）據(jù)表分析，鐵皮石斛在_________條件下的生長狀況最好。請繪出在此含水量條件下，鐵皮石斛產(chǎn)量與光照強度關(guān)系的柱狀圖。（3）在低光照情況下，由于_________階段產(chǎn)生的_________少，導(dǎo)致鐵皮石斛的產(chǎn)量較低。（4）進一步研究發(fā)現(xiàn)，在基質(zhì)含水量低的情況下植物細胞內(nèi)可溶性糖的含量提高，表明植株可以通過積累可溶性糖_________，這是植株的一種保護性反應(yīng)。（5）為保證鐵皮石斛的產(chǎn)量，請?zhí)岢鲈趶姽鈼l件下的栽培建議：_________?！敬鸢浮竣?光照強度和基質(zhì)含水量②.L2W2③.④.光反應(yīng)⑤.ATP和[H]⑥.從而提高細胞的滲透調(diào)節(jié)能力⑦.將基質(zhì)含水量控制在70％左右【解析】【分析】根據(jù)表格分析，該實驗的自變量是光照強度、基質(zhì)含水量，因變量是鐵皮石斛的干重，代表了光合作用強度。隨著基質(zhì)含水量的增加，干重先增加后降低；隨著光照強度的增加，干重先也是先增加后降低，表格顯示240μmol/（m2·s）、70%含水量時，光合作用強度最大?！驹斀狻浚?）根據(jù)以上分析已知，該實驗的自變量是光照強度和基質(zhì)含水量，因此該實驗的目的是探究光照強度和基質(zhì)含水量對鐵皮石斛光合作用的影響。（2）根據(jù)以上分析已知，鐵皮石斛在240μmol/（m2·s）、70%含水量（L2W2）條件下的生長狀況最好。在含水量為70%條件下，根據(jù)表格中光照強度與干重的關(guān)系繪制柱狀圖如下：。（3）在光照強度較低的情況下，光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP和[H]較少，從而導(dǎo)致鐵皮石斛的產(chǎn)量較低。（4）在基質(zhì)含水量低的情況下植物細胞內(nèi)可溶性糖的含量提高，說明植株可以通過積累可溶性糖從而提高細胞的滲透調(diào)節(jié)能力。（5）為保證鐵皮石斛的產(chǎn)量，在強光條件下的基質(zhì)含水量應(yīng)該控制在70%左右?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是根據(jù)表格判斷實驗的自變量和因變量，并根據(jù)數(shù)據(jù)判斷光合作用強度與光照強度、基質(zhì)含水量的關(guān)系。33.些年，研究人員在細胞減數(shù)分裂研究中有一些新發(fā)現(xiàn)，如圖1所示。（1）圖1中呈現(xiàn)了_________細胞產(chǎn)生過程（部分染色體未標(biāo)出），細胞②被稱為_________，此時同源染色體的非姐妹染色單體之間常常發(fā)生_________。（2）與“常規(guī)”減數(shù)分裂相比，“逆反”減數(shù)分裂中染色體變化的特征是_________。在“逆反”減數(shù)分裂中，若MⅡ中約23%的細胞出現(xiàn)了染色體不均分的情況，那么可以估算出約_________%的配子異常。（3）經(jīng)過對大量樣本的統(tǒng)計研究發(fā)現(xiàn)了染色體的分配規(guī)律，如圖2所示。染色體的這種分配規(guī)律及其意義是_________?！敬鸢浮竣?卵②.初級卵母細胞③.交叉互換④.MⅠ姐妹染色體單體分開，MⅡ同源染色體分離⑤.23⑥.卵細胞獲得重組染色體的概率高，后代具有更多變異性（具有更大的基因多樣性），為進化提供了豐富的原材料（子代群體對環(huán)境有更大的適應(yīng)性，有利于進化）【解析】【分析】根據(jù)圖1分析，①到②表示減數(shù)分裂間期，②到③表示減數(shù)第一次分裂，該過程中發(fā)生了交叉互換，③到④過程表示減數(shù)第二次分裂；逆反減數(shù)分裂與常規(guī)減數(shù)分裂的主要差異在于前者MⅠ姐妹染色體單體分開，MⅡ同源染色體分離?！驹斀狻浚?）根據(jù)圖形分析可知，圖1產(chǎn)生的子細胞的大小不同，說明該過程是卵細胞的形成過程，細胞②為初級卵母細胞，該細胞中發(fā)生了同源染色體的非姐妹染色單體的交叉互換。（2）與“常規(guī)”減數(shù)分裂相比，“逆反”減數(shù)分裂中染色體變化的特征是MⅠ姐妹染色體單體分開，MⅡ同源染色體分離。在“逆反”減數(shù)分裂中，若MⅡ中約23%的細胞出現(xiàn)了染色體不均分的情況，那么可以估算出約23%的配子異常。（3）圖2所示的染色體的分配規(guī)律，其意義在于卵細胞獲得重組染色體的概率高，后代具有更多變異性（具有更大的基因多樣性），為進化提供了豐富的原材料（子代群體對環(huán)境有更大的適應(yīng)性，有利于進化）”。【點睛】解答本題的關(guān)鍵是對于圖1和圖2的分析，確定兩種減數(shù)分裂過程的主要差異，并能夠根據(jù)圖2判斷染色體分配的意義。34.蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________?！敬鸢浮竣?限制酶和DNA連接②.CaCl2③.基因突變④.引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√⑤.含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）⑥.抗原抗體雜交⑦.抑菌圈⑧.對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】【分析】（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接黏性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細胞導(dǎo)入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。【詳解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術(shù)。②PCR擴增時，子鏈從引物的3'端延伸，第3次PCR時，兩條子鏈互為引物，因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實驗中的對照原則，若要比較新蛋白A的表達效率是否提高，則需設(shè)置三組實驗實驗變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)?？赡墚a(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原——抗體雜交方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較抑菌圈的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，是因為蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高?！军c睛】本題主要考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識，考生需要理解和記憶相關(guān)知識，并學(xué)會應(yīng)用所學(xué)知識正確答題。35.科研人員通過體細胞雜交培育食用菌新品種。（1）科研人員分別測定了杏鮑菇（A）和秀珍菇（B）單核菌株、雙核菌株的生長速度和原生質(zhì)體產(chǎn)量，結(jié)果如下表。菌株生長速度（cm/d）原生質(zhì)體產(chǎn)量（107個/mL）菌株生長速度（cm/d）原生質(zhì)體產(chǎn)量（107個/mL）單核菌株A10.280.6單核菌株B10.233.0單核菌株A20.221.5單核菌株B20.310.9雙核菌株A10.851.8雙核菌株B10.800.3雙核菌株A20.712.2雙核菌株B20.610.3研究人員最終選擇雙核菌株A1和單核菌株B1作為親本進行細胞融合，選擇的理由是______________。（2）利用酶解法去除細胞壁時，應(yīng)嚴格控制酶的_________等條件，以提高原生質(zhì)體產(chǎn)量并降低破損率。（3）科研人員將雙核菌株A1的原生質(zhì)體進行高溫滅活，使其僅能生存而無法繁殖。將滅活后的雙核菌株A1與未滅活的單核菌株B1的原生質(zhì)體用_________試劑誘導(dǎo)融合。融合過程需要在_________的緩沖溶液中進行，以防止原生質(zhì)體破裂。（4）科研人員將融合劑處理后的原生質(zhì)體懸液涂布于培養(yǎng)基上進行篩選。①菌種遺傳背景的差異會導(dǎo)致菌絲之間出現(xiàn)相互排斥，能夠在培養(yǎng)基上觀察到一條拮抗帶。挑取_________兩側(cè)的一對菌株進行進一步篩選。②研究發(fā)現(xiàn)，雙核菌絲在進行細胞分裂時，會形成一個喙?fàn)罱Y(jié)構(gòu)，稱為鎖狀聯(lián)合，而單核菌絲不出現(xiàn)。單核菌株B1與滅活的雙核菌株A1形成的融合子能夠出現(xiàn)雙核化，也可觀察到鎖狀聯(lián)合?？蒲腥藛T進行顯微鏡觀察并從中選擇_________的一對菌株，進行下一步篩選。③最終篩選出雜合菌株的方法是_________。【答案】（1）雙核菌株A1生長速度快，單核菌株B1原生質(zhì)體產(chǎn)量高（2）濃度和處理時間（3）①.PEG②.等滲（4）①.拮抗帶②.（拮抗帶）兩側(cè)菌株均有鎖狀聯(lián)合③.將上述有鎖狀聯(lián)合的菌種分別與B1培養(yǎng)在同一培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)拮抗帶則該菌種為雜合菌株【解析】【分析】根據(jù)表格分析，杏鮑菇中雙核菌株A1的生長速度最高，雙核菌株A2的原生質(zhì)體產(chǎn)量最高；秀珍菇中雙核菌株B1的生長速度最高，單核菌株B1的原生質(zhì)體產(chǎn)量最高；在兩種真菌中，雙核菌株A1生長速度快，單核菌株B1原生質(zhì)體產(chǎn)量高?！拘?詳解】根表格可知，雙核菌株A1生長速度快，單核菌株B1原生質(zhì)體產(chǎn)量高，因此研究人員最終選擇雙核菌株A1和單核菌株B1作為親本進行細胞融合?！拘?詳解】利用酶解法去除細胞壁時，應(yīng)嚴格控制酶的濃度和處理時間等條件，以提高原生質(zhì)體產(chǎn)量并降低破損率?！拘?詳解】將滅活后的雙核菌株A1與未滅活的單核菌株B1的原生質(zhì)體用PEG試劑誘導(dǎo)融合。融合過程需要在等滲的緩沖溶液中進行，以防止原生質(zhì)體破裂。【小問4詳解】①根據(jù)題意，在培養(yǎng)基上觀察到一條拮抗帶，挑取拮抗帶兩側(cè)的一對菌株進行進一步篩選。②根據(jù)題意，科研人員進行顯微鏡觀察并從中選擇兩側(cè)菌株均有鎖狀聯(lián)合的一對菌株，進行下一步篩選。③最終篩選出雜合菌株的方法是將上述有鎖狀聯(lián)合的菌種分別與B1培養(yǎng)在同一培養(yǎng)基上，若出現(xiàn)拮抗帶則該菌種為雜合菌株。36.人肌紅蛋白（Myo）是早期診斷急性心肌梗塞的生化標(biāo)志物之一。為制備抗Myo的單克隆抗體，科研人員進行研究。（1）科研人員以Myo作為抗原免疫小鼠，取小鼠的脾臟細胞與_________細胞誘導(dǎo)融合。用_________培養(yǎng)基篩選融合細胞，得到雜交瘤細胞。（2）將得到的雜交瘤細胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進行抗體陽性檢測，之后稀釋、培養(yǎng)、再進行抗體陽性檢測并多次重復(fù)上述操作，多次重復(fù)該過程的目的是篩選獲得抗Myo抗體_________的雜交瘤細胞。（3）雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測抗原的方法，具體原理如下圖：固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合，這是由于不同抗體與同一抗原表面的________