微生物快速檢測儀

微生物檢測技術(shù)和相關(guān)儀器醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院臨床檢驗(yàn)儀器教研室

張濤重點(diǎn)難點(diǎn)熟悉了解教學(xué)基本要求傳統(tǒng)的微生物學(xué)鑒定方法過程煩瑣費(fèi)時費(fèi)力易發(fā)生主觀片面錯誤質(zhì)量控制難微生物學(xué)技術(shù)方法快速、準(zhǔn)確、簡易和自動化?概述微電子學(xué)化學(xué)

計(jì)算機(jī)學(xué)分子生物學(xué)物理學(xué)滲透交叉自動化檢測系統(tǒng)概述自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)化檢測系統(tǒng)微生物自動自動血培養(yǎng)系統(tǒng)概述血培養(yǎng)(BloodCulture)

將新鮮離體的血液標(biāo)本接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基上，在一定溫度、濕度等條件下，使對營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長繁殖并對其進(jìn)行鑒別，從而確定病原菌的一種人工培養(yǎng)法。用于菌血癥、敗血癥及膿毒敗血癥的病因?qū)W診斷，一般需要5-7天才能出報(bào)告。概述自動血培養(yǎng)系統(tǒng)概述自動血培養(yǎng)儀為微生物快速培養(yǎng)系統(tǒng)，可以對敗血癥等患者血液里的病原微生物進(jìn)行快速靈敏的檢測，同時可檢測體內(nèi)正常無菌部位(胸腔、腹腔、關(guān)節(jié)腔等)的病原微生物，為臨床迅速有效地進(jìn)行抗感染治療提供診斷依據(jù)。主要功能

檢測標(biāo)本中是否有微生物存在，計(jì)算機(jī)自動掃描進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測，當(dāng)微生物生長代謝導(dǎo)致某些生長指數(shù)超標(biāo)時，儀器自動報(bào)警提示有細(xì)菌生長。自動血培養(yǎng)系統(tǒng)概述主要功能

將培養(yǎng)基上分離的可疑致病菌配制成純菌液，放入自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)中，通過計(jì)算機(jī)自動掃描、讀數(shù)、分析、最后報(bào)告鑒定及藥敏結(jié)果。自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)概述第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)第二節(jié)自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)本章小結(jié)主要內(nèi)容自動血培養(yǎng)儀

工作原理及分類基本結(jié)構(gòu)與功能性能特點(diǎn)常見故障及維護(hù)血培養(yǎng)儀的進(jìn)展第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)

通過自動監(jiān)測培養(yǎng)基（液）中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO2的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢測微生物的存在。自動血培養(yǎng)儀的工作原理混濁度CO2pH熒光標(biāo)記底物代謝產(chǎn)物第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)檢測培養(yǎng)基導(dǎo)的血培養(yǎng)系統(tǒng)電性和電壓的血培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)用測壓原理采用光電原理監(jiān)測的血培養(yǎng)系統(tǒng)根據(jù)檢測原理分類第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)用均質(zhì)熒光衰減原理的血培養(yǎng)系統(tǒng)檢測培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓的血培養(yǎng)系統(tǒng)

血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有一定導(dǎo)電性。微生物在生長代謝的過程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán)（例如在液體培養(yǎng)基內(nèi)CO2轉(zhuǎn)變成CO3－），通過電極檢測培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可判斷有無微生物生長。

第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)

許多細(xì)菌生長過程中，常伴有吸收或產(chǎn)生氣體現(xiàn)象，如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉湯中生長時，由于消耗培養(yǎng)瓶中的氧氣，故首先表現(xiàn)為吸收氣體。而厭氧菌生長時最初均無吸收氣體現(xiàn)象，僅表現(xiàn)為產(chǎn)生氣體（主要為CO2），因此可利用培養(yǎng)瓶內(nèi)壓力的改變檢測微生物的生長情況。

應(yīng)用測壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng)

第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)必然會產(chǎn)生終代謝產(chǎn)物CO2，引起培養(yǎng)基pH

及氧化還原電位改變。利用光電比色檢測血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的改變，可判

微生物在代謝過程中判斷有無微生物生長。采用光電原理監(jiān)測的血培養(yǎng)系統(tǒng)

第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)

在孵育過程中，如有病原微生物生長，其代謝過程中會產(chǎn)生H+

（使培養(yǎng)基變酸）、產(chǎn)生電子（使培養(yǎng)基中某些物質(zhì)還原）和（或）各種帶電荷的原子團(tuán)（如在液體培養(yǎng)基內(nèi)CO2變成HCO3ˉ），發(fā)熒光的物質(zhì)分子在受到這些因素的影響后，改變自身結(jié)構(gòu)而轉(zhuǎn)變成不發(fā)熒光的化合物。通過檢測每個培養(yǎng)瓶內(nèi)發(fā)出的熒光，若出現(xiàn)熒光衰減的現(xiàn)象，就提示有微生物的存在。應(yīng)用均質(zhì)熒光衰減原理的血培養(yǎng)檢測系統(tǒng)第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)根據(jù)檢測手段不同分成四類第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)臨床常見的血培養(yǎng)儀BacT/Alert系統(tǒng)Bactec9000系列第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)BacT/Alert系統(tǒng)：該系統(tǒng)為一種全自動微生物培養(yǎng)和監(jiān)測系統(tǒng)，有120瓶和240瓶兩種規(guī)格。培養(yǎng)瓶底部有特殊的NovelCO2感應(yīng)器，有半滲透性薄膜，將培養(yǎng)基與感應(yīng)器隔離，只有CO2能通過薄膜。當(dāng)有微生物生長釋出CO2可滲透至感應(yīng)器，pH改變使其顏色也改變。儀器每十分鐘自動檢測一次，由電腦分析判斷陰陽性。陽性者發(fā)出警報(bào)，有三種報(bào)警模式。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)BacT/Alert系統(tǒng)工作原理第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)Bactec9000系列：該包括9240型(240瓶)、9120(120瓶)和9050型(50瓶)三種。利用熒光探測技術(shù)：全自動連續(xù)檢測培養(yǎng)瓶內(nèi)微生物代謝引起的CO2濃度變化，而CO2濃度的改變可直接激活培養(yǎng)瓶底部包埋的對CO2濃度變化高度敏感的熒光物質(zhì)，在二極管的激發(fā)下熒光物質(zhì)釋放熒光，熒光強(qiáng)度變化可直接反映培養(yǎng)瓶內(nèi)CO2濃度變化。以判定是否有微生物生長繁殖，儀器每十分鐘自動進(jìn)行質(zhì)控校正，有電腦分析判斷細(xì)菌培養(yǎng)陰陽性，陽性者發(fā)出警報(bào)。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)co2co2co2培養(yǎng)基光電感應(yīng)器熒光感應(yīng)物質(zhì)光源中央處理器報(bào)告Bactec9000系列工作原理第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)自動血培養(yǎng)儀的基本結(jié)構(gòu)與功能培養(yǎng)瓶培養(yǎng)儀數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)瓶第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)傳統(tǒng)手工培養(yǎng)法中使用的培養(yǎng)瓶為三角燒瓶。且其內(nèi)培養(yǎng)基成分單一。瓶口用多層紙封閉，注入血液時需揭開封閉紙極易造成污染。自動血培養(yǎng)儀配套使用的培養(yǎng)瓶是血培養(yǎng)儀重要的核心技術(shù)。培養(yǎng)瓶采用真空負(fù)壓采血技術(shù)，不需使用注射器采血，降低了成本，并減少了標(biāo)本污染機(jī)會；采血時血流量均勻，使病人免受痛苦；血量采集準(zhǔn)確，避免血量過多或過少而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性；采血的密閉性操作，提高了醫(yī)護(hù)人員的安全性。培養(yǎng)瓶培養(yǎng)瓶

需氧培養(yǎng)瓶

厭氧培養(yǎng)瓶

小兒

培養(yǎng)瓶分支桿菌

培養(yǎng)瓶

其他第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)同時需要考慮以下三大要素：(1)微生物對營養(yǎng)和氣體環(huán)境的不同需求；(2)患者的年齡和體質(zhì)的差異；(3)培養(yǎng)前是否使用了抗生素。臨床常見的血培養(yǎng)瓶1

為一次性無菌培養(yǎng)瓶，瓶內(nèi)為負(fù)壓，便于標(biāo)本采集時依靠負(fù)壓作用將血液直接引人培養(yǎng)瓶。每個培養(yǎng)瓶底部都包含一個檢測CO2的傳感器，通過檢測作為微生物生長狀況的指示器。

BacT/Alert系統(tǒng)

第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)Bactec9000系列

臨床常見的血培養(yǎng)瓶2

針對微生物對營養(yǎng)和氣體環(huán)境的要求懸殊，患者的年齡和體質(zhì)差異大以及培養(yǎng)前是否服用抗菌素等要素，BACTEC9000系統(tǒng)提供多種專用封閉式培養(yǎng)瓶，不僅提供不同細(xì)菌繁殖所必需的增菌液體培養(yǎng)基，還包含適宜的氣體成分，最大限度檢出所有陽性標(biāo)本，防止假陰性。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)儀的組成恒溫裝置振蕩培養(yǎng)裝置監(jiān)測裝置第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)功能培養(yǎng)瓶放入儀器后進(jìn)行恒溫振蕩培養(yǎng)及自動連續(xù)監(jiān)測。不同類型自動血培養(yǎng)系統(tǒng)的單機(jī)檢測樣本數(shù)有所不同，一般為數(shù)十至數(shù)百個。監(jiān)測數(shù)據(jù)傳送至數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)，一旦系統(tǒng)分析顯示某一培養(yǎng)瓶達(dá)到陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)時，培養(yǎng)儀將會給予提示信息。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)主機(jī)監(jiān)視器鍵盤打印機(jī)條形碼閱讀器第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)功能

收集并分析來自培養(yǎng)儀的數(shù)據(jù)，以及將患者和培養(yǎng)瓶的資料存入數(shù)據(jù)庫。在不使用數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)時，系統(tǒng)處于監(jiān)視狀態(tài)并出現(xiàn)監(jiān)視屏幕。當(dāng)需要患者及培養(yǎng)資料時，進(jìn)入系統(tǒng)主菜單。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)可根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室的要求追蹤大量的信息，可保存基本或詳盡的資料（如患者檢驗(yàn)號，培養(yǎng)瓶號，標(biāo)本類型以及實(shí)驗(yàn)室自己設(shè)置的一些特殊項(xiàng)目資料），也可根據(jù)病區(qū)、微生物類型及時間追蹤分析結(jié)果。一般還可給出工作量報(bào)告。

第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)自動血培養(yǎng)儀的工作流程自動血培養(yǎng)儀的性能特點(diǎn)第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)自動血培養(yǎng)儀常見故障及維護(hù)

溫度異常（過高或過低）瓶孔被污染數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)與培養(yǎng)儀失去信息聯(lián)系或不工作儀器對測試中的培養(yǎng)瓶出現(xiàn)異常反應(yīng)第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)溫度異常（過高或過低）多數(shù)情況下是由于儀器門打開的次數(shù)太多引起，需注意盡量減少儀器門開關(guān)次數(shù)，并確保培養(yǎng)過程中儀器門是緊閉的。通常培養(yǎng)儀的門要關(guān)閉30min后才能保持溫度平衡。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)瓶孔被污染

如果培養(yǎng)儀瓶孔內(nèi)的培養(yǎng)瓶破裂或泄漏，需按各儀器要求及時進(jìn)行清潔和消毒處理。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)與培養(yǎng)儀失去信息聯(lián)系或不工作

此類故障只可能在微機(jī)與培養(yǎng)儀儀器相對獨(dú)立的系統(tǒng)中出現(xiàn)。此時培養(yǎng)儀仍可監(jiān)測標(biāo)本，但它只能保留最后72小時的數(shù)據(jù)，檢測時也只能打印陽性或陰性標(biāo)本的位置。因此必須注意放置培養(yǎng)瓶時，需先掃描條形碼，再將它放入啟用的瓶孔內(nèi)，患者、檢驗(yàn)號、培養(yǎng)瓶的信息要等到微機(jī)系統(tǒng)工作之后才能輸入。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)儀器對測試中的培養(yǎng)瓶出現(xiàn)異常反應(yīng)

在BACTEC9050培養(yǎng)儀中，出現(xiàn)此類故障的原因大多是由于培養(yǎng)瓶未經(jīng)掃描條形碼就放入儀器內(nèi)，或雖已掃描，但未放入規(guī)定的瓶孔中，系統(tǒng)將這些培養(yǎng)瓶歸為“匿名瓶”，在顯示屏上會出現(xiàn)提示信息。此時應(yīng)將“匿名瓶”取出，重新掃描后放入。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)

BacT/Alert培養(yǎng)儀運(yùn)行中，有時儀器測定系統(tǒng)認(rèn)為某一瓶孔目前是空的，但是實(shí)際上孔內(nèi)還有一被測的培養(yǎng)瓶（無論是陽性或陰性的），此時應(yīng)通過打印或“ProblemLog”命令讀出存在問題的瓶孔號。若整個區(qū)塊中的所有瓶號都被顯示出來，那可能是區(qū)塊有問題；若只列出一個瓶孔號，那就只是這個瓶孔有問題。故障排除方法：如果這一孔內(nèi)的培養(yǎng)瓶已經(jīng)被非法卸出，則可以不管這一信息；如果孔內(nèi)還有培養(yǎng)瓶，則卸出此瓶，裝入到另一孔內(nèi)，然后對前孔作質(zhì)控。第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)血培養(yǎng)儀的進(jìn)展檢出的范圍更廣，陽性率更高靈敏度更高，污染率、假陽性率和假陰性率應(yīng)降至最低自動化和計(jì)算機(jī)的智能化程度更強(qiáng)體積更小，僅需極微量的血液樣品即可檢出所有的微生物檢驗(yàn)周期更短，工作效率更高成本更低，結(jié)果報(bào)告更快使血培養(yǎng)檢查更容易被患者接受

第一節(jié)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)工作原理

基本結(jié)構(gòu)與功能性能特點(diǎn)維護(hù)和保養(yǎng)進(jìn)展常見儀器介紹第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)微生物自動鑒定系統(tǒng)工作原理

采用微生物數(shù)碼鑒定原理

數(shù)碼鑒定是指通過數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成數(shù)學(xué)模式，給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼，建立數(shù)據(jù)庫或編成檢索本。通過對未知菌進(jìn)行有關(guān)生化試驗(yàn)并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字（編碼），查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫，得到細(xì)菌名稱。其基本原理是計(jì)算并比較數(shù)據(jù)庫內(nèi)每個細(xì)菌條目對系統(tǒng)中每個生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻率總和。

第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定表組別試驗(yàn)項(xiàng)目代碼結(jié)果結(jié)果代碼總值

1硫化氫苯丙氨酸葡萄酸鹽－421--+0011

2靛基質(zhì)甲基紅

－枸櫞酸鹽421-++0213

3尿素動力產(chǎn)氣421+++421

74賴氨酸－鳥氨酸－棉子糖421++-420

6

5山梨醇側(cè)金花醇木膠糖421++-420

6數(shù)字編碼結(jié)果判定根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果判定數(shù)碼組合為１３７６６，查編碼手冊，即可找到對應(yīng)的細(xì)菌。這種數(shù)碼分析與電腦分析軟件配套，形成了半自動或全自動細(xì)菌分析系統(tǒng)。腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定表抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的檢測原理

其實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)

將抗生素微量稀釋在條孔或條板中，加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育，儀器每隔一定時間自動測定細(xì)菌生長的濁度，或測定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒光原性物質(zhì)的水解程度，以觀察細(xì)菌的生長情況。得出待檢菌在各藥物濃度的生長斜率，經(jīng)回歸分析得到最低抑菌濃度MIC值，可判斷細(xì)菌對相關(guān)抗生素相應(yīng)敏感的，并根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)得到相應(yīng)敏感度：敏感“S”、中度敏感“MS”和耐藥“R”。ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute：臨床與實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會。以前稱NCCLS第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)與功能

菌液接種器

培養(yǎng)和監(jiān)測系統(tǒng)

測試卡（板）

數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)

是系統(tǒng)的工作基礎(chǔ)，各種不同的測試卡（板）具有不同的功能。最基本的測試卡（板）包括革蘭氏陽性菌鑒定卡（板）、革蘭氏陰性菌鑒定卡（板）、革蘭氏陽性菌藥敏試驗(yàn)卡（板）和革蘭氏陰性菌藥敏試驗(yàn)卡（板）。

測試卡（板）第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)微生物自動鑒定系統(tǒng)的鑒定卡常規(guī)鑒定卡

對各項(xiàng)生化反應(yīng)結(jié)果（陰性或陽性）的判定是根據(jù)比色法的原理，系統(tǒng)以各孔的反應(yīng)值作為判斷依據(jù)，組成數(shù)碼并與數(shù)據(jù)庫中已知分類單位相比較，獲得相似系統(tǒng)鑒定值?？焖贌晒忤b定卡

根據(jù)熒光法的鑒定原理，通過檢測熒光底物的水解、熒光底物被利用后的pH變化、特殊代謝產(chǎn)物的生成和某些代謝產(chǎn)物的生成率來進(jìn)行菌種鑒定。第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)快速熒光測試卡檢測原理為熒光法，如Sensititre系統(tǒng)，在每一反應(yīng)孔內(nèi)參與熒光底物，若細(xì)菌生長，表面特異酶系統(tǒng)水解熒光底物，激發(fā)熒光，反之無熒光。以最低藥物濃度仍無熒光產(chǎn)生的濃度為最低抑菌濃度。

微生物藥敏測試卡常規(guī)測試卡檢測原理為比濁法，如Vitek系統(tǒng)，在含有抗生素的培養(yǎng)基中，濁度的增加提示細(xì)菌生長，根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)解釋敏感或耐藥。第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)

絕大多數(shù)自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)都配有自動接種器，大致可分為真空接種器和活塞接種器，以真空接種器較為常用。儀器一般都配有標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)蠞舛缺葷醿x，操作時只需稀釋好的菌液放入比濁儀中確定濃度即可。菌液接種器第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)

監(jiān)測系統(tǒng)每隔一定時間對每孔的透光度或熒光物質(zhì)的變化進(jìn)行檢測。

快速熒光測定系統(tǒng)可直接對熒光測試板各孔中產(chǎn)生的熒光進(jìn)行測定，并將熒光信號轉(zhuǎn)換成電信號，數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)將電信號轉(zhuǎn)換成數(shù)碼；常規(guī)測試板則直接檢測電信號，從干涉濾光片過濾的光通過光導(dǎo)纖維導(dǎo)入測試板上的各個測試孔，光感受二極管測定通過每個測試孔的光量，產(chǎn)生相應(yīng)的電信號，從而推斷出菌種的類型及藥敏結(jié)果。培養(yǎng)和監(jiān)測系統(tǒng)第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)

系統(tǒng)的神經(jīng)中樞，始終保持與孵箱/讀數(shù)器、打印機(jī)的聯(lián)絡(luò)，控制孵箱溫度，自動定時讀數(shù)，負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的轉(zhuǎn)換及分析處理。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)性能特點(diǎn)第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)維護(hù)和保養(yǎng)

嚴(yán)格按手冊規(guī)定進(jìn)行開、關(guān)機(jī)及各種操作，防止因程序錯誤造成設(shè)備損傷和信息丟失。

定期清潔比濁儀、真空接種器、封口器、讀數(shù)器及各種傳感器，避免由于灰塵而影響判斷的正確性。

定期用標(biāo)準(zhǔn)比濁管對比濁儀進(jìn)行校正，用ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株測試各種試卡，并作好質(zhì)控記錄。

建立儀器使用以及故障和維修記錄，詳細(xì)記錄每次使用情況和故障的時間、內(nèi)容、性質(zhì)、原因和解決辦法。

定期由工程師作全面保養(yǎng)，并排除故障隱患。第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的進(jìn)展

未來理想的微生物鑒定和藥敏分析系統(tǒng)應(yīng)檢測速度更快；檢測的準(zhǔn)確率和分辨率更高；自動化和電腦的智能化程度更強(qiáng)；檢測成本更低。我們相信，隨著

生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)技術(shù)的進(jìn)步，新一代更適合臨床微生物檢測鑒定以及藥物敏感性分析的自動化儀器將不斷涌現(xiàn)。

第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)臨床常見的相關(guān)儀器1第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)臨床常見的相關(guān)儀器2第二節(jié)微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)微生物自動化檢測系統(tǒng)自動血培養(yǎng)檢測、分析系統(tǒng)自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)本章小結(jié)通過自動監(jiān)測培養(yǎng)基（液）中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO2的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢測微生物的存在。檢測培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓為基礎(chǔ)的血培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)用測壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng)采用光電原理監(jiān)測的血培養(yǎng)系統(tǒng)具有檢測靈敏度高，檢出的時間短，檢出病原菌的種類多，抗干擾能力強(qiáng)、實(shí)施連續(xù)、無損傷瓶外監(jiān)測等特點(diǎn)。由培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)儀和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)三部分組成自動血培養(yǎng)檢測、分析系統(tǒng)本章小結(jié)

鑒定采用微生物數(shù)碼鑒定原理抗菌藥物敏感性試驗(yàn)實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)具有自動化程度較高、檢測速度快、可鑒定細(xì)菌種類及藥敏試驗(yàn)種類多、數(shù)據(jù)處理軟件功能強(qiáng)大、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)。由測試卡（板）、菌液接種器、培養(yǎng)和監(jiān)測系統(tǒng)、數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)組成自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)本章小結(jié)1．自動化血培養(yǎng)儀的檢測系統(tǒng)的工作原理。2．自動化血培養(yǎng)檢測和分析系統(tǒng)按檢測原理可分為哪幾類？3．BacT/Alert自動血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。4．Bactec自動血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。5．自動血培養(yǎng)儀有哪些功能特點(diǎn)？6．微生物自動鑒定的工作原理。7．自動化抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的檢測原理。8．VITEK

自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)工作原理。9．微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的性能特點(diǎn)。思考題1.革蘭自動染片機(jī)的工作原理及結(jié)構(gòu)2.細(xì)菌DNA指紋圖譜分析儀的工作原理、主要用途3.革蘭自動染片機(jī)的使用與維護(hù)4.微生物檢驗(yàn)相關(guān)儀器的進(jìn)展65微生物檢驗(yàn)儀器的進(jìn)展主要內(nèi)容熟悉革蘭自動染片機(jī)、細(xì)菌DNA指紋圖譜分析儀的工作原理，革蘭自動染片機(jī)的結(jié)構(gòu)，細(xì)菌DNA指紋圖譜分析儀的主要用途。了解革蘭自動染片機(jī)的使用與維護(hù)、微生物檢驗(yàn)相關(guān)儀器的進(jìn)展。微生物檢驗(yàn)儀器的進(jìn)展學(xué)習(xí)目標(biāo)

微生物標(biāo)本的染色是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室病原菌形態(tài)學(xué)診斷的基本技術(shù)，長期以來實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員依靠手工操作完成涂片、染色。手工操作存在耗費(fèi)時間長、染色效果不穩(wěn)定、操作繁瑣、個人經(jīng)驗(yàn)性強(qiáng)難以標(biāo)準(zhǔn)化等缺點(diǎn)。

全自動標(biāo)本染色機(jī)，不僅能實(shí)現(xiàn)微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作的自動化，減輕實(shí)驗(yàn)人員制片中的勞動強(qiáng)度，而且還可進(jìn)一步提高標(biāo)本的染色效果和病原菌診斷水平。革蘭自動染片機(jī)

通過操作面板選擇染色步驟及不同的復(fù)染液，樣本溶液經(jīng)離心轉(zhuǎn)盤離心后，使溶液中微量的菌體濃縮、并固定干燥至玻片上。

涂片完成后，運(yùn)用自動噴霧染色技術(shù)，按儀器設(shè)定的革蘭氏染色步驟，通過負(fù)壓泵從染液瓶吸出所需溶液，經(jīng)噴嘴向旋轉(zhuǎn)的涂片噴出染液以完成染色及脫色過程，最后烘干涂片。工作原理革蘭自動染片機(jī)

涂片離心轉(zhuǎn)盤

玻片轉(zhuǎn)盤

噴嘴

工作原理革蘭自動染片機(jī)主要由操作面板、涂片離心轉(zhuǎn)盤、玻片轉(zhuǎn)盤、噴嘴、負(fù)壓染料瓶及染料輸送管道組成。革蘭自動染片機(jī)外觀基本結(jié)構(gòu)革蘭自動染片機(jī)參數(shù)設(shè)置在操作面板上選擇相應(yīng)的染色步驟及不同的復(fù)染試劑，設(shè)定染片數(shù)目。手工加載玻片，并給每個加樣口內(nèi)加注樣品懸液。啟動開始鍵，儀器開始離心旋轉(zhuǎn)?？蛇x擇直接加熱固定染色，或在儀器的設(shè)定模式中選擇自動甩片固定后染色。染片固定在玻片轉(zhuǎn)盤卡槽中噴嘴噴涂結(jié)晶紫染色。過量的染色劑會被甩出去，然后用去離子水洗凈，防止在染過的細(xì)菌周圍形成沉淀。噴嘴再將碘液噴至玻片上進(jìn)行碘染色。碘能和結(jié)晶紫形成沉淀。過量的碘會被甩出去，然后用去離子水洗掉。使用脫色劑反復(fù)循環(huán)脫色以去掉碘和結(jié)晶紫的混合物。革蘭氏陽性菌呈紫色；革蘭氏陰性呈紅色。革蘭陽性菌不易脫色復(fù)染后仍保留初染時的顏色，革蘭陰性菌被脫色易復(fù)染。樣本裝載固定初染媒染脫色復(fù)染鏡檢革蘭自動染片機(jī)1.操作簡單，且染色效果良好，尤其適用于批量染色。2.染色過程采用霧化噴染，有效解決了染色不勻的問題。3.按照操作者需求對細(xì)菌涂片可選擇手工固定或儀器自動固定。4.根據(jù)涂片厚薄設(shè)定試劑用量，如結(jié)晶紫、碘液、脫色液等，降低消耗，節(jié)約成本。5..染色完成后儀器自動干燥涂片，可直接鏡檢。革蘭自動染片機(jī)性能特點(diǎn)1.由于使用染液中含有易揮發(fā)成份，染片機(jī)應(yīng)放置通風(fēng)處。2.染片過程中會有大量的廢液產(chǎn)生，因此，染片機(jī)的出水口應(yīng)接入排污管道中。3.染片機(jī)的水槽底部有數(shù)個漏孔，要注意定期清洗，以免被水垢等物堵塞。4.做好機(jī)器保養(yǎng)、清洗工作，定期添加染液。革蘭自動染片機(jī)注意事項(xiàng)與維護(hù)

微生物DNA指紋圖譜分析儀，是基于細(xì)菌基因組內(nèi)重復(fù)序列聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（rep-PCR技術(shù)