水質(zhì) 細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定 平皿計(jì)數(shù)法(征求意見稿)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

目次

前言.............................................................................................................................................ii

1適用范圍.......................................................................................................................................1

2術(shù)語和定義...................................................................................................................................1

3方法原理.......................................................................................................................................1

4干擾和消除...................................................................................................................................1

5試劑和材料...................................................................................................................................1

6儀器和設(shè)備...................................................................................................................................2

7樣品...............................................................................................................................................2

8分析步驟.......................................................................................................................................3

9結(jié)果計(jì)算與表示...........................................................................................................................4

10精密度和準(zhǔn)確度.........................................................................................................................4

11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制.................................................................................................................5

12廢物處理.....................................................................................................................................5

i

前言

為貫徹《中華人民共和國(guó)環(huán)境保護(hù)法》和《中華人民共和國(guó)水污染防治法》,保護(hù)環(huán)境,

保障人體健康,規(guī)范水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定方法,制定本標(biāo)準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定地表水、地下水和廢水中細(xì)菌總數(shù)的平皿計(jì)數(shù)法。

本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。

本標(biāo)準(zhǔn)由環(huán)境保護(hù)部環(huán)境監(jiān)測(cè)司、科技標(biāo)準(zhǔn)司組織制訂。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位:遼寧省環(huán)境監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)中心。

本標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證單位:大連市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心、丹東市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心站、錦州市環(huán)境監(jiān)測(cè)中心

站、遼陽市環(huán)境監(jiān)測(cè)站、沈陽市疾病預(yù)防控制中心、遼寧北方環(huán)境檢測(cè)技術(shù)有限公司。

本標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境保護(hù)部201□年□□月□□日批準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)自201□年□□月□□日起實(shí)施。

本標(biāo)準(zhǔn)由環(huán)境保護(hù)部解釋。

ii

水質(zhì)細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定平皿計(jì)數(shù)法

1適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中細(xì)菌總數(shù)的平皿計(jì)數(shù)法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水、地下水和廢水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

2.1

細(xì)菌總數(shù)totalbacteria

36℃培養(yǎng)48h,1ml水樣在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上所生長(zhǎng)的需氧菌、兼性厭氧菌和異養(yǎng)菌菌落總數(shù)。

2.2

菌落形成單位Colony-FormingUnits,CFU

單位體積中的細(xì)菌群落總數(shù)。

3方法原理

細(xì)菌能以單獨(dú)個(gè)體、成雙成對(duì)、鏈狀、成簇等形式存在,而且沒有任何一種培養(yǎng)基能夠

滿足一個(gè)水樣中所有細(xì)菌的生理要求。據(jù)此特性,通過將水樣接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,在

特定的物理?xiàng)l件下(36℃培養(yǎng)48h)所生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落的總數(shù)作為測(cè)定水中需氧菌、兼性厭

氧菌和異養(yǎng)菌等細(xì)菌總數(shù)。

4干擾和消除

氯具有氧化性,較高濃度的重金屬離子具有毒性,它們都能破壞微生物細(xì)胞內(nèi)酶的活性,

最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡??煞謩e加入硫代硫酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉排除氯或重金屬的干擾。

5試劑和材料

除非另有說明,分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純化學(xué)試劑。

5.1營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

成分:

蛋白胨10g

1

牛肉膏3g

氯化鈉5g

瓊脂15g~20g

制法:將上述成分或含有上述成分的市售成品溶解于1000ml蒸餾水或去離子水中,調(diào)節(jié)

pH值到7.4~7.6,分裝于玻璃容器中,經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min,儲(chǔ)存于冷暗處備用。

5.2無菌水:新制備的蒸餾水或去離子水經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min,備用。

5.3硫代硫酸鈉(Na2S2O3?5H2O)。

5.4乙二胺四乙酸二鈉(C10H14N2O8Na2?2H2O)。

5.5硫代硫酸鈉溶液:(Na2S2O3?5H2O)=0.10g/ml

稱取硫代硫酸鈉10g,溶于適量蒸餾水或去離子水中,定容至100ml,現(xiàn)配。

5.6乙二胺四乙酸二鈉溶液:(C10H14N2O8Na2?2H2O)=0.15g/ml

稱取乙二胺四乙酸二鈉15g,溶于適量蒸餾水或去離子水中,定容至100ml,此溶液保質(zhì)

期為30d。

5.7玻璃珠:直徑3~8mm。

6儀器和設(shè)備

6.1采樣瓶:250ml帶螺旋帽或磨口塞的廣口玻璃瓶。

6.2高壓蒸汽滅菌器:121℃、101.3kpa。

6.3恒溫培養(yǎng)箱:溫度偏差±2℃。

6.4pH計(jì):準(zhǔn)確到0.1pH單位。

6.5放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器。

6.6一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

注:玻璃器皿及采樣器具試驗(yàn)前要按無菌操作要求包扎,121℃高壓蒸汽滅菌20min備用。

7樣品

7.1樣品采集

與其他項(xiàng)目一同采樣時(shí),先單獨(dú)采集微生物水樣。采樣瓶不得用水樣洗滌,按無菌操作

要求采集水樣約200ml于滅菌的采樣瓶中。

采集江、河、湖、庫(kù)等地表水水樣時(shí),可握住瓶子下部直接將帶塞采樣瓶插入水中,距

水面10~15cm處,瓶口朝水流方向,拔瓶塞,使水樣灌入瓶?jī)?nèi)然后蓋上瓶塞,將采樣瓶從水

中取出。如果沒有水流,可握住瓶子水平前推。水樣采好后,迅速扎上無菌包裝紙。

從水龍頭采集樣品時(shí),不要選用漏水的龍頭,采水前可先將水龍頭打開至最大,放水3~

5min,然后將水龍頭關(guān)閉,用火焰灼燒約3min滅菌,開足龍頭,再放水1min,以充分除去

水管中的滯留雜質(zhì)。采樣時(shí)控制水流速度,小心接入瓶?jī)?nèi)。

采集地表水、廢水樣品及一定深度的水樣時(shí),可使用滅菌過的專用采樣裝置采樣。

在同一采樣點(diǎn)進(jìn)行分層采樣時(shí),應(yīng)自上而下進(jìn)行,以免不同層次的攪擾。

2

如果采集的是含有余氯或經(jīng)過加氯處理的水樣,需在采樣瓶滅菌前加入硫代硫酸鈉溶液

(5.5),以除去余氯對(duì)細(xì)菌的抑制作用(每125ml容積加入0.1ml硫代硫酸鈉溶液);如果采

集的是重金屬離子含量較高的水樣,則在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉溶液(5.6),以

消除干擾(每125ml容積加入0.3ml乙二胺四乙酸二鈉溶液)。

注:10mg硫代硫酸鈉可保證去除水樣中1.5mg余氯,硫代硫酸鈉用量可根據(jù)水樣實(shí)際余氯量調(diào)整。

7.2樣品保存

采樣后2h內(nèi)檢測(cè),否則,需10℃以下冷藏并不得超過6h。實(shí)驗(yàn)室接樣后,不能立即開

展檢測(cè)的,應(yīng)將樣品放入0~4℃冰箱并2h內(nèi)測(cè)定。

8分析步驟

8.1樣品稀釋

將采集的水樣加入適量無菌玻璃珠(5.7),用力振搖20~25次,使可能存在的細(xì)菌凝團(tuán)

成分散狀。根據(jù)水樣污染程度確定稀釋度。以無菌操作方式吸取1ml充分混勻的水樣,注入

盛有9ml無菌水的試管中,混勻成1:10稀釋樣品。吸取1:10的稀釋樣品1ml注入盛有9ml

無菌水的試管中,混勻成1:100稀釋樣品。按同法依次稀釋成1:1000、1:10000稀釋樣品。每

個(gè)水樣至少應(yīng)稀釋3個(gè)適宜濃度。

8.2接種

以無菌操作方式用1ml滅菌的移液管吸取充分混勻的水樣或稀釋水樣1ml,注入滅菌平

皿中,傾注15~20ml冷卻到44~47℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,并立即旋搖平皿,使水樣與培養(yǎng)

基充分混勻。每個(gè)水樣或稀釋樣品傾注2個(gè)平皿。

8.3培養(yǎng)

待平皿內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基冷卻凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,使底面向上(避免因表面水分凝結(jié)

而影響細(xì)菌均勻生長(zhǎng)),在36±2℃條件下,恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h后觀察結(jié)果。

8.4結(jié)果判讀

平皿上有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí),則不能使用。

片狀菌落不到平皿的一半,而其余一半菌落分布又很均勻時(shí),將此分布均勻的菌落計(jì)數(shù),

并乘以2代表全皿菌落總數(shù)。

外觀(形態(tài)或顏色)相似,距離相近卻不相觸的菌落,只要它們之間的距離不小于最小

菌落的直徑,予以計(jì)數(shù)。緊密接觸而外觀相異的菌落,予以計(jì)數(shù)。

3

9結(jié)果計(jì)算與表示

9.1結(jié)果計(jì)算

以每個(gè)平皿菌落的總數(shù)或平均數(shù)(同一稀釋度兩個(gè)重復(fù)平皿的平均數(shù))乘以稀釋倍數(shù)來

計(jì)算1ml水樣中的細(xì)菌總數(shù)。各種不同情況的計(jì)算方法如下:

選擇平均菌落數(shù)在30~300之間者進(jìn)行計(jì)數(shù),當(dāng)只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范

圍時(shí),以該平均菌落數(shù)乘以其稀釋倍數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例1)。

若有兩個(gè)稀釋度平均菌落數(shù)均在30~300之間,計(jì)數(shù)則按二者之比值(二者分別乘以其

稀釋倍數(shù)后,較大值與較小值之比)來決定。若其比值小于2,以兩者的平均數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)

定值;若大于2則以稀釋度較小的菌落總數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值;若等于2亦以稀釋度較小的

菌落總數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例2、例3、例4)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則以稀釋度最大的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為細(xì)

菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例5)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則以稀釋度最小的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為細(xì)

菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例6)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間,則以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘

以稀釋倍數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例7)。

表1稀釋度選擇及菌落總數(shù)測(cè)定值

不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋度菌落總數(shù)

示例

10-110-210-3菌落數(shù)之比(CFU/ml)

1136516420—16400

22760295461.637750

32890271602.227100

415030821500

5無法計(jì)數(shù)1650513—513000

627115—270

7無法計(jì)數(shù)30512—30500

9.2結(jié)果表示:

測(cè)定結(jié)果保留兩位有效數(shù)字,大于等于100時(shí)以科學(xué)計(jì)數(shù)法表示,結(jié)果的單位為CFU/ml。

平均值以幾何平均計(jì)算。若所有稀釋度的平皿上均無菌落生長(zhǎng),則以“未檢出”表示。

10精密度和準(zhǔn)確度

10.1精密度

4

6個(gè)實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)低濃度(約50CFU/ml)、中濃度(約3.2×103CFU/ml)和高濃度(約

1.5×105CFU/ml)三個(gè)不同濃度細(xì)菌總數(shù)的樣品及有證標(biāo)準(zhǔn)樣品(濃度為95MPN/ml,可接

受范圍為22~168MPN/ml)進(jìn)行了測(cè)定,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍分別為2.4%~6.2%、

0.59%~1.8%、0.29%~1.3%和1.7%~5.6%;實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為18%、4.7%、2.4%

和3.7%;實(shí)驗(yàn)室間95%置信區(qū)間見表2。

表2實(shí)驗(yàn)室間95%置信區(qū)間

低濃度(CFU/ml)中濃度(CFU/ml)高濃度(CFU/ml)有證標(biāo)準(zhǔn)樣品(CFU/ml)

95%置信95%置信95%置信95%置信

均值均值均值均值

區(qū)間區(qū)間區(qū)間區(qū)間

1.7×103~9.8×104~

3931~502.5×1031.3×1056555~76

3.6×1031.8×105

10.2準(zhǔn)確度

6個(gè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)有證標(biāo)準(zhǔn)樣品(濃度為95MPN/ml,可接受范圍為22~168MPN/ml)進(jìn)行

測(cè)定,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)誤差范圍為-13%~-4.6%;相對(duì)誤差的最終值為-8.7%±6.5%。

注:微生物檢測(cè)數(shù)據(jù)為偏態(tài)分布,其測(cè)定結(jié)果全部經(jīng)以10為底對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行計(jì)算。

11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制

11.1培養(yǎng)基檢驗(yàn)

更換不同批次培養(yǎng)基時(shí)要進(jìn)行陽性菌株檢驗(yàn),以確保其符合要求。

11.2培養(yǎng)基保存

配置好的培養(yǎng)基不易保存過久,不能進(jìn)行多次融化操作,以少量勤配為宜。存放時(shí)應(yīng)避

免陽光直射,并且要避免雜菌侵入和水分蒸發(fā)。當(dāng)培養(yǎng)基顏色變化或脫水明顯時(shí)應(yīng)廢棄不用。

11.3空白試驗(yàn)

每次試驗(yàn)都要用無菌水做實(shí)驗(yàn)室空白測(cè)定,培養(yǎng)后平皿上不得有菌落生長(zhǎng)。否則,該次樣

品測(cè)定結(jié)果無效,應(yīng)查明原因后重新測(cè)定。

12廢物處理

使用后的器皿及廢棄物須經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min后,器皿方可清洗,廢棄

物作為一般廢物處置。

5

中華人民共和國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)

HJ□□□-201□

水質(zhì)細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定平皿計(jì)數(shù)法

Waterquality-Determinationoftotalbacteria-Platecountmethod

(征求意見稿)

水質(zhì)細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定平皿計(jì)數(shù)法

1適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測(cè)定水中細(xì)菌總數(shù)的平皿計(jì)數(shù)法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水、地下水和廢水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

2.1

細(xì)菌總數(shù)totalbacteria

36℃培養(yǎng)48h,1ml水樣在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上所生長(zhǎng)的需氧菌、兼性厭氧菌和異養(yǎng)菌菌落總數(shù)。

2.2

菌落形成單位Colony-FormingUnits,CFU

單位體積中的細(xì)菌群落總數(shù)。

3方法原理

細(xì)菌能以單獨(dú)個(gè)體、成雙成對(duì)、鏈狀、成簇等形式存在,而且沒有任何一種培養(yǎng)基能夠

滿足一個(gè)水樣中所有細(xì)菌的生理要求。據(jù)此特性,通過將水樣接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,在

特定的物理?xiàng)l件下(36℃培養(yǎng)48h)所生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落的總數(shù)作為測(cè)定水中需氧菌、兼性厭

氧菌和異養(yǎng)菌等細(xì)菌總數(shù)。

4干擾和消除

氯具有氧化性,較高濃度的重金屬離子具有毒性,它們都能破壞微生物細(xì)胞內(nèi)酶的活性,

最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。可分別加入硫代硫酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉排除氯或重金屬的干擾。

5試劑和材料

除非另有說明,分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純化學(xué)試劑。

5.1營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

成分:

蛋白胨10g

1

牛肉膏3g

氯化鈉5g

瓊脂15g~20g

制法:將上述成分或含有上述成分的市售成品溶解于1000ml蒸餾水或去離子水中,調(diào)節(jié)

pH值到7.4~7.6,分裝于玻璃容器中,經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min,儲(chǔ)存于冷暗處備用。

5.2無菌水:新制備的蒸餾水或去離子水經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min,備用。

5.3硫代硫酸鈉(Na2S2O3?5H2O)。

5.4乙二胺四乙酸二鈉(C10H14N2O8Na2?2H2O)。

5.5硫代硫酸鈉溶液:(Na2S2O3?5H2O)=0.10g/ml

稱取硫代硫酸鈉10g,溶于適量蒸餾水或去離子水中,定容至100ml,現(xiàn)配。

5.6乙二胺四乙酸二鈉溶液:(C10H14N2O8Na2?2H2O)=0.15g/ml

稱取乙二胺四乙酸二鈉15g,溶于適量蒸餾水或去離子水中,定容至100ml,此溶液保質(zhì)

期為30d。

5.7玻璃珠:直徑3~8mm。

6儀器和設(shè)備

6.1采樣瓶:250ml帶螺旋帽或磨口塞的廣口玻璃瓶。

6.2高壓蒸汽滅菌器:121℃、101.3kpa。

6.3恒溫培養(yǎng)箱:溫度偏差±2℃。

6.4pH計(jì):準(zhǔn)確到0.1pH單位。

6.5放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器。

6.6一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

注:玻璃器皿及采樣器具試驗(yàn)前要按無菌操作要求包扎,121℃高壓蒸汽滅菌20min備用。

7樣品

7.1樣品采集

與其他項(xiàng)目一同采樣時(shí),先單獨(dú)采集微生物水樣。采樣瓶不得用水樣洗滌,按無菌操作

要求采集水樣約200ml于滅菌的采樣瓶中。

采集江、河、湖、庫(kù)等地表水水樣時(shí),可握住瓶子下部直接將帶塞采樣瓶插入水中,距

水面10~15cm處,瓶口朝水流方向,拔瓶塞,使水樣灌入瓶?jī)?nèi)然后蓋上瓶塞,將采樣瓶從水

中取出。如果沒有水流,可握住瓶子水平前推。水樣采好后,迅速扎上無菌包裝紙。

從水龍頭采集樣品時(shí),不要選用漏水的龍頭,采水前可先將水龍頭打開至最大,放水3~

5min,然后將水龍頭關(guān)閉,用火焰灼燒約3min滅菌,開足龍頭,再放水1min,以充分除去

水管中的滯留雜質(zhì)。采樣時(shí)控制水流速度,小心接入瓶?jī)?nèi)。

采集地表水、廢水樣品及一定深度的水樣時(shí),可使用滅菌過的專用采樣裝置采樣。

在同一采樣點(diǎn)進(jìn)行分層采樣時(shí),應(yīng)自上而下進(jìn)行,以免不同層次的攪擾。

2

如果采集的是含有余氯或經(jīng)過加氯處理的水樣,需在采樣瓶滅菌前加入硫代硫酸鈉溶液

(5.5),以除去余氯對(duì)細(xì)菌的抑制作用(每125ml容積加入0.1ml硫代硫酸鈉溶液);如果采

集的是重金屬離子含量較高的水樣,則在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉溶液(5.6),以

消除干擾(每125ml容積加入0.3ml乙二胺四乙酸二鈉溶液)。

注:10mg硫代硫酸鈉可保證去除水樣中1.5mg余氯,硫代硫酸鈉用量可根據(jù)水樣實(shí)際余氯量調(diào)整。

7.2樣品保存

采樣后2h內(nèi)檢測(cè),否則,需10℃以下冷藏并不得超過6h。實(shí)驗(yàn)室接樣后,不能立即開

展檢測(cè)的,應(yīng)將樣品放入0~4℃冰箱并2h內(nèi)測(cè)定。

8分析步驟

8.1樣品稀釋

將采集的水樣加入適量無菌玻璃珠(5.7),用力振搖20~25次,使可能存在的細(xì)菌凝團(tuán)

成分散狀。根據(jù)水樣污染程度確定稀釋度。以無菌操作方式吸取1ml充分混勻的水樣,注入

盛有9ml無菌水的試管中,混勻成1:10稀釋樣品。吸取1:10的稀釋樣品1ml注入盛有9ml

無菌水的試管中,混勻成1:100稀釋樣品。按同法依次稀釋成1:1000、1:10000稀釋樣品。每

個(gè)水樣至少應(yīng)稀釋3個(gè)適宜濃度。

8.2接種

以無菌操作方式用1ml滅菌的移液管吸取充分混勻的水樣或稀釋水樣1ml,注入滅菌平

皿中,傾注15~20ml冷卻到44~47℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,并立即旋搖平皿,使水樣與培養(yǎng)

基充分混勻。每個(gè)水樣或稀釋樣品傾注2個(gè)平皿。

8.3培養(yǎng)

待平皿內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基冷卻凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,使底面向上(避免因表面水分凝結(jié)

而影響細(xì)菌均勻生長(zhǎng)),在36±2℃條件下,恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h后觀察結(jié)果。

8.4結(jié)果判讀

平皿上有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí),則不能使用。

片狀菌落不到平皿的一半,而其余一半菌落分布又很均勻時(shí),將此分布均勻的菌落計(jì)數(shù),

并乘以2代表全皿菌落總數(shù)。

外觀(形態(tài)或顏色)相似,距離相近卻不相觸的菌落,只要它們之間的距離不小于最小

菌落的直徑,予以計(jì)數(shù)。緊密接觸而外觀相異的菌落,予以計(jì)數(shù)。

3

9結(jié)果計(jì)算與表示

9.1結(jié)果計(jì)算

以每個(gè)平皿菌落的總數(shù)或平均數(shù)(同一稀釋度兩個(gè)重復(fù)平皿的平均數(shù))乘以稀釋倍數(shù)來

計(jì)算1ml水樣中的細(xì)菌總數(shù)。各種不同情況的計(jì)算方法如下:

選擇平均菌落數(shù)在30~300之間者進(jìn)行計(jì)數(shù),當(dāng)只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范

圍時(shí),以該平均菌落數(shù)乘以其稀釋倍數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例1)。

若有兩個(gè)稀釋度平均菌落數(shù)均在30~300之間,計(jì)數(shù)則按二者之比值(二者分別乘以其

稀釋倍數(shù)后,較大值與較小值之比)來決定。若其比值小于2,以兩者的平均數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)

定值;若大于2則以稀釋度較小的菌落總數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值;若等于2亦以稀釋度較小的

菌落總數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例2、例3、例4)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則以稀釋度最大的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為細(xì)

菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例5)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則以稀釋度最小的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為細(xì)

菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例6)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間,則以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘

以稀釋倍數(shù)為細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值(見表1例7)。

表1稀釋度選擇及菌落總數(shù)測(cè)定值

不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋度菌落總數(shù)

示例

10-110-210-3菌落數(shù)之比(CFU/ml)

1136516420—16400

22760295461.637750

32890271602.227100

415030821500

5無法計(jì)數(shù)1650513—513000

627115—270

7無法計(jì)數(shù)30512—30500

9.2結(jié)果表示:

測(cè)定結(jié)果保留兩位有效數(shù)字,大于等于100時(shí)以科學(xué)計(jì)數(shù)法表示,結(jié)果的單位為C

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