液相色譜儀的操作與基線問題處理及維護和修理保養(yǎng)

第第頁液相色譜儀的操作與基線問題處理及維護和修理保養(yǎng)液相色譜儀的操作與基線問題處理高效液相色譜儀適合于分別、分析高沸點、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質(zhì)，因而廣泛為化學、醫(yī)學、工業(yè)、農(nóng)學、商檢和法檢等學科領(lǐng)域中針對這種精密而又運用廣泛的科學儀器。下面我們來聊一聊基線。HPLC常見的基線問題緊要有基線漂移以及基線噪音?；€漂移線漂移基線漂移是色譜工普遍碰到的問題。一般說來，機器剛起動時，基線簡單漂移，大約要30min的平衡時間，假如用了緩沖溶液、緩沖鹽，或者在低波長下（220nm）平衡時間相對會比較長，仍舊發(fā)覺基線漂移，原因可能有以下幾種：1、柱溫波動掌控好柱子和流動相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。2、流通池被污染或有氣體用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池（盡量斷開柱子）。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用鹽酸）。3、紫外燈能量不足更換新的紫外燈4、流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。檢查流動相的構(gòu)成，使用高品質(zhì)的化學試劑及HPLC級的溶劑?；€噪音對于紫外檢測器,氘燈光源打開后要預熱30min以上,基線才能穩(wěn)定。噪聲是指與被測物無關(guān)的檢測器輸出信號的隨機擾動變化,分短期噪聲和長期噪聲兩種?；€噪音（規(guī)定的）產(chǎn)生基線噪音的原因有：在流動相、檢測器或泵中有空氣；漏液；流動相混合不完全；溫度影響（柱溫過高,檢測器未加熱）；在同一條線上有其他電子設(shè)備；泵振動。了避開基線噪音,在正式進樣之前,需要對流動相脫氣；沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣；檢查管路接頭是否松動；泵是否漏液；是否有鹽析出和不正常的噪音,如有必要,更換泵密封；用手搖動使溶劑混合均勻或使用低粘度的溶劑削減差異或加上熱交換器；有其他電子設(shè)備時斷開LC、檢測器和記錄儀,檢查干擾是否來自于外部,加以更正；泵振動時在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器?；€噪音（不規(guī)定的）（1）漏液：檢查接頭是否松動,泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要,更換密封,檢查流通池是否漏液。（2）流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成：檢查流動相的構(gòu)成。（3）流動相各溶劑不相溶：選擇互溶的流動相。（4）檢測器/記錄儀電子元件的問題：斷開檢測器和記錄儀的電源,檢查并更正。（5）系統(tǒng)內(nèi)有氣泡：用強極性溶液清洗系統(tǒng)；檢測器內(nèi)有氣泡,清洗檢測器,在檢測器后面安裝背景壓力調(diào)整器。（6）流通池污染（即使是極少的污染物也會產(chǎn)生噪音）:用硝酸清洗流通池；（7）檢測器燈能量時不足更換燈；（8）色譜柱填料流失或堵塞:更換色譜柱。（9）流動相混合不均勻或混合器工作不正常:維護和修理或更換混合器,在流動相不走梯度時,不建議使用泵的混合裝置。高效液相色譜儀操作步驟如下：1）過濾流動相，依據(jù)需要選擇不同的濾膜.2）對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10—20分鐘。3）打開hplc工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。4）進入hplc掌控界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。5）有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進樣閥。6）調(diào)整流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000、7）設(shè)計走樣方法。8）進樣和進樣后操作。9）關(guān)機時，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜。10）填寫登記本，由負責人簽字。11）流動相均需色譜純度，水用20m的去離子水。12）柱子是特別脆弱的，第一次做的方法，先不要讓液體過柱子。13）全部過柱子的液體均需嚴格的過濾。14）壓力不能太大，可以不要超過2000psi。高效液相色譜是色譜法的一個緊要分支，以液體為流動相，接受高壓輸