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PAGEPAGE1檢驗(yàn)科標(biāo)本采集手冊(cè)檢驗(yàn)科標(biāo)本采集手冊(cè)參考
標(biāo)本采集手冊(cè)目錄
1申請(qǐng)單(醫(yī)囑單)12標(biāo)本容器的標(biāo)識(shí)13患者準(zhǔn)備1
3.1患者狀態(tài)1
3.2飲食1
3.3藥物2
3.4體位2
3.5時(shí)間24采集時(shí)間25血液采集2
5.1采血注意事項(xiàng)2
5.2采集過(guò)程3
5.3采集部位3
5.4真空采血方法3
5.5真空管采血順序36尿液采集3
6.1臨床根據(jù)檢測(cè)的需要選擇留尿的方式3
6.2采集注意事項(xiàng)和要求47糞便采集4
7.1患者準(zhǔn)備4
7.2標(biāo)本采集4
7.3標(biāo)本送檢4
7.4標(biāo)本處理4
7.5標(biāo)本拒收58陰道分泌物標(biāo)本采集5
8.1患者準(zhǔn)備5
8.2標(biāo)本采集5
8.3標(biāo)本運(yùn)送5
8.4標(biāo)本處理5
8.5標(biāo)本拒收59前列腺液標(biāo)本采集5
9.1患者準(zhǔn)備5
9.2標(biāo)本采集5
9.3標(biāo)本運(yùn)送5
9.4標(biāo)本拒收510腦脊液標(biāo)本采集510.1腰椎穿刺的適應(yīng)癥510.2腰椎穿刺的主要禁忌癥610.3患者準(zhǔn)備610.4標(biāo)本采集6
10.5標(biāo)本運(yùn)送611漿膜腔積液標(biāo)本采集611.1患者準(zhǔn)備611.2標(biāo)本采集612臨床血液檢驗(yàn)標(biāo)本的采集612.1血液常規(guī)檢查612.2網(wǎng)織紅細(xì)胞712.3紅細(xì)胞沉降率712.4骨髓細(xì)胞檢查712.5血清鐵、總鐵結(jié)合力、血清鐵蛋白、運(yùn)鐵蛋白812.6尿含鐵血黃素檢測(cè)812.7血紅蛋白電泳812.8凝血和抗凝血篩選試驗(yàn)812.9血流變檢測(cè)913臨床生化檢驗(yàn)標(biāo)本的采集913.1常規(guī)生化項(xiàng)目913.2血?dú)鈽?biāo)本的采集1014臨床免疫檢驗(yàn)標(biāo)本的采集1114.1體液免疫、細(xì)胞免疫1114.2病毒性肝炎血清標(biāo)志物、HIV抗體的檢測(cè)1114.3抗“O”、類(lèi)風(fēng)濕因子1214.4TORCH、呼吸道疾病抗體、生殖道感染抗體、自身免疫抗體譜1215臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集1215.1下呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收1215.2尿液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收1315.3血液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收1415.4糞便標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收1615.5腦脊液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收1715.6膿液及病灶分泌物標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收1815.7穿刺引流液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收2015.8生殖道標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收2115.9臨床深部真菌感染標(biāo)本的采集2116分子生物學(xué)標(biāo)本采集2216.1HBV-DNA血清采集2316.2HCV-DNA血漿采集2316.3性病標(biāo)本采集2316.4結(jié)核標(biāo)本的采集程序2317輸血科標(biāo)本采集及要求2418標(biāo)本驗(yàn)收2418.1標(biāo)本輸送流程2418.2不合格及拒收標(biāo)本2419已檢測(cè)樣本的材料存放和處置24
19.1血液樣本2419.2體液標(biāo)本2519.3微生物標(biāo)本2520申請(qǐng)附加檢驗(yàn)項(xiàng)目的時(shí)間限制和復(fù)檢要求2521分析失敗的再檢驗(yàn)或?qū)ν辉紭悠纷鲞M(jìn)一步檢驗(yàn)25附件1成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科標(biāo)本采集指南25附件2檢驗(yàn)科檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄27附件3申請(qǐng)附加檢驗(yàn)的項(xiàng)目及時(shí)限29附件4檢測(cè)項(xiàng)目報(bào)告時(shí)間和生物參考區(qū)間32附件5檢驗(yàn)項(xiàng)目危急值及報(bào)告時(shí)間39附件6知情同意書(shū)41
1申請(qǐng)單(醫(yī)囑單)
(1)本院具有醫(yī)師執(zhí)照的醫(yī)師開(kāi)申請(qǐng)單,申請(qǐng)者應(yīng)對(duì)患者講清楚采集標(biāo)本的目的,采集的時(shí)間、方法及注意事項(xiàng)。
(2)申請(qǐng)者應(yīng)向患者講清楚采集標(biāo)本前的準(zhǔn)備和用藥須知,及可能會(huì)影響到結(jié)果的注意事項(xiàng)。
(3)申請(qǐng)單的填寫(xiě)
臨床醫(yī)生在填寫(xiě)申請(qǐng)單時(shí),應(yīng)完整填寫(xiě)申請(qǐng)單的各項(xiàng)內(nèi)容,字跡清楚,內(nèi)容應(yīng)包括:患者姓名、性別、年齡、病歷號(hào)(或住院號(hào))、科室、床號(hào)(住院病人)、申請(qǐng)日期、標(biāo)本類(lèi)型、臨床診斷及主要癥狀、申請(qǐng)檢驗(yàn)項(xiàng)目及特殊說(shuō)明(如用的什么藥)、醫(yī)師姓名、標(biāo)本采集日期和時(shí)間。
(4)電子申請(qǐng)單的填寫(xiě)
臨床醫(yī)生可通過(guò)醫(yī)院網(wǎng)絡(luò)開(kāi)啟電子申請(qǐng),進(jìn)入醫(yī)生系統(tǒng)——檢驗(yàn)申請(qǐng)流程——在患者姓名窗口進(jìn)入檢驗(yàn)申請(qǐng)窗口——申請(qǐng)單——選擇申請(qǐng)項(xiàng)目——錄入標(biāo)本采集時(shí)間——核實(shí)無(wú)誤后保存申請(qǐng)——提交申請(qǐng)——自動(dòng)打印條碼——申請(qǐng)狀態(tài)自動(dòng)變?yōu)橐寻l(fā)送(具體步驟需遵從當(dāng)前使用HIS系統(tǒng)操作說(shuō)明)。
(5)知情同意書(shū)(見(jiàn)附件6):醫(yī)師開(kāi)具申請(qǐng)單(醫(yī)囑單)并完成對(duì)患者的上述告知義務(wù)后,患者無(wú)異議接受申請(qǐng)單并交納相關(guān)檢查費(fèi)用,住院病人無(wú)異議并接受標(biāo)本采集,視患者知情同意申請(qǐng)單(醫(yī)囑單)的檢查項(xiàng)目。
2標(biāo)本容器的標(biāo)識(shí)
住院患者標(biāo)本容器上貼上條碼,條碼信息必須與患者申請(qǐng)單一致且為唯一性標(biāo)識(shí),包括住院號(hào)、條碼號(hào)、姓名、科室、床號(hào)、檢驗(yàn)項(xiàng)目、采集時(shí)間、采集者信息等。檢驗(yàn)科在接收標(biāo)本后,要打印條碼再次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室內(nèi)編號(hào),同時(shí)須有標(biāo)本接收時(shí)間。
門(mén)診病人檢驗(yàn)申請(qǐng)單必須有臨床醫(yī)生簽字或蓋章,檢驗(yàn)科接收標(biāo)本后進(jìn)行條碼編號(hào),一個(gè)患者3聯(lián),分別貼在標(biāo)本管、申請(qǐng)單上,余下聯(lián)交予患者用于領(lǐng)取報(bào)告單。
3患者準(zhǔn)備
3.1患者狀態(tài)
一般需在安靜、休息狀態(tài)下采集標(biāo)本。如患者出于高度緊張狀態(tài),可使血紅蛋白、白細(xì)胞增高;運(yùn)動(dòng)后由于能量消耗、體液丟失,可造成CK、LDH、ALT、AST等一時(shí)性升高,還可引起血液中鈉、鈣、白蛋白、血糖等成分的改變。
3.2飲食
多數(shù)試驗(yàn)要求在采血前禁食12h,因?yàn)轱嬍持械牟煌煞挚芍苯佑绊憣?shí)驗(yàn)結(jié)果。
(1)餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高,但空腹達(dá)24h以上,可出現(xiàn)低血糖,血中TG、游離甘油及脂肪酸可增高。
(2)高脂餐后2~4h采血,多數(shù)人ALP含量增高,主要來(lái)自腸源性同工酶。
(3)高蛋白質(zhì)餐使血漿尿素、血氨增加,但不影響肌酐含量。
(4)高比例不飽脂肪酸食物,可減低膽固醇含量;香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增加數(shù)倍。
(5)含咖啡因飲料,可使血漿游離脂肪酸增加,并使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。
(6)食物如含有動(dòng)物血液,可引起糞隱血假陽(yáng)性。
(7)飲酒后使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加,長(zhǎng)期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細(xì)胞體積增加、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶亦較不飲酒的病人為高,甚至可以將這三項(xiàng)作為嗜酒者的篩選檢查。
(8)吸煙:癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達(dá)8%,而不吸煙者含量在1%以下。此外,兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高,血液學(xué)方面亦有變化,白細(xì)胞數(shù)增加、嗜酸粒細(xì)胞減少、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細(xì)胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高于非吸煙組。
3.3藥物
藥物對(duì)檢驗(yàn)的影響非常復(fù)雜,在采樣前,以暫停各種藥物為宜,如某種藥物不可停用,則應(yīng)了解可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響。
3.4體位
體位影響血液循環(huán),由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變,則細(xì)胞成分和大分子物質(zhì)的改變較為明顯,例如由臥位改為站位,血漿TP、ALB、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;RBC、Hb、HCT等亦可增加。由于體位的因素,在確立參考值時(shí),應(yīng)考慮門(mén)診和住院病人可能存在的結(jié)果差異,故采集標(biāo)本時(shí)要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。
3.5時(shí)間
病人準(zhǔn)備還應(yīng)考慮病人的生物鐘規(guī)律,特別是激素水平分析,如女性生殖激素與月經(jīng)周期密切相關(guān);膽固醇則在經(jīng)前期最高,排卵時(shí)最低;纖維蛋白原在經(jīng)前期最高,血漿蛋白則在排卵時(shí)減少。生長(zhǎng)激素于入睡后會(huì)出現(xiàn)短時(shí)高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高;血漿蛋白在夜間降低;血Ca往往在中午出現(xiàn)最低值。故采血時(shí)間應(yīng)在相同時(shí)間進(jìn)行。
4采集時(shí)間
要求空腹的項(xiàng)目--住院病人在8:00之前,門(mén)診病人最好在9:00以前,以空腹12小時(shí)為準(zhǔn);特殊項(xiàng)目請(qǐng)?jiān)谙嚓P(guān)部門(mén)預(yù)約。常規(guī)項(xiàng)目和急診項(xiàng)目原則上24小時(shí)均可進(jìn)行。
5血液采集
5.1采血注意事項(xiàng)
嚴(yán)格按照無(wú)菌技術(shù)操作,無(wú)論醫(yī)生、護(hù)士、檢驗(yàn)人員除穿戴工作服外,還應(yīng)戴一次性口罩,同時(shí)嚴(yán)格做好采血手的消毒,防止患者采血部位感染。保證一人一針,杜絕交叉感染。真空采血過(guò)程如有血液外溢和污染,立即使用過(guò)氧乙酸溶液或75%的酒精溶液消毒處理。對(duì)所有的采血材料嚴(yán)格執(zhí)行使用前再次檢查,保證安全。采血人員對(duì)所采集的標(biāo)本做好登記工作,并簽名。樣品采集完后,對(duì)所使用的材料做好無(wú)害化處置,保證環(huán)境和人員安全。
靜脈采血時(shí),止血帶離抽血扎針部位上方約5cm距離,注意袖筒不要太緊,止血帶壓迫時(shí)間宜小于1分鐘,若止血帶結(jié)扎超過(guò)2分鐘,大靜脈血流受阻而使毛細(xì)血管內(nèi)壓上升,可有血管內(nèi)液和組織液交流,能使相對(duì)分子質(zhì)量小于5000的物質(zhì)逸入組織液;隨著壓迫時(shí)間延長(zhǎng),局部組織發(fā)生缺氧而引起血液成分的變化較大,檢查結(jié)果時(shí)出現(xiàn)不應(yīng)有的增高和減低。
為保證檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性不能在靜脈輸液同側(cè)臂或輸液三通處進(jìn)行采血。
防止溶血:容器不清潔、不干燥;淤血時(shí)間過(guò)長(zhǎng);穿刺不順利,組織損傷過(guò)多;抽血速度過(guò)快;血液注入容器時(shí)未取下針頭或注入速度過(guò)快時(shí)產(chǎn)生大量泡沫;震蕩過(guò)于劇烈等。若用普通注射器采血后,未取下針
(7)飲酒后使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加,長(zhǎng)期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細(xì)胞體積增加、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶亦較不飲酒的病人為高,甚至可以將這三項(xiàng)作為嗜酒者的篩選檢查。
(8)吸煙:癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達(dá)8%,而不吸煙者含量在1%以下。此外,兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高,血液學(xué)方面亦有變化,白細(xì)胞數(shù)增加、嗜酸粒細(xì)胞減少、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細(xì)胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高于非吸煙組。
3.3藥物
藥物對(duì)檢驗(yàn)的影響非常復(fù)雜,在采樣前,以暫停各種藥物為宜,如某種藥物不可停用,則應(yīng)了解可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響。
3.4體位
體位影響血液循環(huán),由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變,則細(xì)胞成分和大分子物質(zhì)的改變較為明顯,例如由臥位改為站位,血漿TP、ALB、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;RBC、Hb、HCT等亦可增加。由于體位的因素,在確立參考值時(shí),應(yīng)考慮門(mén)診和住院病人可能存在的結(jié)果差異,故采集標(biāo)本時(shí)要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。
3.5時(shí)間
病人準(zhǔn)備還應(yīng)考慮病人的生物鐘規(guī)律,特別是激素水平分析,如女性生殖激素與月經(jīng)周期密切相關(guān);膽固醇則在經(jīng)前期最高,排卵時(shí)最低;纖維蛋白原在經(jīng)前期最高,血漿蛋白則在排卵時(shí)減少。生長(zhǎng)激素于入睡后會(huì)出現(xiàn)短時(shí)高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高;血漿蛋白在夜間降低;血Ca往往在中午出現(xiàn)最低值。故采血時(shí)間應(yīng)在相同時(shí)間進(jìn)行。
4采集時(shí)間
要求空腹的項(xiàng)目--住院病人在8:00之前,門(mén)診病人最好在9:00以前,以空腹12小時(shí)為準(zhǔn);特殊項(xiàng)目請(qǐng)?jiān)谙嚓P(guān)部門(mén)預(yù)約。常規(guī)項(xiàng)目和急診項(xiàng)目原則上24小時(shí)均可進(jìn)行。
5血液采集
5.1采血注意事項(xiàng)
嚴(yán)格按照無(wú)菌技術(shù)操作,無(wú)論醫(yī)生、護(hù)士、檢驗(yàn)人員除穿戴工作服外,還應(yīng)戴一次性口罩,同時(shí)嚴(yán)格做好采血手的消毒,防止患者采血部位感染。保證一人一針,杜絕交叉感染。真空采血過(guò)程如有血液外溢和污染,立即使用過(guò)氧乙酸溶液或75%的酒精溶液消毒處理。對(duì)所有的采血材料嚴(yán)格執(zhí)行使用前再次檢查,保證安全。采血人員對(duì)所采集的標(biāo)本做好登記工作,并簽名。樣品采集完后,對(duì)所使用的材料做好無(wú)害化處置,保證環(huán)境和人員安全。
靜脈采血時(shí),止血帶離抽血扎針部位上方約5cm距離,注意袖筒不要太緊,止血帶壓迫時(shí)間宜小于1分鐘,若止血帶結(jié)扎超過(guò)2分鐘,大靜脈血流受阻而使毛細(xì)血管內(nèi)壓上升,可有血管內(nèi)液和組織液交流,能使相對(duì)分子質(zhì)量小于5000的物質(zhì)逸入組織液;隨著壓迫時(shí)間延長(zhǎng),局部組織發(fā)生缺氧而引起血液成分的變化較大,檢查結(jié)果時(shí)出現(xiàn)不應(yīng)有的增高和減低。
為保證檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性不能在靜脈輸液同側(cè)臂或輸液三通處進(jìn)行采血。
防止溶血:容器不清潔、不干燥;淤血時(shí)間過(guò)長(zhǎng);穿刺不順利,組織損傷過(guò)多;抽血速度過(guò)快;血液注入容器時(shí)未取下針頭或注入速度過(guò)快時(shí)產(chǎn)生大量泡沫;震蕩過(guò)于劇烈等。若用普通注射器采血后,未取下針
頭直接將血液注入真空管內(nèi),也易造成溶血。
5.2采集過(guò)程
收取檢驗(yàn)申請(qǐng)單(醫(yī)生、護(hù)士、檢驗(yàn)人員)→審查合格(核對(duì)檢驗(yàn)單上姓名、住院號(hào)、科別、床號(hào)、檢驗(yàn)項(xiàng)目等是否填寫(xiě)清晰,能正確辨認(rèn))→檢查真空管條碼信息是否與申請(qǐng)單病人信息和要求的檢驗(yàn)信息一致→按申請(qǐng)單上的病人姓名呼喚其姓名以再次確認(rèn)病人→找好采血靜脈并消毒→按照采血順序采取靜脈血→用棉簽壓迫傷口→充分混勻樣品(在采血單上填上采血時(shí)間)→送至相關(guān)部門(mén)檢測(cè)(由運(yùn)送部或臨床醫(yī)護(hù)人員完成)。
5.3采集部位
通常選擇手肘中央部分較粗的靜脈血管,用食指觸摸,是否為有彈性的血管(肌肉較無(wú)彈性),若血管不明顯,請(qǐng)輕拍手肘中央部位(約5~10次),讓血管較易浮現(xiàn),若該部位不明顯,可改用手背處?kù)o脈(請(qǐng)患者手輕握),輕拍手背中央部位(約5~10次),讓血管較易浮現(xiàn)。小兒采用股靜脈采血或頸外靜脈采血,但有危險(xiǎn)性,以少用為宜。
5.4真空采血方法
確定穿刺部位后,先以碘酒消毒,以選定之靜脈穿刺部位為中心點(diǎn),由內(nèi)往外以環(huán)狀涂拭消毒,消毒直徑約7.5cm,稍待干躁后進(jìn)行第二次75%酒精消毒。真空采血裝置,設(shè)計(jì)備有軟橡皮套管式止血裝置,酒精消毒后,穿刺,回血后即將另一端的硬插管插入真空定量采血管內(nèi),血液足量后,拔出硬插管即止血,當(dāng)插入另一支真空定量采血管時(shí)又可采血。整個(gè)采血過(guò)程無(wú)血液溢出和污染,采血完成后,針頭從靜脈拔除前,先將最后一支試管退出持針器,再拔除針頭。針頭拆卸,建議直接在針頭撤卸器上進(jìn)行;也可用鑷子夾除丟入專(zhuān)用污染廢棄桶內(nèi);在無(wú)鑷子卸針的情況下,請(qǐng)將針頭平放在桌上,以針就蓋。千萬(wàn)不可用手拿針蓋而將針套入,避免針扎意外。
止血:退針后請(qǐng)病人手指壓住棉簽,手伸直抬高于心臟,保持兩分鐘(如果是有出血傾向患者如紫癜,ITP,血液病等,請(qǐng)病人不要離開(kāi)檢驗(yàn)科,要壓迫5~10分鐘直到無(wú)血滲出為止)。
5.5真空管采血順序
血標(biāo)本采集時(shí)建議的真空管使用順序如下:
⑴血液培養(yǎng)(分成人需氧瓶、兒童需氧瓶、厭氧瓶、分支桿菌瓶)(直立旋轉(zhuǎn)混勻)。
⑵生化、免疫(紅頭)。
⑶凝血象(藍(lán)頭)(顛倒混勻8-10次)。
⑷血細(xì)胞分析、糖化血紅蛋白(紫頭)(顛倒混勻8-10次)。
⑸生化、免疫、血流變(綠頭)(顛倒混勻8-10次),分離膠普通管(黃頭)。
⑹血沉(黑頭)(顛倒混勻8-10次)
6尿液采集
6.1臨床根據(jù)檢測(cè)的需要選擇留尿的方式
⑴首次晨尿:即留取清晨第一次尿,能真實(shí)的反映腎臟病情況。
⑵隨機(jī)尿:不為條件所限,適于門(mén)診、急診病人,但受多種因素的影響,有形成分的濃度較低。⑶午后尿:午餐后2h尿中尿膽原和糖含量高,適于這兩種成分的檢驗(yàn),可提高陽(yáng)性檢出率。
⑷中段尿采集法:是臨床上最多采用的方法,女性病人先以肥皂水或1:1000高錳酸鉀水溶液沖洗外陰部及尿道口;男性病人應(yīng)翻轉(zhuǎn)包皮,用肥皂水或1:1000苯托溴銨沖洗或消毒尿道口,再用滅菌紗布擦干,讓病人排尿,棄去前段尿,收集中段尿10-20ml,盛于無(wú)菌容器內(nèi)立即加蓋送檢
⑸12h尿:頭晚8時(shí)排空膀胱并棄去此次尿液,再收集至翌晨8時(shí)前的全部尿液,適用于Addis尿沉渣計(jì)數(shù)。
⑹24h尿:適于代謝產(chǎn)物24h定量測(cè)定,如尿蛋白、糖、鈉、鉀、氯、鈣、尿酸、17-羥皮質(zhì)醇和17-酮皮質(zhì)醇等。應(yīng)準(zhǔn)確的收集24h尿液,采集方法:早上8點(diǎn)到第二天早上8點(diǎn),早上8時(shí)排空膀胱并棄去此次尿液,再收集,直到第二天早上8點(diǎn)將小便全部收集在容器中,并測(cè)尿量,從混勻尿液中采集100-200ml送檢。收集24h尿液根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康募尤脒m當(dāng)防腐劑。24h尿液沉渣還可用于找抗酸桿菌。
⑺特殊體位采集標(biāo)本:如分別采集直立或運(yùn)動(dòng)后尿標(biāo)本與平臥8h后尿標(biāo)本,對(duì)體位性蛋白尿、運(yùn)動(dòng)性血尿診斷有幫助。
⑻下午2點(diǎn)鐘至4點(diǎn)鐘留取尿標(biāo)本:適于尿膽原檢查。
⑼清潔尿(中段尿、導(dǎo)尿、膀胱穿刺尿等):適于細(xì)菌培養(yǎng),應(yīng)注意無(wú)菌操作。
6.2采集注意事項(xiàng)和要求
⑴應(yīng)用清潔、有蓋、干燥的一次性容器,防止日照與污染。
⑵采集尿液量:尿常規(guī)與一般定性檢查留取尿液約30-100ml。
⑶尿標(biāo)本要新鮮,留取后立即送檢。放置2h以上尿中成分可發(fā)生變化,如紅細(xì)胞、白細(xì)胞溶解等。⑷尿標(biāo)本要防止月經(jīng)血、白帶、精液、前列腺液、糞便、煙灰等異物混入。為此應(yīng)避免月經(jīng)期驗(yàn)?zāi)颉E曰颊呦纫鍧嵧怅幉?,?.1%苯托溴銨溶液侵過(guò)的棉球擦洗外陰部并消毒尿道口。一般檢查留取晨起第一次清潔中段尿,作細(xì)菌培養(yǎng)者應(yīng)先做尿道口局部消毒處理并注意無(wú)菌操作。
⑸尿膽原等化學(xué)物質(zhì)因光分解或氧化,需要避光。
7糞便采集
7.1患者準(zhǔn)備
病人必須清楚標(biāo)本采集前嚴(yán)格飲食控制、標(biāo)本采集和運(yùn)送是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的前提的,應(yīng)認(rèn)真與醫(yī)生合作。免疫法實(shí)驗(yàn)前無(wú)需控制飲食,化學(xué)法實(shí)驗(yàn)前3天嚴(yán)格禁食動(dòng)物性食品,根據(jù)病人的病情酌情禁食維生素C等還原性藥物。
7.2標(biāo)本采集
通常采取自然排出的糞便,無(wú)糞便排出而又必須檢查時(shí),可經(jīng)肛門(mén)指診或采便管拭子取標(biāo)本,灌腸或服油類(lèi)瀉劑的糞便不適合做檢驗(yàn)標(biāo)本。糞便應(yīng)取新鮮標(biāo)本,不得混有水、尿液和其它成分。用勺子取新鮮糞便指頭大小或2ml(稀便)放入便盒內(nèi),大便不正常的,如有膿血粘液時(shí),應(yīng)選擇有膿血粘液部分。不要用衛(wèi)生紙或其他吸水的物質(zhì)包大便送檢。嬰兒不能用尿不濕上的大便。
7.3標(biāo)本送檢
大便標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,不超過(guò)1小時(shí)。送檢過(guò)程中需防止出現(xiàn)標(biāo)本外溢。
7.4標(biāo)本處理
糞便標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢驗(yàn)(一般在采集后1小時(shí)內(nèi)檢查完畢)。試驗(yàn)所使用的器具必須干凈,防止試驗(yàn)出現(xiàn)
假陽(yáng)性。標(biāo)本容器為一次性使用,檢驗(yàn)后標(biāo)本應(yīng)焚燒化。
7.5標(biāo)本拒收
被容器吸干了水分的標(biāo)本拒收;標(biāo)本量過(guò)少的標(biāo)本拒收;混入了尿液或其它成分的標(biāo)本拒收;采集1小時(shí)后采送檢的標(biāo)本拒收。
8陰道分泌物標(biāo)本采集
8.1患者準(zhǔn)備
取陰道分泌物之前應(yīng)避免性生活、陰道沖洗和上藥。
8.2標(biāo)本采集
采用無(wú)菌生理.鹽水棉拭子自陰道后穹窿、子宮頸或陰道壁上多部位取材。
8.3標(biāo)本運(yùn)送
將標(biāo)本置于消毒小瓶?jī)?nèi),迅速送檢。如需檢查滴蟲(chóng),應(yīng)注意保暖。
8.4標(biāo)本處理
制備成生理鹽水涂片以觀察陰道分泌物。若要求找到滴蟲(chóng),收到標(biāo)本后應(yīng)迅速涂片鏡檢,如不能迅速鏡檢應(yīng)將標(biāo)本繼續(xù)保溫。制成薄涂片做革蘭氏染色尋找線索細(xì)胞。
8.5標(biāo)本拒收
標(biāo)本采集后未能及時(shí)送檢,放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未采取保溫措施的標(biāo)本。
9前列腺液標(biāo)本采集
9.1患者準(zhǔn)備
患者檢查前3天應(yīng)禁止性活動(dòng);檢查前先排尿;如做細(xì)菌培養(yǎng),應(yīng)先清洗尿道口,用無(wú)菌試管收集前列腺液。
9.2標(biāo)本采集
檢查者右手食指涂潤(rùn)滑劑后置于肛門(mén)外慢慢插入,直至食指盡量插入直腸內(nèi)。摸準(zhǔn)前列腺,用力適中、均勻,先從上向下按摩前列腺左右葉2~3次,后由中線向肛門(mén)按壓2~3次,擠壓會(huì)陰部尿道,前列腺液便從尿道口流出。取樣時(shí)應(yīng)棄去第一滴液體,再用試管或玻片收集。
9.3標(biāo)本運(yùn)送
取樣后立即送檢,避免標(biāo)本干涸。
9.4標(biāo)本拒收
已干涸的標(biāo)本不能進(jìn)行鏡檢,拒收。
10腦脊液標(biāo)本采集
10.1腰椎穿刺的適應(yīng)癥
(1)懷疑任何形式的腦炎或腦膜炎時(shí);
(2)懷疑多發(fā)性硬化以及評(píng)價(jià)癡呆和神經(jīng)系統(tǒng)病變時(shí);
(3)疑有蛛網(wǎng)膜下腔出血時(shí);
(4)評(píng)價(jià)炎性神經(jīng)病和多發(fā)性神經(jīng)根病時(shí);
(5)懷疑腦占位性病變時(shí);
(6)神經(jīng)系統(tǒng)疾患需系統(tǒng)觀察或需椎管內(nèi)給藥、造影和腰麻等。
10.2腰椎穿刺的主要禁忌癥
(1)實(shí)施腰穿取腦脊液時(shí),一定要考慮是否有顱內(nèi)壓升高,如果眼底檢查發(fā)現(xiàn)視乳頭水腫,一定要先做CT和MRI檢查。影像學(xué)檢查如腦室大小正常且沒(méi)有移位,后顱凹沒(méi)有占位征象,方可腰穿取腦脊液,否則不能做腰穿。
(2)對(duì)休克、衰竭或?yàn)l危狀態(tài)及穿刺部位皮膚有炎癥者亦不宜作腰穿。
(3)凝血酶原時(shí)間延長(zhǎng)、血小板計(jì)數(shù)低于50×10/L、使用肝素或任何原因?qū)е碌某鲅獌A向,應(yīng)該在凝血障礙糾正后方可腰穿。
(4)脊髓壓迫癥做腰穿時(shí)應(yīng)該謹(jǐn)慎,因?yàn)檠┛梢约又丶顾鑹浩劝Y狀。
(5)開(kāi)放性顱腦損傷或有腦脊液漏者。
10.3患者準(zhǔn)備
患者應(yīng)了解腰椎穿刺術(shù)的注意事項(xiàng),放松心情,積極與醫(yī)生合作。
10.4標(biāo)本采集
腦脊液標(biāo)本由臨床醫(yī)生進(jìn)行腰椎穿刺采集,必要時(shí)可從小腦延腦池或側(cè)腦池穿刺獲得。穿刺后應(yīng)做壓力測(cè)定,然后將腦脊液分別收集于3個(gè)無(wú)菌小瓶中,每瓶1~2ml即可,第1瓶做細(xì)菌學(xué)檢查,第2瓶做化學(xué)或免疫學(xué)檢查,第3瓶做細(xì)胞計(jì)數(shù),順序不宜顛倒。對(duì)于要測(cè)定PH的,要求嚴(yán)格保持標(biāo)本采集過(guò)程中的厭氧條件。采集的腦脊液應(yīng)盡量避免凝固和混入血液。
10.5標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,不能超過(guò)1小時(shí),以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。
11漿膜腔積液標(biāo)本采集
11.1患者準(zhǔn)備
盡量放松心情,積極與醫(yī)生配合。
11.2標(biāo)本采集
漿膜腔積液標(biāo)本由臨床醫(yī)生行漿膜腔穿刺術(shù)獲得,如胸腔穿刺術(shù)、腹腔穿刺術(shù)、心包腔穿刺術(shù),穿刺術(shù)必須嚴(yán)格無(wú)菌操作。采集標(biāo)本量視檢驗(yàn)?zāi)康亩?。積液分別收集于3個(gè)無(wú)菌小瓶中,第一瓶做細(xì)菌學(xué)檢查,第2瓶做化學(xué)或免疫學(xué)檢查,第3瓶做細(xì)胞計(jì)數(shù),三瓶順序不宜顛倒。
12臨床血液檢驗(yàn)標(biāo)本的采集
12.1血液常規(guī)檢查
12.1.1患者準(zhǔn)備
采血前患者應(yīng)避免激烈運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng),一般要求休息15分鐘后采血,冬季注意保暖,以保持血液循環(huán)暢通?;颊咝那槠届o時(shí)方可采血。盡量避免藥物干擾,化療患者要求在化療前采集標(biāo)本。
12.1.2標(biāo)本采集
采血部位通常選擇肘前靜脈,幼兒可采用頸外靜脈。使用一次性真空采血管,紫頭管(抗凝劑為EDTA-K2)??鼓?ml。
9
12.1.3標(biāo)本運(yùn)送
血液標(biāo)本應(yīng)采集后立即送檢,并盡快檢查。避免標(biāo)本溫度變化過(guò)大。
12.1.4標(biāo)本處理與存儲(chǔ)
未能及時(shí)檢驗(yàn)的抗凝血標(biāo)本在室溫下保存,4小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。一般WBC、RBC、PLT可穩(wěn)定24小時(shí),白細(xì)胞分類(lèi)可穩(wěn)定6~8小時(shí),血紅蛋白可穩(wěn)定數(shù)日。低溫(4℃)保存可使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果降低。12.1.5標(biāo)本拒收
檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫(xiě)內(nèi)容與血液標(biāo)本標(biāo)識(shí)內(nèi)容不一致或不清楚者可拒收;標(biāo)本量小于1ml者(嬰幼兒、嚴(yán)重?zé)齻忍厥馇闆r除外),可拒收;血液中有凝塊,嚴(yán)重溶血、脂血者,拒收。
12.2網(wǎng)織紅細(xì)胞
同血液常規(guī)檢查的標(biāo)本采集。
12.3紅細(xì)胞沉降率
12.3.1患者準(zhǔn)備
患者在安靜狀態(tài)下,采血前一周應(yīng)盡量避免服用對(duì)檢測(cè)有影響的藥物;患者采血時(shí)宜采用坐位或臥位。12.3.2標(biāo)本采集
采血部位通常選擇肘前靜脈,幼兒可采用頸外靜脈。使用黑頭管(抗凝劑為枸櫞酸鈉),采血量1.6ml。12.3.3標(biāo)本運(yùn)送
采血后應(yīng)盡快進(jìn)行測(cè)定。
12.3.4標(biāo)本處理與存儲(chǔ)
要求標(biāo)本應(yīng)在采血后3小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),且在18-25℃室溫下進(jìn)行,室溫過(guò)高血沉加快,可按溫度系數(shù)校正。溫度過(guò)低時(shí)血沉減慢,無(wú)法校正。室溫下標(biāo)本放置時(shí)間不應(yīng)超過(guò)3小時(shí),置4℃不應(yīng)超過(guò)6小時(shí)。12.3.5標(biāo)本拒收
標(biāo)本量低于要求量、嚴(yán)重溶血、脂血、有凝塊者拒收。
12.4骨髓細(xì)胞檢查
12.4.1患者準(zhǔn)備
患者骨髓穿刺前應(yīng)避免劇烈運(yùn)動(dòng),休息15分鐘。消除恐懼和疑慮。
12.4.2標(biāo)本采集
成人一般取髂后、髂前上棘。取材過(guò)程中如遇取材不佳或干抽,可換位取材。必要時(shí)應(yīng)多部位取材,以便全面了解骨髓造血情況。術(shù)前應(yīng)做好消毒處理,嚴(yán)格按照無(wú)菌操作規(guī)程進(jìn)行操作。術(shù)前給患者注射麻藥做局部麻醉,穿刺后應(yīng)壓迫穿刺點(diǎn)一段時(shí)間,以免術(shù)后出血,再蓋上消毒敷料。骨髓液量不宜過(guò)多,一般不超過(guò)0.2ml,一般不需抗凝,若需要,應(yīng)使用EDTA-K2。
12.4.3標(biāo)本運(yùn)送
骨髓標(biāo)本采集后應(yīng)迅速送檢。
12.4.4標(biāo)本處理與存儲(chǔ)
骨髓標(biāo)本送檢后應(yīng)迅速制片,涂片要新鮮染色,染色劑以瑞氏-姬姆薩混合染色為佳,固定和染色時(shí)間要比血片長(zhǎng)。
12.4.5標(biāo)本拒收
骨髓標(biāo)本稀釋、凝固拒收。
12.5血清鐵、總鐵結(jié)合力、血清鐵蛋白、運(yùn)鐵蛋白
12.5.1患者準(zhǔn)備
一般采血前24小時(shí)要素食,避免高脂食物。
12.5.2標(biāo)本采集
標(biāo)本采集以晨8時(shí)為宜,采集患者靜脈血2ml,不抗凝或肝素抗凝。
12.5.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。
12.5.4標(biāo)本處理與存儲(chǔ)
標(biāo)本送檢后應(yīng)立即檢測(cè),4小時(shí)內(nèi)完成。如不能立即檢測(cè),應(yīng)分離血清4℃冰箱保存,1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。12.5.5標(biāo)本拒收
溶血標(biāo)本應(yīng)拒收。
12.6尿含鐵血黃素檢測(cè)
標(biāo)本最好留取第一次晨尿,不能用鐵制容器盛標(biāo)本。
12.7血紅蛋白電泳
12.7.1患者準(zhǔn)備
一般采血前24小時(shí)要素食,避免高脂食物。
12.7.2標(biāo)本采集
采集靜脈血2ml,紫頭抗凝管。
12.7.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。
12.7.4標(biāo)本處理與存儲(chǔ)
標(biāo)本制成血紅蛋白液后,可在4℃冰箱保存1周。-20℃冰凍可保存幾個(gè)月,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,也可通入一氧化碳形成一氧化碳血紅蛋白,冰凍后長(zhǎng)期保存。
12.7.5標(biāo)本拒收
標(biāo)本抗凝失敗或抗凝不完全,致使游離紅細(xì)胞過(guò)少者,應(yīng)予以拒收。
12.8凝血和抗凝血篩選試驗(yàn)
血漿凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)和纖維蛋白原(FIB)等。12.8.1患者準(zhǔn)備
一般采血前24小時(shí)要素食,避免高脂食物。情緒穩(wěn)定,避免劇烈運(yùn)動(dòng)。注意患者是否應(yīng)用肝素、口服抗凝劑等對(duì)結(jié)果有影響的藥物,是否有肝病。
12.8.2標(biāo)本采集
用藍(lán)頭管采集靜脈血2ml,抽血要順利,且避免溶血。
12.8.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢。
12.8.4標(biāo)本處理與存儲(chǔ)
3000r/min離心10分鐘,分離乏血小板血漿。標(biāo)本采集后應(yīng)立即檢測(cè),室溫下應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。12.8.5標(biāo)本拒收
溶血、黃疸、脂血、標(biāo)本量過(guò)多或過(guò)少、有凝塊的標(biāo)本拒收。
12.9血流變檢測(cè)
12.9.1患者準(zhǔn)備
采血前避免過(guò)度活動(dòng)和高脂飲食,避免情緒激動(dòng)。
12.9.2標(biāo)本采集
早晨空腹采血,采血時(shí)止血帶不宜扎得過(guò)緊,采血體位對(duì)結(jié)果有影響,立位高于坐位,坐位高于臥位。分別用綠頭管(標(biāo)本量5ml)、黑頭管(標(biāo)本量1.6ml)、紫頭管(標(biāo)本量2ml)三支試管同時(shí)采集標(biāo)本。12.9.3標(biāo)本運(yùn)送
取血后應(yīng)立即送檢。
12.9.4標(biāo)本處理與存儲(chǔ)
取血后靜置20分鐘后進(jìn)行試驗(yàn)。最好在4小時(shí)內(nèi)完成。血樣不能在0℃以下冰凍保存,室溫條件下應(yīng)在0.5~4小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),4℃條件下,在12小時(shí)內(nèi)完成。
12.9.5標(biāo)本拒收
標(biāo)本量少,有溶血、凝塊的標(biāo)本拒收。
13臨床生化檢驗(yàn)標(biāo)本的采集
13.1常規(guī)生化項(xiàng)目
13.1.1患者準(zhǔn)備
(1)避免劇烈運(yùn)動(dòng):劇烈肌肉運(yùn)動(dòng)明顯影響體內(nèi)代謝,引起血中某些成分濃度的改變,如乳酸、肌酸激酶、天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、堿性磷酸酶、葡萄糖、等的升高,故一般主張抽血前24小時(shí)不做劇烈運(yùn)動(dòng),清晨取血,住院病人可在起床前抽血,匆忙趕到門(mén)診的人應(yīng)至少休息15分鐘后取血。
(2)注意合理飲食:除了急診或其它特殊原因外,一般主張?jiān)诮?2小時(shí)后空腹取血,延長(zhǎng)空腹時(shí)間(饑餓)或餐后血液的化學(xué)成分都會(huì)變化。如譏餓時(shí)血糖及蛋白質(zhì)降低、膽紅素升高;餐后血糖、血鉀、堿性磷酸酶及甘油三酯通常升高,無(wú)機(jī)磷升高,血清可呈渾濁。另外飲食量及質(zhì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果也有影響,如高蛋白飲食可使血清尿素、血氨、尿酸升高;高脂肪飲食引起乳糜微粒血癥,導(dǎo)致血清渾濁;飲水過(guò)多或過(guò)少可使血液稀釋或濃縮。血液中成分受飲食影響,變動(dòng)幅度較大的成分有鉀離子、葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、無(wú)機(jī)磷等。
(3)采血前避免飲酒:采血前飲酒可使血乳酸、尿酸等迅速增加,連續(xù)飲酒可使天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶升高,而γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶上升最明顯。長(zhǎng)期飲酒者往往有甘油三酯血癥,γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶也會(huì)長(zhǎng)期不正常。
(4)避免緊張與情緒激動(dòng),否則可以影響神經(jīng)內(nèi)分泌功能,影響呼吸,使乳酸等升高。
(5)藥物的影響:很多藥物進(jìn)入人體后可使某些檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果增高或降低。如咖啡因可使血糖和膽固醇
增高;治療冠心病的某些藥物可使甘油三酯和乳酸脫氫酶減低;維生素C可使乳酸脫氫酶減低;血和尿中維生素C能影響測(cè)定過(guò)程中的化學(xué)反應(yīng);維生素B2可使尿呈現(xiàn)黃色;口腹避孕藥可影響脂質(zhì)代謝,可是轉(zhuǎn)氨酶升高等。故病人在檢驗(yàn)前應(yīng)盡可能停服對(duì)試驗(yàn)有干擾的藥物。
(6)體位的影響:體位(站立、坐位、臥位)改變可以引起某些檢驗(yàn)指標(biāo)的顯著改變,故建議取血時(shí)以坐位5分鐘后取血為宜。
13.1.2標(biāo)本采集
采集標(biāo)本的容器和必需的添加品:
(1)不需要抗凝劑的真空采血管(紅頭管)的項(xiàng)目:TP、ALB、TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、r-GT、GLU、BUN、Cr、CK、LDH、α-HBDH、CK-MB、TBA、HBAIC、K、NA、CL、CA、P、MG、CO2、UA、CK、HBDH、AMY、TG、CHOL、HDL、LDL、APO-A、APO-B
(2)需加肝素抗凝的真空采血管(綠頭管)的項(xiàng)目:AMON。
采集標(biāo)本的類(lèi)型和量:
(1)血液:一般為靜脈血,非抗凝血作生化項(xiàng)目需4ml,抗凝血應(yīng)視抗凝劑的量而定。
(2)尿液:應(yīng)清楚記錄24小時(shí)尿量,混勻后取10ml送檢,尿淀粉酶取隨機(jī)尿。
靜脈血標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題:
(1)一側(cè)手臂輸液時(shí)應(yīng)從對(duì)側(cè)手臂采血,禁止在輸液同側(cè)手臂采血,以免影響檢測(cè)結(jié)果。
(2)壓脈帶使用時(shí)間應(yīng)少于1分鐘,以免引起血液淤滯,超成血管內(nèi)溶血或血液某些成分的改變,特別是測(cè)定乳酸時(shí)不可使用壓脈帶,否則結(jié)果偏高。
(3)避免溶血,溶血會(huì)使血鉀、膽紅素以及一些酶(如LDH)等指標(biāo)的結(jié)果出現(xiàn)明顯偏差。
13.1.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢。送檢過(guò)程中應(yīng)避免日光直接照射,且注意不要?jiǎng)×艺鹗帯?/p>
13.1.4標(biāo)本處理和存儲(chǔ)
標(biāo)本應(yīng)及時(shí)分離血清,盡快檢驗(yàn)。由于血細(xì)胞的代謝、氣體交換及物質(zhì)轉(zhuǎn)移使細(xì)胞內(nèi)外多種成分發(fā)生變化,導(dǎo)致分析結(jié)果出現(xiàn)誤差,如血氨、二氧化碳測(cè)定的標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),氨和二氧化碳會(huì)揮發(fā),影響檢測(cè)結(jié)果。血液中的酶在室溫下放置,活性會(huì)逐漸降低。血液放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),葡萄糖會(huì)減低,血鉀會(huì)升高。實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)保持在15℃~25℃,防止標(biāo)本水分蒸發(fā),標(biāo)本濃縮。如不能及時(shí)檢測(cè),可將血清于4℃冰箱放置2~3天,但大多數(shù)酶類(lèi)不管在什么溫度下保存,其活性都會(huì)有一定損失。
13.1.5標(biāo)本拒收
標(biāo)本量過(guò)少,試管用錯(cuò),溶血以及嚴(yán)重脂血的標(biāo)本可拒收。
13.2血?dú)鈽?biāo)本的采集
13.2.1患者準(zhǔn)備
患者采血前解除恐懼心理,保持安靜是很重要的條件,以免造成血?dú)庹`差,也減少患者的疼痛。13.2.2標(biāo)本采集
采用動(dòng)脈血,取橈動(dòng)脈、肱動(dòng)脈、股動(dòng)脈、足背動(dòng)脈均可,最常取橈動(dòng)脈。取血的注射器需用肝素(1000U/ml)抗凝,肝素應(yīng)充分濕潤(rùn)注射器內(nèi)壁但不過(guò)量,血標(biāo)本要隔絕空氣,可在針尖插入一橡皮塞,然后用兩手滾動(dòng)
注射器使標(biāo)本充分混合達(dá)到抗凝,如發(fā)現(xiàn)混有小氣泡時(shí),可將針管豎直,立即排出氣泡,避免血液與氣泡震動(dòng)。
13.2.3標(biāo)本運(yùn)送
抽血后要求嚴(yán)加密封,不能接觸空氣,立即混合均勻送檢,天熱可放冰壺中送檢。
13.2.4標(biāo)本處理和儲(chǔ)存
采集后應(yīng)盡快檢驗(yàn),不宜放置過(guò)久,以免影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。如不能及時(shí)檢測(cè),應(yīng)保存于4℃冰箱中,時(shí)間不超過(guò)2小時(shí),測(cè)定時(shí)再在室溫放置數(shù)分鐘,并充分混勻。
13.2.5標(biāo)本拒收
血?dú)鈽?biāo)本在采集和運(yùn)送過(guò)程中,封閉的皮塞脫落或密封失敗的標(biāo)本應(yīng)拒收;未按要求及時(shí)送檢、體積不足、標(biāo)識(shí)不正確的標(biāo)本應(yīng)拒收。
14臨床免疫檢驗(yàn)標(biāo)本的采集
14.1體液免疫、細(xì)胞免疫
14.1.1患者準(zhǔn)備
患者應(yīng)遵守醫(yī)囑用藥,特別要告知主管醫(yī)師服藥情況。采集血液標(biāo)本,以晨起空腹12小時(shí)以上為最佳?;颊弑苊鈩×疫\(yùn)動(dòng),保持情緒穩(wěn)定。
14.1.2標(biāo)本采集
體液免疫的標(biāo)本使用真空采血管采集空腹靜脈血3ml,不抗凝,即紅頭管。細(xì)胞免疫的標(biāo)本使用EDTA.2K類(lèi)抗凝劑抗凝管采集抗凝血1-2ml,即紫頭管,不得使用分離膠真空管。
14.1.3標(biāo)本運(yùn)送
采血后應(yīng)密閉,盡快送檢,途中注意不要?jiǎng)×艺鹗?,避免過(guò)大的溫度變化。
14.1.4標(biāo)本處理和儲(chǔ)存
常規(guī)分離血清,避免溶血。測(cè)定IG時(shí)最好使用新鮮血清或保存于4℃條件下且不超過(guò)72小時(shí)的血清。補(bǔ)體應(yīng)立即檢測(cè),室溫不得超過(guò)6小時(shí),2~8℃不得超過(guò)24小時(shí)。
14.1.5標(biāo)本拒收
試管錯(cuò)誤標(biāo)本、溶血標(biāo)本、陳舊標(biāo)本、標(biāo)識(shí)有誤標(biāo)本拒收。
14.2病毒性肝炎血清標(biāo)志物、HIV抗體的檢測(cè)
14.2.1患者準(zhǔn)備
不需要強(qiáng)調(diào)患者禁食。
14.2.2標(biāo)本采集
使用一次性真空管采集靜脈血3ml,可以使用血清或血漿,即紅頭管和綠頭管都可,但建議使用血清。14.2.3標(biāo)本運(yùn)送
采血后應(yīng)密閉,注意不要?jiǎng)×艺鹗帯?/p>
14.2.4標(biāo)本處理和儲(chǔ)存
標(biāo)本應(yīng)盡快分離血清,及時(shí)測(cè)定。標(biāo)本于4℃條件下保存5天或-70~-20℃保存數(shù)年,抗體滴度穩(wěn)定。不得反復(fù)凍融。不得使用防腐劑。
14.2.5標(biāo)本拒收
溶血標(biāo)本、反復(fù)凍融的標(biāo)本、細(xì)菌污染的標(biāo)本拒收。14.3抗“O”、類(lèi)風(fēng)濕因子14.3.1患者準(zhǔn)備
了解患者服藥史;告知患者應(yīng)禁食12小時(shí)以上。14.3.2標(biāo)本采集
使用一次性真空采血管,不需抗凝,即用紅頭管。14.3.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢,容器密閉,注意避光。14.3.4標(biāo)本處理和儲(chǔ)存
標(biāo)本密閉,垂直放置,凝集充分后一次完成離心。分離好的血清應(yīng)及時(shí)測(cè)定。若8小時(shí)內(nèi)不能完成檢測(cè),血清應(yīng)置于2~8℃保存。若24小時(shí)內(nèi)不能完成檢測(cè),應(yīng)于-20℃保存或冰凍保存。14.3.5標(biāo)本拒收
溶血標(biāo)本,標(biāo)本不足的標(biāo)本。
14.4TORCH、呼吸道疾病抗體、生殖道感染抗體、自身免疫抗體譜14.4.1患者準(zhǔn)備
一般不需要禁食,但應(yīng)忌油膩食物。14.4.2標(biāo)本采集
使用真空采血管,血清或血漿都可。14.4.3標(biāo)本運(yùn)送
容器密閉,避免劇烈震蕩。14.4.4標(biāo)本處理和儲(chǔ)存
分離血清時(shí)應(yīng)避免溶血,檢測(cè)時(shí)最好使用新鮮血清或保存于4℃條件下且不超過(guò)24小時(shí)的血清,較長(zhǎng)時(shí)間保存應(yīng)在-20℃以下,且避免反復(fù)凍融。14.4.5標(biāo)本拒收
采集后未按要求儲(chǔ)存及處理的標(biāo)本、溶血標(biāo)本、標(biāo)識(shí)有誤的標(biāo)本拒收。15臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集15.1下呼吸道標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收15.1.1送檢指征
(1)下呼吸道感染患者可有發(fā)熱、咳嗽和咳痰,痰呈膿性、粘稠或血性,可伴有胸痛、氣急、甚至呼吸困難,肺部可聞及濕羅音;
(2)白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞比例明顯增高,甚至核左移是下呼吸道感染最常見(jiàn)的癥狀,咳嗽的性質(zhì)與痰的性狀如膿或鐵銹樣痰具有鑒別診斷意義,應(yīng)采集標(biāo)本送檢。
(3)X線檢查提示肺部有炎癥性浸潤(rùn)或胸腔積液等,嚴(yán)重者可導(dǎo)致感染性休克和呼吸衰竭;(4)下呼吸道標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)檢查對(duì)臨床診斷和治療具有重要意義;
(5)對(duì)嬰幼兒最常見(jiàn)的是發(fā)熱、氣急和呼吸困難等癥狀。15.1.2標(biāo)本采集
標(biāo)本采集應(yīng)在臨床工作人員指導(dǎo)下進(jìn)行,并盡可能在抗菌藥物使用之前采集;對(duì)可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS、肺炭疽、肺鼠疫等)的患者采集檢驗(yàn)標(biāo)本時(shí)必須注意生物安全防護(hù),一般采用以下幾種方法:(1)自然咳痰法
晨痰最佳,患者清晨起床后,用清水或牙刷清潔口腔和牙齒,有假牙者應(yīng)取下假牙。用力深咳,從氣管咳出呼吸道深部的痰,痰直接吐入無(wú)菌、清潔、干燥、不滲漏的廣口帶蓋容器中,標(biāo)本量≥1ml,立即送檢。。對(duì)于痰量少、無(wú)痰或咳痰困難者可霧化吸入加溫至45℃的100g/L無(wú)菌Nacl水溶液,使痰液易于排出。(2)支氣管鏡采集法
由臨床醫(yī)生按相應(yīng)操作規(guī)程采集。用支氣管鏡在肺內(nèi)病灶附近用導(dǎo)管吸引或用支氣管刷直接取得標(biāo)本,該方法對(duì)患者有一定痛苦,不易接受。(3)防污染毛刷采集法和支氣管肺泡灌洗法
由臨床醫(yī)生按相應(yīng)操作規(guī)程采集,采集標(biāo)本放入痰杯中,標(biāo)本量應(yīng)大于1ml,立即送檢,必須注意采集標(biāo)本時(shí)盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。(4)胃內(nèi)采痰法
無(wú)自覺(jué)癥狀的肺結(jié)核病人尤其嬰幼兒不會(huì)咳嗽,且有時(shí)將痰誤咽入胃內(nèi),可采集胃內(nèi)容物做結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)。該法應(yīng)于清晨空腹時(shí),將胃管插入胃內(nèi),用注射器抽取胃液。
(5)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子伸入咽部,小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí),可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢。由臨床醫(yī)生采集。15.1.3標(biāo)本的運(yùn)送
標(biāo)本采集后盡快送檢,不能及時(shí)送檢的標(biāo)本,室溫保存≤2小時(shí).15.1.4標(biāo)本的驗(yàn)收
(1)檢查培養(yǎng)杯是否有滲漏、破損或明顯污染;(2)標(biāo)本是否有標(biāo)簽;
(3)檢查培養(yǎng)杯上的標(biāo)簽與申請(qǐng)單是否一致;(4)檢查標(biāo)本是否適量,是否合格。15.2尿液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收15.2.1送檢指征
患者出現(xiàn)以下癥狀和體征之一時(shí),應(yīng)考慮做尿培養(yǎng):(1)尿頻、尿急、尿痛、排尿困難和恥骨上壓痛;(2)肉眼膿尿或血尿;
(3)尿常規(guī)表現(xiàn)為白細(xì)胞和/或亞硝酸鹽陽(yáng)性;(4)不明原因的發(fā)熱,無(wú)其他局部癥狀;(5)留置導(dǎo)尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱;(6)膀胱排空功能受損有尿儲(chǔ)留;
應(yīng)注意兒童和老年患者的尿路感染癥狀通常不典型,且易引起腎臟損害,需特別留意,及時(shí)采集標(biāo)本送檢,以免漏診。15.2.2標(biāo)本采集(1)采集原則
尿標(biāo)本采集應(yīng)在未使用抗生素之前,注意避免消毒劑污染標(biāo)本,應(yīng)保證尿液在膀胱內(nèi)至少停留4小時(shí)以上。(2)采集容器
a容器為不與尿液成分發(fā)生反應(yīng)的惰性材料制成;b清潔、無(wú)菌、加蓋、封閉、防滲漏;c不含防腐劑和抑制劑;
d廣口、具有較寬的底部,容積應(yīng)>50ml,盒蓋易于開(kāi)啟。(3)采集方法
a清潔中段尿:最好留取早晨清潔中段尿,囑咐患者睡前少飲水。清晨起床后肥皂水清洗會(huì)陰部,女性應(yīng)用手分開(kāi)大陰唇,男性應(yīng)翻上包皮,仔細(xì)清洗,再用清水沖洗尿道口周?chē)_(kāi)始排尿,將前段尿排出,中段尿約10~20ml,直接排入專(zhuān)用的無(wú)菌容器中,立即送檢,2小時(shí)內(nèi)接種。標(biāo)本由醫(yī)護(hù)人員采集或醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)由患者正確留取。
b恥骨上膀胱穿刺:由醫(yī)生按無(wú)菌操作技術(shù)采集,使用無(wú)菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集。
c直接導(dǎo)尿:按常規(guī)方法對(duì)會(huì)陰局部進(jìn)行消毒后,用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱獲取膀胱尿液。該法可減少尿液標(biāo)本污染,準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況,但有可能將下尿道細(xì)菌引入膀胱,導(dǎo)致繼發(fā)感染,一般不提倡使用。
d小兒收集包:對(duì)于無(wú)自控能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液,這中裝置由于很難避免會(huì)陰部菌群污染產(chǎn)生假陽(yáng)性,所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)才有意義。如檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性,應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析,必要時(shí)可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍魅∧蛞哼M(jìn)行復(fù)檢。
e留置導(dǎo)尿管收集尿液:利用留置導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時(shí),應(yīng)先消毒導(dǎo)尿管外部,按無(wú)菌操作方法用注射器穿刺導(dǎo)尿管吸收尿液,操作時(shí)應(yīng)防止混入消毒劑,不能從尿液收集袋中采集尿液送檢。15.2.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)送檢,及時(shí)接種,室溫下保存時(shí)間不超過(guò)2小時(shí),4℃保存不超過(guò)8小時(shí)(冷藏保存不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng))。15.2.4標(biāo)本驗(yàn)收
(1)檢查標(biāo)本標(biāo)識(shí)是否與申請(qǐng)單相符;(2)檢查標(biāo)本容器有無(wú)滲漏,滲出、是否加蓋;(3)檢查送檢時(shí)間是否超過(guò)規(guī)定的標(biāo)本保存時(shí)間。15.3血液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收15.3.1采血指征
患者出現(xiàn)以下一種體征時(shí)可作為采血的重要指征:
(1)發(fā)熱(≥38℃)或低溫(≤36℃);(2)寒戰(zhàn);
(3)白細(xì)胞增多(>10×10/L,特別有“核左移”未成熟的或帶狀的白細(xì)胞增多);(4)皮膚粘膜出血;(5)昏迷;
(6)多器官衰竭,血壓降低,CRP升高及呼吸快;
(7)血液病患者出現(xiàn)粒細(xì)胞減少(成熟的多形核白細(xì)胞或同時(shí)具備上述幾種體征時(shí)而臨床可疑菌血癥應(yīng)采集血培養(yǎng)。新生兒菌血癥,應(yīng)同時(shí)做尿液和腦脊液培養(yǎng)。
15.3.2標(biāo)本的采集
(1)皮膚消毒程序:嚴(yán)格執(zhí)行以下三步法a70%酒精檫拭靜脈穿刺部位待30秒以上;
b1%~2%碘酊作用30秒或10%碘伏60秒,從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒,至消毒區(qū)域直徑達(dá)3cm以上。c穿刺后用70%酒精脫碘。對(duì)碘過(guò)敏的患者,用70%酒精消毒60秒,待酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。(2)培養(yǎng)瓶消毒程序
70%酒精或異丙醇檫拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞,作用60秒,然后注入血液。(3)靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序
a在穿刺前或穿刺期間,為防止靜脈滑動(dòng),可戴乳膠手套固定靜脈,手不可接觸穿刺點(diǎn);b用注射器無(wú)菌穿刺取血后,勿換針頭直接注入血培養(yǎng)瓶,或嚴(yán)格按廠商推薦的方法采血。c血標(biāo)本接種到培養(yǎng)瓶后,輕輕混勻以防止血液凝固,立即送檢,切勿冷藏。(4)采血量
成年患者:推薦的采血量為每套不少于10ml,每瓶不少于5ml;嬰幼兒患者:推薦的采血量,每瓶不少于2ml(5)血培養(yǎng)份數(shù)和采血時(shí)間
對(duì)懷疑菌血癥的成人患者,推薦同時(shí)采集2-3套(不同部位)血培養(yǎng)標(biāo)本。嬰幼兒患者,推薦同時(shí)采集2次(不同部位)血培養(yǎng)標(biāo)本。
一次靜脈采血注入到多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份培養(yǎng)或一套血培養(yǎng)。多次采血不應(yīng)在同一部位進(jìn)行,應(yīng)更換部位。對(duì)于間歇性寒顫或發(fā)熱應(yīng)在寒顫或體溫高峰到來(lái)之前0.5~1小時(shí)采集血液。對(duì)于某些全身性和局部感染患者采血培養(yǎng)的建議:
a急性發(fā)熱懷疑菌血癥者,應(yīng)盡量在抗菌藥使用之前,在10分鐘內(nèi)于不同部位采集兩份血標(biāo)本,每一份血標(biāo)本接種需氧和厭氧培養(yǎng)瓶各一個(gè)。
b對(duì)于非急性感染,懷疑有菌血癥者,應(yīng)在24h內(nèi)于不同部位采集采集2~3份血標(biāo)本,每次采血的間隔不應(yīng)小于3h,并應(yīng)于抗菌給藥前采血。
C急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎患者,應(yīng)在在1-2小時(shí)內(nèi)采集3份血標(biāo)本,并盡量在抗菌藥前采血;如果24小時(shí)培養(yǎng)陰性,可再采集3份以上的血標(biāo)本。入院前兩周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者,連續(xù)3天,每天采集2份。
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可選用中和或吸附抗菌藥物的培養(yǎng)瓶。
D亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎患者,在24小時(shí)內(nèi)不同部位采集血液標(biāo)本2或3份,每次間隔大于1h;如果24小時(shí)培養(yǎng)陰性,可再采集2或3份以上的血標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)。
E不明原因發(fā)熱,可在24小時(shí)內(nèi)不同部位采集血液標(biāo)本2或3份,每次間隔大于1h;如果24~48小時(shí)培養(yǎng)陰性,可再采集2或3份以上的血標(biāo)本。
f可疑菌血癥或真菌菌血癥,但血培養(yǎng)持續(xù)陰性,改變血培養(yǎng)條件和方法,以獲得罕見(jiàn)的或苛養(yǎng)的微生物。
g兒童菌血癥患者在24小時(shí)只需要采一次血標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng),需特別注意穿刺部位的消毒,以區(qū)別感染菌和污染菌,由于兒童厭氧菌菌血癥罕見(jiàn),常規(guī)血培養(yǎng)不做厭氧培養(yǎng)。15.3.3標(biāo)本運(yùn)送
采血后立即送檢,如不能立即送檢,室溫保存不得大于2小時(shí),最好置35~37℃孵箱中,切勿冷藏。15.3.4標(biāo)本驗(yàn)收
(1)檢查培養(yǎng)瓶是否有滲漏、破損或明顯污染;(2)檢查瓶子上的標(biāo)簽與申請(qǐng)單是否相符;
(3)檢查血液標(biāo)本是否適量,并在申請(qǐng)單上注明采血量,抗生素使用情況以及采血部位(如靜脈、導(dǎo)管);關(guān)注送檢是否及時(shí)以及血液標(biāo)本是否適量;
(4)對(duì)于延遲送檢的血培養(yǎng)瓶應(yīng)注意肉眼觀察微生物生長(zhǎng)可視信號(hào),如發(fā)現(xiàn)可視信號(hào)提示有微生物生長(zhǎng),應(yīng)該立即直接涂片鏡檢和劃線轉(zhuǎn)種。15.4糞便標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收15.4.1送檢指征
當(dāng)腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時(shí)建議采集糞便標(biāo)本,進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)(1)糞便涂片鏡檢白細(xì)胞>5個(gè)/高倍鏡(2)重癥腹瀉(3)體溫大于38.5℃(4)血便(5)便中有膿液
(6)未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉患者(7)來(lái)自疫區(qū)的患者15.4.2標(biāo)本采集
(1)標(biāo)本采集盡可能在發(fā)病早期和應(yīng)用抗菌藥物治療之前,在不同的時(shí)間采集2~3份標(biāo)本,可提高致病菌的分離率。
(2)自然排便采集標(biāo)本時(shí),取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便1~3g。液體糞便擇取絮狀物,1~3ml,直接裝入無(wú)菌、帶蓋、廣口的培養(yǎng)杯中送檢,送檢的標(biāo)本中不能加入防腐劑。
(3)直腸拭子采集標(biāo)本:適于排便困難者或嬰幼兒??捎梅试硭畬⒏亻T(mén)周?chē)磧?,用無(wú)菌鹽水保存液或增菌液潤(rùn)濕的棉拭子插入肛門(mén),成人4~5cm,兒童2~3cm,與直腸粘膜表面接觸,輕輕旋轉(zhuǎn),必須將拭子置于
適當(dāng)?shù)倪\(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。
15.4.3標(biāo)本的運(yùn)送
(1)糞便標(biāo)本應(yīng)盡快送檢,室溫條件下不超過(guò)2小時(shí)。如不能及時(shí)送檢可加入PH7.0的磷酸鹽甘油或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基,但不宜超過(guò)24小時(shí)。使用改良Cary—Blair培養(yǎng)基時(shí),不能運(yùn)送培養(yǎng)志賀氏菌的標(biāo)本。
(2)直腸拭子采集的標(biāo)本必須置入運(yùn)送培養(yǎng)基或GN肉湯中送檢,轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間不宜超過(guò)2小時(shí)。
(3)高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本運(yùn)送必須符合特殊標(biāo)本的安全要求。
(4)直腸活檢標(biāo)本用糞便培養(yǎng)杯送檢,內(nèi)盛少量無(wú)菌蒸餾水以防標(biāo)本干燥。
15.4.4標(biāo)本驗(yàn)收
(1)對(duì)糞便標(biāo)本放置時(shí)間>2小時(shí),拒絕接收,在申請(qǐng)單注明“標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),請(qǐng)重留標(biāo)本送檢”;
(2)直腸拭子未置于運(yùn)送培養(yǎng)基中,拒絕接收,在申請(qǐng)單注明”標(biāo)本送檢不合格,請(qǐng)重留標(biāo)本送檢”;
(3)送檢的糞便標(biāo)本中混有尿液,拒絕接收,在申請(qǐng)單注明“送檢的標(biāo)本中混有尿液,不合格,請(qǐng)重留標(biāo)本送檢”。
(4)直腸拭子或活檢標(biāo)本干燥,拒絕接收,在申請(qǐng)單注明“標(biāo)本已干燥,不合格,請(qǐng)重留標(biāo)本送檢”。15.5腦脊液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收
15.5.1送檢指征
(1)多數(shù)成人患者癥狀為發(fā)熱、頭痛、惡心、嘔吐以及頸項(xiàng)強(qiáng)直和反射增強(qiáng)等腦膜刺激征的表現(xiàn),腦脊液的典型改變有腰穿時(shí)壓力增高,腦脊液的白細(xì)胞和蛋白增高、糖含量減低和致病菌培養(yǎng)陰性;
(2)嬰幼兒和老年人臨床表現(xiàn)經(jīng)常為不明確和無(wú)特異性,因此對(duì)于嬰兒不明原因發(fā)熱,應(yīng)懷疑為腦膜炎,采集腦脊液及時(shí)送檢。
15.5.2標(biāo)本的采集
(1)采集時(shí)間
懷疑為腦膜炎的病人,應(yīng)立即采集腦脊液,必須在使用抗菌藥物以前采集標(biāo)本。
(2)采集方法:經(jīng)腰穿穿刺采集腦脊液
a用碘酊消毒皮膚;
b在L3-L4、L4-L5或L5-S1間隙插入帶有空心針的空針;
c到達(dá)蛛網(wǎng)膜間隙,拔去空心針,收集腦脊液1~2ml于3支防滲漏的無(wú)菌小瓶中,立即送檢,選取最混濁的一支送做微生物檢查。
d抽取足夠量的腦脊液:用于檢測(cè)細(xì)菌,腦脊液量應(yīng)大于或等于1ml;用于檢測(cè)抗酸桿菌,腦脊液量應(yīng)大于或等于2ml;用于真菌培養(yǎng),腦脊液量應(yīng)大于或等于2ml。
15.5.3標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)
(1)如只采集了一小瓶腦脊液,應(yīng)首先送到微生物室;
(2)做腦脊液培養(yǎng)時(shí),建議同時(shí)做血培養(yǎng);
(3)采集腦脊液的小瓶不需要加入防腐劑;
(4)進(jìn)行腰穿過(guò)程中,嚴(yán)格無(wú)菌操作,避免污染。
15.5.4標(biāo)本的運(yùn)送
采集標(biāo)本后應(yīng)在常溫下立即送檢,否則回影響檢出率,用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本不可置冰箱冷藏或低溫保存,否則會(huì)使病原微生物死亡,尤其是腦膜炎奈瑟氏菌、肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌。
15.5.5標(biāo)本的驗(yàn)收
(1)檢查培養(yǎng)瓶是否有滲漏、破損或明顯污染;
(2)檢查培養(yǎng)瓶是否有標(biāo)簽;
(3)檢查瓶子上的標(biāo)簽與申請(qǐng)單是否相符;
(4)檢查腦脊液標(biāo)本是否足量。
15.6膿液及病灶分泌物標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收
15.6.1送檢指征
包括手術(shù)部位感染、皮膚和軟組織感染、骨骼感染等。
(1)手術(shù)部位感染
a切口感染:手術(shù)后30天內(nèi),皮膚、皮下組織或肌膜層以上組織出現(xiàn)感染征象。
b深部傷口的感染:無(wú)植入物手術(shù)后30天內(nèi);植入物手術(shù)后一年內(nèi),肌膜層以下組織出現(xiàn)感染征象?;颊叱S邪l(fā)熱、局部疼痛或壓痛等臨床癥狀。
(2)皮膚和軟組織的感染
皮膚和軟組織的感染包括皮膚感染、軟組織感染、褥瘡感染、燒傷感染、乳房潰瘍、乳房炎、臍炎等。a皮膚感染:局部出現(xiàn)疼痛、壓痛、紅、腫或熱等臨床癥狀;
b軟組織感染:壞死性筋膜炎、感染性壞疽、壞死性蜂窩組織炎、感染性肌炎、淋巴腺炎、淋巴管炎等患者出現(xiàn)以下任一項(xiàng)時(shí),需采集標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)檢查:局部出現(xiàn)膿性分泌物;手術(shù)或組織兵力檢查發(fā)現(xiàn)膿瘍或其他感染證據(jù);局部疼痛、壓痛、紅、腫或熱等臨床癥狀。
c褥瘡感染:局部出現(xiàn)疼痛、壓痛、紅、腫等臨床癥狀,或者產(chǎn)生膿性分泌物。
d燒傷感染:患者出現(xiàn)以下任一項(xiàng)時(shí),需采集標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)檢查。
①局部出現(xiàn)膿性分泌物;
②燒傷部位發(fā)生明顯變化,如:急速的焦痂剝離、顏色變深或傷口周?chē)[脹,且組織病理檢查發(fā)現(xiàn)微生物侵犯至鄰近組織;
③無(wú)明確的感染存在,但血液培養(yǎng)分離出微生物。
④骨骼感染
a骨髓炎:患者出現(xiàn)以下情況之一者,需采集標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)檢查。
①手術(shù)或組織病理檢查發(fā)現(xiàn)骨髓炎征象;
②未明原因的發(fā)熱,局部舯、紅、壓痛或有引流物等臨床癥狀任兩項(xiàng),血液培養(yǎng)分離出微生物或血液抗原檢測(cè)陽(yáng)性或影像學(xué)提示感染者。
b椎間盤(pán)感染:患者出現(xiàn)以下情況之一者,需采集標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)檢查。
①手術(shù)或組織病理檢查發(fā)現(xiàn)局部有感染征象者;
②未明原因的發(fā)熱、病灶部位疼痛且血液或尿液抗原檢測(cè)陽(yáng)性者;
③未明原因的發(fā)熱或病灶部位疼痛且影像學(xué)提示感染者。
15.6.2標(biāo)本的采集
(1)組織(膿腫周?chē)蚋腥静课幌陆M織)
經(jīng)手術(shù)或活檢獲得的組織是最好的檢測(cè)標(biāo)本,應(yīng)盡快送微生物室,以便及時(shí)、正確地處理。
(2)開(kāi)放性膿腫
以無(wú)菌生理鹽水或70%乙醇擦去創(chuàng)口表面分泌物,盡量抽吸深部膿液送檢,標(biāo)本量≥1ml。
(3)閉合性膿腫
以無(wú)菌生理鹽水或70%乙醇擦去表面分泌物,再抽吸膿腫壁,無(wú)菌操作置入?yún)捬踹\(yùn)送系統(tǒng)。
(4)分泌物
組織和膿液優(yōu)于拭子,若必須使用拭子采集標(biāo)本,則深入傷口,取鄰近新生組織處標(biāo)本,置運(yùn)送培養(yǎng)基運(yùn)送。
(5)常見(jiàn)皮膚軟組織感染標(biāo)本采集
a蜂窩組織炎
以無(wú)菌生理鹽水或70%乙醇清潔局部后,用注射器自炎癥中央(而非邊緣)抽吸。未形成膿腫時(shí),標(biāo)本難以采集,可用小量無(wú)菌生理鹽水灌洗,注入無(wú)菌杯送檢。
b口腔感染
口腔感染包括牙齦、牙周、根尖周感染及潰瘍壞死性口炎。仔細(xì)清潔牙齦及齒緣,去除唾液、碎屑、斑點(diǎn),用牙周刮仔細(xì)刮取齒緣損傷物質(zhì)置厭氧運(yùn)送系統(tǒng)運(yùn)送。以相同方法采集標(biāo)本涂片、染色。c耳部感染
包括內(nèi)耳及外耳感染。鼓膜穿刺術(shù)適用于復(fù)雜的、復(fù)發(fā)的或慢性持續(xù)性中耳炎。
①鼓膜完整時(shí),用肥皂液清洗耳道,鼓膜穿刺術(shù)抽吸膿液置無(wú)菌杯或厭氧運(yùn)送系統(tǒng);
②鼓膜破裂時(shí),通過(guò)反射鏡,用柔軟拭子采集,置運(yùn)送培養(yǎng)基。
③外耳炎時(shí),以濕棉簽清潔耳道,用力轉(zhuǎn)動(dòng)拭子采集標(biāo)本,以免漏檢鏈球菌。
d眼部感染
包括結(jié)膜、角膜、玻璃體感染。由于標(biāo)本量小,推薦在床邊接種平板及涂片。
①以無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)拭子,兩側(cè)分別以不同的拭子在結(jié)膜上滾動(dòng),直接接種血平板及巧克力平板,也可將拭子送實(shí)驗(yàn)室接種。應(yīng)注意即使只有一側(cè)發(fā)生結(jié)膜炎,亦盡能采集雙側(cè)標(biāo)本,以確定局部菌群,與患側(cè)分離菌比較。
②角膜刮取物由眼科醫(yī)生在麻醉下采取(麻醉劑可能抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng),盡量在麻醉前采集結(jié)膜標(biāo)本)。用無(wú)菌刮匙刮取潰瘍或損傷處,刮取物直接接種血平板及巧克力平板及真菌培養(yǎng)基。
③玻璃體抽吸液注入無(wú)菌杯送檢,若標(biāo)本量小,可直接接種培養(yǎng)基。
e導(dǎo)管相關(guān)性感染
懷疑發(fā)生導(dǎo)管相關(guān)性感染時(shí),應(yīng)采集導(dǎo)管做病原學(xué)檢查。采集方法:以70%乙醇消毒導(dǎo)管周?chē)つw,無(wú)菌操作拔除導(dǎo)管,剪下近心端末梢5cm,置無(wú)菌容器,立即送微生物室,以免干燥。
15.6.3標(biāo)本的保存和運(yùn)送
(1)膿液、拭子或厭氧運(yùn)送系統(tǒng),室溫下2小時(shí)內(nèi),最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室。厭氧培養(yǎng)標(biāo)本以
無(wú)菌、無(wú)氧容器及時(shí)運(yùn)送,若不能及時(shí)運(yùn)送,應(yīng)置室溫,不可置冰箱保存。
(2)組織置厭氧運(yùn)送系統(tǒng)或無(wú)菌杯送檢。標(biāo)本量少時(shí),加及滴無(wú)菌生理鹽水保濕。室溫下15分鐘內(nèi),最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室。胃活檢組織室溫下1小時(shí)內(nèi),或者4℃環(huán)境下,最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。
(3)蜂窩組織炎標(biāo)本:無(wú)菌杯(不推薦注射器直接運(yùn)送)室溫下15分鐘內(nèi),最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。
(4)口腔感染標(biāo)本:厭氧運(yùn)送系統(tǒng)室溫下2小時(shí)內(nèi),最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。
(5)耳部感染標(biāo)本:室溫下2小時(shí)內(nèi),最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。外耳標(biāo)本若不能在2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,可于4℃保存,不超過(guò)24小時(shí)。
(6)眼部感染標(biāo)本:培養(yǎng)基或標(biāo)本室溫下15min內(nèi),結(jié)膜拭子2小時(shí)內(nèi),最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。
(7)導(dǎo)管:室溫下15分鐘內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。否則,4℃環(huán)境下,2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。
15.6.4標(biāo)本的驗(yàn)收
(1)檢查容器是否有滲漏、破裂或明顯污染,容器標(biāo)簽與申請(qǐng)單是否一致。
(2)標(biāo)本量、容器、運(yùn)送條件、重復(fù)檢查間隔符合相應(yīng)標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)。
(3)表淺傷口感染標(biāo)本革蘭染色顯微鏡檢查,鱗狀土皮細(xì)胞2+,無(wú)多形核白細(xì)胞,為不可接受標(biāo)本。
(4)標(biāo)本顯微鏡學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)大量鱗狀上皮細(xì)胞,提示正常菌群污染,為不可接受標(biāo)本。
15.7穿刺引流液標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收
15.7.1送檢指征
(1)懷疑結(jié)核性或化膿性胸膜炎,肺炎、肺膿腫、支氣管擴(kuò)張等感染出現(xiàn)胸膜腔積液者;
(2)懷疑細(xì)菌性或結(jié)核性腹膜炎出現(xiàn)腹腔積液者;
(3)心包炎癥出現(xiàn)心臟壓塞和未明原因的滲出性心包炎時(shí),行心包穿刺;
(4)滑膜腔積液采集指針包括:
a手術(shù)中或組織病理檢查發(fā)現(xiàn)感染證據(jù)者;
b不明原因的關(guān)節(jié)紅腫、熱、痛、壓痛、積水或活動(dòng)受限等臨床表現(xiàn)中任意兩項(xiàng),并且關(guān)節(jié)液革蘭染色顯微鏡檢查發(fā)現(xiàn)微生物及白細(xì)胞、或影像學(xué)提示感染,或血液、尿液或關(guān)節(jié)液抗原檢測(cè)陽(yáng)性,或關(guān)節(jié)液化學(xué)及細(xì)胞學(xué)檢查提示感染而與原有風(fēng)濕性病變無(wú)關(guān)者。
15.7.2標(biāo)本采集
一般由臨床醫(yī)生采集穿刺液、引流液標(biāo)本。避免自引流袋采集標(biāo)本,避免以拭子送檢標(biāo)本。
(1)以碘消毒欲穿刺部位皮膚,無(wú)菌操作,經(jīng)皮穿刺抽取體腔積液,注入?yún)捬踹\(yùn)送系統(tǒng)或無(wú)菌杯送檢。亦可直接接種血培養(yǎng)瓶,其中0.5ml注入無(wú)菌杯以備涂片顯微鏡檢查。
(2)細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本量須在1ml以上,診斷非臥床腹膜透析患者腹膜炎時(shí),至少采集10ml標(biāo)本。15.7.3標(biāo)本運(yùn)送
(1)標(biāo)本采集后,應(yīng)及時(shí)送實(shí)驗(yàn)室。室溫下15分鐘內(nèi),最長(zhǎng)不超過(guò)24小時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室。
(2)心包積液以及用于真菌培養(yǎng)的體液,4℃環(huán)境下,不超過(guò)24小時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室。
(3)運(yùn)送容器中應(yīng)加入抗凝劑,以防止運(yùn)送過(guò)程中凝固.
15.7.4標(biāo)本的驗(yàn)收
(1)檢查容器是否有滲漏、破裂或明顯污染,容器標(biāo)簽與申請(qǐng)單是否一致。
(2)標(biāo)本量、容器、運(yùn)送條件、重復(fù)檢查間隔符合相應(yīng)標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)。
15.8生殖道標(biāo)本的采集、運(yùn)送和驗(yàn)收
15.8.1送檢指征
成人患者典型癥狀為尿道口紅腫、瘙癢、燒灼感,有時(shí)尿急及排尿困難,可有稀薄粘液或粘液膿性甚至粘稠膿性分泌物。但是部分患者可無(wú)任何癥狀,或癥狀很輕微。
15.8.2標(biāo)本采集
根據(jù)感染的部位和可能的病原體確定病原學(xué)診斷的標(biāo)本種類(lèi)、采集部位和采集方法等。由于外生殖器存在有正常菌群,所以在采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意盡量減少或避免正常菌群的污染。
(1)尿道分泌物
a男性清洗外尿道,將滅菌拭子插入尿道內(nèi)2~4cm,轉(zhuǎn)動(dòng)并停留2s采集標(biāo)本。
b女性清洗外尿道,用滅菌拭子經(jīng)陰道在恥骨聯(lián)合處按摩尿道采集排出物。
c巴氏腺、尿道旁腺:碘酊消毒皮膚,抽吸液體到滅菌容器中或用滅菌拭子蘸取。
d陰道分泌物:用滅菌拭子擦去多余的分泌物或排出物,棄去;再用另一滅菌拭子或吸管從陰道穹隆粘膜采取分泌物;如果要作涂片,則再用一根拭子。
e宮頸分泌物:用窺器無(wú)潤(rùn)滑劑觀察官頸,用滅菌拭子擦取官頸的粘液和分泌物,棄去;重新用滅菌拭子小心輕輕地從頸管采集標(biāo)本。
f前列腺按摩液:清洗尿道口,從肛門(mén)用手指按摩前列腺,用無(wú)菌拭子或無(wú)菌容器收集前列腺液。g潰瘍分泌物:先用生理鹽水清潔病灶,用滅菌拭子取其邊緣或底部的分泌物。
15.8.3標(biāo)本的運(yùn)送
采集標(biāo)本后應(yīng)立即室溫送檢,否則會(huì)影響檢出率。
15.8.4標(biāo)本的驗(yàn)收
(1)檢查培養(yǎng)容器是否有滲漏、破損或明顯污染。
(2)標(biāo)本是否有標(biāo)簽。
(3)查容器上的標(biāo)簽與申請(qǐng)單是否相符。
(4)檢查標(biāo)本是否適量。
15.9臨床深部真菌感染標(biāo)本的采集
15.9.1標(biāo)本采集的類(lèi)別
(1)各種分泌物和排泄物,泌尿生殖道分泌物、耳垢、痰、糞便、尿液等。
(2)血液和體液,體液包括胸水、腹水、腦脊液、淋巴穿刺液等。
(3)膿汁及滲出物。
(4)其他如眼部、下呼吸道灌洗液等。
15.9.2標(biāo)本采集方法和注意事項(xiàng)
具體采集的方法和注意事項(xiàng)見(jiàn)下表1,除此而外應(yīng)注意以下事項(xiàng):
(1)采集的標(biāo)本量要足,血液和腦脊液標(biāo)本5mL,胸腔液20mL,并且應(yīng)立即送檢,深部真菌標(biāo)本最長(zhǎng)不超過(guò)2h。
(2)對(duì)于高度懷疑深部真菌感染的病人如果靜脈血培養(yǎng)不成功,應(yīng)采用動(dòng)脈血培養(yǎng)。
(3)對(duì)于引流膿腫或潰瘍膿液,最好不用拭子取材,應(yīng)盡可能從損害的深部取材,非引流的皮下膿腫或竇道中的膿液要用無(wú)菌注射器抽吸。
表1真菌感染標(biāo)本的采集方法
注:RT室溫
16分子生物學(xué)標(biāo)本采集
*
16.1HBV-DNA血清采集16.1.1采集容器
無(wú)菌真空采血管(紅頭)16.1.2標(biāo)本采集
以真空采血方式采集被檢者靜脈血2-3ml。16.1.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后放入不易破碎的容器中,在30-40分鐘內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。16.1.4標(biāo)本的處理
室溫(20-25℃)1500轉(zhuǎn)/分離心5分鐘(或按作業(yè)指導(dǎo)書(shū)操作),吸取血清盛入另一支無(wú)菌離心管中備用,(特別注意不要吸入紅血球和嚴(yán)禁溶血,否則易使結(jié)果出現(xiàn)假陰性)。16.1.5標(biāo)本的保存
若標(biāo)本在1-2周內(nèi)檢測(cè),放2-8℃冰箱保存。若在一個(gè)月內(nèi)檢測(cè)放-20℃保存,若長(zhǎng)期保存則放-70℃低溫冰箱或液氮罐中保存。16.2HCV-DNA血漿采集16.2.1采集容器
無(wú)菌真空采血管(紫頭)16.2.2標(biāo)本采集
用EDTA作為抗凝劑,以真空采血方式采集被檢者靜脈2-3ml,混勻(防止劇烈振動(dòng),以免溶血)。若用白細(xì)胞,則同“EB-DNA白細(xì)胞的采集、運(yùn)送和保存的標(biāo)準(zhǔn)操作程序”。16.2.3標(biāo)本運(yùn)送
標(biāo)本采集后放入不易破碎的容器中,在20分鐘內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。16.3性病標(biāo)本采集16.3.1采集容器
無(wú)菌管(灰頭)。16.3.2標(biāo)本采集
(1)尿道分泌物:男性患者需要取尿道分泌物作基因擴(kuò)增相關(guān)檢測(cè)時(shí),應(yīng)由泌尿外科或皮膚科醫(yī)生用專(zhuān)用的棉簽伸進(jìn)尿道口2-4cm轉(zhuǎn)動(dòng)數(shù)圈,將棉簽取下的分泌物洗于無(wú)菌的生理鹽水管中。(一次性)
(2)陰道分泌物:女性病人需清潔外陰,由婦產(chǎn)科醫(yī)生或皮膚科醫(yī)生用專(zhuān)用棉簽取陰道分泌物,洗于無(wú)菌生理鹽水管中。(一次性)
(3)皰液:由于皰液量少,倒掉無(wú)菌的生理鹽水,取入無(wú)菌管(灰頭)。
(4)局部組織:取少許于無(wú)菌生理鹽水的離心管內(nèi),用無(wú)菌生理鹽水洗凈存放在相應(yīng)的溫度環(huán)境備用。(5)尿液:應(yīng)留取前段晨尿送檢。16.3.3標(biāo)本運(yùn)送:立即送實(shí)驗(yàn)室。16.4結(jié)核標(biāo)本的采集程序16.4.1采集容器
無(wú)菌培養(yǎng)杯。16.4.2標(biāo)本采
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