DB32-T 2736-2015鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20

B31

備案號：44814-2015DB32

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T2736-2015

鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

Technicalcodeforproducingasepticseedlingsof

DendrobiumofficinalekimuraetMigo

2015-02-15發(fā)布2015-04-15實施

江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB32/T2736-2015

鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)環(huán)境的消毒滅菌、培養(yǎng)基配制、培養(yǎng)條件調(diào)控、無菌播種苗

生產(chǎn)工藝流程，以及商品苗的質(zhì)量分級、包裝、運輸?shù)取?/p>

本標(biāo)準(zhǔn)適用于鐵皮石斛無菌播種苗的生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

LY/T1882-2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。

3.1

鐵皮石斛無菌播種苗asepticseedlingsofDendrobiumofficinalekimuraetMigo

以鐵皮石斛成熟蒴果的種子通過組織培養(yǎng)方法，在培養(yǎng)基上進(jìn)行無菌播種、培養(yǎng)獲得的種苗。

3.2

萌發(fā)培養(yǎng)cultureofgermination

從種子播種，萌發(fā)出新葉的培養(yǎng)過程。

3.3

生長培養(yǎng)cultureofgrowth

萌發(fā)培養(yǎng)結(jié)束，將幼苗稀開轉(zhuǎn)接至生長培養(yǎng)基，形成植株的培養(yǎng)過程。

3.4

生根培養(yǎng)cultureofrooting

生長培養(yǎng)結(jié)束，將幼苗再一次稀開轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基，形成根系，成為成品苗的培養(yǎng)過程。

4生產(chǎn)場地與設(shè)備

按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行。

1

DB32/T2736-2015

5容器和器械清洗

容器采用650ml蘭花組培瓶。清洗按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行。

6培養(yǎng)基配制和貯存

按照NY/T2306-2013和LY/T1882-2010中的規(guī)定進(jìn)行。其中固化劑（瓊脂等）可以采用粉末狀，不

需先加熱溶化，和其它配制溶液混合均勻，在分裝機(jī)內(nèi)定容后，pH調(diào)整至5.7~5.8。邊均勻攪拌、邊分

裝。

7滅菌、接種、培養(yǎng)室操作

按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行。

8無菌播種苗生產(chǎn)流程

8.1無菌播種苗生產(chǎn)流程圖

參見附錄A。

8.2蒴果的采集及處理

8.2.1采集地選擇

采集地周圍1km范圍內(nèi)應(yīng)無其它種類石斛。

8.2.2采收和保存

經(jīng)自然或人工授粉后，蒴果開始轉(zhuǎn)黃時，選擇飽滿的果實連莖一起采收，采收后放于陰涼干燥處備

用。

8.2.3蒴果處理

取完整的蒴果在超凈工作臺上切除果柄和花蒂，按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行滅菌。滅菌后的

蒴果在超凈臺上晾干，當(dāng)天播種。

8.3萌發(fā)培養(yǎng)

將滅菌的蒴果，置于無菌濾紙上，在蒴果花蒂端切開一小口，用鑷子夾住花柄端在培養(yǎng)瓶瓶口輕輕

抖動，邊抖動邊轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，將種子均勻地播撒于萌發(fā)培養(yǎng)基表面。一個蒴果接種5~8瓶。

接種后的培養(yǎng)瓶放于培養(yǎng)室，前3d為暗培養(yǎng)，第4d始光照強(qiáng)度為14.4~18μmol·m-2·s-1，第7d后光照

強(qiáng)度增加至27~36μmol·m-2·s-1，光照時間為12h/d；溫度25±3℃；培養(yǎng)60~90d。

8.4生長培養(yǎng)

幼芽長至1~3mm時轉(zhuǎn)接至生長培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶150~200株。

轉(zhuǎn)接后的培養(yǎng)瓶放于培養(yǎng)室，光照強(qiáng)度為36~72μmol·m-2·s-1，光照時間為12h/d；溫度為25±3℃；培

養(yǎng)60~90d。

8.5生根培養(yǎng)

2

DB32/T2736-2015

幼苗長至1~1.5cm時轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶20~40株。

轉(zhuǎn)接后的培養(yǎng)瓶放于培養(yǎng)室，培養(yǎng)條件同8.4。

8.6標(biāo)簽

每次接種后，將標(biāo)注好播種日期、品種號、操作人工號等信息的標(biāo)簽貼于培養(yǎng)瓶上。

8.7煉苗

當(dāng)幼苗長至3~5cm高時，將培養(yǎng)瓶放置于溫室自然散射光下煉苗，光照強(qiáng)度為144~180μmol·m-2·s-1，

溫度25±5℃，煉苗7~15d，即可進(jìn)行銷售或種植。

9商品苗質(zhì)量

9.1質(zhì)量要求

商品苗應(yīng)為非污染、無爛莖、爛根、黃葉；葉片4片以上，正常展開，葉色翠綠。650ml蘭花組培瓶

每瓶40-45株。

9.2商品苗分級

表1鐵皮石斛商品苗分級

根葉片株高莖粗

等級

（條）（片）（cm）（cm）

一級苗3~5＞6≥5.0≥0.3

二級苗2~34~6≥3≥0.2

10出售

10.1包裝

鐵皮石斛瓶苗直立放置在塑料筐或紙箱中，包裝箱應(yīng)該結(jié)實牢固并設(shè)有透氣孔，并有保持向上的標(biāo)

識，裝箱后貼上標(biāo)簽。

10.2標(biāo)簽

每批苗應(yīng)有標(biāo)簽，標(biāo)明無菌苗生產(chǎn)單位、品種、苗齡、等級、數(shù)量、出苗日期、批號、標(biāo)準(zhǔn)號、苗

木檢驗證書號等。

10.3運輸

當(dāng)溫度超過30℃或低于5℃時，裝運的車廂應(yīng)有空調(diào)，溫度調(diào)節(jié)至25±3℃。到目的地后應(yīng)立即拆

封，放置到待移栽區(qū)域。

3

DB32/T2736-2015

AA

附錄A

（資料性附錄）

鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)流程

優(yōu)良親本制種

滅菌

無菌蒴果

播種

萌發(fā)培養(yǎng)

60~90d后轉(zhuǎn)接

生長培養(yǎng)

90~120d后轉(zhuǎn)接

生根培養(yǎng)

90~120d

成品苗

煉苗7~15d

商品苗

銷售

圖A.1鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)流程

_________________________________

4

DB32/T2736-2015

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》編制。

本標(biāo)準(zhǔn)由蘇州神元生物科技股份有限公司提出。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：蘇州神元生物科技股份有限公司、蘇州市鐵皮石斛研究院。

本標(biāo)準(zhǔn)起草人：滕士元、史驥清、郭傳敏、趙鋒、時劍、孫賀、王譯、侯森廣、張琳琳。

I

DB32/T2736-2015

鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了鐵皮石斛無菌播種苗生產(chǎn)環(huán)境的消毒滅菌、培養(yǎng)基配制、培養(yǎng)條件調(diào)控、無菌播種苗

生產(chǎn)工藝流程，以及商品苗的質(zhì)量分級、包裝、運輸?shù)取?/p>

本標(biāo)準(zhǔn)適用于鐵皮石斛無菌播種苗的生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

LY/T1882-2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

本標(biāo)準(zhǔn)采用下列定義。

3.1

鐵皮石斛無菌播種苗asepticseedlingsofDendrobiumofficinalekimuraetMigo

以鐵皮石斛成熟蒴果的種子通過組織培養(yǎng)方法，在培養(yǎng)基上進(jìn)行無菌播種、培養(yǎng)獲得的種苗。

3.2

萌發(fā)培養(yǎng)cultureofgermination

從種子播種，萌發(fā)出新葉的培養(yǎng)過程。

3.3

生長培養(yǎng)cultureofgrowth

萌發(fā)培養(yǎng)結(jié)束，將幼苗稀開轉(zhuǎn)接至生長培養(yǎng)基，形成植株的培養(yǎng)過程。

3.4

生根培養(yǎng)cultureofrooting

生長培養(yǎng)結(jié)束，將幼苗再一次稀開轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基，形成根系，成為成品苗的培養(yǎng)過程。

4生產(chǎn)場地與設(shè)備

按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行。

1

DB32/T2736-2015

5容器和器械清洗

容器采用650ml蘭花組培瓶。清洗按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行。

6培養(yǎng)基配制和貯存

按照NY/T2306-2013和LY/T1882-2010中的規(guī)定進(jìn)行。其中固化劑（瓊脂等）可以采用粉末狀，不

需先加熱溶化，和其它配制溶液混合均勻，在分裝機(jī)內(nèi)定容后，pH調(diào)整至5.7~5.8。邊均勻攪拌、邊分

裝。

7滅菌、接種、培養(yǎng)室操作

按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行。

8無菌播種苗生產(chǎn)流程

8.1無菌播種苗生產(chǎn)流程圖

參見附錄A。

8.2蒴果的采集及處理

8.2.1采集地選擇

采集地周圍1km范圍內(nèi)應(yīng)無其它種類石斛。

8.2.2采收和保存

經(jīng)自然或人工授粉后，蒴果開始轉(zhuǎn)黃時，選擇飽滿的果實連莖一起采收，采收后放于陰涼干燥處備

用。

8.2.3蒴果處理

取完整的蒴果在超凈工作臺上切除果柄和花蒂，按照NY/T2306-2013中的規(guī)定執(zhí)行滅菌。滅菌后的

蒴果在超凈臺上晾干，當(dāng)天播種。

8.3萌發(fā)培養(yǎng)

將滅菌的蒴果，置于無菌濾紙上，在蒴果花蒂端切開一小口，用鑷子夾住花柄端在培養(yǎng)瓶瓶口輕輕

抖動，邊抖動邊轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，將種子均勻地播撒于萌發(fā)培養(yǎng)基表面。一個蒴果接種5~8瓶。

接種后的培養(yǎng)瓶放于培養(yǎng)室，前3d為暗培養(yǎng)，第4d始光照強(qiáng)度為14.4~18μmol·m-2·s-1，第7d后光照

強(qiáng)度增加至27~36μmol·m-2·s-1，光照時間為12h/d；溫度25±3℃；培養(yǎng)60~90d。

8.4生長培養(yǎng)

幼芽長至1~3mm時轉(zhuǎn)接至生長培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶150~200株。

轉(zhuǎn)接后的培養(yǎng)瓶放于培養(yǎng)室，光照強(qiáng)度為36~72μmol·m-2·s-1，光照時間為12h/d；溫度為25±3℃；培

養(yǎng)60~90d。

8.5生根培養(yǎng)

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DB32/T2736-2015

幼苗長至1~1.5cm時轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶20~40株。

轉(zhuǎn)接后的培養(yǎng)瓶放于培養(yǎng)室，培養(yǎng)條件同8.4。

8.6標(biāo)簽

每次接種后，將標(biāo)注好播種日期、品種號、操作人工號等信息的標(biāo)簽貼于培養(yǎng)瓶上。

8.7煉苗

當(dāng)幼苗長至3~5cm高時，將培養(yǎng)瓶放置于溫室自然散射光下煉苗，光照強(qiáng)度為144~180μmol·m-2·s-1，

溫度25±5℃，煉苗7~15d，即可進(jìn)行銷售或種植。

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