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主講老師：陳郁生物制藥技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫微生物染色法目錄CONTENTS01、認(rèn)識革蘭氏染色02、革蘭氏染色實驗認(rèn)識革蘭氏染色PART01革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中使用最廣泛的一種染色方法，由一位丹麥醫(yī)生漢斯·克里斯蒂安·革蘭（HansChristianGram）于1884年所創(chuàng)立。經(jīng)革蘭氏染色后，可將細(xì)菌分為革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G-）。革蘭氏染色法在鑒別細(xì)菌、研究細(xì)菌的致病性等發(fā)面具有極其重要的意義。認(rèn)識革蘭氏染色法革蘭氏染色實驗PART01與細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成有關(guān)。實驗原理實驗原理G+細(xì)菌與G－細(xì)菌細(xì)胞壁的比較結(jié)構(gòu)化學(xué)組成肽聚糖磷壁酸脂溶性物質(zhì)G+一層厚多含量較高少G－兩層薄少無多實驗原理a、用紫色染料結(jié)晶紫染色b、用碘液媒染c、用酒精脫色d、用番紅花紅復(fù)染實驗原理空隙染料脫色結(jié)果G+變小難流出保留紫色G－變大易流出無色

G+細(xì)菌與G－細(xì)菌細(xì)胞壁脫色過程中的變化結(jié)果：

G+（紫色），

G－（紅色）菌種金黃色葡萄球菌、大腸桿菌純培養(yǎng)物（18～24h）儀器顯微鏡材料

載玻片、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙、染色缸等染料初染液（結(jié)晶紫）、媒染劑（碘液）、脫色劑（95%乙醇）、復(fù)染液（番紅）實驗材料實驗步驟涂片染色鏡檢實驗步驟（1）.涂片A.加小滴水

B.涂成薄層

C.固定菌體

涂片制備過程實驗步驟（2）.染色01結(jié)晶紫初染1min02碘液媒染1min0395%酒精脫色

20s～30s0405細(xì)水沖洗細(xì)水沖洗細(xì)水沖洗細(xì)水沖洗涂片染色過程（3）.鏡檢陽性G+陰性G-實驗步驟（4）注意事項（1）載玻片：潔凈無脂（3）涂片：均勻，宜薄，不宜

過厚（2）滴水和取菌量：不宜過多（4）加熱固定：溫度不宜過高（6）脫色時間：20～30s（5）水洗：不要直

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