2014年人類白細(xì)胞抗原與乙型病毒性肝炎【藥學(xué)論文】

1/12014年人類白細(xì)胞抗原與乙型病毒性肝炎【藥學(xué)論文】藥學(xué)論文-人類白細(xì)胞抗原與乙型病毒性肝炎【關(guān)鍵詞】人類白細(xì)胞抗原；基因多態(tài)性；乙型病毒性肝炎乙型病毒性肝炎（簡稱乙肝）是目前世界上廣泛流行的傳染病之一，據(jù)不完全統(tǒng)計，全球至少有20億人曾感染過乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus,HBV），約3億人成為慢性感染者，在我國是一種常見的感染性疾病,流行很廣,受其感染的病人可出現(xiàn)不同的疾病表現(xiàn)，如急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化和肝癌等，此病還有家族性,且親子間的感染幾率大于夫妻，嚴(yán)重威脅人類的健康［1］。

人體感染HBV后,出現(xiàn)不同臨床結(jié)果的機制尚不清［2］。

有研究顯示，HBV復(fù)制并不直接損傷肝細(xì)胞,其引發(fā)疾病并出現(xiàn)不同的臨床過程和表現(xiàn)主要決定于個體的免疫狀況［3,4］，也就是說，受個體免疫應(yīng)答能力所決定；而決定宿主免疫應(yīng)答能力最重要的遺傳因素是HLA的等位基因多態(tài)性。

近年來研究表明，人類白細(xì)胞抗原(humanleucocyteantigen,HLA)復(fù)合體與HBV感染之間存在著一定的關(guān)系，某些類型的HLA基因型與HBV感染的慢性化有關(guān)［5］，抗HBV免疫反應(yīng)受HLAⅠ類、Ⅱ類基因的影響［6,7］。

本文從HLA基因型與HBV感染的相關(guān)性、HLA基因與乙肝疫苗應(yīng)答反應(yīng)的關(guān)系2個方面，就近年來有關(guān)報道作一簡要綜述。

1HLA復(fù)合體主要組織兼容性復(fù)合體(majorhistocompatibilitycomplex,MHC)是脊椎動物某一染色體上編碼主要組織兼容性抗原、控制細(xì)胞間相互識別、調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的一組緊密連鎖的基因群。

人類MHC位于第6染色體短臂上大約4000kb范圍內(nèi)，稱人類白細(xì)胞抗原復(fù)合體。

HLA復(fù)合體是迄今所知人類多態(tài)性最豐富的由一系列緊密連鎖的基因座位所組成的遺傳系統(tǒng)，定位于第6號染色體短臂6p2131區(qū)，長3600kb。

此區(qū)域有以下幾個特點：

①是免疫功能相關(guān)基因中最集中、最多的一個區(qū)域，128個基因中39.8%基因產(chǎn)物均有免疫功能；②是基因密度最高的一個區(qū)域，平均每16kb就有一個基因；③是多態(tài)性最豐富的一個區(qū)域；④是與疾病關(guān)聯(lián)最為密切的一個區(qū)域。

HLA復(fù)合體是迄今已知的人體最復(fù)雜的基因體系,并已證實在許多疾病中起重要作用。

它包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ類基因,Ⅰ類基因包括HLAA、B、C及EL位點的等位基因,Ⅱ類基因包括HLADQ、DP、DR3個亞區(qū)和新近確定的DN、DO、DM3個亞區(qū)。

Ⅲ類基因至少包括(HLAc2、Bf、c4A、c4B)36個基因座位,編碼部分補體成分和細(xì)胞因子。

HLAⅠ和Ⅱ類抗原分別是CD8和CD4分子的配體,有穩(wěn)定和促進免疫細(xì)胞間相互結(jié)合、增強免疫應(yīng)答的啟動或效應(yīng)功能,所以它們被認(rèn)為是促進免疫應(yīng)答的一類重要的輔佐分子。

2HLA基因型和HBV感染的相關(guān)性2．1HLA基因型和發(fā)生肝炎的人種、民族和地域有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，在乙肝的發(fā)生中，不同的人種、民族或地域中與之相關(guān)的基因是不同的。

例如HLAA3、HLAB7、HLADR是白人中較為常見的抗原，但在東方人中頻率很低，東方人中常見的HLAB46、HLAD在白人中卻十分罕見［8］。

在歐洲地區(qū)與乙肝的發(fā)生有關(guān)的HLA基因是:HLADR3、DR2、DRB1﹡03、DRB1﹡04、DRB3、A1B8DR3DQ2DPB1﹡0401等；在非洲地區(qū)與之有關(guān)的基因是DRB1﹡1302；在美洲與之有關(guān)的基因是DRBl，其中拉丁美洲與之有關(guān)的是DRB1﹡04、DRB1﹡13［9］。

2．2HLA基因型和HBV感染轉(zhuǎn)歸有關(guān)HBV感染后可引起較廣感染譜，有的感染后成為無癥狀攜帶者或隱匿性肝炎,有的表現(xiàn)為急性肝炎經(jīng)過，有的則遷延不愈成為慢性肝炎，甚至發(fā)生肝硬化或原發(fā)性肝癌［10］,這些不同的臨床轉(zhuǎn)歸是病毒、環(huán)境和宿主遺傳因素三者相互作用的結(jié)果［11,，12］。

許多研究表明,某些HLAⅡ類分子或等位基因與HBV感染的預(yù)后有密切關(guān)系。

山東的袁振華［13］采用聚合酶鏈反應(yīng)－序列特異性引物技術(shù)（PCR/SSCP）分別對慢性乙型肝炎組、HBV攜帶組、HBV感染后自然恢復(fù)組各30例和正常對照組50例進行HLADRB1等位基因的檢測。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)：

HLADRB1﹡1201/﹡1501可能是慢性乙型肝炎HBV攜帶者的易感基因，HLADRB1﹡1201還可能是乙肝肝硬化的易感基因，HLADRB1﹡1501可能是原發(fā)性肝癌的易感基因。

陳冬梅［14］以213例HBV自限性感染者和420例慢性乙肝患者為研究對象,DQA1﹡0102在慢性乙肝組的分布頻率顯著低于HBV自限性感染組,而DQA1﹡0201在慢性乙肝組的分布頻率顯著高于HBV自限性感染組，調(diào)整性別、年齡等混雜因素影響后與HLADQA1其它等位基因相比,攜帶DQA1﹡0102基因者降低慢性乙肝發(fā)生的風(fēng)險，而攜帶DQA10201基因者增加慢性乙肝發(fā)生的風(fēng)險，提示HLADQA1基因多態(tài)性可能是影響HBV感染結(jié)局的重要宿主遺傳因素。

2．3HLA基因型和HBV感染后的清除有關(guān)2.3.1HLAⅠ類分子和HBV感染后的清除HLAⅠ分子在病毒抗原的提呈及其限制的CTL細(xì)胞在抗病毒免疫中具有極其重要的作用。

HLAI分子以膜型和可溶性2種形式存在于體內(nèi)，具有不同的免疫學(xué)功能。

研究表明:正常人肝實質(zhì)細(xì)胞基本不表達或僅微量表達HLAⅠ分子［15］。

在HBV感染時,呈急性經(jīng)過的病例，其肝細(xì)胞表面HLAⅠ的表達明顯增加；而慢性經(jīng)過的病例,情況則相當(dāng)復(fù)雜。

據(jù)報道,大致按慢性活動性肝炎(CAH),慢性遷延性肝炎(CPH)(輕、中、重)肝硬化的次序,膜型HLAⅠ類（mHLAⅠ）在肝細(xì)胞表面呈遞增趨勢［16］。

大量的研究表明,病毒性肝炎時HLAⅠ在肝細(xì)胞的表達和肝細(xì)胞的損害成正相關(guān),損害越重,肝細(xì)胞表面HLAⅠ表達越強［17］。

在慢性病毒性肝炎異常浸潤的淋巴細(xì)胞中以CD8+T淋巴細(xì)胞最為明顯,且和肝細(xì)胞表面HLAⅠ的表達緊密相關(guān)。

可見肝細(xì)胞表面HLAⅠ的表達和病毒的清除密切相關(guān),而肝細(xì)胞表面MhlaⅠ表達相對不足,不能引起足夠有效的免疫反應(yīng)來清除病毒,從而成為肝炎病毒持續(xù)存在的重要原因［18］。

進一步的研究發(fā)現(xiàn),在那些不能自動清除病毒的慢性感染者中HLAⅠ限制的HBeAg特異的CTL反應(yīng)明顯減弱。

最近研究表明,特異性CTL除經(jīng)典的穿孔蛋白途徑外,還能通過非細(xì)胞溶解途徑即細(xì)胞凋亡阻止病毒的復(fù)制使病毒清除,而不引起炎癥反應(yīng)。

細(xì)胞凋亡可發(fā)生在急性或慢性肝炎。

在HBV感染者的肝臟標(biāo)本中,從凋亡小體與淋巴細(xì)胞緊密相連來看,提示以CTL為主的淋巴細(xì)胞通過與特異性靶細(xì)胞蛋白分子包括Fas分子和HLA分子間的相互作用,誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡也是機體清除病毒的有效方式［19］。

RouvierJ［20］等研究發(fā)現(xiàn)靶細(xì)胞表面的HLA和抗原形成的復(fù)合物與效應(yīng)細(xì)胞表面TCR之間的相互作用,可誘導(dǎo)后者表達Fas抗原及其配體。

HLAⅠ限制的CTL所誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡是否受靶細(xì)胞膜上HLAⅠ分子表達的調(diào)控尚需進一步研究。

可溶性HLAⅠ(sHLAⅠ)在一些病毒感染的情況下,sHLAⅠ水平可明顯升高,如巨細(xì)胞病毒,水痘帶狀皰疹病毒及HIVⅠ感染。

為探討sHLAⅠ在病毒性肝炎中的意義,Sakaguch［21］等對9名急性、21名慢性病毒性肝炎患者血清中sHLAⅠ的水平進行了檢測。

結(jié)果表明,急慢性肝炎患者血清中sHLAⅠ的水平明顯高于正常人,且sHLAⅠ的滴度與ALT明顯相關(guān),而和血清中B2M的水平關(guān)聯(lián)較弱。

對6例用干擾素治療的患者血清中sHLAⅠ進行系列檢測發(fā)現(xiàn),這些患者sHLAⅠ水平升高,升高的原因可能是病毒感染的肝細(xì)胞膜表面表達的sHLAⅠ于細(xì)胞的壞死而釋放到血清中。

Puppo［22］等將16名用干擾素治療的丙型肝炎患者分為3組,第1組為應(yīng)答者,第2組為初期應(yīng)答而后復(fù)發(fā)者,第3組為不應(yīng)答者。

對3組病人sHLAⅠ的系列檢測結(jié)果表明,第1組病人治療2周后sHLAⅠ水平明顯升高,然后逐漸開始下降并在治療后一個月回落到治療前水平。

而其它2組sHLAⅠ水平在治療期間及治療后無明顯變化。

目前關(guān)于sHLAⅠ與病毒性肝炎的研究極少,sHLAⅠ分子是否參與病毒性肝炎慢性化機制以及能否作為評價干擾素療效的指標(biāo),仍需進一步研究。

2.3.2HLAⅡ類分子和HBV感染后的清除目前發(fā)現(xiàn),HLADR基因與肝炎的慢性化之間有密切關(guān)系,HLADR基因調(diào)控的免疫反應(yīng)與HBV感染后病毒的清除有關(guān),是決定HBV、感染結(jié)果的重要因素,并且HLADR基因決定宿主免疫環(huán)境與自身免疫性肝炎的發(fā)病有關(guān)。

最早在1984年，F(xiàn)orzaniB報道在Italian病人中，HLADR3可能對慢性HBsAg陽性的肝病不重疊感染HDV有關(guān)，DR2與清除HDV失敗有關(guān)，DR4與機體不持續(xù)染HBV有關(guān)［23］。

1995年4月,ThurszMR也報道DRB11302與機體不持續(xù)感染HBV有關(guān)［24］。

3HLA基因型與乙肝疫苗的應(yīng)答有關(guān)3.1HLAⅠ類限制性的CTL反應(yīng)普遍認(rèn)為HBV對受染肝細(xì)胞不具有直接的細(xì)胞毒性,HBV誘導(dǎo)的肝臟疾病以及HBV的清除過程中,對HBV編碼抗原的細(xì)胞免疫反應(yīng)起著重要的作用。

對受染肝細(xì)胞的清除主要是依靠CD8+CTL細(xì)胞誘導(dǎo)的肝細(xì)胞溶解反應(yīng)。

急性HBV感染者大多表現(xiàn)出較強烈的HLAⅠ類限制性的CTL反應(yīng),而在慢性患者則此類反應(yīng)大多較弱甚或檢不出,而當(dāng)慢性乙肝急性發(fā)作時則CTL反應(yīng)又趨強烈。

由此認(rèn)為較弱的CTL反應(yīng)使對HBV清除不徹底可能是導(dǎo)致HBV感染慢性化的原因。

近年來陸續(xù)有文獻報道HLAA2、A3、A11、A31、Aw68、B7等與特異性CTL反應(yīng)的關(guān)系。

3.2HLAⅡ類限制性的T細(xì)胞反應(yīng)HLAⅡ類限制性的CD4+T細(xì)胞效應(yīng)在HBV的清除中也發(fā)揮重要作用,在利用TheradigmHBV疫苗接種來檢測病人的免疫反應(yīng)的研究中［25］,對TT(破傷風(fēng)毒素)830～843肽段有HTL(輔助性T淋巴細(xì)胞)反應(yīng)的病人也對HBcAg18～27肽段產(chǎn)生了特異性的CTL反應(yīng),這提示在慢性HBV感染者中,TheradigmHBV疫苗免疫性接種后,HTL反應(yīng)的發(fā)生與CTL反應(yīng)的發(fā)展密切相關(guān)。

并且發(fā)現(xiàn)慢性HBV感染者的HTL反應(yīng)發(fā)生率和強度都比正常對照低,這可能與慢性乙肝患者對該疫苗的低免疫反應(yīng)性有關(guān)。

接種乙肝疫苗的應(yīng)答除了和遺傳因素有關(guān)外［26］，不同的人對乙肝疫苗的反應(yīng)不同可能與機體HLA基因的不同有關(guān),獨特的HLA等位基因決定針對HbsAg的疫苗產(chǎn)生不同應(yīng)答情況。

錢毅［27］等研究了1400名廣東漢族人群乙肝疫苗無、弱免疫應(yīng)答與HLADR2、7、9等位基因的相關(guān)性。

結(jié)果發(fā)現(xiàn),廣東漢族人群接種乙肝疫苗的無、弱免疫應(yīng)答與HLA－DR7有關(guān),其強應(yīng)答與HLADR2有關(guān),而與HLADR9無明顯相關(guān)性。

山東的劉海英［28］研究了60例HBsAg陽性產(chǎn)婦所分娩的新生兒，出生24h內(nèi)開始全程免疫接種乙肝疫苗。

結(jié)果12例免疫失敗，48例免疫成功。

分別檢測其HLADR3、DR4、DR13和DR15。

結(jié)果提示，母嬰傳播導(dǎo)致新生兒接種乙肝疫苗免疫失敗與HLADR抗原有關(guān)，HLADR3可能為免疫失敗的易感基因，HLADR15則可能為其保護基因。

HBV感染嚴(yán)重地威脅著人類的健康,免疫反應(yīng)在其發(fā)病以及病毒的清除過程中發(fā)揮了重要作用。

HLA復(fù)合體作為調(diào)節(jié)機體免疫應(yīng)答的重要基因群,與抗HBV免疫反應(yīng)有著密切的關(guān)系。

HLAⅠ類、Ⅱ類限制性的T細(xì)胞反應(yīng)分別在HBV的清除過程中發(fā)揮了重要的作用,較弱的免疫反應(yīng)是造成HBV感染慢性化的原因之一,某些特殊的HLA基因型可能影響著HBV感染的慢性化和免疫反應(yīng)的強弱。

雖然HLA復(fù)合體與HBV感染間的關(guān)系尚難定論,但現(xiàn)有的資料已在實際工作中得到了一定的應(yīng)用(如基因疫苗的研制等)。

世界范圍內(nèi)人類基因組的一個重點就是致病基因和易感基因的定位,其中乙肝發(fā)生的易感基因的定位也屬于其中的一部分,如果找到了乙肝的易感基因,找到了各型乙肝轉(zhuǎn)歸的相關(guān)基因以及機體對乙肝疫苗的無、弱應(yīng)答基因，可以通過基因的測定來預(yù)測乙肝的發(fā)展,從而指導(dǎo)預(yù)防和治療。

相信隨著研究工作的深入,HLA復(fù)合體在HBV感染的預(yù)測、預(yù)防與治療中的作用將進一步明確。

【參考文獻】［1］LAVANCHYD.HepatitisBvirusepidemiology,diseaseburden,treatment,andcurrentandemergingpreventionandcontrolmeasures［J］.ViralHepatitis,2004,11(2):97-107.［2］MARKT.Geneticsusceptibilityinchronicviralhepatitis［J］.AntiviralRes,2001,52(2):113-116.［3］JUNGMC,PAPEGR.ImmunologyofhepatitisBinfection［J］.LancetInfectDis,2002,2(1):43-50.［4］駱抗先.乙型肝炎基礎(chǔ)與臨床［M］.2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:108.［5］蔣業(yè)貴,王宇明.乙型肝炎患者人類白細(xì)胞抗原DRB1、DQA1、DQB1等位基因多態(tài)性分析［J］.中華流行病學(xué)雜志,2004,25(4):337-340.［6］章曉鷹,陳建杰,陳蘭羽,等.乙肝后肝硬化患者HLAA、DRB1等位基因多態(tài)性研究［J］.中國免疫學(xué)雜志,2004,20(12):838-840.［7］蔣雪梅,陳士俊,旭日,等.山東漢族人乙肝患者HLAB基因型的相關(guān)性研究［J］.山東大學(xué)學(xué)報,2005,43(8):737-740.［8］周光炎.免疫學(xué)原理［M］.上海:上海第二醫(yī)科大學(xué)出版社,2000:64-65.［9］ALRICL,FORTM,IZOPETJ,etal.GenesofthemajorhistocompatibilitycomplexclassⅡinfluencetheoutcomeofhepatitisCvirusinfection［J］.Gastroenterology,1997,113(5):1675-1681.［10］LEEWM.HepatitisBvirusinfection［J］.NEnglJMed,1997,337(24):1733-1745.［11］THIOCL,THOMASDL,KARACKIP,etal.ComprehensiveanalysisofclassⅠandclassⅡHLAantigensandchronichepatitisBvirusinfection［J］.Virol,2003,77(22):12083-12087.［12］JIANGYegui,WANGYuming,LIUTonghua,etal.AssociationbetweenHLAclassⅡgeneandserityofthronichepatitisB［J］.WorldGastroenterol,2004,12(3):622-625.［13］袁振華,崔萌,孫成剛,等.HLADRB1﹡1201/﹡1501與HBV感染不同狀態(tài)的相關(guān)性［J］.山東大學(xué)學(xué)報,2005,43(5):429-431.［14］陳冬梅,高冀榮,都特,等.HLADQA1基因多態(tài)性與HBV感染結(jié)局相關(guān)［J］.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2006,26（5）:494-498.［15］PETERT,DCNALDSONJ,MARKF,etal.DualAssociationofHLADR2andDR3withprimarysclerosingcholanditis［J］.Hepatology,1991,13:157.［16］LUISAGB,MIGUELLB,ASUNEIONGS,etal.VariabilityintheexpressionofaB22microglobulinEpitopeonhepatocytesinchronictypeChepatitisontreatmentwithterferon［J］.Hepatology,1993,13:372.［17］JOHNSONYN,GEORGEOLA,NIKOLAIVN,etal.HepaticHLAantigendisplayinchronichepatitisBvirusinfection［J］.DigDisSci,1993,38(5):888.［18］MOSESR,ALECJD,ROGERL,etal.AbrogationofresistancetotheilerqsvirusinduceddemyelinationinH2bmicedeficientinB2microglobulin［J］.Immunol,1994,151∶266.［19］KAGID,VIGNAUXF,LEDERMANNB,etal.FasandperforinpathwaysasmajormechanismofT2cellmediatedcytotoxicity［J］.Science,1994,265∶528.［20］ROUVIERJ,PIERREG.FasinvolvementinCa6independentTcellmediatedcytotoxicity［J］.ExpMed,1993,177∶195.［21］SAKAGUCHIK,KOIDEN,TAKENAMIT,etal.SolubleHLAclassIantigensinseraofpatientswithchronichepatitis［J］.GastroenteroJPN,1992,27:206.［22］PUPPOF,PICCIOTTOA,B