湖南省鳳凰縣鳳凰皇倉中學(xué)2025屆高考沖刺模擬生物試題含解析

湖南省鳳凰縣鳳凰皇倉中學(xué)2025屆高考沖刺模擬生物試題注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場號(hào)和座位序號(hào)。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．酒精會(huì)影響肝細(xì)胞的代謝功能，例如蛋白質(zhì)的降解。據(jù)此推測，肝細(xì)胞中功能直接受到酒精影響的細(xì)胞器是A．溶酶體 B．高爾基體 C．光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) D．線粒體2．組氨酸缺陷型沙門氏菌是由野生菌種突變形成的，自身不能合成組氨酸。將其接種在缺乏組氨酸的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，有極少量菌落形成。2-氨基芴是一種致突變劑，將沾有2-氨基芴的濾紙片放到上述平板培養(yǎng)基中，再接種組氨酸缺陷型沙門氏菌進(jìn)行培養(yǎng)，會(huì)有較多菌落出現(xiàn)。以下敘述不正確的是A．在接種前，2-氨基芴和濾紙片須進(jìn)行滅菌處理B．基因突變的可逆性與是否存在致突變劑無關(guān)C．若用劃線法接種可以根據(jù)菌落數(shù)計(jì)算活菌數(shù)量D．此方法可以用于檢測環(huán)境中的化學(xué)致突變劑3．為研究生長素類似物2，4-D對(duì)某植物插枝生根的作用，科研人員獲得了如表所示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列敘述錯(cuò)誤的是組別甲組乙組丙組2，4-D濃度（mol/L）10-1010-50生根數(shù)目（條）43822A．本實(shí)驗(yàn)還可以利用根的總長度作為檢測指標(biāo)B．若欲探究2，4-D對(duì)插枝生根的最適濃度，應(yīng)在10-10到10-5之間設(shè)置濃度梯度實(shí)驗(yàn)C．用三種溶液處理插枝的時(shí)間應(yīng)該相同D．該實(shí)驗(yàn)可以說明低濃度的2，4-D促進(jìn)插枝生根，高濃度的2，4-D抑制插枝生根4．下列關(guān)于人體細(xì)胞有氧呼吸和無氧呼吸相同點(diǎn)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．都是在生物膜上完成反應(yīng) B．都能生成三磷酸腺苷C．都需要多種酶的催化 D．都能產(chǎn)生丙酮酸和[H]5．假如你在研究中發(fā)現(xiàn)一種新的單細(xì)胞生物并決定該生物屬于原核生物還是真核生物，則以下哪種特性與你的決定無關(guān)？()①核膜的有無②核糖體的有無③細(xì)胞壁的有無④膜上磷脂的有無A．①③ B．②④ C．①④ D．②③6．小麥種子萌發(fā)時(shí)需要適宜的溫度，適量的水分，充足的空氣，不需要光。小麥種子萌發(fā)過程中，下列現(xiàn)象一定會(huì)發(fā)生的是（）A．基因突變，染色體變異 B．DNA復(fù)制，淀粉酶合成C．ADP轉(zhuǎn)化成ATP，C3被[H]還原 D．有氧呼吸增強(qiáng)，有機(jī)物總能量增加7．河豚毒素（TTX）是一種離子通道阻斷劑。用TTX處理突觸前神經(jīng)纖維，然后每隔5min對(duì)突觸前神經(jīng)纖維施加一次刺激，分別測量突觸前和突觸后神經(jīng)元的電位變化，結(jié)果如圖。河豚毒素的作用機(jī)理可能為（）A．TTX作用于鈉離子通道，阻斷突觸前神經(jīng)元Na+內(nèi)流，抑制突觸前膜遞質(zhì)釋放B．TTX作用于鈉離子通道，阻斷突觸后神經(jīng)元Na+內(nèi)流，抑制神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)突觸后膜的作用C．TTX作用于鉀離子通道，阻斷突觸前神經(jīng)元K+外流，抑制突觸前膜遞質(zhì)釋放D．TTX作用于鉀離子通道，阻斷突觸后神經(jīng)元K+外流，抑制神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)突觸后膜的作用8．（10分）冠狀病毒是一類致病性很強(qiáng)的RNA病毒，這類病毒（）A．能夠利用自身的核糖體合成蛋白質(zhì)B．核酸組成中特有的堿基為胸腺嘧啶C．可用含有碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基培養(yǎng)D．利用宿主細(xì)胞的核糖核苷酸及氨基酸等物質(zhì)增殖二、非選擇題9．（10分）某種質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，它們的識(shí)別序列和黏性末端各不相同，該質(zhì)粒同時(shí)含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因?？茖W(xué)家利用此質(zhì)粒培育轉(zhuǎn)基因抗鹽作物，提高糧食種植面積取得重大進(jìn)展。其培育過程如下圖，請(qǐng)回答下列問題。（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用________兩種酶對(duì)質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，以保證重組質(zhì)粒序列的唯一性。（2）基因工程中的檢測篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法（使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法）檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入了土壤農(nóng)桿菌。培養(yǎng)基除了含有土壤農(nóng)桿菌生長繁殖必需的成分和瓊脂外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還要含有______、______________。從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是____（填數(shù)字）菌落中的細(xì)菌。（3）為了確定抗鹽作物是否培育成功，要用__________標(biāo)記的含抗鹽基因的DNA片段作探針進(jìn)行分子雜交檢測，還要從個(gè)體水平用__________（方法）鑒定作物的耐鹽性。（4）將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的工程細(xì)胞培育成完整植株需要用組織培養(yǎng)技術(shù)，組織培養(yǎng)技術(shù)依據(jù)的原理是________________________。（5）將抗鹽基因?qū)胱魑锛?xì)胞內(nèi)，使作物具有了抗鹽性狀，這種變異類型屬于_________。10．（14分）白酒發(fā)酵過程中，窖池中培養(yǎng)液的pH會(huì)降低。為選育適合白酒生產(chǎn)的耐酸性強(qiáng)的酵母菌，研究者進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答有關(guān)問題：（1）酵母菌的代謝類型是________。（2）溫度和pH是影響酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。________℃左右最適合酵母菌繁殖。酵母菌能在pH值為1．0~2．4的范圍內(nèi)生長，最適pH值為3．4~4．0。發(fā)酵過程中窖池中培養(yǎng)液的pH會(huì)逐漸下降，原因是________________。（1）從窖池取含酵母菌的適量培養(yǎng)液分別接種到酸堿度不同的麥芽汁培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)在pH≤1的環(huán)境中，仍可檢測到少量耐酸性酵母菌生長，這些菌株是________形成的。（3）研究者從pH為2~1的培養(yǎng)液中獲得菌種，可通過________法接種到培養(yǎng)基上，進(jìn)行純化培養(yǎng)。純化培養(yǎng)所用培養(yǎng)基常用________法滅菌，滅菌后在________附近倒平板。（4）實(shí)驗(yàn)獲得了三個(gè)耐酸性強(qiáng)的酵母菌菌株，特點(diǎn)如下表。菌株ABC特點(diǎn)pH≤1時(shí)，生長代謝正常并優(yōu)于其它常規(guī)菌種pH≤1時(shí)，生長代謝正常，pH3~6時(shí)不正常pH為2~6時(shí)，生長代謝正常并優(yōu)于其|它常規(guī)菌種依據(jù)菌株特點(diǎn)，研究者認(rèn)為C菌株更適合作為白酒發(fā)酵菌株，作出這一判斷的理由是________。11．（14分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對(duì)人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達(dá)蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細(xì)胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)效率很低，研究者推測不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物（引物B和C中都替換了一個(gè)堿基），并按圖2方式依次進(jìn)行4次PCR擴(kuò)增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點(diǎn)的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請(qǐng)?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進(jìn)一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，比較_________的大小，以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點(diǎn)是_________。12．下圖是某高等動(dòng)物的細(xì)胞分裂的坐標(biāo)圖和分裂圖，請(qǐng)回答下列問題：（1）坐標(biāo)圖中縱坐標(biāo)表示_____________（染色體/DNA）的變化，由分裂圖可知，坐標(biāo)圖的縱坐標(biāo)中a＝________。（2）H→I段表示發(fā)生了______________，之后進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是____________。（3）CD段，細(xì)胞中染色體、染色單體和DNA分子數(shù)量之比為_________。（4）在分裂圖中，含有同源染色體的是________；含有姐妹染色單體的是________。（5）分裂圖①的細(xì)胞名稱為________________，一個(gè)這樣的細(xì)胞能產(chǎn)生________種生殖細(xì)胞。（6）分裂圖③中產(chǎn)生的子細(xì)胞名稱為___________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

酒精會(huì)影響肝細(xì)胞的蛋白質(zhì)的降解等代謝功能，而蛋白質(zhì)降解與溶酶體中的水解酶密不可分，可見，肝細(xì)胞中功能直接受到酒精影響的細(xì)胞器是溶酶體，A正確，B、C、D均錯(cuò)誤。故選A。2、C【解析】

在微生物培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)用具都要進(jìn)行滅菌處理。常用稀釋涂布法計(jì)算活菌的數(shù)目，常用平板分離法分離細(xì)菌和定量測定?；蛲蛔兊脑蛴泻芏?，如物理因素、化學(xué)因素和生物因素?！驹斀狻吭谖⑸锱囵B(yǎng)過程中，培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)用具都要進(jìn)行滅菌處理，A正確；由題意可知，2-氨基芴可使沙門氏菌中野生型增多，說明該化學(xué)誘變劑處理缺陷型細(xì)菌可使其變?yōu)橐吧?，但由題意不能說明野生型突變?yōu)榱巳毕菪?，且根?jù)致突變劑可提高基因突變的頻率，但不能決定突變的方向，可判斷基因突變的可逆性與是否存在致突變劑無關(guān)，B正確；計(jì)算活菌的數(shù)目常用稀釋涂布法，而不是用平板劃線法，C錯(cuò)誤；根據(jù)菌落的變化情況，可推測環(huán)境中的化學(xué)致突變劑，D正確。

故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查了測定微生物的數(shù)量、微生物的分離和培養(yǎng)相關(guān)內(nèi)容；意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。3、B【解析】

A、研究生長素類似物2，4-D對(duì)植物插枝生根的作用，可以用生根數(shù)或根的總長度作為檢測指標(biāo)，A正確；B、與濃度為0時(shí)比較，2，4-D濃度為10-5mol/L時(shí)，對(duì)生根表現(xiàn)為抑制，為10-10mol/L時(shí)，對(duì)生根表現(xiàn)為促進(jìn)，探究2，4-D對(duì)插枝生根的最適濃度，應(yīng)在0到10-10之間設(shè)置濃度梯度實(shí)驗(yàn)，B錯(cuò)誤；C、該實(shí)驗(yàn)自變量為2，4-D濃度，時(shí)間為無關(guān)變量，三種溶液處理插枝的時(shí)間應(yīng)該相同，C正確；D、該實(shí)驗(yàn)可以說明低濃度的2，4-D促進(jìn)插枝生根，高濃度的2，4-D抑制插枝生根，D正確。故選B。4、A【解析】

有氧呼吸與無氧呼吸的異同：項(xiàng)目有氧呼吸無氧呼吸區(qū)別進(jìn)行部位第一步在細(xì)胞質(zhì)中，然后在線粒體始終在細(xì)胞質(zhì)中是否需O2需氧不需氧最終產(chǎn)物CO2+H2O不徹底氧化物酒精、CO2或乳酸可利用能量1167kJ61.08KJ聯(lián)系將C6H12O6分解成丙酮酸這一階段相同，都在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行【詳解】A、有氧呼吸第一階段和無氧呼吸都在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、有氧呼吸和無氧呼吸都能產(chǎn)生ATP，B正確；C、有氧呼吸和無氧呼吸都是一系列的化學(xué)反應(yīng)，所以需要多種酶的催化，C正確；D、有氧呼吸第一階段和無氧呼吸第一階段的產(chǎn)物都是丙酮酸和[H]，D正確。故選A。【點(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞呼吸的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記細(xì)胞有氧呼吸和無氧呼吸的具體過程、場所、產(chǎn)物等基礎(chǔ)知識(shí)，能對(duì)兩者進(jìn)行比較，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。5、B【解析】

原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的異同：比較項(xiàng)目原核細(xì)胞真核細(xì)胞大小較小較大主要

區(qū)別無以核膜為界限的細(xì)

胞核，有擬核有以核膜為界限的細(xì)胞核

細(xì)胞壁有，主要成分是糖類

和蛋白質(zhì)

植物細(xì)胞有，主要成分是

纖維素和果膠；動(dòng)物細(xì)胞

無；真菌細(xì)胞有，主要成

分為多糖

生物膜系統(tǒng)無生物膜系統(tǒng)有生物膜系統(tǒng)細(xì)胞質(zhì)有核糖體，無其他細(xì)

胞器有核糖體和其他細(xì)胞器

【詳解】①核膜的有無是判斷真核生物與原核生物重要依據(jù)，①正確；

②真核生物和原核生物都有核糖體，與確定生物類型無關(guān)，②錯(cuò)誤；

③除支原體外，原核生物都有細(xì)胞壁，而真核生物中動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁，植物的細(xì)胞壁的成分與原核生物的細(xì)胞壁的成分不同，所以細(xì)胞壁可以作為判斷真核生物與原核生物的依據(jù)，③正確；

④真核生物和原核生物細(xì)胞膜上都有磷脂，不能作為判斷依據(jù)，④錯(cuò)誤。

故選B。6、B【解析】

小麥種子的萌發(fā)需要細(xì)胞進(jìn)行呼吸作用提供能量，同時(shí)在沒有葉片長出的情況下不能進(jìn)行光合作用，細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂和細(xì)胞分化，【詳解】A、小麥種子萌發(fā)時(shí)有可能發(fā)生基因突變和染色體變異，但不是一定會(huì)發(fā)生，A錯(cuò)誤；B、種子萌發(fā)時(shí)胚芽胚根細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，細(xì)胞分裂間期DNA分子會(huì)進(jìn)行復(fù)制，小麥種子富含淀粉，萌發(fā)時(shí)會(huì)合成淀粉酶催化淀粉水解，B正確；C、種子萌發(fā)時(shí)能進(jìn)行呼吸作用，ADP可以轉(zhuǎn)化成ATP，但不需要光，不進(jìn)行光合作用所以不進(jìn)行C3的還原，C錯(cuò)誤；D、種子萌發(fā)有氧呼增強(qiáng)，呼吸作用氧化分解有機(jī)物，釋放熱能，有機(jī)物中總能量減少，D錯(cuò)誤。故選B?！军c(diǎn)睛】本題重點(diǎn)是考生要能夠分析清楚在種子萌發(fā)過程中進(jìn)行的生理過程，易錯(cuò)點(diǎn)是對(duì)有機(jī)物的總量和種類進(jìn)行區(qū)分，在沒有光合作用的條件下，有機(jī)物總量降低，而種類增加。7、A【解析】

適宜刺激使突觸前神經(jīng)元產(chǎn)生興奮，由突觸前膜釋放神經(jīng)遞質(zhì)，作用于突觸后膜，引起突觸后膜發(fā)生電位變化。若突觸前膜不能釋放神經(jīng)遞質(zhì)，則興奮不能傳遞到突觸后膜?！驹斀狻恳罁?jù)圖示可知，突觸后神經(jīng)元的興奮主要取決于突觸前神經(jīng)元的興奮，隨著刺激次數(shù)的增加，突觸前神經(jīng)元興奮明顯減弱，突觸后神經(jīng)元興奮也減弱甚至不興奮，主要原因是TTX作用于鈉離子通道，阻斷了Na+內(nèi)流，導(dǎo)致突觸前動(dòng)作電位變化明顯減弱，進(jìn)而導(dǎo)致突觸前膜遞質(zhì)釋放減少或不能釋放，使得突觸后膜難以興奮。綜上分析，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。8、D【解析】

病毒是一類沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的特殊生物，只有蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)構(gòu)成，不能獨(dú)立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活細(xì)胞內(nèi)才能生活和繁殖，一旦離開了活細(xì)胞，病毒就無法進(jìn)行生命活動(dòng)?！驹斀狻緼、病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無核糖體，A錯(cuò)誤；B、冠狀病毒為RNA病毒，不含DNA，無胸腺嘧啶，B錯(cuò)誤；C、病毒不能用培養(yǎng)基培養(yǎng)，必須寄生到活細(xì)胞中，C錯(cuò)誤；D、病毒能利用宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和原料，在宿主細(xì)胞中增殖，D正確。故選D。二、非選擇題9、SalⅠHindⅢ氨芐青霉素四環(huán)素（或答氨芐青霉素和四環(huán)素）4和6放射性同位素（或熒光素）一定濃度的鹽水澆灌作物（將作物移栽到鹽堿地中種植）細(xì)胞的全能性基因重組【解析】

分析第一個(gè)圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗鹽作物的培育過程，首先構(gòu)建基因表達(dá)載體；其次采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（作物細(xì)胞）；再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將含有目的基因的作物細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗鹽作物。分析第二個(gè)圖：圖示為篩選含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌的過程，培養(yǎng)基A和B中應(yīng)該分別加入氨芐青霉素、四環(huán)素?！驹斀狻浚?）質(zhì)粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，其中BamHⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，用該酶切割會(huì)破壞目的基因；若只用SalⅠ一種限制酶切割可能會(huì)導(dǎo)致目的基因與運(yùn)載體反向連接；因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用SalⅠ和HindⅢ兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒和抗鹽基因進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。（2）用SalⅠ和HindⅢ兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割時(shí)，會(huì)破會(huì)四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌能在含有氨芐青毒素的培養(yǎng)基上能生存，但不能在含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生存，所以培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有氨芐青霉素、四環(huán)素，含目的基因的是4和6菌落中的細(xì)菌。（3）探針是指用放射性同位素標(biāo)記的目的基因（抗鹽基因）。除了從分子水平上進(jìn)行檢測，還可以從個(gè)體水平上進(jìn)行鑒定，即用一定濃度的鹽水澆灌作物來鑒定作物的耐鹽性。（4）將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，組織培養(yǎng)技術(shù)依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性。（5）將抗鹽基因?qū)胱魑锛?xì)胞內(nèi)，使作物具有了抗鹽性狀，這屬于基因工程技術(shù)，變異類型是基因重組。【點(diǎn)睛】本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗鹽作物的培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟，能根據(jù)圖中限制酶的位置及題干要求選擇正確的限制酶；能根據(jù)題中信息判斷培養(yǎng)基中抗生素的名稱；識(shí)記植物組織培養(yǎng)過程及條件。10、異養(yǎng)兼性厭氧型20細(xì)胞呼吸產(chǎn)生二氧化碳，可形成碳酸；代謝過程中還產(chǎn)生了其他酸性物質(zhì)基因突變平板劃線法或稀釋涂布平板高壓蒸汽滅菌酒精燈該菌對(duì)pH耐受范圍更大，發(fā)酵初期pH近中性，C菌種適合此環(huán)境，更易于形成優(yōu)勢菌群；發(fā)酵后期pH逐漸降低，C菌種依然能正常生長【解析】

1、葡萄酒與白酒制作的原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厭氧微生物，在缺氧條件下進(jìn)行無氧呼吸，在氧氣充足的條件下進(jìn)行有氧呼吸，酵母菌具有核膜包被的細(xì)胞核，屬于真核生物，適宜酵母菌生長的溫度范圍是18～24℃。

2、常用的微生物接種方法為平板劃線法和稀釋涂布平板法?！驹斀狻浚?）酵母菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型。（2）適宜酵母菌生長的溫度范圍是18～24℃。即20℃左右最適合酵母菌繁殖。由于酵母菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)生二氧化碳，可形成碳酸；以及代謝過程中還產(chǎn)生了其他酸性物質(zhì)，所以在發(fā)酵過程中窖池中培養(yǎng)液的pH會(huì)逐漸下降。（1）酵母菌生長的最適pH值為3．4~4．0，過酸的PH會(huì)導(dǎo)致酵母菌死亡，但在pH≤1的環(huán)境中，仍檢測到少量耐酸性酵母菌生長，說明這些菌株是基因突變形成的。（3）常用的微生物接種方法為平板劃線法和稀釋涂布平板法。培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌，培養(yǎng)基滅菌后要在酒精燈附近倒平板，以防止微生物的污染。（4）比較表格中的三種菌體的特點(diǎn)可知，C菌對(duì)pH耐受范圍更大，而酵母菌發(fā)酵的初期pH近中性，所以C菌種適合此環(huán)境，更易于形成優(yōu)勢菌群；而且發(fā)酵后期pH逐漸降低，C菌種依然能正常生長，所以C菌株更適合作為白酒發(fā)酵菌株?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合選育適合生產(chǎn)白酒的耐酸性強(qiáng)的酵母菌，考查酵母菌的代謝類型、倒平板、微生物的接種方法等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力。11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會(huì)造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運(yùn)輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因（1）啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)．此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后，篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。第四步：目的基因的檢測和表達(dá)1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原——抗體雜交。4、有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?！驹斀狻浚?）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細(xì)胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點(diǎn)的基因突變技術(shù)。②與研究者推測不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物（引物B和C中都替換了一個(gè)堿基），因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照原則，若要比較新蛋白A的表達(dá)效率是否提高，則需設(shè)置三組實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對(duì)照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)粒可能產(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提