(高清版)GBT 16886.11-2021 醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第11部分：全身毒性試驗(yàn)

第11部分：全身毒性試驗(yàn)Biologicalevaluationof國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)IGB/T16886.11—2021/ISO Ⅲ V 12規(guī)范性引用文件 1 1 24.1總則 2 24.3動(dòng)物狀況 34.4動(dòng)物飼養(yǎng)與管理 34.5劑量組大小和數(shù)目 34.5.1劑量組大小 34.5.2劑量組數(shù)目 34.5.3對(duì)照設(shè)置 4 44.7樣品制備 4 44.8.1試驗(yàn)樣品接觸 44.8.2劑量體積 44.8.3劑量頻率 54.9體重和飼料/水消耗 54.10臨床觀察 54.11臨床病理學(xué) 54.12解剖病理學(xué) 54.13試驗(yàn)設(shè)計(jì) 64.14試驗(yàn)質(zhì)量 6 6 65.2研究設(shè)計(jì) 6 65.2.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 75.2.3試驗(yàn)條件 7 75.2.5臨床觀察 75.2.6病理學(xué) 8 85.3.1總則 85.3.2結(jié)果評(píng)價(jià) 85.4最終報(bào)告 9 6.1總則 6.2研究設(shè)計(jì) 6.2.3試驗(yàn)條件 6.2.5臨床觀察 6.3評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 6.3.2結(jié)果評(píng)價(jià) 6.4最終報(bào)告 附錄A(資料性)接觸途徑 附錄B(資料性)劑量體積 附錄C(資料性)常見臨床癥狀與觀察項(xiàng)目 附錄D(資料性)建議的血液學(xué)、臨床生化和尿液分析測(cè)量 附錄E(資料性)建議進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)價(jià)的器官清單 附錄F(資料性)醫(yī)療器械全身毒性試驗(yàn)限定的組織病理學(xué)器官清單 21附錄G(資料性)材料介導(dǎo)的熱原信息 附錄H(資料性)大鼠亞慢性全身毒性試驗(yàn)——胃腸外雙途徑接觸 Ⅲ 本文件代替GB/T16886.11—2011《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第11部分：全身毒性試驗(yàn)》,與——GB/T16886.1—2011醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第1部分：風(fēng)險(xiǎn)管理過程中的評(píng)價(jià)與試驗(yàn)——GB/T16886.2—2011醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第2部分：動(dòng)物福利要求(ISO10993-2:2006, 997年首次發(fā)布為GB/T16886.11—1997.2011年第一次修訂：V全身毒性是醫(yī)療器械使用中產(chǎn)生的一種潛在的不良作用。器械或材料的可瀝濾物可以通過吸收、件涉及一般全身毒性評(píng)價(jià)。雖然毒性物質(zhì)的全身性吸收和分布可產(chǎn)生特異性的靶器官或器官系統(tǒng)毒GB/T16886.10和GB/T——第1部分：風(fēng)險(xiǎn)管理過程中的評(píng)價(jià)與試驗(yàn)。目的是保護(hù)人類由于使用醫(yī)療器械所產(chǎn)生的潛在——第2部分：動(dòng)物福利要求。目的在于最大限度利用科學(xué)合理的非動(dòng)物試驗(yàn)，確保用于評(píng)價(jià)醫(yī)———第4部分：與血液相互作用試驗(yàn)選擇。目的是為醫(yī)療器械與血液相互作用評(píng)價(jià)提供通用——第5部分：體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)。目的是為評(píng)定醫(yī)療器械體外細(xì)胞毒性提供試驗(yàn)方法?！?部分：植入后局部反應(yīng)試驗(yàn)。目的是為評(píng)定醫(yī)療器械所用生物材料植入后局部反應(yīng)提供——第7部分：環(huán)氧乙烷滅菌殘留量。目的是為經(jīng)環(huán)氧乙烷(EO)滅菌的單件醫(yī)療器械上EO及V——第17部分：可瀝濾物允許限量的建立。目的是為醫(yī)療器械可瀝濾物允1GB/T16886.11—2021/I本文件規(guī)定了評(píng)價(jià)醫(yī)療器械材料導(dǎo)致潛在不良全身反應(yīng)時(shí)的要求，給出了試驗(yàn)步驟指南。本文件適用于醫(yī)療器械或材料的全身毒性研究。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用ISO10993-1醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第1部分：風(fēng)險(xiǎn)管理過程中的評(píng)價(jià)與試驗(yàn)(Biologicalevalu-ationofmedicaldevices—Part1ISO10993-2醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第2部分：動(dòng)物福利要求(Biologicalevaluationofmedicaldevices—Part2:AnimalwISO10993-1界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。每單位體重或表面積給予的試驗(yàn)樣品的量(如質(zhì)個(gè)體或群體研究對(duì)象中，劑量與特定生物學(xué)反應(yīng)程度之間的關(guān)系。劑量與接觸相關(guān)作用范圍之間的關(guān)系。水或其他與器械使用相關(guān)的液體作用于器械或材料后遷移出的化學(xué)物。采用一種適宜的試驗(yàn)樣品劑量進(jìn)行的單劑量組試驗(yàn)，以判定是否存在毒性危害。2GB/T16886.11—2021/I非限定于機(jī)體與器械接觸部位不良作用的毒性。在24h內(nèi)一次、多次或持續(xù)接觸試驗(yàn)樣品后在72h內(nèi)任何時(shí)間發(fā)生的不良作用。在24h～28d內(nèi)多次或持續(xù)接觸試驗(yàn)樣品后發(fā)生的不良作用。反復(fù)或持續(xù)接觸試驗(yàn)樣品后在動(dòng)物壽命期的某一階段發(fā)生的不良作用。在動(dòng)物的主要壽命期內(nèi)反復(fù)或持續(xù)接觸試驗(yàn)樣品后發(fā)生的不良作用。4基本考慮決定進(jìn)行全身毒性試驗(yàn)之前，應(yīng)考慮按照ISO10993-1。應(yīng)基于對(duì)全身毒性的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定對(duì)進(jìn)行試驗(yàn)的決定進(jìn)行確認(rèn)。應(yīng)按照ISO10993-1中給出的接觸方式和接觸時(shí)間來考慮選擇器械的適宜應(yīng)在最終產(chǎn)品、最終產(chǎn)品和/或材料中的代表性組件上進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)樣品應(yīng)體現(xiàn)器械的正常制造和加工狀態(tài)，若必需偏離，應(yīng)記錄在試驗(yàn)報(bào)告中并說明理由。出于識(shí)別大對(duì)試驗(yàn)樣品的接觸。在設(shè)計(jì)試驗(yàn)時(shí)要考慮的一些因素包括試驗(yàn)樣品的物理和化學(xué)性能，如pH、穩(wěn)定性、黏度、滲透當(dāng)考慮動(dòng)物試驗(yàn)時(shí)，宜分析并采用所有合理并可行的替代、減少及優(yōu)化的替代方法，以符合ISO10993-2的規(guī)定。對(duì)于體內(nèi)急性毒性試驗(yàn)，體外細(xì)胞毒性數(shù)據(jù)可用于估計(jì)起始劑量。對(duì)于醫(yī)療器械全身毒性試驗(yàn)具體動(dòng)物種屬的選擇沒有絕對(duì)的要求。但是，試驗(yàn)所用動(dòng)物種屬應(yīng)3全身毒性試驗(yàn)的精確度在很大程度上取決于每一劑量水平所采用的動(dòng)試驗(yàn)類別嚙齒動(dòng)物急性“5只3只10只(每種性別各5只)6只(每種性別各3只)20只(每種性別各10只)8只(每種性別各4只)可采用單一性別動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。如預(yù)期器械僅用于一種性別時(shí)，試驗(yàn)宜在該性別動(dòng)物體上進(jìn)嚙齒類單劑量組試驗(yàn)可參考該推薦數(shù)量，額外增加的劑量組可減少至每種性別各10只。建議與統(tǒng)計(jì)學(xué)專家商討非嚙齒類慢性試驗(yàn)劑量組的動(dòng)物數(shù)量，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量宜根據(jù)能提供有效數(shù)據(jù)所需的最少動(dòng)物數(shù)來確定，試驗(yàn)終結(jié)時(shí)應(yīng)有足夠的動(dòng)物以保證能對(duì)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)4錄B。5(見附錄C)。6觀察項(xiàng)目十十十臨床觀察十十十臨床病理學(xué)b十十十b十十b十慢性全身毒性試驗(yàn)一般是亞急性/亞慢性試驗(yàn)在時(shí)間上的再延長(zhǎng)，根據(jù)人體接觸周期來確定，記錄和報(bào)告的很多參數(shù)是相同的。慢性全身毒性試驗(yàn)可增加劑量組，包括衛(wèi)星劑量組，可觀察當(dāng)有臨床指征或預(yù)期不進(jìn)行更長(zhǎng)期接觸試驗(yàn)時(shí)，宜考慮這些項(xiàng)目。建議的體液和器官/組織分析項(xiàng)目見附急性全身毒性提供根據(jù)預(yù)期臨床途徑進(jìn)行的7實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物房間的溫度和相對(duì)濕度宜適合于動(dòng)物種屬，如小鼠需(22±3)℃、相對(duì)濕度30%~急性全身毒性試驗(yàn)觀察周期應(yīng)至少3d,必要時(shí)可延長(zhǎng)。8b)試驗(yàn)終結(jié)時(shí)考慮測(cè)定附錄D中給出的臨床生化血液方面的項(xiàng)目。急性接觸試驗(yàn)適宜的測(cè)2)采用5只動(dòng)物，如2只或2只以上出現(xiàn)死亡、或2只或2只以上出現(xiàn)抽搐或俯臥、或3只或3只以上出現(xiàn)體重下降超過10%,則試驗(yàn)樣品不符合試驗(yàn)要求。在全身毒性評(píng)4)重復(fù)試驗(yàn)時(shí)，如全部10只接觸試驗(yàn)樣品的動(dòng)物在觀察階段顯示沒有大于介質(zhì)對(duì)照組91)所用動(dòng)物種屬、品系；3)適用時(shí)，飼料和水的消耗；13)所采用的結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)價(jià)(如使用)及其生物學(xué)意義討論。GB/T16886.11—2021/I6重復(fù)接觸全身毒性(亞急性、亞慢性急性毒性與單劑量(或限制性接觸)的不良作用有關(guān)，但許多醫(yī)療器械更常見的人體接觸方式是重復(fù)或持續(xù)接觸形式。重復(fù)或持續(xù)接觸可能會(huì)由于化學(xué)物在組織內(nèi)的積聚或其他機(jī)制產(chǎn)生潛在反重復(fù)接觸全身毒性試驗(yàn)可提供預(yù)期臨床途徑持續(xù)接觸產(chǎn)生健康危害方面的信息，還可提供物質(zhì)經(jīng)預(yù)期臨床接觸途徑毒性作用模式方面的信息。為安全評(píng)估的依據(jù)。這些研究結(jié)果提供臨床和解剖病理學(xué)研究導(dǎo)則范圍方面的重要信息。重復(fù)接觸研究一般不給出復(fù)測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)，但劑量組的動(dòng)物數(shù)量要適應(yīng)記錄結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)價(jià)要求(見表1)。由于重復(fù)接觸研究的周期不同，應(yīng)按照要求制備試驗(yàn)樣品以確保其穩(wěn)定性。6.2研究設(shè)計(jì)至少在試驗(yàn)前5d使健康初成年動(dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室條件，將動(dòng)物隨機(jī)分為各試驗(yàn)組。典型試驗(yàn)采用嚙齒動(dòng)物(大鼠、小鼠),4.2和4.3中規(guī)定了動(dòng)物模型的要求(年齡、體重等)。如采用非嚙齒動(dòng)物應(yīng)進(jìn)行科學(xué)論證。4.5中規(guī)定了劑量組、每組動(dòng)物的數(shù)量和類別以及動(dòng)物性別。如經(jīng)科學(xué)論證，宜考慮采用高劑量水平衛(wèi)星實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和對(duì)照動(dòng)物，在超過最終處死期的預(yù)定時(shí)間，該試驗(yàn)組以及對(duì)照組動(dòng)物可用于檢查包括可逆性、持續(xù)性或遲發(fā)性毒性作用在內(nèi)的試驗(yàn)反應(yīng)。亞慢性研究的衛(wèi)星組動(dòng)物應(yīng)至少保留實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房間溫度和濕度宜適合動(dòng)物種屬，如大鼠需(22±3)℃、相對(duì)濕度30%～70%條件。典獨(dú)飼養(yǎng)，群養(yǎng)時(shí)每一籠具不宜多于5只動(dòng)物。適當(dāng)情況下，醫(yī)療器械毒性試驗(yàn)所用劑量應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)的結(jié)果、臨床接觸劑量與安全因素的重復(fù)劑量全身毒性研究觀察期應(yīng)與研究周期相適應(yīng)，4.10中規(guī)定了典型的眼科檢查采用檢眼鏡或其他同類適宜器具，宜在接觸GB/T16886.11—2021/I(資料性)A.1總則A.2～A.10列出了幾種接觸途徑，也可采用其他更具有臨床相關(guān)性的接觸途徑，應(yīng)采用最接近臨床的途徑。如采用其他接觸途徑應(yīng)予以論證，在設(shè)計(jì)相應(yīng)試驗(yàn)時(shí)建議與專家進(jìn)行磋商。經(jīng)皮膚途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于表面器械，要注意限制動(dòng)物以防試驗(yàn)樣品經(jīng)口進(jìn)入。經(jīng)植入途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于植入器械。該試驗(yàn)適用于常規(guī)或特定部位應(yīng)用可直接試驗(yàn)的材料，需考慮試驗(yàn)樣品的形狀和質(zhì)地。植入試驗(yàn)方法見ISO10993-6。A.4吸入經(jīng)吸入途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于接觸揮發(fā)性化學(xué)物氣體瀝濾環(huán)境或可能吸入氣霧劑/微粒試驗(yàn)樣品的器械。該接觸途徑的具體方法見吸入毒理學(xué)專著。A.5皮內(nèi)經(jīng)皮內(nèi)途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于皮內(nèi)接觸環(huán)境導(dǎo)致化學(xué)物溶出的器械，試驗(yàn)樣品一般通過注射直接進(jìn)入皮內(nèi)部位。對(duì)多部位注射宜明確描述其位置并進(jìn)行論證。A.6肌內(nèi)經(jīng)肌內(nèi)途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于肌肉組織接觸環(huán)境導(dǎo)致化學(xué)物溶出的器械，試驗(yàn)樣品一般通試驗(yàn)樣品引起的肌纖維緊張所導(dǎo)致的神經(jīng)損傷疼痛降至最低。重復(fù)劑量試驗(yàn)時(shí)宜輪換注射部位，例如非水溶性配方其沉淀物可保持>24h。對(duì)多部位注射宜明確描述其位置并進(jìn)行論證。經(jīng)腹腔途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于液路器械，或腹腔接觸環(huán)境導(dǎo)致化學(xué)物溶出的器械，也適用于不宜經(jīng)靜脈途徑的浸提液，如非極性油浸提液以及含有微粒的浸提液。腹腔途徑優(yōu)于試驗(yàn)樣品過濾后靜脈注射。試驗(yàn)樣品一般直接進(jìn)入腹腔，計(jì)算劑量頻率宜考慮經(jīng)該途徑接觸的試驗(yàn)樣品主要通過門靜脈循環(huán)吸收，因此應(yīng)經(jīng)肝臟到達(dá)全身循環(huán)。需注意不要注射到胃或腸腔內(nèi)。經(jīng)靜脈途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于直接或間接液路器械，或血液接觸環(huán)境導(dǎo)致化學(xué)物溶出的器械。試驗(yàn)樣品一般直接進(jìn)入血管系統(tǒng)，如試驗(yàn)樣品含有微粒，可采用腹腔途徑或考慮樣品過濾。評(píng)價(jià)納米材料時(shí)，分散的納米材料本身可考慮靜脈注射的途徑。用于靜脈試驗(yàn)的推薦劑量體積和注射次數(shù)，以及最常用的實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物種屬見附錄B。需注意最大限度降低試驗(yàn)樣品注射于血管外的可能性，如注射過程≥5min,宜考慮采用雙翼針經(jīng)口途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于直接或間接接觸口腔黏膜的器械，或其他腸道應(yīng)用的產(chǎn)品。試驗(yàn)樣品一般通過灌胃法接觸。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在接觸試驗(yàn)樣品之前通常禁食，禁食期可從數(shù)小時(shí)至過夜，代謝率越高的動(dòng)物禁食時(shí)間越短。禁食期后稱量動(dòng)物體重，然后根據(jù)體重給予單次劑量的試驗(yàn)樣品。灌胃后過3h~4h再投給飼料。如在一段時(shí)間內(nèi)分次灌胃，則需要根據(jù)時(shí)間長(zhǎng)短給動(dòng)物提供飼經(jīng)皮下途徑的全身毒性試驗(yàn)適用于皮下接觸環(huán)境導(dǎo)致化學(xué)物溶出的器械。試驗(yàn)樣品一般通過注射或植入直接進(jìn)入皮下部位。對(duì)多部位注射宜明確描述其位置并進(jìn)行論證。GB/T16886.11—2021/ISO10(資料性)人道主義動(dòng)物試驗(yàn)原則要求應(yīng)采取合理措施最大限度降低或消除任何不良生理或病理作用。表B.1中列出的數(shù)值旨在提供信息并代表文獻(xiàn)中報(bào)告的單次給藥的最大限值，這些最大值不宜作為本文件的推薦值，但研究人員可在考慮諸如體重/表面積、接觸速率、試驗(yàn)樣品物理化學(xué)與生物學(xué)特性以及動(dòng)物品系等因素時(shí)采用上限值，對(duì)于重復(fù)劑量接觸，需試圖在考慮到這些調(diào)整因素的情況下表B.1試驗(yàn)樣品接觸最大單劑量體積動(dòng)物種屬皮下肌內(nèi)灌胃大鼠1小鼠21犬21猴51鼠)和0.2mL(大鼠),靜脈劑量體積宜不超過1mL/min.B.2劑量體積參考文獻(xiàn)見參考文獻(xiàn)[11]～[16]。GB/T16886.11—2021/I(資料性)常見臨床癥狀與觀察項(xiàng)目常見臨床癥狀與觀察項(xiàng)目見表C.1。表C.1常見臨床癥狀與觀察項(xiàng)目臨床觀察呼吸呼吸困難(腹式呼吸、氣喘)、呼吸暫停、紫紺、呼吸急促、鼻流液中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)、肺、心臟嗜睡減輕或加重、翻正反射消失、感覺缺乏、全身僵硬、共濟(jì)失調(diào)、CNS、軀體肌肉、感覺、陣攣、強(qiáng)直、強(qiáng)直性陣攣、昏厥、角弓反張眼癥狀流淚、瞳孔縮小/散大、眼球突出、上瞼下垂、混濁、虹膜炎、結(jié)膜炎、自主性、刺激性心動(dòng)過緩、心動(dòng)過速、心律不齊、過多自主性自主性自主性胃腸CNS、自主性、感覺、胃腸運(yùn)動(dòng)性、腎-—血紅蛋白濃度； ——葡萄糖——隱血——蛋白 (資料性)除了評(píng)價(jià)組織病理學(xué)，下面標(biāo)星號(hào)(*)的器官/-—腎上腺”;——附睪*;——膽囊(如有); 肝——乳腺(雌性); ——脾*;(資料性)限定的組織病理學(xué)分析宜包括表F.1列出的所有I層器官/組織。如果在I層組織或同步進(jìn)行的臨床病理(臨床生化和血液學(xué))觀各系統(tǒng)中的臟器/組織(物種若適用)I層組織口、唾液腺、食管、肝臟、胃、膽囊、胰腺、腸(十二指腸、橫結(jié)腸、升結(jié)腸、降結(jié)腸、回腸、空腸、盲腸、乙狀結(jié)腸)、直腸、肛門內(nèi)分泌腎上腺腎臟、輸尿管、膀胱、尿道、皮膚、肺、直腸腎臟皮膚、皮下組織、頭發(fā)、指甲肌肉肌肉腦卵巢、輸卵管、子宮、陰道、乳腺、睪丸、輸呼吸GB/T16886.11—2021/I這種致熱形式源自于革蘭氏陰性細(xì)菌的生物活性內(nèi)毒素，通常為醫(yī)療器●前列腺素；●細(xì)菌外毒素[如毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)、金黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)、鏈球菌致●神經(jīng)遞質(zhì)(如去甲腎上腺素、血清素);正在研究開發(fā)的測(cè)定方法通過測(cè)定單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子來檢測(cè)革蘭氏陰性和陽性GB/T16886.11—2021/ISO10非極性浸提液注射至同一動(dòng)物體內(nèi)是評(píng)價(jià)其毒性的一種方法。這種接觸6b推薦劑量。接觸當(dāng)天為第0天。介質(zhì)，試驗(yàn)期間每3天接觸1次(即5次接觸)。表B.1給出了單次或非常有限的次數(shù)的靜脈注射時(shí)試驗(yàn)樣品接觸的最大劑量體積。若每天重復(fù)或周期性接觸，則宜減少任何途徑的試驗(yàn)樣品接觸體積。LASA(見參考文獻(xiàn)[17])建議在相對(duì)短時(shí)間內(nèi)(少于1min)進(jìn)行大鼠快速注射及常規(guī)每天一次注射(注射速度≤2mL/min)的最大靜脈注射體積為表B.1給出了單次或非常有限次數(shù)的腹腔注射時(shí)試驗(yàn)樣品接觸的最大劑量體積。當(dāng)前的經(jīng)驗(yàn)表明射物按照5mL/kg～10mL/kg的劑量注射后，腹腔殘留量(PRV)可存留三天。因此，在按照[1]ISO10993Biologicalevaluationof[2]ASTMF619-03StandardPracticeforExtractionofMedica[3]AAMI/ST72BacterialEndotoxin—Testmethods,routinemonitoring,andalternatibatchtesting[5]U.S./FDAToxicologicalprinciplesforthesafetyassessmentofdire[6]U.S.CodeofFederal[7]UnitedStatesPharmacopoeia26:BiologicalReactimulary21,Rockville,MD;PharmacopoeialConvention,2003,pp.2028-2032[8]EuropeanPharmacopoeia.EighthEdit[9]MHLWNotificationbyD2012.BasicPrinciplesofBiologicalSafetyEvaluationRequiredforApplicationforApprovaltoMarkvaluation.HumanandEnvironmentalToxicology.1995,14pp.305-307[12]DerelankoM.J.,&.HollingerM.A.CRCHandbookofToxicology.CRC[13]DiehlK.-H.,HullR.,MortonD.,PfisterR.,Rabemampianinach.Agoodpracticeguidetotheadminifblood,includingroutesandvolumes.J.Appl.Toxicol.[14]MortonD.Effectsofinfusionratesinratsreceivingrsalinesolution.Lab.Anim.Sci.1997,47pp.656-659[15]RichmondJ.D.Doselimitvolumes:TheUnitedKingdom