《病毒學(xué)總論》課件

病毒學(xué)

virology病毒的根本性狀3000BC，埃及孟非思壁畫(huà)中長(zhǎng)老患小兒麻痹癥。什么是病毒？

病毒是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、只含有一種類型的核酸、嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的、對(duì)抗生素不敏感，而對(duì)干擾素敏感的非細(xì)胞型微生物。病毒與其它微生物的區(qū)別第一節(jié)病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成病毒體(virion)：具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)和感染性的完整病毒顆粒。一、病毒的大小和形態(tài)大?。?0－250nm左右。形態(tài)：球形、桿狀或絲狀、磚形、子彈形、蝌蚪形等。葡萄球菌(1000nm〕

牛痘病毒300×250nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體

(65×95nm)B、腺病毒

(70nm)C、脊髓灰質(zhì)炎病毒

(30nm)D、乙腦病毒

(40nm)E、蛋白分子

(10nm)F、流感病毒

(100nm)G、煙草花葉病毒二、病毒的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成根本結(jié)構(gòu)：nucleocapsid輔助結(jié)構(gòu)：viralenvelope核衣殼核心衣殼一種類型的核酸小量非結(jié)構(gòu)蛋白殼粒螺旋對(duì)稱20面體立體對(duì)稱復(fù)合對(duì)稱包膜蛋白質(zhì)多糖脂類病毒體結(jié)構(gòu)模式圖殼粒衣殼核心〔核樣物〕核衣殼包膜包膜病毒包膜子?！泊掏弧郴瘜W(xué)組成－病毒核酸?分子量差異顯著：3ＫＢ－400ＫＢ;?多種形式存在：ＲＮＡ或ＤＮＡ；?不同形式復(fù)制；?病毒基因組可相互重疊，轉(zhuǎn)錄的ＲＮＡ前體可以多種方式拼接；?與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)相似，有內(nèi)含子及非編碼區(qū)；?具有感染性。化學(xué)組成－病毒蛋白質(zhì)?

結(jié)構(gòu)蛋白：capsid,envelopeprotein?

非結(jié)構(gòu)蛋白：酶:與病毒復(fù)制有關(guān)的酶；與致病有關(guān)的酶；調(diào)控蛋白：HIVTat,revetc;

病毒衣殼—病毒20面體立體對(duì)稱模式圖

不同病毒核酸結(jié)構(gòu)不同，殼粒數(shù)目和排列也不相同。根據(jù)殼粒的排列方式稱為對(duì)稱，病毒結(jié)構(gòu)由以下幾種對(duì)稱型：Icosahedralsymmetry〔二十面體立體對(duì)稱型〕五鄰體六鄰體病毒衣殼—螺旋對(duì)稱模式圖病毒衣殼—復(fù)合對(duì)稱模式圖衣殼的主要功能：保護(hù)病毒核酸參與感染過(guò)程具有抗原性病毒衣殼—電鏡照片病毒包膜—電鏡照片包膜的主要功能：維護(hù)病毒體結(jié)構(gòu)的完整性與病毒入侵有關(guān)具有抗原性第二節(jié)病毒的增殖一、virusreplicationcircle:吸附(Adsorption)穿入(Penetration)脫殼(Uncoating)生物合成(Biosynthesis)裝配與釋放(AssemblyandRelease)1.吸附Adsorption〔幾分至幾十分鐘〕2-3.Penetration、Uncoating融合---有包膜病毒胞飲---無(wú)包膜病毒直接穿入在溶酶體酶作用下，脫殼。4.生物大分子合成Biosynthesis〔隱蔽期〕6大類型：雙鏈DNA病毒單鏈DNA病毒單正鏈RNA病毒單負(fù)鏈RNA病毒雙鏈RNA病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒區(qū)域：DNA病毒核內(nèi)〔除痘病毒〕RNA病毒胞質(zhì)〔除流感病毒及逆轉(zhuǎn)錄病毒〕生物合成〔以dsDNA為例〕親代DNAmRNA早期蛋白〔酶〕〔功能蛋白〕子代DNA子代mRNA晚期蛋白〔結(jié)構(gòu)蛋白〕子代病毒RNA病毒的生物合成單正鏈RNA=mRNA結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)蛋白中間復(fù)制體子代核酸單負(fù)鏈RNA正鏈RNA蛋白質(zhì)中間復(fù)制體子代核酸〔依賴RNA的RNA多聚酶〕逆轉(zhuǎn)錄病毒病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄酶

RNA:DNA中間體雙鏈DNA整合入細(xì)胞染色體子代病毒mRNA和子代核酸5-7.

assembly，maturation,

andrelease

裝配〔assembly〕釋放〔release〕裂解〔Disintegration〕:nakedviruscausethehostcelllysis出芽〔Budding〕:envelopedviruses二、病毒的生長(zhǎng)曲線1、隱蔽期2、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期3、細(xì)胞死亡期缺陷病毒因病毒基因組不完整或基因發(fā)生改變，而不能進(jìn)行正常增殖所產(chǎn)生的子代病毒。缺陷干擾顆粒(defectiveinterferingparticle,DIP)：缺陷病毒，具有干擾同種成熟病毒體進(jìn)入細(xì)胞的作用。輔助病毒可以輔助缺陷病毒完成正常增殖的病毒。三、與病毒增殖有關(guān)的異?，F(xiàn)象

頓挫感染病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，如細(xì)胞不能為病毒增殖提供所需要的酶、能量及必要的成分，那么病毒在細(xì)胞中不能合本錢身的成分，稱為頓挫感染。非容納細(xì)胞、容納細(xì)胞。干擾現(xiàn)象兩種病毒感染同一種細(xì)胞，常發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒復(fù)制的現(xiàn)象，稱干擾現(xiàn)象。機(jī)制：IFN、受體、DIP。第三節(jié)理化因素對(duì)病毒的影響一、物理因素的影響溫度大多數(shù)病毒耐冷不耐熱。在－70℃〔數(shù)月〕或－196℃〔數(shù)年〕條件下，病毒感染性可保持?jǐn)?shù)月至數(shù)年。一般加熱60℃經(jīng)30min或100℃數(shù)秒鐘可使大多數(shù)病毒滅活。pH值多數(shù)病毒在pH6～8范圍內(nèi)穩(wěn)定。射線和UV射線使核苷酸鏈發(fā)生致死性斷裂；UV那么是在病毒的多核苷酸上形成雙聚體(如胸腺核苷與尿核苷)，抑制病毒DNA或RNA的復(fù)制。二、化學(xué)因素的影響脂溶劑乙醚、氯仿、去氧膽酸鹽等脂溶劑可使有包膜病毒的包膜脂質(zhì)溶解而滅活病毒，失去吸附能力。消毒劑過(guò)氧乙酸、甲醛等均能使大多數(shù)病毒滅活。與細(xì)菌相比，病毒對(duì)消毒劑抵抗力強(qiáng)，特別是無(wú)包膜的小型病毒。中草藥板藍(lán)根、大青葉、大黃、貫仲和七葉一枝花等對(duì)某些病毒有一定的抑制作用。第四節(jié)病毒分類—?jiǎng)游锊《綝NA病毒RNA病毒亞病毒：一類比病毒還小的、結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)單的微生物。包括類病毒和Prion。

病毒的感染與致病機(jī)制第一節(jié)病毒的傳播方式和感染類型一、病毒感染來(lái)源感染途徑傳播方式水平傳播垂直傳播二、病毒感染的類型機(jī)體感染病毒后1.按有無(wú)臨床病癥，可分為隱性感染和顯性感染。2.依病毒感染后在機(jī)體內(nèi)滯留的時(shí)間長(zhǎng)短，分為急性感染和持續(xù)性感染。3.持續(xù)性感染根據(jù)開(kāi)展和預(yù)后又分為慢性感染、潛伏感染、慢發(fā)病毒感染和急性感染的遲發(fā)并發(fā)癥?！惨弧畴[性病毒感染與顯性病毒感染1.隱性病毒感染病毒進(jìn)入機(jī)體后不引起臨床病癥的感染，對(duì)組織和細(xì)胞的損傷不明顯。相關(guān)因素：病毒毒力弱、機(jī)體防御能力強(qiáng)、病毒種類、病毒的性質(zhì)。病毒仍可在體內(nèi)增殖并向外界播散病毒，可成為重要的傳染源。隱性感染者雖不出現(xiàn)臨床病癥，但仍可獲得免疫力而終止感染。病毒攜帶者：有局部隱性感染者一直不產(chǎn)生對(duì)此種病毒的免疫力叫病毒攜帶者，無(wú)病癥，但病毒可在體內(nèi)增殖并向外界排泄播散，也是重要的傳染源。有的病毒如天花病毒、麻疹病毒等進(jìn)入機(jī)體，到達(dá)靶細(xì)胞后大量增殖，使細(xì)胞和組織損傷，機(jī)體出現(xiàn)明顯的臨床病癥，這樣的感染稱為顯性病毒感染或臨床感染；按病癥出現(xiàn)早晚、持續(xù)時(shí)間的長(zhǎng)短以及病毒在體內(nèi)持續(xù)存在狀態(tài)等顯性感染又分為急性病毒感染和持續(xù)性病毒感染兩種。2.顯性病毒感染〔二〕急性(病原消滅型)病毒感染病毒侵入機(jī)體后，在細(xì)胞內(nèi)增殖，經(jīng)數(shù)日以至數(shù)周的潛伏期后突然發(fā)病。在潛伏期內(nèi)：1、病毒增殖到一定水平，由靶細(xì)胞的損傷和死亡而導(dǎo)致組織器官的損傷和功能障礙，出現(xiàn)臨床病癥。2、宿主發(fā)動(dòng)非特異性和特異性免疫因素去除病毒。宿主一般能在病癥出現(xiàn)一段時(shí)間內(nèi)，把病毒去除掉而進(jìn)入恢復(fù)期。特點(diǎn)：為潛伏期短，發(fā)病急，病程數(shù)日至數(shù)周。病后常獲得特異性免疫。因此，特異性抗體可作為受過(guò)感染的證據(jù)?！踩吵掷m(xù)性病毒感染病毒可在機(jī)體內(nèi)持續(xù)存在數(shù)月數(shù)年數(shù)十年?？沙霈F(xiàn)病癥，可不出現(xiàn)病癥而長(zhǎng)期帶病毒，成為重要的傳染源。持續(xù)性病毒感染有病毒和機(jī)體兩方面的因素：機(jī)體免疫功能低下，無(wú)力完全去除病毒；病毒抗原性弱，機(jī)體難以產(chǎn)生免疫應(yīng)答以去除；病毒存在于受保護(hù)的部位或病毒發(fā)生突變,可以逃避宿主免疫作用；某些病毒的抗原性弱，難以產(chǎn)生免疫應(yīng)答；病毒基因整合在宿主細(xì)胞的基因組中，長(zhǎng)期與宿主細(xì)胞共存。持續(xù)性感染有下述四種類型：1．潛伏性病毒感染(latentviralinfection)2．慢性病毒感染〔chronicviralinfection〕3．慢發(fā)病毒感染(slowvirusinfection)或稱遲發(fā)病毒感染(delayedviralinfection)4．急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥〔delayedcomplicationafteracuteviralinfection〕1.潛伏性病毒感染經(jīng)急性或隱性感染后，病毒基因組存在于一定組織或細(xì)胞內(nèi)，但并不能產(chǎn)生有感染性的病毒體。在某些條件下病毒被激活而急性發(fā)作，病毒僅在臨床出現(xiàn)間歇性急性發(fā)作時(shí)才被檢出。在非發(fā)作期，用一般常規(guī)法不能別離出病毒。

例如，單純皰疹病毒Ⅰ型〔HSV-1〕感染水痘帶狀皰疹病毒〔VZV〕感染2.慢性病毒感染經(jīng)顯性或隱性感染后，病毒并未完全去除，可持續(xù)存在于血液或組織中并不斷排出體外，病程長(zhǎng)達(dá)數(shù)月至數(shù)十年?；颊呖杀憩F(xiàn)輕微或無(wú)臨床病癥。如乙型肝炎病毒〔HBV〕、巨細(xì)胞病毒〔CMV〕及EB病毒〔EBV〕等常形成慢性感染。3.慢發(fā)病毒感染病毒感染后潛伏期很長(zhǎng)可達(dá)數(shù)月、數(shù)年甚至數(shù)十年之久。此時(shí)機(jī)體無(wú)病癥，也別離不出病毒。一旦發(fā)病出現(xiàn)慢性進(jìn)行性疾病，最終常為致死性感染。如：AIDS、羊瘙癢病〔scrapie〕、人克雅病〔CJD〕、庫(kù)魯病〔Kuru〕等。庫(kù)魯病是朊病毒感染機(jī)體后，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)達(dá)數(shù)十年的潛伏期后，引起的一種進(jìn)行性小腦退行性疾病。4.急性病毒感染的遲發(fā)并發(fā)癥急性感染后1年或數(shù)年，發(fā)生致死性的病毒病。如亞急性硬化性全腦炎〔SSPE〕。該病是在兒童期感染麻疹病毒后，有些到青春期才表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，用電鏡在腦組織中可查到類似麻疹病毒樣顆粒。有人認(rèn)為這是麻疹病毒的缺陷病毒。第二節(jié)病毒的致病機(jī)制病毒能否感染機(jī)體引起疾病取決于病毒的致病性病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)增殖，導(dǎo)致宿主細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能改變，并擴(kuò)延到多數(shù)細(xì)胞，便可形成組織器官的損傷及功能障礙。宿主免疫力在病毒和機(jī)體細(xì)胞相互作用過(guò)程中，機(jī)體的免疫應(yīng)答有時(shí)也可對(duì)機(jī)體造成某些免疫病理性損傷，介導(dǎo)疾病的發(fā)生與開(kāi)展。一、病毒感染引起宿主細(xì)胞的變化病毒對(duì)細(xì)胞的致病作用包括來(lái)自病毒的直接損傷和機(jī)體免疫病理應(yīng)答兩個(gè)方面。敏感的宿主細(xì)胞被病毒感染后，兩者相互作用下可表現(xiàn)為：溶細(xì)胞作用穩(wěn)定狀態(tài)感染細(xì)胞凋亡包涵體的形成細(xì)胞增生和轉(zhuǎn)化病毒基因的整合

〔一〕溶細(xì)胞作用病毒在宿主易感細(xì)胞內(nèi)增殖成熟后，短時(shí)間釋放大量子代病毒造成細(xì)胞破壞與死亡，這種作用稱殺細(xì)胞效應(yīng)，或稱為溶細(xì)胞作用。主要見(jiàn)于無(wú)包膜，殺傷性強(qiáng)的病毒。病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞變性、死亡裂解的作用稱病毒的細(xì)胞病變效應(yīng)〔cytopathiceffect,CPE〕。病毒培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的CPE

(二)穩(wěn)定狀態(tài)感染

一些不具有殺細(xì)胞效應(yīng)的病毒〔多為有包膜病毒〕所引起的感染稱穩(wěn)定狀態(tài)感染(steadystateinfection)。病毒在感染宿主細(xì)胞的過(guò)程中，對(duì)細(xì)胞代謝、溶酶體膜影響不很大。成熟的病毒多以出芽方式釋放出來(lái)，其過(guò)程緩慢、病變輕微，細(xì)胞暫時(shí)還不會(huì)出現(xiàn)裂解和死亡，但可發(fā)生宿主細(xì)胞膜受體被破壞、細(xì)胞膜成分發(fā)生變化，出現(xiàn)細(xì)胞融合及細(xì)胞外表產(chǎn)生新的抗原等。1.細(xì)胞融合：感染與未感染的細(xì)胞融合，可以使病毒從感染的細(xì)胞直接進(jìn)入相鄰的正常細(xì)胞，有利于病毒在細(xì)胞間的擴(kuò)散。2.細(xì)胞膜出現(xiàn)新抗原：病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖過(guò)程中，將病毒基因編碼的蛋白質(zhì)插入細(xì)胞膜外表，導(dǎo)致細(xì)胞膜外表抗原的改變。有利于進(jìn)行病毒感染的診斷?！踩臣?xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡〔cellapoptosis〕是由細(xì)胞基因自身指令發(fā)生的一種生物學(xué)過(guò)程。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)有些病毒〔腺病毒、人免疫缺陷病毒等〕增殖可直接誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，也可通過(guò)病毒基因組編碼的蛋白質(zhì)間接作用下誘發(fā)細(xì)胞凋亡?！菜摹嘲w的形成某些受病毒感染的細(xì)胞內(nèi)，用普通光學(xué)顯微鏡可看到有與正常細(xì)胞結(jié)構(gòu)和著色不同的圓形或橢圓形斑塊，稱為包涵體〔inclusionbodyoribclusion〕。因病毒種類不同，包涵體有位于胞漿內(nèi)的(痘病毒)，也有在細(xì)胞核內(nèi)的(皰疹病毒)；或者兩者都有(麻疹病毒)；有嗜酸性的或嗜堿性的。包涵體的本質(zhì)：①有些病毒的包涵體就是病毒顆粒的聚集體；②有些是病毒增殖留下的痕跡；③病毒感染引起的細(xì)胞反響物。可作為診斷依據(jù)和鑒定病毒的參考。如從可疑為狂犬病的腦組織切片或涂片中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)有嗜酸性包涵體，即內(nèi)基小體(Negribody)，可診斷為狂犬病?！参濉臣?xì)胞轉(zhuǎn)化增生和病毒基因組的整合某些DNA病毒的全部或局部核酸，或RNA病毒基因組經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)生的DNA，結(jié)合至細(xì)胞染色體中，稱為整合。整合作用可使細(xì)胞遺傳性狀發(fā)生改變，即轉(zhuǎn)化〔transformation〕。轉(zhuǎn)化的細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂失控，細(xì)胞可發(fā)生惡性變。病毒的致腫瘤作用二、病毒感染引起的機(jī)體變化

(一)組織器官的損傷及組織器官的親嗜性病毒對(duì)細(xì)胞的殺傷作用，在大多數(shù)情況下，必然導(dǎo)致組織和器官的損傷和功能障礙。病毒對(duì)人體組織的致病作用是有選擇性的。例如，流感病毒和鼻病毒對(duì)呼吸道粘膜有親嗜性；天花病毒和皰疹病毒對(duì)皮膚粘膜細(xì)胞有親嗜性；而腦炎病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒那么對(duì)神經(jīng)組織具有親嗜性?！捕?免疫病理?yè)p傷1．體液免疫病理作用許多病毒如狂犬病病毒、HSV、流感病毒等有包膜病毒侵入細(xì)胞后，能誘發(fā)細(xì)胞外表出現(xiàn)新抗原。這種抗原與特異性抗體結(jié)合后，在補(bǔ)體參與下引起細(xì)胞的破壞。2．細(xì)胞免疫病理作用細(xì)胞免疫在某些病毒感染的恢復(fù)上起著重要作用。但特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)可以同時(shí)損傷受病毒感染而出現(xiàn)膜新抗原的靶細(xì)胞。病毒蛋白亦可因與宿主細(xì)胞的某些蛋白間存在共同抗原性而導(dǎo)致自身免疫應(yīng)答。由于某些病毒可引起免疫病理性損傷，因此，一般在臨床上不宜應(yīng)用免疫功能增強(qiáng)劑治療這類疾病。綜上，病毒感染早期所致細(xì)胞損傷主要是病毒引起，感染后期由免疫復(fù)合物、補(bǔ)體活化、ADCC作用、CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的復(fù)雜反響引起機(jī)體局部組織器官的嚴(yán)重?fù)p傷和炎癥。(三)病毒感染對(duì)免疫系統(tǒng)的影響

1．病毒感染引起的免疫抑制許多病毒感染可引起暫時(shí)性免疫抑制。如麻疹病毒、風(fēng)疹病毒、CMV等感染，急性期和恢復(fù)期患者外周血淋巴細(xì)胞對(duì)特異性抗原和促有絲分裂原(PHA、ConA〕的反響減弱。同時(shí)，對(duì)結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)也出現(xiàn)轉(zhuǎn)陰的情況。2．病毒感染對(duì)免疫活性細(xì)胞的殺傷已發(fā)現(xiàn)引起AIDS的人類免疫缺陷病毒(HIV〕對(duì)輔助性T細(xì)胞(CD4＋)具有強(qiáng)親和性和殺傷性。因而在感染者出現(xiàn)CD4＋細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞數(shù)相對(duì)增多，兩種細(xì)胞比值倒置的現(xiàn)象。3．病毒感染引起自身免疫性疾病隱蔽在細(xì)胞內(nèi)的一些抗原暴露或釋放出來(lái)；病毒抗原也可能與機(jī)體細(xì)胞結(jié)合，改變細(xì)胞外表結(jié)構(gòu)成為“非已物質(zhì)〞，這些細(xì)胞可成為靶細(xì)胞而受到免疫細(xì)胞和免疫因子的作用，從而發(fā)生自身免疫性疾病。第三節(jié)抗病毒免疫AntiviralImmunity

干擾素定義：由病毒或其他干擾素誘生劑刺激人或動(dòng)物細(xì)胞所產(chǎn)生的一類分泌性蛋白具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)活性。

種類：種類 產(chǎn)生細(xì)胞 抗病毒免疫調(diào)節(jié)抗腫瘤

人白細(xì)胞 強(qiáng) 弱 弱

人成纖維細(xì)胞強(qiáng)弱弱

T細(xì)胞 弱 強(qiáng)強(qiáng) 抗病毒意義：抗病毒特點(diǎn)種的特異性、間接性、廣譜性早期中斷病毒復(fù)制，阻止病毒擴(kuò)散Lysisofvirus-infectedcellsbycytotoxiceffectorcells體液免疫病毒中和抗體：針對(duì)病毒某些外表抗原血凝抑制抗體：血凝素補(bǔ)體結(jié)合抗體：病毒內(nèi)部抗原或外表非中和抗原HumoralImmunityMechanismsofvirusneutralizationbyantibodyatthecellularlevelExtracellularneutralizationofvirusbyantibodyAntibodydependentcellularcytotoxicityorADCC細(xì)胞免疫細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞直接殺傷靶細(xì)胞〔細(xì)胞裂解、細(xì)胞凋亡〕分泌多種細(xì)胞因子〔IFN－gamma、TNF〕等發(fā)揮抗病毒作用。Th1細(xì)胞Lysisofvirus-infectedcellsbycytotoxiceffectorcellsCell-mediatedeventsinviralinfections抗病毒免疫持續(xù)時(shí)間牢固持久免疫力有病毒血癥的全身性病毒感染：水痘、天花單一血清型的病毒感染：乙型腦炎病毒短暫免疫力局部或粘膜外表感染：流感病毒、鼻病毒多血清型病毒感染：鼻病毒易發(fā)生抗原變異的病毒感染：流感病毒

病毒感染的診斷與防治常用的病毒學(xué)診斷方法包括：病毒的別離鑒定病毒的血清學(xué)檢查病毒蛋白和核酸的檢測(cè)一、病毒感染的診斷〔一〕標(biāo)本的采取與送檢應(yīng)注意以下原那么：1.對(duì)本身帶有雜菌(如咽拭子、糞便)或易受污染的標(biāo)本，要進(jìn)行病毒別離培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)使用抗生素。2.因病毒在室溫中易失去活性，標(biāo)本應(yīng)低溫保存并盡快送檢。3.血清學(xué)診斷標(biāo)本的采取應(yīng)在發(fā)病初期和病后2～3w內(nèi)各取1份血清，以便比照雙份血清抗體效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化?！捕巢《镜膭e離與鑒定病毒的別離1.動(dòng)物接種是最原始的病毒培養(yǎng)方法，根據(jù)病毒種類不同，選擇敏感動(dòng)物及適宜接種部位，如嗜神經(jīng)性病毒〔狂犬病毒〕可接種于小鼠腦內(nèi)，痘病毒可接種于家兔角膜或皮內(nèi)。

細(xì)胞的變化有些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)可引起特有的細(xì)胞病變，稱為細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect，CPE)。常見(jiàn)的變化有細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等。有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等作用于細(xì)胞膜，可使鄰近的細(xì)胞相互融合，形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞。有些病毒(如狂犬病病毒、麻疹病毒等)可在培養(yǎng)細(xì)胞中形成胞漿或核內(nèi)的包涵體。病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo)病毒培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的CPE2.紅細(xì)胞吸附(hemadsorption,HAd)流感或副流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素(haemagglutinin,HA)，具有吸附脊椎動(dòng)物(豚鼠、雞、猴等)紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱紅細(xì)胞吸附，常用來(lái)測(cè)定具有HA的粘病毒與副粘病毒的增殖。假設(shè)有相應(yīng)的抗血清，那么能中和細(xì)胞膜上的HA，HAd不再發(fā)生，稱紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)。3.干擾現(xiàn)象(int