pcr統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)程序?qū)I(yè)資料

xxxx醫(yī)院檢查科PCR實(shí)驗室程序管理文獻(xiàn)

撰寫人：批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期：啟用日期：二零零四年貳月一日某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號:JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第1頁共48頁目錄程序文獻(xiàn)名稱頁碼核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室設(shè)立和管理………2實(shí)驗室內(nèi)務(wù)管理及清潔………5實(shí)驗室人員配備及培訓(xùn)程序………………6儀器申請、采購、驗證和管理程序…………8離心機(jī)使用、維護(hù)和校準(zhǔn)原則操作程序………………9測量儀器設(shè)備統(tǒng)一管理原則程序……………11持續(xù)可調(diào)移液器操作及校準(zhǔn)程序…………12常規(guī)儀器設(shè)備使用、操作和維護(hù)程序……14應(yīng)急解決程序…………………17實(shí)驗耗材購買、質(zhì)檢和儲存程序…………19試劑質(zhì)檢原則操作程序……………………21實(shí)驗室化學(xué)試劑管理及配制原則操作程序………………23實(shí)驗室殘留試劑藥物、廢棄物解決及生物防護(hù)程序………25標(biāo)本采集、驗收和保存原則操作程序……27標(biāo)本唯一標(biāo)記編號程序………30標(biāo)本前解決原則操作程序……………………31檢查成果報告程序……………33抱怨解決程序………………35實(shí)驗室記錄管理……………37實(shí)驗室室內(nèi)質(zhì)量控制原則操作程序…………39實(shí)驗室室間質(zhì)量評價原則操作程序…………41GeneAmp5700型核酸擴(kuò)增熒光檢測儀操作及分析程序…42附圖與附表修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第2頁共48頁核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室設(shè)立和管理1 目：實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室有專人負(fù)責(zé)，依照實(shí)驗室管理規(guī)范實(shí)行全面質(zhì)量管理，保證明驗質(zhì)量。2 范疇：本制度合用于所有開展核酸擴(kuò)增熒光檢測項目實(shí)驗室及有關(guān)人員，并明確了實(shí)驗室各項規(guī)章。3 操作人：4 規(guī)章4.1 實(shí)驗室分區(qū)設(shè)立a）核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室設(shè)立為試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)及擴(kuò)增區(qū)。每個區(qū)都設(shè)立一種緩沖區(qū)，用于更換工作服、鞋套及維持空氣流向，實(shí)驗室布局見附圖01。進(jìn)入各個工作區(qū)域工作擴(kuò)增時,必要嚴(yán)格遵守單一方向順序,即從第一區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)→第二區(qū)標(biāo)本制備區(qū)→第三區(qū)擴(kuò)增區(qū)。各區(qū)門前有醒目的志，一、二區(qū)通過排風(fēng)裝置保持正壓，三區(qū)通過抽風(fēng)裝置保持負(fù)壓。b）各室實(shí)驗物品（含移液器、試管架、吸頭盒、記錄本、筆等），不得混用，須貼上不同標(biāo)簽予以區(qū)別。c）各區(qū)配有不同顏色工作服，一區(qū)為白色，二區(qū)為藍(lán)色，三區(qū)為粉紅色。進(jìn)入實(shí)驗室，必要更換本室有顏色標(biāo)記工作服，穿上鞋套。4.2 試劑準(zhǔn)備區(qū)工作制度a）實(shí)驗人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用白色工作服。實(shí)驗中須戴手套、一次性鞋套。b）記錄溫濕度計讀數(shù)（例附表01）。c）記錄冰箱溫度計讀數(shù)，繪制冰箱質(zhì)控圖（例附圖02）。d）依照當(dāng)天標(biāo)本驗收登記表，取出當(dāng)天實(shí)驗須配制和使用試劑，別的試劑要及時收好放回冰箱內(nèi)。e）每周一清點(diǎn)庫存試劑，看有無過期或?qū)⒔狡谠噭蜃鲌髲U解決或排列優(yōu)先使用，避免揮霍，然后記錄試劑詳細(xì)保存狀況。f）實(shí)驗中所使用離心管、吸頭等需經(jīng)高壓滅菌解決，使用時應(yīng)在消毒有效期內(nèi)。g）試劑準(zhǔn)備工作完畢后，將使用過離心管、吸頭須置于盛有10％“84”消毒液或類似消毒液廢液缸中，還原實(shí)驗臺面。h）將準(zhǔn)備好試劑放入傳遞窗中。i）其她區(qū)用品不得帶入本區(qū)。j）每次實(shí)驗記錄，書寫工整詳細(xì)，應(yīng)使用本室專用、帶有本室標(biāo)記記錄本、紙和筆。k）實(shí)驗完畢打開紫外燈消毒30～60分鐘，記錄紫外燈使用狀況。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第3頁共48頁4.4 標(biāo)本制備區(qū)工作制度a）實(shí)驗人員進(jìn)入該區(qū)須穿本室專用藍(lán)色工作服。實(shí)驗中須使用一次性鞋套，戴手手套，手套需常更換。b）從傳遞窗中取出試劑放入冰箱冷凍室試劑存儲專區(qū)暫存。c）記錄溫濕度計讀數(shù)。d）記錄冰箱溫度計讀數(shù)，繪制冰箱質(zhì)控圖。e）核對標(biāo)本編號、類型和標(biāo)本數(shù)量。f）按試劑盒規(guī)定進(jìn)行標(biāo)本裂解和提取解決，在超凈工作臺上進(jìn)行加樣，遞入傳遞窗內(nèi)。g）使用本室專用通過滅活無菌解決加樣器和帶濾心吸頭。h）使用過離心管、吸頭須置于盛有10％“84”消毒液或類似消毒液廢液缸中。i）使用本室專用帶有本室標(biāo)記記錄本、紙和筆。j）患者樣品應(yīng)按有生物傳染性危險品對待。k）標(biāo)本解決完畢后，關(guān)閉所有儀器，記錄儀器使用時間和運(yùn)營狀態(tài)。l）其她區(qū)用品不得帶入本室。m）實(shí)驗完畢要打開紫外燈消毒30～60分鐘，記錄紫外燈使用狀況。4.4 擴(kuò)增區(qū)工作制度a）實(shí)驗人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用粉紅色工作服。實(shí)驗中須使用一次性鞋套，戴手套，手套需常更換。b）將從傳遞窗接受來離心后加好樣反映管上機(jī)擴(kuò)增。c）擴(kuò)增分析完后，記錄成果，打印報告。d）得到當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)控成果后，在室內(nèi)質(zhì)控圖（例附圖03）上描點(diǎn)。e）關(guān)掉擴(kuò)增儀，記錄儀器使用時間和運(yùn)營狀態(tài)。f）實(shí)驗完畢要打開紫外燈消毒30～60分鐘，記錄紫外燈使用狀況（例附表02）。本文涉及如下圖表，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：實(shí)驗室平面布局示意圖---附圖01冰箱質(zhì)控圖---附圖02室內(nèi)質(zhì)控圖---附圖03溫度、濕度登記表---附表01移動紫外燈使用登記表---附表02修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第4頁共48頁修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第5頁共48頁實(shí)驗室內(nèi)務(wù)管理及清潔1目：保證明驗室尋常內(nèi)務(wù)管理及清潔工作順利進(jìn)行。2范疇：實(shí)驗室有關(guān)人員及醫(yī)院清潔工人。3內(nèi)務(wù)管理及清潔制度3.1 內(nèi)務(wù)管理制度b）進(jìn)入實(shí)驗室工作人員必要遵守實(shí)驗室單一流向規(guī)定，禁止逆向走動。c）非本室工作人員未經(jīng)容許不得進(jìn)入實(shí)驗室。d）實(shí)驗人員必要熟悉儀器性能方容許操作，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。e）所有儀器（如PCR擴(kuò)增儀）須有專人負(fù)責(zé)，有使用維護(hù)記錄。f）注意保持儀器衛(wèi)生整潔，禁止在室內(nèi)抽煙，吃零食，非儀器操作人應(yīng)盡量少入。g）每天理解儀器運(yùn)轉(zhuǎn)狀況及試劑使用狀況，負(fù)責(zé)儀器整潔，安全，檢查電源，水龍頭，節(jié)假日應(yīng)指定人員負(fù)責(zé)檢查實(shí)驗室儀器、設(shè)備，保證安全。3.2 內(nèi)務(wù)清潔制度a）合理規(guī)劃實(shí)驗室內(nèi)物品，做到擺放整潔、有序，無用或使用效率低物品放置到儲存處，慣用物品要容易尋找到。b）抽屜、柜子、文獻(xiàn)類物品要作好標(biāo)記，以以便辨認(rèn)。c）實(shí)驗結(jié)束后用10%“84”d）每天對使用過移液器用優(yōu)氯凈進(jìn)行擦拭，每2周1次對移液器進(jìn)行高壓消毒。e）實(shí)驗過程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺，應(yīng)及時用10%“84”f）每天實(shí)驗前通過內(nèi)走廊上開關(guān)，啟動各區(qū)通風(fēng)系統(tǒng)，各區(qū)實(shí)驗結(jié)束后打開該區(qū)移動紫外燈消毒實(shí)驗臺面，紫外燈每天啟動30～60分鐘。g）每天實(shí)驗結(jié)束，待紫外燈消毒時間足夠后，依次關(guān)閉各區(qū)紫外燈并記錄。h）依次清潔三個區(qū)實(shí)驗臺面和地面，各區(qū)清潔消毒工具均專用，不可混用，注意按照單一方向流程原則來進(jìn)行清潔。i）解決好各區(qū)廢棄物，交醫(yī)院集中解決。j）每周將工作服交院洗衣房洗滌消毒，不同實(shí)驗區(qū)工作服隔開洗滌。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第6頁共48頁實(shí)驗室人員配備及培訓(xùn)程序1目：保證明驗室有足夠數(shù)量合格具備開展該類實(shí)驗?zāi)芰?shí)驗人員。2合用范疇：本程序合用于實(shí)驗室人員配備、管理、培訓(xùn)及考核。3程序：3.1人員規(guī)定：3.1.13.1.2實(shí)驗室工作人員應(yīng)參加衛(wèi)生部或省臨檢中心舉辦PCR3.1.3對于新進(jìn)入本室人員，如尚未獲得PCR3.2人員配備：3.2.1實(shí)驗室應(yīng)依照工作需要配備足夠工作人員，當(dāng)前實(shí)驗室有主任技師、主管技師、技師各13.2.23.3人員培訓(xùn)及考核：3.3.1實(shí)驗室負(fù)責(zé)人（或委托人）參加每年衛(wèi)生部PCR3.3.2實(shí)驗室工作人員每1～2年至少參加1次PCR3.3.33.3.3.3.5實(shí)驗室工作人員每年應(yīng)提交至少修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第7頁共48頁3.4人員管理3.4.1實(shí)驗室建立所有工作人員技術(shù)檔案，涉及：學(xué)歷、任職資格、刊登論文、研究成果、培訓(xùn)等有關(guān)材料復(fù)印件。3.4.2技術(shù)檔案分文本檔案和電子檔案，文本檔案每年更新1次，電子檔案隨時更新。本文涉及如下表格，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：實(shí)驗室重要負(fù)責(zé)人簡歷表---附表03實(shí)驗室工作人員一覽表---附表04人員培訓(xùn)籌劃及培訓(xùn)登記表---附表05修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第8頁共48頁儀器申請、采購、驗證和管理程序1 目：保證儀器正常購買、安裝、使用，保證明驗室儀器設(shè)備得到妥善管理。2 合用范疇：基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗室所有儀器設(shè)備。3 負(fù)責(zé)人：劉某某4 申請、采購及驗證程序4.1儀器申請購買需依照實(shí)驗室需要由實(shí)驗室工作人員提出并向?qū)嶒炇邑?fù)責(zé)人進(jìn)行書面報告。4.2由實(shí)驗室負(fù)責(zé)人填寫儀器設(shè)備申購表，通過科室領(lǐng)導(dǎo)小組會議批準(zhǔn)后，上報醫(yī)院設(shè)備科統(tǒng)一進(jìn)行購買。4.3儀器采購到貨后，在醫(yī)院設(shè)備科人員和實(shí)驗室人員共同陪伴下由廠家到實(shí)驗室進(jìn)行安裝。4.4儀器安裝后由廠家工程師進(jìn)行培訓(xùn)并通過設(shè)備科人員確認(rèn)后，填報儀器安裝表后，設(shè)備科和實(shí)驗室各備份一份儀器維護(hù)使用檔案后，由實(shí)驗室負(fù)責(zé)人簽字后方可使用。5管理程序：5.1基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗室重要儀器設(shè)備均需建立檔案，重要儀器涉及：PE7000擴(kuò)增儀、冷凍離心機(jī)、離心機(jī)、超低溫冰箱、普通低溫冰箱、移液器、超凈工作臺等。5.2設(shè)備檔案涉及：設(shè)備名稱、制造商名稱、型號、序號、接受日期和啟用日期、當(dāng)前放置地點(diǎn)、接受時狀態(tài)、校準(zhǔn)和鑒定日期和成果以及下次校準(zhǔn)日期、進(jìn)行維護(hù)和維護(hù)籌劃、故障記錄等，并應(yīng)有儀器使用闡明書或其他技術(shù)資料復(fù)印件。5.3儀器浮現(xiàn)故障應(yīng)作記錄和解決意見，如不能正常使用，應(yīng)填寫維修申請單，交醫(yī)院設(shè)備維修人員或有關(guān)專門維修單位進(jìn)行解決。5.4儀器應(yīng)有工作狀態(tài)標(biāo)記，正常使用者貼綠色標(biāo)簽。有故障待修暫停使用者用黃色標(biāo)簽，不能使用者應(yīng)貼紅色標(biāo)簽。需定期作校準(zhǔn)或檢定儀器應(yīng)有校準(zhǔn)或檢定日期及下次校準(zhǔn)或檢定日期記錄。5.6基因擴(kuò)增檢查實(shí)驗室儀器設(shè)備實(shí)行分區(qū)使用，不得混用。5.7本實(shí)驗室所有儀器、設(shè)備均為專用不外借。本文涉及如下表格，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：重要儀器設(shè)備一覽表---附表06修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第9頁共48頁離心機(jī)使用、維護(hù)和校準(zhǔn)原則操作程序1 目：保證離心機(jī)正常使用。2 合用范疇：合用于本室使用普通離心機(jī)和低溫離心機(jī)。3 操作人：劉某某胡某某陳某某4 操作4.1 用法4.1.1 普通離心機(jī)a）離心機(jī)應(yīng)放置在水平結(jié)實(shí)地板或平臺上，并力求使儀器處在水平位置以免離心時導(dǎo)致儀器振蕩。b）打開電源開關(guān)，將預(yù)先平衡好樣品對稱放置于轉(zhuǎn)頭樣品架上，關(guān)閉機(jī)蓋。c）旋動定期旋鈕設(shè)定離心時間，緩慢旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕使儀器轉(zhuǎn)速達(dá)到預(yù)定規(guī)定。d）離心完畢后，將轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)回零位，關(guān)閉電源開關(guān)。e）待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動時打開機(jī)蓋，取出離心樣品，再次關(guān)閉機(jī)蓋結(jié)束離心。4.1.2 低溫離心機(jī)a）離心機(jī)應(yīng)放置在水平結(jié)實(shí)地板或平臺上，并力求使儀器處在水平位置以免離心時導(dǎo)致儀器振蕩。b）打開電源開關(guān)，按功能選取鍵，設(shè)定離心溫度、速度和時間。c）待機(jī)腔溫度達(dá)到設(shè)定規(guī)定期，將預(yù)先平衡好樣品對稱放置于轉(zhuǎn)頭樣品架上，關(guān)閉機(jī)蓋。d）按啟動鍵，離心機(jī)將執(zhí)行上述參數(shù)進(jìn)行運(yùn)營，到預(yù)定期間自動關(guān)機(jī)。e）待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動時打開機(jī)蓋，取出離心樣品。如不再使用該離心機(jī)，關(guān)閉電源，用柔軟干凈布擦拭轉(zhuǎn)頭和機(jī)腔內(nèi)壁，待離心機(jī)腔內(nèi)溫度與室溫平衡后方可蓋上機(jī)蓋。4.2 維護(hù)保養(yǎng)a）離心室清潔：為了避免樣本等殘留物污染，應(yīng)經(jīng)常對離心機(jī)外殼和離心室進(jìn)行清潔解決。對離心室清潔，應(yīng)先打開離心機(jī)蓋，撥掉電源線，用專用設(shè)備將離心機(jī)轉(zhuǎn)頭旋下，70%乙醇去污染清潔離心室；離心室內(nèi)橡膠密封圈經(jīng)去污劑解決后，用水沖洗，再用甘油潤滑。b）轉(zhuǎn)頭清潔：轉(zhuǎn)頭會被樣本殘留物污染，也也許會被某些化學(xué)試劑腐蝕，因而應(yīng)對轉(zhuǎn)頭每月進(jìn)行清潔維護(hù)。每月用中性清潔劑清潔轉(zhuǎn)頭一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長轉(zhuǎn)頭壽命。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第10頁共48頁c）離心完畢后，應(yīng)及時用干軟布拭去離心室冷凝水。（此步僅合用于低溫離心機(jī)）d）離心結(jié)束后，使離心機(jī)蓋打開，然后關(guān)機(jī)。4.3 校準(zhǔn)每年6月、12月請醫(yī)院設(shè)備科南昌市計量局對該類儀器進(jìn)行定期檢修校準(zhǔn)。應(yīng)急解決如果離心時發(fā)現(xiàn)離心管破裂，必要先停止實(shí)驗，將破裂管密封放入生物垃圾桶，再用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒，如必要需用移動紫外燈照射30～60分鐘后才干開始實(shí)驗。注意事項：a）離心機(jī)應(yīng)始終處在水平位置，與外接電源電壓匹配，并規(guī)定有良好接地線。b）開機(jī)前應(yīng)檢查機(jī)腔有無異物掉入。c）樣品應(yīng)預(yù)先平衡，使用離心機(jī)微量離心時離心套管與樣品應(yīng)同步平衡。d）揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時，應(yīng)使用帶蓋離心管，并保證液體不外漏以免侵蝕機(jī)腔或?qū)е率鹿?。e）每次操作完畢，應(yīng)做好使用狀況記錄，應(yīng)定期對機(jī)器各項性能進(jìn)行檢修。f）離心過程中若發(fā)現(xiàn)異?，F(xiàn)象，應(yīng)及時關(guān)閉電源，報請關(guān)于技術(shù)人員檢修。g）定期清潔機(jī)腔。h）使用離心機(jī)時遵守左右手分開原則，只以右手操作儀器。i）使用冷凍離心機(jī)時，除注意以上各項外，還應(yīng)注意擦拭機(jī)腔動作要輕柔，以免損壞機(jī)腔內(nèi)溫度敏感器。j）相對離心力于每分鐘轉(zhuǎn)速換算。以往離心機(jī)轉(zhuǎn)速常以每分鐘多少轉(zhuǎn)表達(dá)，當(dāng)前慣用相對離心力（RCF）表達(dá)。兩者互換公式如下：N=(RCF×105)/(1.18×R)RCF=0.×R×NN表達(dá)轉(zhuǎn)速，單位為轉(zhuǎn)/分（r/min）；R表達(dá)離心半徑，即離心管底端至軸心距離，單位為厘米（cm）；RCF表達(dá)相對離心力，單位用重力加速度g（g＝9.8m/s）本文涉及如下圖表，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：離心機(jī)使用登記表---附表07修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第11頁共48頁測量儀器設(shè)備統(tǒng)一管理原則程序1 目：保證設(shè)備儀器精準(zhǔn)性，保證明驗精確性。2 合用范疇：實(shí)驗室所有測量設(shè)備（涉及移液器、溫度計、濕度計、天平等）。操作人：劉某某胡某某陳某某4 操作辦法依照詳細(xì)儀器規(guī)定在規(guī)定期間內(nèi)上報設(shè)備科，規(guī)定儀器校準(zhǔn)。如移液器校準(zhǔn)時間半年；溫度計、濕度計1年；天平1年。b）由醫(yī)院設(shè)備科聯(lián)系某某省原則計量局統(tǒng)一校準(zhǔn)。c）詳細(xì)記錄校準(zhǔn)儀器名稱型號、以及校準(zhǔn)時間。d）某些測量設(shè)備（如溫濕度計）可只校準(zhǔn)一套，校準(zhǔn)過測量設(shè)備可作為實(shí)驗室其他該種測量設(shè)備參照。e）某些儀器設(shè)備（涉及冰箱、水浴箱等）每天都要用校準(zhǔn)過溫度計進(jìn)行測定、記錄，以保證其精準(zhǔn)性，保證明驗質(zhì)量。本文涉及如下表格，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：設(shè)備校正登記表---附表08冰箱溫度登記表---附表09水浴箱溫度登記表---附表10修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第12頁共48頁持續(xù)可調(diào)式移液器操作及校準(zhǔn)程序1 目：對的使用移液器，保證移液器加樣精準(zhǔn)性和精確性。2 合用范疇：各種品牌、型號持續(xù)可調(diào)式移液器。3 操作程序3.1轉(zhuǎn)動旋鈕設(shè)定移液量，設(shè)定移液量不可超過該移液器規(guī)定范疇。3.2裝上配套吸頭（Tip）。3.3將按鈕壓至第一停點(diǎn)位置。3.4將移液管吸頭浸入液面下2～3mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入液體。待移入吸頭吸滿液體后，將吸頭撤出液面，擦掉吸頭外側(cè)所有液滴。3.5輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。約1秒鐘后，繼續(xù)將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。待吸頭液體放干凈后，將吸頭貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出吸頭。3.6松開按鈕使之回到起點(diǎn)位置。需要時，可更換吸頭繼續(xù)移液操作。4 校準(zhǔn)辦法4.1 校準(zhǔn)環(huán)境和用品規(guī)定室溫：20～25℃，測定中波動范疇不不不大于±0.5℃電子天平：放置于無塵和震動影響臺面上，房間盡量有空調(diào)。稱量時，為保證天平內(nèi)濕度（相對濕度60～90％），天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10mL蒸餾水小燒杯。小燒杯：5～10mL體積。測定液體：溫度為20～25℃去氣雙蒸水。選定校準(zhǔn)體積：a）擬校準(zhǔn)體積；b）移液器標(biāo)定體積中間體積。c）最小可調(diào)體積（不不大于擬定體積10％）。如為固定體積移液器，則只有一種校準(zhǔn)體積。4.2 校準(zhǔn)環(huán)節(jié)a）將移液器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選取適當(dāng)吸頭；b）調(diào)節(jié)好天平；c）來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭濕潤，用紗布拭干吸頭；d）垂直握住移液器，將吸頭浸入液面2～3mm處，緩慢（1～3秒）一致地吸取蒸餾水；修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第13頁共48頁e）將吸頭離開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部液體；f）將移液器以30℃g）記錄稱量值；h）擦干吸頭外面；i）按上環(huán)節(jié)稱量10次；j）取10次測量值均值作為最后移液器吸取蒸餾水重量，按附表1所列蒸餾水Z因子計算體積；k）按校準(zhǔn)成果調(diào)節(jié)移液器。備注：持續(xù)可調(diào)移液器校準(zhǔn)由某某省原則計量局統(tǒng)一校準(zhǔn)。（附表蒸餾水Z因子hPa(mbar)）溫度（℃）80085390796010131067201.00261.002710.00271.00281.00291.002920.51.00271.00281.00281.00291.00301.0030211.00281.00291.00301.00301.00311.003121.51.00301.00301.00311.00311.00321.0032221.00311.00311.00321.00321.00331.003322.51.00321.00321.00331.00331.00341.0035231.00331.00331.00341.00351.00351.003623.51.00341.00351.00351.00361.00361.0037241.00351.00361.00361.00371.00381.003824.51.00371.00371.00381.00381.00411.0039251.00381.00381.00391.00391.00401.00414.3 比較校準(zhǔn)法運(yùn)用經(jīng)計量局校準(zhǔn)并頒發(fā)校準(zhǔn)報告之同型號移液器，在移液器量程范疇高低兩個檔各選取一種校準(zhǔn)點(diǎn)，運(yùn)用電子天平稱量成果與已校準(zhǔn)移液器稱量成果進(jìn)行比較，完畢校準(zhǔn)。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第14頁共48頁常規(guī)儀器設(shè)備使用、操作和維護(hù)程序1目：對的操作使用儀器設(shè)備，保證檢測質(zhì)量，保障儀器設(shè)備使用壽命，充分發(fā)揮儀器效益和效率。范疇：電熱恒溫水浴鍋、超凈工作臺、冰箱等。3使用程序3.1儀器設(shè)備使用授權(quán)：a）僅有本實(shí)驗室工作人員有權(quán)使用實(shí)驗室儀器設(shè)備。b）儀器設(shè)備使用者在使用前一方面必要熟悉儀器設(shè)備操作使用程序并經(jīng)室主任考核承認(rèn)。3.2儀器使用：a）儀器設(shè)備使用嚴(yán)格遵守分區(qū)使用管理。b）儀器設(shè)備使用必要嚴(yán)格遵循儀器設(shè)備原則操作規(guī)程。c）重要儀器使用時每次工作應(yīng)有相應(yīng)使用記錄。4操作及維護(hù)程序4.1電熱恒溫水浴箱4.1.1水浴箱應(yīng)置于結(jié)實(shí)水平臺上，電源電壓須匹配。4.14.14.14.14.1.6水浴箱工作溫度波動范疇?wèi)?yīng)控制在：設(shè)定溫度+/–4.1.7水浴箱正面外下壁貼有4.14.14.2 超凈工作臺4.2.1新安裝或長期未使用工作臺，使用前必要用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維物品認(rèn)真進(jìn)行清潔工作。4.2.2接通電源，使用前應(yīng)提前15～30分鐘同步啟動紫外燈和風(fēng)機(jī)組工作。4.2.3當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)風(fēng)速時，用工作臺操作面板上風(fēng)速調(diào)節(jié)鈕進(jìn)行調(diào)節(jié)。風(fēng)機(jī)、照明均由批示燈批示其工作狀態(tài)，工作時，發(fā)光。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第15頁共48頁4.2.4工作臺面上禁止存儲不必要物品，以保持工作區(qū)干凈氣流不受干擾。4.2.5禁止在工作臺面上記錄書寫，工作時應(yīng)盡量避免作明顯擾動氣流動作；禁止在預(yù)過濾進(jìn)風(fēng)口部位放置物品，以免擋住進(jìn)風(fēng)口導(dǎo)致進(jìn)風(fēng)量減少，減少凈化能力。4.2.6使用結(jié)束后，用消毒液清理工作臺面后打開紫外燈，15～30分鐘后關(guān)閉紫外燈，關(guān)閉干凈臺電源。4.2.7依照環(huán)境干凈限度，定期將預(yù)過濾器中濾料拆下清洗，普通間隔時間為3～6個月。4.2.8每次使用干凈臺后，均需對干凈臺進(jìn)行清潔。4.2.9定期（普通每半年1次）計測工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)參數(shù)規(guī)定，則可調(diào)大風(fēng)機(jī)供電電壓。當(dāng)風(fēng)機(jī)組電壓調(diào)到最大時，工作區(qū)風(fēng)速仍達(dá)不到0.3m/s，則必要更換高效空氣過濾器。（由廠家或院儀器維修人員進(jìn)行）4.2.10做好維護(hù)記錄。4.2.11長期不使用工作臺撥下電源插頭。4.3 普通冰箱4.3.1開、關(guān)機(jī)：試劑冰箱按闡明書規(guī)定放好后，插上電源線，冷藏室溫度開關(guān)置于4℃，冷凍室溫度開關(guān)置于-204.3.2若冰箱較長時間不用或需要送修時需按如下環(huán)節(jié)操作：a）關(guān)閉冰箱電源，并拔下電源插頭。b）清空冰箱內(nèi)所有貯存物，并妥善放置到其他冰箱內(nèi)。打開冰箱門，等待冰箱內(nèi)霜化完。c）用肥皂水擦洗干凈冰箱內(nèi)膽，后用消毒液擦洗一次。d）保持冰箱門打開待其自然干燥。4.3.3冰箱應(yīng)放置于水平地面并留有一定散熱空間。4.3.4外接電源電壓必要匹配，并規(guī)定有良好接地線。4.3.5放入冰箱內(nèi)所有試劑、樣品、質(zhì)控品等必要密封保存。4.3.6保持冰箱出水口暢通；非自動除霜冰箱應(yīng)定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時切斷電源，用軟布蘸水擦拭冰箱內(nèi)外，必要時可用中性洗滌劑。4.3.7每日由專人負(fù)責(zé)觀測冰箱內(nèi)溫度并記錄于表中，登記表貼于門上，每月一張，一年裝訂成冊存檔。4.3.8若溫度超過規(guī)定范疇，調(diào)節(jié)溫控使其回到正常范疇，并進(jìn)行記錄。4.3.9若溫控調(diào)節(jié)無效，報請設(shè)備科維修，修理后須驗收合格并簽字后方能正常使用。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改內(nèi)容批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第16頁共48頁4.4 超低溫冰箱4.4.1接通電源，將冰箱開關(guān)置ON位置，此時溫度顯示屏顯示冰箱實(shí)際溫度，且數(shù)字不斷地閃爍。4.4.2溫度設(shè)定：以調(diào)節(jié)冰箱溫度為-70℃為例闡明，按SET鍵，溫度批示顯示-85℃，且“8”閃爍，按“↑”鍵直至“8“變?yōu)椤?”；按“→”鍵，此時溫度批示為“-75℃”，“5”閃爍，按“↑”鍵直至“5”變?yōu)?.4.3設(shè)定溫度時應(yīng)注意，普通應(yīng)以10℃遞減方式進(jìn)行，即每次設(shè)定溫度低于冰箱實(shí)際溫度104.4.4如超低溫度遇較長時間停電，其溫度顯示會不斷閃爍，且報警批示燈（ALARM）也閃爍，此時應(yīng)按上述辦法調(diào)節(jié)。4.4.5由冰箱管理人或其委托人每工作日記錄冰箱溫度，冰箱溫度登記表貼于冰箱門，每月更換1次，存檔。4.4.6超低溫冰箱由專人保管，試劑和物品應(yīng)按指定位置存儲。4.4.7修改次數(shù)修改內(nèi)容修改內(nèi)容批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第17頁共48頁應(yīng)急解決程序目：在實(shí)際工作中，儀器設(shè)備發(fā)生故障、試劑盒發(fā)生質(zhì)量問題時，為保證檢查成果精確性，及時、應(yīng)對的采用應(yīng)急辦法，最大限度上避免或減輕不利影響。范疇：合用于滿足核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室檢測需要并也許對檢查成果導(dǎo)致誤差儀器設(shè)備和試劑盒。3職責(zé)：3.1核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室工作人員在職責(zé)范疇內(nèi)均有責(zé)任熟悉各種儀器和有關(guān)設(shè)備性能、規(guī)定、維護(hù)和保養(yǎng)、常用故障排除、特別要嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。3.2工作人員在職責(zé)范疇內(nèi)均有責(zé)任故意識地注意以求及時發(fā)現(xiàn)并報告儀器設(shè)備和試劑盒異常狀況。3.2作為應(yīng)急解決，潛在著一定也許影響檢測質(zhì)量不擬定因素。室主任負(fù)責(zé)在第一時間檢查核算應(yīng)急辦法有效性。4工作流程：4.1儀器設(shè)備故障：4.1.1室主任接到異常狀況報警后，及時現(xiàn)場確認(rèn)異常狀況性質(zhì)：觀測有誤、誤操作、偶發(fā)現(xiàn)象或確屬不能及時排除故障。4.1.2用紅牌故障標(biāo)志標(biāo)示故障儀器，放置到其他實(shí)驗室，以防被錯誤使用。4.1.3小型儀器送儀器部門維修，大型貴重儀器關(guān)閉電源開關(guān)，取下電源插頭。用相應(yīng)防塵罩遮蔽儀器。4.1.4有滿足規(guī)定替用設(shè)備，啟用替用設(shè)備（準(zhǔn)用儀器）。借用其她部門儀器設(shè)備時，及時聯(lián)系借用并核算該設(shè)備使用狀態(tài)。替用、借用或備用設(shè)備使用在滿足質(zhì)量規(guī)定同步，必要同步滿足實(shí)驗室管理辦法（特別是防污染）規(guī)定。4.1.54.1.64.1.7維修儀器必要經(jīng)驗收合格并供需雙方簽名后才干重新啟用。去掉未校準(zhǔn)標(biāo)示牌。4.14.1.9修改次數(shù)修改內(nèi)容修改內(nèi)容批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第18頁共48頁4.2試劑盒質(zhì)量問題：試劑盒質(zhì)量發(fā)生問題，經(jīng)核算后，及時告知供貨商迅速更換另一批次試劑，使用前需先作質(zhì)量檢測，合格后方可使用。4.3儀器設(shè)備故障或試劑質(zhì)量問題不能得到解決，預(yù)期將會影響到檢測報告及時發(fā)出，可將標(biāo)本送至其他實(shí)驗室檢查（該實(shí)驗室同樣應(yīng)為獲同類認(rèn)準(zhǔn)進(jìn)行PCR檢測實(shí)驗室）；如已影響到報告及時發(fā)出，應(yīng)在門診取報告處向病人公示或向有關(guān)病區(qū)公示，獲得病人諒解。4.4影響到檢測報告發(fā)出狀況，應(yīng)在應(yīng)急解決登記表（例附表10）作記錄。本文涉及如下表格，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：應(yīng)急解決登記表---附表11修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第19頁共48頁實(shí)驗耗材購買、質(zhì)檢和儲存程序1 目：保證耗材使用質(zhì)量，合理配用及存儲。2 合用范疇：核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室慣用耗材：1.5ml離心管、0.5ml離心管、帶濾芯吸頭。3 操作人：胡某某4 購買和儲存程序4.1購買前訂出籌劃并定出品名、質(zhì)量規(guī)格報有關(guān)部門訂貨及購買。4.2購買后，驗收合格即領(lǐng)取。4.3慣用消耗品定點(diǎn)、定量地擺在實(shí)驗臺抽屜里，并標(biāo)明品名及數(shù)量。特殊消耗品放在指定地方。4.5訂購消耗品前，應(yīng)精確查詢數(shù)量。5 質(zhì)檢程序5.1 檢測1.5ml離心管5.1.1 目測:檢查離心管有無畸形、破損、不能閉蓋狀況。5.1.2 實(shí)驗檢測每批隨機(jī)抽樣離心管50個用于實(shí)驗檢測。a）將抽取50個目測合格b）離心管插在浮板上置于沸水浴鍋中20分鐘后取出，如發(fā)既有爆開狀況發(fā)生，即以為該批離心管不符合本實(shí)驗室實(shí)驗規(guī)定，作退貨解決。c）再將這50個離心管加半量生理鹽水后，1萬轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，如發(fā)既有管蓋爆開或漏液狀況發(fā)生，即以為該批離心管不符合本實(shí)驗室實(shí)驗規(guī)定，作退貨解決。d）經(jīng)上述檢測未發(fā)現(xiàn)不合格狀況后，即啟用該批耗材。5.2 檢測0.5ml離心管辦法、環(huán)節(jié)同上。5.3 檢測帶濾芯吸頭5.3.1 目測檢查吸頭有無畸形、破損。5.3.2 實(shí)驗檢測:每批隨后抽樣吸頭50個用于實(shí)驗檢測。a）用適配加樣器配合吸取適量液體，看有無吸孔堵塞、漏氣現(xiàn)象發(fā)生，在排除移液器因素后，如有異常發(fā)現(xiàn)，即以為該批吸頭不符合本實(shí)驗室實(shí)驗規(guī)定，作退貨解決。b）經(jīng)上述檢測未發(fā)現(xiàn)不合格狀況后，即啟用該批耗材。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第20頁共48頁備注：實(shí)驗耗材在目測合格后基本上都可以初步通過驗收。如果在目測不合格或目測合格后浮現(xiàn)甚至頻繁浮現(xiàn)爆管、堵塞、漏液、漏氣等狀況下，再由實(shí)驗人員進(jìn)行實(shí)驗檢測。本文涉及如下表格，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：消耗性材料驗收登記表---附表12修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第21頁共48頁試劑質(zhì)檢原則操作程序1 目：保證每批用于臨床實(shí)驗試劑質(zhì)量良好，符合規(guī)定。2 合用范疇：各種用于臨床實(shí)驗核酸擴(kuò)增熒光檢測試劑（HBV、HCV、TB、CT）。3 操作人：胡某某4 質(zhì)檢環(huán)節(jié)4.1 收到試劑后，目測試劑與否處在凍存狀態(tài)。4.2 核對試劑品種和數(shù)量并檢查包裝：外包裝（廠名廠址、檢測項目、批準(zhǔn)文號、批號和有效期等）；內(nèi)包裝（試劑瓶完整性、真空包裝完整性、試劑品種完整性、使用闡明書有否等）。4.3及時將試劑轉(zhuǎn)入－20℃4.4 最遲在前批次試劑存量尚可維持常規(guī)實(shí)驗一周時，按如下規(guī)定對新批號試劑進(jìn)行效驗實(shí)驗1。4.5 效驗實(shí)驗1：在使用前批次試劑進(jìn)行常規(guī)實(shí)驗同步帶上少量新批次試劑。用新批次試劑做陰性對照和陽性室內(nèi)質(zhì)控品，重復(fù)5次實(shí)驗，若陰陽性及室內(nèi)質(zhì)控成果均正常話，可初步通過驗收。若浮現(xiàn)陰性漲、室內(nèi)質(zhì)控品不漲或成果偏差太大等狀況時規(guī)定對新批號試劑進(jìn)行效驗實(shí)驗2。4.6 效驗實(shí)驗2：4.6.1規(guī)定設(shè)立：空白對照、陰性對照、陽性對照各一，陽性原則品梯度（102、103、104、105、106）。4.6.2浮現(xiàn)如下狀況中任何一種，判斷為試劑不合格，不能用于臨床檢測：a）空白對照浮現(xiàn)擴(kuò)增。如擴(kuò)增曲線CT值不不大于27，需重復(fù)實(shí)驗確證試劑污染。b）陽性對照和陽性原則品均未檢出，或陽性對照未檢出而陽性原則品檢出率大幅下降，表達(dá)試劑失效或檢測敏捷度大幅下降。4.6.3 陽性對照未檢出，陽性原則品檢測正常，提示樣品提取液也許存在問題。重復(fù)新舊提取液陽性對照實(shí)驗，擬定提取液失效問題。更換提取液后該批試劑方可使用。4.6.4 4.6.5陽性對照檢出，陽性原則品未檢出或擴(kuò)增曲線明顯系統(tǒng)性CT值偏大5個循環(huán)以上。提示陽性原則品存在問題。更換陽性原則品后該批試劑方可投入使用。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第22頁共48頁4.6.6 空白對照、陰性對照無擴(kuò)增，陽性對照正常檢出，陽性原則品導(dǎo)出原則曲線之斜率（－2.9～－3.9）、截距（26～34）、有關(guān)性（﹤4.7將實(shí)驗成果歸入記錄。本文涉及如下圖表，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：試劑驗收登記表---附表13修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第23頁共48頁實(shí)驗室化學(xué)試劑管理及配制原則操作程序1 目：保證明驗中用到各種溶液符合實(shí)驗規(guī)定。2 合用范疇：核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室慣用溶液：4％NaOH溶液、75％酒精、優(yōu)氯凈、10％84溶液等。3 操作人：劉某某胡某某陳某某4管理程序：4.1化學(xué)試劑購買或領(lǐng)用：每月清點(diǎn)一次試劑，發(fā)現(xiàn)試劑存量局限性時，及時領(lǐng)用或提交請購申請。發(fā)既有試劑過期或明顯變質(zhì)時要及時報廢，并將報廢試劑妥善解決。4.2化學(xué)試劑貯存：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗室慣用化學(xué)試劑均置于避光、陰涼、干燥處保存。實(shí)驗中慣用到某些化學(xué)試劑則依照規(guī)定保存于不同環(huán)境（如預(yù)冷乙醇保存于4℃）。PCR試劑一律貯存于-204.3化學(xué)試劑使用：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗室慣用化學(xué)試劑均無毒性或僅有低腐蝕性，故使用時重要應(yīng)注意分類、分區(qū)保存、關(guān)注失效日期和使用后及時清潔等。5 化學(xué)試劑配制：5.1 用品干燥干凈200ml量桶一只，5ml量桶一只，三角燒瓶兩只，天平一架，250ml、1000ml廣口瓶各一只。5.2 配制環(huán)節(jié)5.2.1 配制4％NaOH溶液a）用天平稱取4克分析純NaOH固體，置于一只三角燒瓶中。b）用200ml量桶精確取100ml水，緩緩注入盛放NaOH固體三角燒瓶中。c）搖蕩三角燒瓶使NaOH固體充分溶解。d）然后緩緩傾倒入250ml廣口瓶中密封保存?zhèn)溆谩?.2.2 配制優(yōu)氯凈a）普通桌面，器具和地面消毒只要使有效氯達(dá)到500mg/L，即可達(dá)到消毒作用。b）優(yōu)氯凈有效氯為60％，如配制一升優(yōu)氯凈溶液，則稱取優(yōu)氯凈833mg，倒入三角燒瓶中，緩緩加入1000ml水充分溶解，備用。c）如需加大消毒力度，則有效氯溶度加大。5.2.3 配制75％酒精溶液a）普通常規(guī)消毒75％酒精由醫(yī)院藥劑科提供。b）RNA提取75％酒精配制，試劑盒提供DEPC水，酒精用分析純無水酒精。c）依照當(dāng)天標(biāo)本數(shù)量配制。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第24頁共48頁5.2.4 配制a）精確量取84原液100ml倒入三角燒瓶中。b）量取900ml水，緩緩倒入三角燒瓶中，混勻備用。注意事項：每份配制好溶液保質(zhì)期為14天。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第25頁共48頁實(shí)驗室殘留試劑藥物、廢棄物解決及生物防護(hù)程序1 目：保證明驗室、實(shí)驗人員和外部環(huán)境安全。2 合用范疇：核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室慣用化學(xué)試劑（NaOH、EDTA、乙醇、生理鹽水等）、實(shí)驗室廢棄物解決；實(shí)驗人員和外部環(huán)境生物防護(hù)。3 操作人：劉某某胡某某陳某某4 解決辦法和環(huán)節(jié)4.1 殘留試劑、廢棄物解決4.1.1無菌物品，如棉簽、棉球、紗布等應(yīng)在有效期內(nèi)使用，使用后廢物品應(yīng)及時進(jìn)行無害化解決，不得隨意丟棄。4.1.2使用合格一次性實(shí)驗用品(如試管、吸頭、離心管等)，放入污物袋內(nèi)交醫(yī)院集中解決。4.1.3夾取標(biāo)本工具，如鉗、鑷、接種環(huán)、吸管等，用后均應(yīng)消毒清潔，進(jìn)行微生物檢查時，應(yīng)重新滅菌，金屬工具可燒灼滅菌或消毒液浸泡；玻璃制品干熱或壓力蒸汽滅菌。4.1.4污染標(biāo)本容器、吸管及注射器等投入盛有“844.1.54.1.6一次性塑料痰盂，先用mg/L優(yōu)氯凈溶液浸泡2～4小時后，交醫(yī)院集中解決。4.1.74.1.8廢棄標(biāo)本如血、尿、胸水、腹水、腦脊液、唾液、胃液、腸液、關(guān)節(jié)腔液等按mg/L濃度比例加優(yōu)氯凈干粉，攪勻后作用２～４小時后，交醫(yī)院集中解決。4.1.9盛標(biāo)本容器，若為一次性使用紙質(zhì)容器及其外面包被廢紙，應(yīng)焚毀；對可再次使用玻璃、塑料或搪瓷容器，煮沸15分鐘或加入mg/L優(yōu)氯凈溶液浸泡2～6小時，消毒液每日更換，消毒后用洗滌劑及流水刷洗，瀝干，用于微生物培養(yǎng)采樣者，用壓力蒸汽滅菌后備用。4.1.10修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第26頁共48頁4.2生物防護(hù)辦法生物防護(hù)目是在監(jiān)控基本上，對各種危險因素采用有效控制辦法，防止實(shí)驗室中存在污染源對實(shí)驗室、實(shí)驗人員和環(huán)境污染。4.2.1每天更換廢液缸10%“84”消毒溶液，并保證10%4.24.24.4.4.2.6有下列狀況之一者，需此外消毒：手接觸有傳染性微生物；水龍頭、水池肥皂、工作服也許同步被大量細(xì)菌污染者。消毒劑可用“4.4.4.2.9在實(shí)驗過程中病人標(biāo)本（血液、體液）外漏時，4.4.4.24.總之，實(shí)驗室生物防護(hù)辦法，從技術(shù)角度講有三大環(huán)節(jié)：供應(yīng)室滅菌保證，實(shí)驗室生物防護(hù)辦法、相應(yīng)規(guī)章制度和實(shí)驗人員防護(hù)意識，實(shí)驗廢棄物解決。在實(shí)行生物防護(hù)辦法時，應(yīng)嚴(yán)格遵守各種有關(guān)規(guī)定和制度，提高實(shí)驗室整體生物防護(hù)水平。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第27頁共48頁標(biāo)本采集、驗收和保存原則操作程序1 目：保證所收集標(biāo)本符合實(shí)驗規(guī)定。保證標(biāo)本保存質(zhì)量。2 合用范疇：核酸擴(kuò)增熒光檢測驗室現(xiàn)行檢測項目：HBV、HCV、TB、CT。操作人：陳某某4 采集程序4.1標(biāo)本采集由實(shí)驗室第二實(shí)驗員陳某某在標(biāo)本接受區(qū)采集。4.2標(biāo)本也可由其他各科室醫(yī)護(hù)人員采集并送至實(shí)驗室，但是該醫(yī)護(hù)人員均需接受基因診斷實(shí)驗室關(guān)于核酸擴(kuò)增技術(shù)，標(biāo)本采集、保存、運(yùn)送知識統(tǒng)一培訓(xùn)。4.3基因診斷實(shí)驗室人員依照實(shí)驗室檢測所需制定采集標(biāo)本規(guī)定。如下：a）血液標(biāo)本：用真空采集管采集血液標(biāo)本，血標(biāo)本采集后在2小時內(nèi)送達(dá)實(shí)驗室（HCV采用EDTA抗凝血漿）。離心（檢查單與標(biāo)本一道）后用一次性吸管吸取血清或血漿加入經(jīng)消毒1.5ml離心管中，輸入病人基本信息，編號。b）痰標(biāo)本：用帶蓋無菌一次性塑料瓶收集清晨第一口痰標(biāo)本送檢。（對于無痰或少痰患者，可用45℃加溫100g/LNaCl水溶液霧化吸入或變化體位以使痰液易于咳出；對于小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導(dǎo)咳痰，用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采集標(biāo)本。）標(biāo)本在室溫下保存不能超過24小時。c）生殖道拭子：尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專用取樣拭子（滅菌，一次性）采集樣本，及時送檢。采集生殖道拭子標(biāo)本，規(guī)定病人在采樣前2小時內(nèi)不能排尿，采樣時，將棉拭子伸入男性尿道及女性宮頸口2～3cm，轉(zhuǎn)動一周以獲得上皮細(xì)胞。d）尿液：由病人自留尿液于無菌封閉杯中送檢。e）腦脊液和胸腹水：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒試管中及時送檢。注意：所有上述用于臨床標(biāo)本采集容器如試管或離心管，均應(yīng)使用前高壓滅菌。5標(biāo)本運(yùn)送程序標(biāo)本采集后，密閉、標(biāo)（貼）姓名，應(yīng)盡量快送至檢測實(shí)驗室，如運(yùn)送時間需2小時以上，必要用冰盒送至實(shí)驗室。標(biāo)本中如加入了恰當(dāng)穩(wěn)定劑，如用于RNA測定加入4mol/L異硫氰酸胍鹽（GITC）血清（漿）標(biāo)本和用于DNA測定EDTA抗凝血等，則可在室溫下運(yùn)送或郵寄。6 驗收程序6.1 驗收環(huán)節(jié)6.嚴(yán)格對各類樣本核對和雙簽制度，對病房各樣本及時進(jìn)行驗收，核對，不符合規(guī)定樣本一律退回，并有書面記錄。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第28頁共48頁6.1.6.1.2.1普通內(nèi)容進(jìn)入實(shí)驗室樣本在進(jìn)行編號(或貼條碼)、離心前，工作人員應(yīng)再次認(rèn)真核對姓名，聯(lián)號，住院號，病區(qū)床號，項目等。對不符合規(guī)定者應(yīng)作記錄，并及時告知采樣科室，對的及時地補(bǔ)采樣，以免延誤病人檢測成果報告。對書寫不清晰申請單，當(dāng)事者要及時與病房聯(lián)系(可電話)，明確受檢者姓名，住院號，性別，年齡，病區(qū)，床號和檢查項目等；并作相應(yīng)記錄。6.1.2.2按檢測項目驗證標(biāo)本a）HBV：所需標(biāo)本類型為未溶血血清或血漿，注意血漿標(biāo)本所用抗凝劑，用EDTA-K2，不可使用肝素。標(biāo)本為全血時及時分離出血漿保存。b）HCV：同上，但標(biāo)本為血清時，要在1小時內(nèi)分離出血清用于檢測。c）TB：晨起第一口深部痰(不能為唾液)、胸腹水、腦脊液、膿液或穿刺液。d）CT：尿道或陰道分泌物。6.1.3 符合拒檢不合格病人標(biāo)本范疇實(shí)驗室人員對標(biāo)本進(jìn)行查驗，浮現(xiàn)其他不合規(guī)定狀況，如未對的使用抗凝劑標(biāo)本、嚴(yán)重溶血及靜脈營養(yǎng)時嚴(yán)重脂血并影響檢測成果血標(biāo)本、采血量局限性檢查需要量標(biāo)本、采集標(biāo)本將嚴(yán)重影響檢查成果者（例如檢測項目TB標(biāo)本是唾液而不是晨痰）、采樣時間過長（特別是進(jìn)行RNA檢測時）、經(jīng)核對標(biāo)本病人姓名、年齡、性別、及檢查號聯(lián)等不相符等等，應(yīng)拒收標(biāo)本，登記并告知有關(guān)科室。6.1.4 拒檢程序a）對拒檢不合格標(biāo)本應(yīng)登記在不合格標(biāo)本處置記錄本上。b）填寫不合格標(biāo)本處置單，并隨同申請單送返送檢科室。c）必要時電話告之有關(guān)科室醫(yī)生或護(hù)士。7標(biāo)本保存程序7.1解決前標(biāo)本保存：a）HBV：全血樣本可4℃下短期（1～2周）保存，或分離出血清（血漿），保存于-20℃下，較長期保存應(yīng)在d）HCV：在1小時內(nèi)分離血清，吸取200μl，加入20uRnasin，保存于-20℃c）TB：液化痰標(biāo)本如果不及時用于核酸提取，可保存于-70℃下。解決后痰或胸腹水、腦脊液、膿液用于TB檢測標(biāo)本可置于4℃下短期保存。長期保存于修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第29頁共48頁d）CT：解決后沉淀標(biāo)本可置于－20℃下短期保存，如不及時用于核酸提取，則需保存在-70℃下。7.2報告發(fā)出后標(biāo)本保存：a）提取核酸標(biāo)本當(dāng)天檢測可置4℃保存，如當(dāng)天不檢測應(yīng)置-20b）原始血清/血漿樣本在報告發(fā)出后放入超低溫冰箱-7c）血清/血漿標(biāo)本放置超低溫冰箱保存時須有記錄，按檢測項目分類存儲，并由專人負(fù)責(zé)管理。8 特殊標(biāo)本解決對暫不檢測項目和規(guī)定期間外收到零散樣本，要隨時登記和交班，以免漏檢，遺失和延誤檢查。對特殊樣本或特殊病人樣本，實(shí)行“首接”負(fù)責(zé)制，所謂特殊樣本是指難于采集樣本，以及特殊病人樣本一律實(shí)行“首接”負(fù)責(zé)制，無論那位工作人員，一旦收到樣本后，均須負(fù)其責(zé)任，不得以任何借口推托，及時和正保證管和轉(zhuǎn)送樣本到關(guān)于實(shí)驗室或關(guān)于人員，同步作交班記錄和雙簽名。對于做長期病情動態(tài)考察病人標(biāo)本一律置于-70℃本文涉及如下圖表，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：PCR擴(kuò)增接受標(biāo)本登記表---附表14PCR擴(kuò)增拒收標(biāo)本登記表---附表15標(biāo)本超低溫保存登記表---附表16修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第30頁共48頁標(biāo)本唯一標(biāo)記編號程序1 目：保證標(biāo)本編號唯一性，也是精確發(fā)放報告基本。2 合用范疇：使用核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室所開展四種檢測項目：乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、核結(jié)桿菌、沙眼衣原體。操作人：胡某某陳某某4 編號辦法4.1基本原則4.1.1 依照標(biāo)本送檢日期，每天標(biāo)本相應(yīng)標(biāo)記一種唯一代號。如當(dāng)天為9月15日，則編為020915。4.1.2依照檢測項目不同，每種檢測項目相應(yīng)標(biāo)記一種唯一代號。如乙型肝炎病毒標(biāo)記為B、丙型肝炎病毒標(biāo)記為C、結(jié)核桿菌標(biāo)記為T、沙眼衣原體為CT。4.1.3在同種檢測類型驗單中，按驗單順序編號。如第一種檢測乙型肝炎病毒驗單編為B01、第二個檢測乙型肝炎病毒驗單編為B02、第三個檢測結(jié)核驗單編為B03等。4.1.4如有特殊狀況，應(yīng)在標(biāo)記前面增長特異字母區(qū)別開，如住院單和門診單、其他醫(yī)院送來單和本醫(yī)院單要區(qū)別開等。4.2編號環(huán)節(jié)a）先記錄所有當(dāng)天送來標(biāo)本，依照編號基本原則，給當(dāng)天標(biāo)本編好號，每個樣本每個檢測項目相應(yīng)一種唯一編號（如021008T04）。b）用標(biāo)記筆在每張驗單和相應(yīng)樣品管上作好相似標(biāo)記。c）在樣本記錄簿上作好記錄，每個樣本記錄都應(yīng)涉及如下信息：送檢時間、醫(yī)院、科室、醫(yī)生、病人姓名、重要病史、實(shí)驗成果（當(dāng)天實(shí)驗后填上）等。d）模仿擴(kuò)增儀反映槽，在一張檢查信紙上按類型、順序排好各樣本位置，同步排好陰陽性對照、陽性質(zhì)控品、陽性原則品位置。e）解決好樣品、點(diǎn)樣后，按照d）排布，將反映管放入擴(kuò)增儀上相應(yīng)位置，開始擴(kuò)增。f）擴(kuò)增得到成果后，先在記錄簿上填入成果，作好記錄，再一一把實(shí)驗成果填入相應(yīng)驗單。g）發(fā)放成果驗單。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第31頁共48頁標(biāo)本前解決原則操作程序1 目：保證標(biāo)本解決原則化、規(guī)范化，使不規(guī)范操作因素對實(shí)驗成果導(dǎo)致影響減至最小。2 合用待解決標(biāo)本范疇：乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、沙眼衣原體、結(jié)核桿菌。操作人：劉某某胡某某陳某某4 原則操作程序4.1 乙型肝炎病毒（DNA血清）a）雙手戴上手套，從冰箱取出標(biāo)本，將化驗單和試管依次編號后，棄去手套。b）雙手換上新手套，用鑷子(夾取滅菌物品專用)取出1.5ml離心管，相應(yīng)標(biāo)本編號，置于離心管架上。c）將移液器調(diào)到40μl，先混勻DNA提取液，再吸取40μl加入到已編號離心管中。然后吸取40μl血清，加入離心管中混勻，注意每吸取一份血清標(biāo)本應(yīng)更換一次槍頭。解決所有標(biāo)本，然后將離心管插到水浴板上，用鑷子放入水浴鍋，沸水浴10分鐘。d）水浴完畢后用鑷子將水浴板取出，轉(zhuǎn)至4℃靜置8～12小時，然后10000轉(zhuǎn)/5分鐘離心，取上清液2μe）收拾臺面至準(zhǔn)備狀態(tài)。4.2 丙型肝炎病毒（RNA血清）a）雙手戴上手套，從冰箱取出標(biāo)本，將化驗單和試管依次編號后，棄去手套。b）雙手換上新手套，用鑷子(夾取滅菌物品專用)取出0.5ml滅菌離心管，相應(yīng)標(biāo)本編號，置于離心管架上。c）先用移液器混勻RNA提取液A，然后吸取10μl加入到編好號離心管中，再用移液器吸取50μl血清加入，最后用移液器加入200μlRNA提取液B，在震蕩器上震蕩混勻，放置5分鐘，然后6000轉(zhuǎn)1分鐘離心。d）去上清，留沉淀。加入450μl用DEPC水配制75﹪預(yù)冷乙醇充分混勻，洗滌沉淀，然后6000轉(zhuǎn)1分鐘離心，去上清。相似辦法再洗一次，吸干上清，65℃e）給烘干沉淀中加入18μl反映液I，混勻，再加入2μl逆轉(zhuǎn)錄酶，充分混勻，瞬時離心（3秒），放入溫箱，37℃f）逆轉(zhuǎn)錄后95℃3分鐘高溫滅活，瞬時離心（3秒），取5μlg）收拾臺面至準(zhǔn)備狀態(tài)。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第32頁共48頁4.3結(jié)核桿菌（痰液）a）取晨痰加入4倍體積4％氫氧化鈉待其充分液化(30分鐘)，液化過程中，振蕩2～3次，如痰液粘稠，可延長液化時間。b）取1ml消化液加入離心管，10000轉(zhuǎn)離心5分鐘。c）棄上清留沉淀，加入1ml生理鹽水洗滌，10000轉(zhuǎn)5分鐘離心。d）重復(fù)c操作，留沉淀，加入50μlDNA提取液，混勻。e）沸水浴10分鐘，4℃f）10000轉(zhuǎn)5分鐘離心，取上清2μl點(diǎn)樣上機(jī)。4.4沙眼衣原體（分泌物）a）向裝有分泌物標(biāo)本試管中加入1ml無菌生理鹽水，充分振蕩混勻。b）吸取液體轉(zhuǎn)至1.5ml離心管中，1rpm離心5分鐘。c）棄上清，沉淀用無菌生理鹽水洗滌一次后，加50μlDNA提取液充分混勻。d）沸水浴10分鐘，4℃靜置6～8小時。e）10000rpm離心5分鐘，取上清液2μl點(diǎn)樣上機(jī)。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第33頁共48頁檢查成果報告程序1 目：使核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗室檢測報告及時發(fā)送，更好服務(wù)于臨床以及患者。2 合用范疇：本原則合用于基因診斷實(shí)驗室所有檢測成果報告。負(fù)責(zé)人：劉某某4 報告程序4.1檢測成果報告應(yīng)精確、清晰、明確、客觀和及時，杜絕虛假報告。4.2實(shí)時熒光PCR測定期其數(shù)據(jù)要經(jīng)分析，避免因非特異性熒光而導(dǎo)致假陽性成果。依照質(zhì)控品判斷PCR擴(kuò)增有效性，只有當(dāng)質(zhì)控品擴(kuò)增成果符合項目SOP關(guān)于條件時，才可發(fā)出報告，否則應(yīng)重新測定。4.3定性測定檢測項目其成果以“陰性”或“陽性”報告；定量測定，成果報告為每毫升拷貝數(shù)（拷貝數(shù)/ml），如成果高于測定辦法線性范疇上限，則對樣本稀釋后再測，成果乘上稀釋倍數(shù)。如成果低于辦法測定范疇下限，則直接報告低于檢測下限即可，不能報告為“0”或“陰性”4.4每份報告均應(yīng)使用科內(nèi)統(tǒng)一打印報告專用紙打??；報告內(nèi)容至少應(yīng)涉及：病人姓名、性別、年齡、及測定項目、成果、參照范疇以及標(biāo)題、標(biāo)本號、標(biāo)本類型、標(biāo)本接受日期和檢測日期、實(shí)驗操作者和審核者簽名、報告日期等。否則視為無效或虛假報告單。4.5所有檢測報告均需具備檢測和審核資格實(shí)驗人員進(jìn)行檢查核對，報告單上具備檢測人員和審核人員簽字方可生效。4.6報告單應(yīng)及時發(fā)出。門診患者報告單送至服務(wù)臺門診報告發(fā)放處，醫(yī)院采用計算機(jī)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，門診患者憑病歷唯一條形碼在發(fā)放處領(lǐng)取檢測報告，住院患者報告由實(shí)驗室打印后經(jīng)專門人員送至病房護(hù)理部。4.7打印當(dāng)天檢測報告匯總表，存檔，妥善保存2年以上。4.8原則上不采用電話、圖文傳真、電子郵件等形式傳送成果。4.9如臨床科室或者患者由于特殊狀況且理由充分，規(guī)定以上幾種特殊形式發(fā)送報告，必要確認(rèn)身份后（涉及核對其所查詢患者姓名、性別、年齡、檢測項目、送檢醫(yī)生、送檢日期、病區(qū)床號等狀況，并提供患者ID號），經(jīng)實(shí)驗室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后才干發(fā)放報告。當(dāng)需郵寄報告時，應(yīng)由患者告知地址、郵政編碼及E-Mail地址等。4.10應(yīng)明確告知查詢者，上述特殊狀況報告均僅為臨床提供參照，實(shí)驗最后成果以正式檢測報告單為準(zhǔn)。特殊狀況報告發(fā)放需詳細(xì)登記，訂立報告人姓名，實(shí)驗室負(fù)責(zé)人簽字。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第34頁共48頁4.11任何形式報告等患者資料必要遵循醫(yī)院患者臨床病歷資料保密原則，未經(jīng)允許，普通人員不可查詢或復(fù)印，特殊狀況時必要在科主任或本室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)狀況下方可查詢。本文涉及如下圖表，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：核酸擴(kuò)增熒光檢測成果報告---附表20修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第35頁共48頁抱怨解決程序1目：以病人為“中心”，以質(zhì)量為“核心”，優(yōu)質(zhì)服務(wù)。“抱怨”基于對臨床和病人（涉及家屬等）返饋意見注重，往往從中能發(fā)現(xiàn)實(shí)驗室存在問題或漏洞。有利于提高檢查和服務(wù)質(zhì)量，減少醫(yī)療差錯和事故，鞏固和有效改進(jìn)實(shí)驗室質(zhì)量體系，本程序合用于檢查科權(quán)限內(nèi)能解決解決問題。當(dāng)科室不能妥善解決時，將移送醫(yī)院醫(yī)務(wù)處，遵循醫(yī)院醫(yī)療糾紛解決程序。2合用范疇：來自于患者或家屬，臨床醫(yī)護(hù)人員和/或?qū)嶒炇夜ぷ魅藛T針對檢測成果質(zhì)量、服務(wù)質(zhì)量和/或?qū)嶒炇夜芾淼葐栴}投訴和/或抱怨。3負(fù)責(zé)人：劉某某4職責(zé)a）每個實(shí)驗室人員均有責(zé)任接待申訴者，室負(fù)責(zé)人對抱怨進(jìn)行解決，如超過室負(fù)責(zé)人職權(quán)范疇，應(yīng)會同科主任解決。b）對外部抱怨，實(shí)驗室工作人員不得推卸，應(yīng)負(fù)責(zé)將抱怨人領(lǐng)到實(shí)驗室負(fù)責(zé)人處，對電話抱怨須作記錄并及時報告室負(fù)責(zé)人。5解決程序5.1抱怨接受執(zhí)行者在接受抱怨時應(yīng)熱情、和諧、禮貌、嚴(yán)肅和認(rèn)真，應(yīng)記錄抱怨者姓名、地址、聯(lián)系方式、抱怨內(nèi)容（一方面注意穩(wěn)定抱怨者情緒）。5.2抱怨解決5.2.1 患者對服務(wù)態(tài)度抱怨解決方式a）接到抱怨后，及時記錄抱怨，并向科室負(fù)責(zé)人報告。b）對患者提出合理規(guī)定及時進(jìn)行解決。c）調(diào)查事情原委，依照調(diào)查成果對有關(guān)負(fù)責(zé)人進(jìn)行懲罰。d）記錄解決成果。5.2.2 患者對成果精確性抱怨解決方式a）為患者展示原始實(shí)驗數(shù)據(jù)。b）向患者解釋有關(guān)實(shí)驗程序和也許臨床狀況，協(xié)助患者解除疑慮。c）如確有實(shí)驗成果不符合有效性規(guī)定或浮現(xiàn)錯誤，則應(yīng)及時糾正錯誤，重新實(shí)驗以得到精確成果。同步由室負(fù)責(zé)人向患者致歉以爭獲得到其諒解，按關(guān)于條例對負(fù)責(zé)人進(jìn)行相應(yīng)懲罰，并記錄。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第36頁共48頁5.2.3 醫(yī)生對檢測成果和臨床診斷符合率抱怨解決方式a）針對醫(yī)生抱怨進(jìn)行全程調(diào)查，查找存在影響成果因素，并形成書面報告。b）就調(diào)查發(fā)現(xiàn)問題進(jìn)行針對性解決。c）與醫(yī)生建立交流機(jī)制。解決原則：a）能及時解決抱怨應(yīng)予以及時解決，記錄解決成果。b）不能及時解決報怨應(yīng)爭取與抱怨者商定反饋時間，盡量將問題向?qū)嶒炇抑魅螆蟾?，謀求妥善解決辦法，盡快答復(fù)抱怨者。c）抱怨解決以抱怨者滿意為目，但必要以遵重科學(xué)，遵重事實(shí)為原則，在不違背科學(xué)原則，醫(yī)療行為規(guī)范基本上，爭取抱怨者最大限度理解。5.3抱怨解決善后a）執(zhí)行者對報怨作兩份記錄，自己保存一份。b）對抱怨審核遵循科內(nèi)部審核安排執(zhí)行。c）如抱怨涉及到實(shí)驗室操作程序與否符合《臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗室管理暫行辦法》、《臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗室工作規(guī)范》等，實(shí)驗室負(fù)責(zé)人應(yīng)召集實(shí)驗室工作人員討論，如實(shí)驗室操作程序的確不符合關(guān)于規(guī)定，應(yīng)重新修訂操作規(guī)程，并報科主任批準(zhǔn)后執(zhí)行。d）實(shí)驗室工作人員在向?qū)嶒炇抑魅螆笤沟貌坏綕M意解決時，有權(quán)向科主任提出報怨。本文涉及如下圖表，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：抱怨記錄及解決反饋意見登記表---附表17修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第37頁共48頁實(shí)驗室記錄管理1 目：檢查資料是實(shí)驗室質(zhì)量證明資料及質(zhì)量體系運(yùn)作根據(jù)重要構(gòu)成某些。為使資料記錄、保存狀態(tài)在控，特制定本文獻(xiàn)。2 合用范疇：本程序合用于實(shí)驗過程中產(chǎn)生數(shù)據(jù)、文本資料記錄和保存，重要有：病人和標(biāo)本信息、實(shí)驗操作記錄、實(shí)驗檢測成果、原始檢測申請單和檢測報告單、儀器使用記錄等，實(shí)驗記錄涉及電子記錄和文本記錄。3 操作人：胡某某陳某某4 規(guī)章4.1 電腦上記錄文獻(xiàn)管理規(guī)章a）擴(kuò)增過程中由熒光擴(kuò)增儀產(chǎn)生數(shù)據(jù)文獻(xiàn)必要保存在非系統(tǒng)分區(qū)專門文獻(xiàn)夾中（如D:\PCR），保存途徑要清晰、便捷、易查找。b）文獻(xiàn)夾目錄構(gòu)造規(guī)定層次感分明：一全年實(shí)驗成果均保存在一種年度文獻(xiàn)夾里，如“”文獻(xiàn)夾；每個年度文獻(xiàn)夾又包括12個月文獻(xiàn)夾，如“9月”、“10月”，每天實(shí)驗成果就保存在當(dāng)月文獻(xiàn)夾里。c）SDS文獻(xiàn)保存時以當(dāng)天日期命名，如9月10日保存為0910.sds。d）若某天進(jìn)行了多次實(shí)驗，須保存各種SDS文獻(xiàn)，命名時在背面以a、b、c等字母標(biāo)記，如9月10日做兩次實(shí)驗，分別保存為0910a.sds和0910b.sds。e）為了防止儲存實(shí)驗成果電腦發(fā)生系統(tǒng)崩潰、硬件故障等問題導(dǎo)致實(shí)驗成果丟失、無法查詢等狀況，每月實(shí)驗成果記錄文獻(xiàn)都要用移動存儲設(shè)備（如軟盤、USB硬盤等）拷貝到另一部PC機(jī)上做備份；一年數(shù)據(jù)要用刻錄機(jī)刻制一張CD光盤備份儲存，貼上標(biāo)簽，如“實(shí)驗成果備份”。放入檔案柜妥善存儲。4.2 書面記錄文獻(xiàn)管理：a）檢測過程中實(shí)驗記錄：在專用實(shí)驗記錄簿上記載，不同實(shí)驗區(qū)記錄簿不得混用。試劑貯存區(qū)記錄檢測所用試劑盒狀況（名稱、批號、數(shù)量）和自配試劑記錄；標(biāo)本制備區(qū)記錄檢測標(biāo)本數(shù)及在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行操作過程；在擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)記錄質(zhì)控成果和分析。b）標(biāo)本原始檢測申請單最后保存于擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)，至少1年以上；其他實(shí)驗記錄保存于各自實(shí)驗操作區(qū)內(nèi)，至少保存2年以上。c）實(shí)驗記錄要真實(shí)，需使用黑色墨水或圓珠筆，筆跡清晰，不得隨意涂改，如確需更改，應(yīng)在原更改內(nèi)容上劃雙線，填上新內(nèi)容，并簽名。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第38頁共48頁d）實(shí)驗記錄須妥善保存，不得給她人借閱或復(fù)?。ㄉ婕搬t(yī)療糾紛解決除外）。在記錄借出時需有實(shí)驗室負(fù)責(zé)人、經(jīng)手人、借閱人簽名方可。e）超過保存期限實(shí)驗記錄，由室負(fù)責(zé)人交科里統(tǒng)一保存。f）在接受標(biāo)本后，要記錄入病人和標(biāo)本信息，涉及：病人姓名、性別、年齡、病人ID、檢查單申請ID號、病區(qū)床號、檢測項目、標(biāo)本類型、標(biāo)本狀態(tài)、送檢日期、標(biāo)本接受人姓名等。連同實(shí)驗得到檢測成果，當(dāng)天工作結(jié)束前打印出當(dāng)天病人、標(biāo)本信息及檢測成果匯總表，存檔，保存至少1年以上。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第39頁共48頁實(shí)驗室室內(nèi)質(zhì)量控制原則操作程序1 目：隨時理解并控制實(shí)驗室檢測精密度變化。2 合用范疇：核酸擴(kuò)增熒光定量檢測實(shí)驗室。操作人：劉某某胡某某陳某某4 操作環(huán)節(jié)4.1 血清質(zhì)量控制品a)質(zhì)控品來源：衛(wèi)生部或省臨檢中心b)質(zhì)控品與樣本同步解決，排列順序為：原則品或校準(zhǔn)品，陰性質(zhì)控品，陽性質(zhì)控品，臨床樣本。c)質(zhì)控品解決及分析判斷。d)實(shí)驗成果判斷：實(shí)驗成果合格，即發(fā)報告；實(shí)驗成果不合格，報告室主任，會同關(guān)于人員，查找因素，妥善解決。e)每次檢測質(zhì)控成果須有記錄。f)失控因素及糾正辦法須有記錄。附：室內(nèi)質(zhì)控品制備及操作質(zhì)控品制備：收集本室檢測臨床樣本，HBVDNA定量為104copies/ml樣本混勻，并分裝于0.5ml離心管中，每支110μl，編號后（如Qb0201-n），-20℃操作：每次檢測過程中將此分裝室內(nèi)質(zhì)控品與樣本同步檢測，記錄此標(biāo)本檢測成果；計算前5次檢測成果平均值作為本批質(zhì)控品靶值，并在網(wǎng)絡(luò)電腦Lis系統(tǒng)中進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控圖制作。4.2 室內(nèi)質(zhì)控圖用法4.2.1 描點(diǎn)a）圖中X線為靶線，X±2s為警告線，X±3s為失控線。對于同一批號質(zhì)控血清無論使用幾種月，其空圖均不變化。只要將圖紙上方“起止日期”項填入每月實(shí)際起止日期即可。b）每天將該批號質(zhì)控血清按關(guān)于規(guī)定程序復(fù)融隨同病人標(biāo)本同步檢測。將日期、檢測成果和操作者如實(shí)記錄在圖下方相應(yīng)位置，并按前面辦法畫出圖上相應(yīng)點(diǎn)，用直線將該點(diǎn)與前一天點(diǎn)連接。c）月底計算當(dāng)月所有質(zhì)控血清檢測成果X、s和CV，并進(jìn)行圖形分析和小結(jié)，將質(zhì)量控制圖存入質(zhì)控資料檔案。4.2.2 圖形分析a）如果在X±3s線以外，則為失控，應(yīng)及時報告關(guān)于負(fù)責(zé)人，迅速查找因素。必要時復(fù)測標(biāo)本，然后方可發(fā)出報告，并將失控狀況、查找過程及解決成果等詳細(xì)記修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第40頁共48頁錄。b）如果在X±2s線以外，或浮現(xiàn)持續(xù)6點(diǎn)以上在一側(cè)等規(guī)律變化，均應(yīng)雖然向關(guān)于負(fù)責(zé)人反映，并積極查找因素。但當(dāng)天檢查成果普通可以發(fā)出。4.2.3 通過觀測圖形規(guī)律性變化進(jìn)行誤差分析，消除誤差來源a）曲線漂移：提示有系統(tǒng)誤差，精確度發(fā)生了一次性向上或向下變化。這種變化往往是由于一種新狀況引起。如更換不同批號試劑，啟用新批號質(zhì)控血清、操作人員變換等。在找因素時，應(yīng)重點(diǎn)注意“漂移”先后發(fā)生了那些變動因素。b）趨勢性變化：向下或向上趨勢性變化表白檢測精確度發(fā)生了徐徐地變化。這種變化往往是由于一種逐漸變化因素導(dǎo)致。如質(zhì)控血清降解，試劑效價減少等。c）持續(xù)多點(diǎn)分布在靶值一側(cè)：當(dāng)前，普通以為質(zhì)控血清檢測成果持續(xù)6天以上出當(dāng)前靶值同一側(cè)，則應(yīng)迅速查找因素，爭取盡快使之回答環(huán)繞在靶值隨機(jī)分布狀態(tài)。由于按照記錄學(xué)原理，由純隨機(jī)誤差導(dǎo)致這種狀況也許性很小。持續(xù)6天以上出當(dāng)前靶值同一側(cè)也許性不大于1.5％。因而凡浮現(xiàn)持續(xù)6天以上出當(dāng)前靶值同一側(cè)者均有也許存在非隨機(jī)誤差因素。如成果與靶值偏離并不太大，不會給臨床使用帶來太大影響時，普通化驗報告可以照常填發(fā)。d）其她規(guī)律變化：（周期性等）4.2.4 通過圖形資料對比進(jìn)行誤差分析，消除誤差來源a）每月月底將該月所有質(zhì)控血清檢測成果X和s與該批測定X和s進(jìn)行比較。如果X發(fā)生了變化，闡明精確度發(fā)生了變化提示有非隨機(jī)誤差存在。如果當(dāng)月s不同側(cè)表白檢測精密度發(fā)生了變化。b）將使用同一批號質(zhì)控血清CT值X和s按月份列出。如果X逐在月上升，應(yīng)考慮保存不當(dāng)導(dǎo)致試劑效價減少或質(zhì)控血清自身浮現(xiàn)降解。如果各月份X基本一致而s逐月加大，則重要提示常規(guī)工作精密度下降，應(yīng)重點(diǎn)從操作、管理上找因素。c）在數(shù)年中，把每月CV和失控規(guī)律列成表，可用作檢測質(zhì)量歷史性回顧及趨勢分析。本文涉及如下圖表，見SOP文獻(xiàn)末附圖表：室內(nèi)質(zhì)控登記表---附表18修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第41頁共48頁實(shí)驗室室間質(zhì)量評價原則操作程序1目：室間質(zhì)評（EQA）是實(shí)驗室質(zhì)量控制體系中重要某些，是保證患者檢查成果和其報告精確性和可靠性，以及各實(shí)驗室間成果可比性重要手段。2合用范疇：衛(wèi)生部或省臨檢中心下發(fā)PCR室間質(zhì)控血清檢測。3負(fù)責(zé)人：劉某某4職責(zé)：4.1實(shí)驗室人員均須熟知并遵守本程序，詳細(xì)項目由室負(fù)責(zé)人執(zhí)行。4.2室負(fù)責(zé)人監(jiān)督貫徹。5操作程序：5.1質(zhì)控標(biāo)本接受和驗收：收到質(zhì)控血清后由有關(guān)人員登記、簽字，依照質(zhì)控標(biāo)本關(guān)于闡明對血清數(shù)量、批號、包裝進(jìn)行驗收并將質(zhì)控標(biāo)本按規(guī)定置-20℃5.2質(zhì)控標(biāo)本檢測按常規(guī)臨床標(biāo)本對待，若需要，檢測前先依照闡明對質(zhì)控物進(jìn)行復(fù)溶。5.3室間質(zhì)評樣本必要按實(shí)驗室常規(guī)工作進(jìn)行，由進(jìn)行常規(guī)工作人員測試，工作人員必要使用實(shí)驗室常規(guī)檢測辦法和試劑，不得特殊對待。檢測成果須在截止日期前上報。5.4實(shí)驗室檢測EQA樣本次數(shù)必要與常規(guī)檢測病人樣本次數(shù)同樣（即1次）。EQA樣本檢測在部或省臨檢中心規(guī)定期間內(nèi)進(jìn)行，檢測成果上報也必要在截止日期前，通過E-mail或掛號信寄出。5.6室間質(zhì)評檢測成果和反饋成果均記錄于室間質(zhì)評登記表，依照反饋成果分析室間質(zhì)評狀態(tài)，如有出控應(yīng)查找因素，并采用相應(yīng)辦法。5.7禁止與其他實(shí)驗室交流室間質(zhì)評檢測成果。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診斷規(guī)范文獻(xiàn)文獻(xiàn)編號：JYYFY-PCR版序:1130生效日期:12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁碼:第42頁共48頁GeneAmp5700型核酸擴(kuò)增熒光檢測儀操作及分析程序1 目：使GeneAmp5700型核酸擴(kuò)增熒光檢測儀可以對的和正常使用，保證擴(kuò)增及成果分析原則化、規(guī)范化。2 合用范疇：GeneAmp5700型核酸擴(kuò)增熒光檢測儀。3 操作人：劉某某胡某某陳某某4 操作程序4.1 用法a）依次打開電腦顯示屏和電腦主機(jī)電源開關(guān)，進(jìn)入WindowsNT界面。b）接著打開光源檢測器和PCR儀電源開關(guān)，預(yù)熱5分鐘。c）按需要在電腦上設(shè)定一種新運(yùn)營版