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2.1植物細(xì)胞工程一植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)一、教學(xué)目標(biāo)1.概述細(xì)胞的全能性,闡明植物細(xì)胞工程的主要技術(shù)——植物組織培育和植物體細(xì)胞雜交。2.通過介紹植物組織培育技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù),激發(fā)學(xué)生探究生命科學(xué)奇異的愛好,通過學(xué)習(xí)使學(xué)生達(dá)到用發(fā)展的眼光看問題、分析問題,勇于開拓、推陳出新。3.在植物細(xì)胞工程兩種技術(shù)的學(xué)習(xí)中,滲透科學(xué)看法、科學(xué)方法和科學(xué)精神的養(yǎng)成教化,培育學(xué)生形成正確的唯物主義世界觀和人生觀。4.通過聯(lián)系生產(chǎn)生活實(shí)際,培育學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際的實(shí)力。二、教學(xué)重難點(diǎn)1.教學(xué)重點(diǎn)(1)植物組織培育的原理和過程。(2)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理。2.教學(xué)難點(diǎn)(1)植物組織培育的試驗(yàn)。三、教學(xué)過程【新課導(dǎo)入】老師利用課件展示一些蘭花的圖片,并讓學(xué)生自我閱讀教材第34頁“從社會(huì)中來”,思索教材中最終提出的問題,然后老師通過介紹植物細(xì)胞工程的基本技術(shù),讓學(xué)生明確解決這一問題的思路,引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)對(duì)應(yīng)的學(xué)問內(nèi)容。“其芽葺葺,其葉青青,猶綠衣郎,挺節(jié)獨(dú)立,可敬可慕。迨夫花開,凝晴瀼露,萬態(tài)千妍,薰風(fēng)自來,四坐芬郁,豈非入蘭室乎!豈非有國(guó)香乎!”這是我國(guó)歷史上第一部蘭譜——《金漳蘭譜》(宋·趙時(shí)庚)中對(duì)蘭花的一段描述。從古至今,我國(guó)人民都把蘭花看作高潔、高雅的象征,許多人寵愛蘭花。但是蘭花種子通常發(fā)育不全,在自然條件下萌發(fā)率極低;傳統(tǒng)分株繁殖的方法又存在繁殖周期長(zhǎng),繁殖率低等問題,假如靠自然繁殖,蘭花的價(jià)格可想而知了。如何能讓珍貴的蘭花大量、快速地繁殖,從而走入尋常百姓家呢?探討:如何能讓珍貴的蘭花大量、快速地繁殖,從而走入尋常百姓家呢?提示:利用植物組織培育技術(shù)可以大量、快速地培育蘭花。蘭花是欣賞植物中最常見的一類依靠植物組織培育繁育種苗的植物,其組培苗的數(shù)量約占欣賞植物組培苗總量的40%植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是什么?(全能性)【新課講授】(一)植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)老師組織學(xué)生閱讀教材第34頁“植物細(xì)胞的工程的基本技術(shù)”的相關(guān)內(nèi)容,結(jié)合“從社會(huì)中來”思索探討,提問:1.植物組織培育的基本原理是什么?2.什么是細(xì)胞的全能性?3.體細(xì)胞具有全能性的根本緣由是什么?學(xué)生帶著問題去閱讀教材,并小組成員之間相互探討,得出答案。通過分析探討,使學(xué)生對(duì)本節(jié)的內(nèi)容學(xué)習(xí)由淺入深,加深學(xué)生對(duì)植物組織培育基本原理的理解。學(xué)問梳理:1.細(xì)胞的全能性(1)概念:細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,照舊具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。(2)緣由:一般來說,生物體的每個(gè)細(xì)胞中都含有發(fā)育成為完整個(gè)體所需的全部遺傳信息。(3)細(xì)胞全能性的比較:①受精卵>生殖細(xì)胞(卵細(xì)胞>精子)>體細(xì)胞;②植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞;③幼嫩的細(xì)胞>蒼老的細(xì)胞;④分化程度低的細(xì)胞>分化程度高的細(xì)胞;⑤分裂實(shí)力強(qiáng)的細(xì)胞>分裂實(shí)力弱的細(xì)胞。(二)植物組織培育技術(shù)老師利用課件介紹植物組織培育的概念和流程,并展示流程圖,讓學(xué)生加深植物組織培育的過程,并通過自己動(dòng)手操作“菊花的組織培育”讓學(xué)生對(duì)植物組織培育的流程形成直觀的相識(shí),并促進(jìn)他們理解和駕馭相關(guān)概念。學(xué)問梳理:(1)概念:植物組織培育是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞(稱為外植體)等,培育在人工配制的培育基上,賜予相宜的培育條件,誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。(2)原理:植物細(xì)胞的全能性。(3)過程:外植體是指離體的植物器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體。植物的莖尖、幼嫩的葉片、花藥是常用的外植體。①愈傷組織:不定形的薄壁組織團(tuán)塊。細(xì)胞排列疏松且無規(guī)則、高度液泡化、呈無定形態(tài)態(tài)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。留意:無葉綠體,可進(jìn)行有絲分裂②脫分化:在確定的激素和養(yǎng)分等條件的誘導(dǎo)下,已經(jīng)分化的細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能,轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只募?xì)胞,進(jìn)而形成愈傷組織的過程。③再分化:脫分化產(chǎn)生的愈傷組織接著進(jìn)行培育,又可以重新分化成胚狀體、根、芽等,這個(gè)過程叫做再分化。④相宜的培育條件:離體、無菌條件、種類和比例相宜的養(yǎng)分物質(zhì)、植物激素(主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)的誘導(dǎo)和調(diào)整、相宜的外界條件(溫度、pH、光照等)。脫分化過程一般不須要光照、再分化過程須要光照。生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素>1,有利于根的分化;<1,有利于芽的分化;=1,促進(jìn)愈傷組織的形成。老師拿出提前打算好的試驗(yàn)材料,并以小組為單位,分發(fā)不同時(shí)期的試驗(yàn)材料,讓學(xué)生進(jìn)行視察,通過視察植物組織培育試驗(yàn)中不同時(shí)期的試驗(yàn)材料,讓學(xué)生寫出植物組織培育的基本流程,并讓學(xué)生閱讀教材中的試驗(yàn)過程,通過閱讀試驗(yàn)內(nèi)容和視察試驗(yàn)不同時(shí)期的生長(zhǎng)狀況,讓學(xué)生更直觀的對(duì)植物組織培育的認(rèn)知,并促進(jìn)他們理解和駕馭相關(guān)概念。探究?實(shí)踐:菊花的組織培育觀看視頻《菊花的組織培育》,通過視頻初步了解菊花組織培育過程,提出問題,學(xué)問點(diǎn)歸納梳理。1.原理:2.目的要求:(1)了解植物組織培育的基本原理(2)了解生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度、用量比例對(duì)菊花愈傷組織形成和分化的影響(3)嘗試進(jìn)行植物組織培育3.方法步驟:(1)制備外植體(2)接種到誘導(dǎo)愈傷組織培育基(3)接種到誘導(dǎo)生芽培育基(4)接種到誘導(dǎo)生根培育基脫分化:將接種了外植體的錐形瓶或植物組織培育瓶置于18-22℃的培育箱中培育。在培育過程中,定期視察和記錄愈傷組織的生長(zhǎng)狀況。再分化:培育15~2d后,將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培育基上,將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培育基上,進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗。4.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(1)接種3~4d后,檢查外植體的生長(zhǎng)狀況,統(tǒng)計(jì)有多少外植體被污染,有多少能正常生長(zhǎng),試分析它們被污染的緣由。用于植物組織培育的培育基同樣適合某些微生物的生長(zhǎng),如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。培育物一旦受到微生物的污染,就會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)前功盡棄,因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。導(dǎo)致外植體被污染的緣由可能有:培育基、接種工具滅菌不徹底;外植體消毒不徹底;操作過程不符合無菌操作要求等。(2)你培育出愈傷組織了嗎?假如培育出來了,從剛接種的外植體到長(zhǎng)出愈傷組織閱歷了多少天?這些愈傷組織進(jìn)一步分化出芽和根了嗎?視察試驗(yàn)結(jié)果,看看是否培育出了愈傷組織,記錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出了愈傷組織。從剛接種的外植體到長(zhǎng)出愈傷組織一般須要2周左右的時(shí)間。統(tǒng)計(jì)更換培育基后愈傷組織進(jìn)一步分化成芽和根的比例和時(shí)間。(3)視察外植體的分化狀況,填好結(jié)果記錄表,并剛好分析結(jié)果。做好統(tǒng)計(jì)和比照,填好結(jié)果記錄表,培育嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)看法。從試驗(yàn)的第一步起先就要做好試驗(yàn)記錄,可以分組配制不同的培育基,如誘導(dǎo)愈傷組織的培育基、誘導(dǎo)生芽的培育基等,還可以進(jìn)行不同配方的比較。(4)你培育的幼苗移栽到露地后,能夠正常生長(zhǎng)嗎?生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培育基,又不能傷及根系。一般運(yùn)用無土栽培的方法。培育基質(zhì)要提前消毒,可以向培育基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的高錳酸鉀,并用塑料薄膜覆蓋12h。掀開塑料薄膜24h后才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過渡幾天,待其長(zhǎng)壯后再移植到大田或盆中??梢栽谡n后統(tǒng)計(jì)移栽的成活率,看看移栽是否合格。5.進(jìn)一步探究(5)若想探究生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的運(yùn)用比例對(duì)植物組織培育的影響,則應(yīng)如何設(shè)計(jì)比照試驗(yàn)?①空白比照:不加任何激素;②試驗(yàn)組1:生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值等于1;③試驗(yàn)組2:生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值大于1;④試驗(yàn)組3:生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值小于1。特別的植物組織培育——花藥離體培育:該過程涉及的生殖方式是有性生殖,經(jīng)秋水仙素加倍之后,獲得的植株一般為純合子。(三)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)老師利用課件展示“番茄—馬鈴薯”的想象圖,并介紹科學(xué)家以此進(jìn)行的試驗(yàn)探究,通過這個(gè)實(shí)例,引出植物體細(xì)胞雜交的概念??偨Y(jié)植物體細(xì)胞雜交的概念:植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞,在確定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。展示植物體細(xì)胞雜交過程示意圖,讓小組之間相互探討以下問題,并得出答案:1.在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí),為什么要去除細(xì)胞壁?去除細(xì)胞壁的方法是什么?細(xì)胞壁阻礙著細(xì)胞間的雜交(阻礙了原生質(zhì)體間的融合)酶解法2.誘導(dǎo)融合的方法有哪些?物理法(電融合法、離心法)和化學(xué)法(聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法)3.若只考慮兩兩融合,融合后的原生質(zhì)體有哪些類型?所需的類型是什么?用什么方法可以得到所需類型?4.植物體細(xì)胞雜交完成的標(biāo)記是什么?再生出新的細(xì)胞壁5.得到雜種細(xì)胞后再如何操作才能得到雜種植株?學(xué)生通過閱讀教材第36-38頁的內(nèi)容,小組之間相互溝通,并得出答案。老師依據(jù)學(xué)生的回答,進(jìn)行適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充,糾錯(cuò)。通過探討、溝通,培育學(xué)生的團(tuán)隊(duì)合作精神,熬煉學(xué)生的思維。學(xué)問梳理:1.概念:植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞,在確定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。2.過程:植物細(xì)胞融合、植物組織培育。3.去除細(xì)胞壁的方法:酶解法。(1)所用酶:纖維素酶和果膠酶。(2)去壁的緣由:細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體間的融合(阻礙著細(xì)胞間的雜交)。4.原生質(zhì)體間的融合(關(guān)鍵環(huán)節(jié))(1)原理:細(xì)胞膜具有確定的流淌性。(2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法(電融合法、離心法)和化
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