氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測定植物油中的非皂化物質(zhì)

背景介紹隨著我國近年來植物油的大力發(fā)展，植物油市場極大豐富。但是，摻假、偽劣的植物油甚至地溝油依然流入市場，不僅欺騙消費(fèi)者，還危害著消費(fèi)者的健康安全。非皂化物質(zhì)是植物油的一類特征成分。目前，國內(nèi)外對植物油非皂化物質(zhì)氣相色譜質(zhì)譜法的研究主要集中在分別分析角鯊烯、甾醇以及其他萜類物質(zhì)的成分上，但是分析的植物油種類及數(shù)量較少，針對大量市售植物油中能實(shí)現(xiàn)分析多種非皂化物質(zhì)并用于植物油油鑒定和防偽檢測的研究還未有報(bào)道。本文將專攻植物油非皂化物質(zhì)的檢測分析，探究少有報(bào)道的配有HP-5MS色譜柱的氣相色譜質(zhì)譜的檢測分析能力，拓展已有的氣相色譜質(zhì)譜檢測技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了甾醇及角鯊烯物質(zhì)的同時(shí)分析。文章亮點(diǎn)1.建立了測定植物油中的非皂化成分（角鯊烯及甾醇物質(zhì)）的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析方法，其檢測限均小于2.00mg/L，加標(biāo)回收率為90.12%～112.42%。2.詳細(xì)分析山茶油、大豆油、玉米胚芽油的品質(zhì)差別，從非皂化物質(zhì)的水平揭示各種植物油之間的差異，為以非皂化物質(zhì)探究山茶油的鑒定與防偽檢測提供依據(jù)。內(nèi)容簡介1

實(shí)驗(yàn)部分1.1

主要儀器與試劑1.2

實(shí)驗(yàn)方法1.2.1

溶液配制1.2.2

植物油前處理1.2.3

標(biāo)準(zhǔn)樣品配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作1.2.3.1

標(biāo)準(zhǔn)曲線儲(chǔ)備溶液1.2.3.2

標(biāo)準(zhǔn)曲線工作溶液用正己烷稀釋上述儲(chǔ)備液，使得b-谷甾醇的濃度梯度為8.0、80.0、8.0′102、4.0′103、1.0′104mg/L，其他各物質(zhì)混合標(biāo)樣溶液的濃度梯度為5.0、50.0、2.5′102、1.0′103、2.5′103mg/L。1.2.4

GC-MS色譜條件1.2.5

精密度與準(zhǔn)確度本文用濃度為100mg/L角鯊烯、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、羽扇豆醇、環(huán)阿屯醇的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行檢測6次，以相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）值評(píng)價(jià)儀器的精密度。2

結(jié)果與討論2.1

非皂化物質(zhì)的衍生GC-MS最初檢測條件參考文獻(xiàn)[13]中β-谷甾醇檢測方法并進(jìn)行了優(yōu)化。2.2

色譜條件的優(yōu)化的研究基于上述研究結(jié)果，采用上述GC-MS條件對山茶油實(shí)際樣品進(jìn)行處理分析，結(jié)果顯示在30～35min之間色譜峰重疊嚴(yán)重，樣品中被分析物的干擾較為嚴(yán)重且未達(dá)到基線分離，無法通過色譜峰進(jìn)行定性或定量分析。2.3

GC-MS檢測分析植物油中常見的6種非皂化物質(zhì)為確定植物油中常見的6種甾醇及角鯊烯物質(zhì)在該色譜條件下能達(dá)到基線分離，本文采用混標(biāo)樣和上述優(yōu)化后的色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣分析，測試條件如下：程序升溫條件：180℃保持1min；然后以8℃/min升至250℃，保持10min；再以2℃/min升至280℃，保持15min；分流比：1:20。結(jié)果如圖2所示。2.4

植物油中的非皂化物質(zhì)的分析檢測情況2.4.1

實(shí)際樣品的分析情況從圖3a中可以看出山茶油的各非皂化物質(zhì)基本達(dá)到基線分離，其保留時(shí)間在18.672、31.957、33.105、35.084、36.264、36.800min，分別為角鯊烯、菜油甾醇三甲基硅醚、豆甾醇三甲基硅醚、β-谷甾醇三甲基硅醚、羽扇豆醇三甲基硅醚和環(huán)阿屯醇三甲基硅醚。2.4.2

回收率方法的回收率采用標(biāo)準(zhǔn)添加法進(jìn)行測定和計(jì)算。本文對抽提的樣品再添加75mg/L或300mg/L混標(biāo)溶液后衍生再進(jìn)行分析測定，并計(jì)算得出相對應(yīng)的加標(biāo)回收率，結(jié)果見表2。2.4.3

大豆油、玉米油和山茶油中非皂化物質(zhì)的分析對9種油品的非皂化物質(zhì)進(jìn)行峰面積統(tǒng)計(jì)計(jì)算其在實(shí)際油品中的含量，結(jié)果見表3。3

結(jié)論本文采用氣相色譜質(zhì)譜法檢測植物油中的角鯊烯、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、羽扇豆醇和環(huán)阿屯醇。它們的檢測限均低于2.00mg/mL，其保留時(shí)間RSD值均<8%，峰面積RSD值均<10%，方法的回收率為90.12%～112.42%，說明該方法精密度較好且準(zhǔn)確可靠。此外，本文中通過對比傳統(tǒng)固相萃取前處理方法，發(fā)現(xiàn)直接皂化抽提衍生可獲得更好的回收率。最后，采用所建立的方法實(shí)現(xiàn)了山茶油、大豆油及玉米油實(shí)際樣本分析，同時(shí)進(jìn)一步采用方差分析結(jié)果表明，山茶油中的豆甾醇的含量與大豆油（或玉米油）中的存在顯著差異，而β-谷甾醇的含量在大豆油與