食品毒理學(xué)化學(xué)毒物的一般毒性作用

食品毒理學(xué)化學(xué)毒物的一般毒性作用[要求]了解LD50的計算方法、化學(xué)毒物所致機(jī)體損傷的組織學(xué)改變及其評價。2.熟悉蓄積毒性作用及其評價；急性、亞慢和慢性毒性試驗(yàn)設(shè)計及評價。3.掌握急性、亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)的基本概念、染毒途徑。

第2頁,共83頁，2024年2月25日，星期天幾個概念：化學(xué)毒物、毒物與非毒物一般毒性作用（generaltoxicity）：在一定劑量、一定接觸時間和接觸方式下對試驗(yàn)動物產(chǎn)生的綜合毒性效應(yīng)（又稱為基礎(chǔ)毒性basictoxicity

）。

按接觸毒性時間的長短，一般毒性作用分為急性毒性、亞慢性毒性和慢性毒性。第3頁,共83頁，2024年2月25日，星期天第4頁,共83頁，2024年2月25日，星期天§1急性毒性作用及其評價

§2蓄積毒性及其評價

§3亞慢性和慢性毒性作用及其評價第5頁,共83頁，2024年2月25日，星期天§1急性毒性作用一、急性毒性概念和急性毒性試驗(yàn)的目的二、急性毒性試驗(yàn)三、急性毒性評價（分級）第6頁,共83頁，2024年2月25日，星期天一、急性毒性概念和急性毒性試驗(yàn)的目的急性毒性(acutetoxicity)是指機(jī)體(人或試驗(yàn)動物)一次接觸或24小時內(nèi)多次接觸化學(xué)物后所引起的快速劇烈的中毒效應(yīng)，包括一般行為、外觀改變、形態(tài)變化以及死亡效應(yīng)。

試驗(yàn)動物的染毒途徑不同，一次接觸的含義也有所不同。第7頁,共83頁，2024年2月25日，星期天急性毒性試驗(yàn)(acutetest)是指機(jī)體(人或試驗(yàn)動物)一次給與或24小時內(nèi)多次給予受試物后，短時間內(nèi)動物所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，包括致死和非致死的指標(biāo)參數(shù)。第8頁,共83頁，2024年2月25日，星期天目的①測試和求出化學(xué)毒物對一種或幾種試驗(yàn)動物的致死量(以LD50表示)以及其它的急性毒性參數(shù)，了解急性毒作用強(qiáng)度。②并通過觀察動物中毒表現(xiàn)和死亡的情況，了解急性毒作用性質(zhì)、可能的靶器官和致死原因，提供化學(xué)毒物的急性中毒資料、初步評價對人體產(chǎn)生損害的危險性。第9頁,共83頁，2024年2月25日，星期天③探求化學(xué)毒物急性毒性的劑量—反應(yīng)關(guān)系與中毒特征。④為亞慢性、慢性毒性作用試驗(yàn)的染毒劑量設(shè)計提供參考依據(jù)。⑤研究化學(xué)毒物急性中毒的預(yù)防和急救治療措施。⑥為毒理學(xué)機(jī)制研究提供線索

。第10頁,共83頁，2024年2月25日，星期天急性毒性試驗(yàn)常用的毒性參數(shù)：LD50（LC50）Zac

（LD50/Limac）LD84/LD16(或LC84／LC16)

劑量—反應(yīng)曲線斜率

第11頁,共83頁，2024年2月25日，星期天二、急性毒性試驗(yàn)(一)試驗(yàn)動物[原則]：①急性毒性試驗(yàn)要求選擇對化學(xué)毒物的代謝和毒效應(yīng)表現(xiàn)與人的反應(yīng)盡可能一致的試驗(yàn)動物。（最基本和重要的原則）②動物易于獲得③品系純化④價格較低和易于飼養(yǎng)等條件。

第12頁,共83頁，2024年2月25日，星期天1．試驗(yàn)動物的種屬和品系最好用兩種種屬的動物嚙齒類:小鼠、大鼠、豚鼠或家兔非嚙齒類：狗或猴。急性皮膚毒性試驗(yàn)可選用成年大鼠、豚鼠或家兔，優(yōu)先考慮白色家兔。而急性吸入毒性試驗(yàn)和經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)則優(yōu)先考慮大鼠。第13頁,共83頁，2024年2月25日，星期天⒉試驗(yàn)動物的年齡和體重：急性試驗(yàn)動物不宜過老或過幼，通常要求選擇剛成年動物進(jìn)行試驗(yàn)，而且須是未曾交配和受孕的動物。例如：大鼠180～240g、小鼠18～25g、家兔2～2.5kg、豚鼠200～250g、狗10～15kg。同一批試驗(yàn)動物體重變異范圍不應(yīng)超過該批動物平均體重的20％。

第14頁,共83頁，2024年2月25日，星期天3.試驗(yàn)動物的性別：急性毒性試驗(yàn)的主要內(nèi)容是求LD50，除特殊要求外，一般急性毒性試驗(yàn)對動物性別要求為雌雄各半。如果在預(yù)試驗(yàn)時發(fā)現(xiàn)化學(xué)毒物(如農(nóng)藥)對雌、雄動物毒效應(yīng)的敏感性有明顯差異，則應(yīng)單獨(dú)分別求出雌性與雄性動物各自的LD50。如果試驗(yàn)是為致畸試驗(yàn)作準(zhǔn)備，也可僅作雌性動物的LD50測試。第15頁,共83頁，2024年2月25日，星期天4.動物數(shù)量與隨機(jī)分組：大、小鼠等小動物每組10只狗等大動物每組6只分組原則——隨機(jī)化原則（了解）第16頁,共83頁，2024年2月25日，星期天5.禁食：經(jīng)消化道染毒時，要求試驗(yàn)前對動物禁食大鼠、小鼠——隔夜進(jìn)食；染毒后禁食4h大動物——每日上午喂食前染毒染毒后繼續(xù)禁食2~4h，但在禁食時要保障飲水。第17頁,共83頁，2024年2月25日，星期天6.實(shí)驗(yàn)動物的預(yù)檢：選擇健康動物1~2周的檢疫期第18頁,共83頁，2024年2月25日，星期天

（二）試驗(yàn)動物的飼養(yǎng)環(huán)境恒定的溫度：22±3℃濕度：30~70%照度：晝夜各半飼料合格、飲水合格、墊料合格第19頁,共83頁，2024年2月25日，星期天（三）染毒途徑的選擇:

染毒途徑（exposureroutes）的選擇需考慮：模擬人在生活和生產(chǎn)環(huán)境中實(shí)際接觸受試物的途徑和方式；有利于不同化學(xué)物之間急性毒性大小的比較；受試物的性質(zhì)和用途；各種受試物毒性評價程序的要求等。最常用的染毒途徑為經(jīng)口、經(jīng)呼吸道、經(jīng)皮特殊情況下也可采用注射途徑。

第20頁,共83頁，2024年2月25日，星期天經(jīng)口(胃腸道)接觸

:

灌胃:小鼠0.2

1.0ml/只或0.1

0.5ml/10g

大鼠一次灌胃體積不超過5ml/只家兔不超過10ml/2kg

狗不超過50ml/10kg

吞咽膠囊:

經(jīng)呼吸道接觸

:

靜式吸入動式吸入

經(jīng)皮膚接觸

:注射途徑接觸:

第21頁,共83頁，2024年2月25日，星期天（四）染毒劑量與分組:

1．查閱文獻(xiàn)①了解化學(xué)毒物的結(jié)構(gòu)式、分子量、常溫常壓下的狀態(tài)、熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、密度、閃點(diǎn)、揮發(fā)度、蒸氣壓、水溶性和脂溶性等理化特性，生產(chǎn)批號及純度，雜質(zhì)成分與含量等。第22頁,共83頁，2024年2月25日，星期天1．查閱文獻(xiàn)②確定使用哪一種計算方法求LD50，然后再設(shè)計劑量分組。LD50的計算方法常用寇氏法、概率單位法、霍思法等。③找出與受試化學(xué)毒物結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)近似的化學(xué)物的毒性資料，并以文獻(xiàn)資料中相同的動物種系和相同接觸途徑所測得的LD50(LC50)值作為受試化學(xué)物的預(yù)期毒性中值。

第23頁,共83頁，2024年2月25日，星期天2．預(yù)試驗(yàn)

①設(shè)定以此預(yù)期值作為待測化學(xué)物的中間劑量組，并在該劑量的上下各設(shè)計l一2個劑量組作為預(yù)試驗(yàn)劑量。②根據(jù)確定的劑量組進(jìn)行染毒。③根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的死亡資料確定組距。第24頁,共83頁，2024年2月25日，星期天可根據(jù)以下公式計算出劑量分組：

i=(lgLD90-lgLD10)／(n-1)

或：i=(lgLD100-lgLD0)／(n-1)

式中i為組距(相鄰的兩個劑量組對數(shù)劑量之差)；

n為設(shè)計的劑量組數(shù)。第25頁,共83頁，2024年2月25日，星期天3．正式試驗(yàn);

一般來說、根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計所選用的LD50計算方法來確定組數(shù)。例如幾率單位法、寇氏法一般設(shè)6～10個劑量組；霍恩法固定設(shè)4個劑量組。求得i值后．以最低劑量組(LD0或LD10)的對數(shù)劑量加上一個i值，即是第二個劑量組的對數(shù)劑量，依此類推直至最高劑量組，查各自的反對數(shù)即得出各組劑量的真實(shí)值。

123456LgLD0LgLD0+iLgLD0+2iLgLD0+3iLgLD0+4i???

第26頁,共83頁，2024年2月25日，星期天（五）試驗(yàn)周期與毒效應(yīng)觀察試驗(yàn)周期：一般以兩周為宜第27頁,共83頁，2024年2月25日，星期天毒效應(yīng)觀察1.中毒癥狀第28頁,共83頁，2024年2月25日，星期天2.體重在觀察試驗(yàn)動物中毒癥狀的過程中，應(yīng)同時觀察體重的變化。體重可以反映動物中毒后的整體變化。體重改變的原因很多，若化學(xué)毒物刺激或損傷消化道可出現(xiàn)試驗(yàn)動物飲食減少甚至拒食，表現(xiàn)為體重減輕。若化學(xué)毒物引起腹瀉，將影響食物吸收和利用，體重也會減輕。如果化學(xué)毒物影響水的攝取或腎能功急性損傷，也可能在體重上反映出來。所以，對存活動物尤其是對低于LD50劑量組的存活動物．應(yīng)在觀察期14天內(nèi)稱量其體重的變化．以便了解受試物引起毒效應(yīng)的持續(xù)時間。第29頁,共83頁，2024年2月25日，星期天3.病理檢查及其他指標(biāo):急性毒性試驗(yàn)中，對死亡的動物均應(yīng)及時進(jìn)行大體解剖和病理組織學(xué)檢查，肉眼觀察主要臟器的大體病理變化，如臟器大小、外觀、色澤的變化，有無充血、出血、水腫或其它改變，對有改變的臟器進(jìn)行取材做組織病理學(xué)檢查。對存活動物在觀察期結(jié)束時進(jìn)行大體病理檢查．必要時做組織病理學(xué)檢查。根據(jù)試驗(yàn)需要可進(jìn)一步擴(kuò)大觀察項目．如體溫、心電圖、腦電圖或進(jìn)行某些生化指標(biāo)測定等。第30頁,共83頁，2024年2月25日，星期天4.死亡和死亡時間重點(diǎn)觀察和記錄每只動物死亡的時間，特別是最早出現(xiàn)死亡的時間以及各個劑量組動物的死亡數(shù)。分析中毒死亡時間的規(guī)律具有一定意義，可為深人研究化學(xué)物的毒作用機(jī)制提供參考。第31頁,共83頁，2024年2月25日，星期天三、急性毒性評價外源化學(xué)物急性毒性分級（WHO）毒性分級大鼠一次經(jīng)口LD50(mg/kg)6只大鼠吸入4小時，死亡2~4只的濃度(ppm)兔經(jīng)皮LD50(/mg/kg)對人可能致死的估計量g/kg總量(g/60kg)劇毒<1<10<5<0.050.1高毒1~10~5~0.05~3中等毒50~100~44~0.5~30低毒500~1000~350~5~250實(shí)際無毒5000~10000~2180~>15>1000第32頁,共83頁，2024年2月25日，星期天我國食品毒理急性毒性分級法(1994)急性毒性分級大鼠經(jīng)口LD50(mg/kg)大致相當(dāng)于70kg人的致死量6級(極毒)<1稍嘗,<7滴5級(劇毒)1~507滴~1茶匙4級(中等毒)51~5001茶匙~35克3級(低毒)501~500035~350克2級(實(shí)際無毒)5001~15000350~1050克1級(無毒)>15000>1050克第33頁,共83頁，2024年2月25日，星期天LD50為了便于比較化學(xué)物的毒性及有毒化學(xué)物的管理，國內(nèi)外根據(jù)LD50值大小提出了許多急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)。LD50值是一個常用的急性毒性評價指標(biāo)，但不能表示急性毒性的全部內(nèi)容：1）以死亡作為觀察指標(biāo)；2）是一個統(tǒng)計學(xué)估計數(shù)值。比較不同外來化學(xué)物的LD50或比較同一化學(xué)物不同實(shí)驗(yàn)室所測定的LD50值時，要注實(shí)意驗(yàn)條件的同一性和量概念的等效性，需要檢查完整的劑量-反應(yīng)關(guān)系資料。第34頁,共83頁，2024年2月25日，星期天LD50值的95%可信限，劑量-反應(yīng)曲線的斜率及動物急性致死的時間都是劑量-反應(yīng)關(guān)系資料內(nèi)容。斜率小時，在劑量低于LD50值時，致死作用大于斜率大的毒物。致死效應(yīng)發(fā)生的時間越短，危害越大。第35頁,共83頁，2024年2月25日，星期天同一化學(xué)物的LD50值在不同實(shí)驗(yàn)室的測定結(jié)果可有4-7倍；LD50相似的兩種物質(zhì)，不同的致死劑量范圍內(nèi)致死毒性不定相同；LD50不同時，致死毒性不定有明顯差別。第36頁,共83頁，2024年2月25日，星期天LD16與LD84用于彌補(bǔ)LD50的不足。用曲線表示劑量與死亡率之間的關(guān)系時，LD16與LD84的比值呈現(xiàn)一種兩端平直、中間陡峭的S形曲線，其轉(zhuǎn)折點(diǎn)相當(dāng)于動物死亡率16％和84％。LD16與LD84正好是致死劑量反應(yīng)曲線的直線部分，即與動物死亡率的概率單位4.0和6.0相當(dāng)，也是LD50值的±16的值。（P27面，圖1-2）急性毒作用帶（Zac）帶越寬，危險性越小。第37頁,共83頁，2024年2月25日，星期天1.消耗的動物量大2.獲得的信息有限3.測得的LD50僅僅是一個近似值，不能用來表示急性毒性的全部內(nèi)容。4.在安全性評價中僅評價動物死亡和簡單的癥狀觀察是不夠的，更需要的是生理學(xué)、血液學(xué)及其它化驗(yàn)檢查所提供的深入細(xì)致的毒性信息。經(jīng)典急性毒性試驗(yàn)的局限性第38頁,共83頁，2024年2月25日，星期天評價時需要考慮的其它指標(biāo)和參數(shù)：劑量-反應(yīng)曲線的斜率動物急性致死的時間化合物L(fēng)D84和LD16

化合物的急性毒作用帶第39頁,共83頁，2024年2月25日，星期天LD50的計算方法：寇式法和改進(jìn)式寇式法概率單位-對數(shù)圖解法霍恩法第40頁,共83頁，2024年2月25日，星期天§2蓄積毒性作用及其評價一、基本概念二、

蓄積毒性試驗(yàn)方法及其評價第41頁,共83頁，2024年2月25日，星期天一、基本概念■蓄積作用（accumulation)：當(dāng)化學(xué)物與機(jī)體發(fā)生亞慢性接觸，將反復(fù)進(jìn)入機(jī)體，而且當(dāng)進(jìn)入的速度或總量超過代謝轉(zhuǎn)化與排出的速度或總量時，化學(xué)物就有可能在機(jī)體內(nèi)逐漸增加并貯留的現(xiàn)象貯存庫

鉛（Pb）-骨骼鎘（Cd）-腎臟

DDT、TCDD等-脂肪組織第42頁,共83頁，2024年2月25日，星期天易蓄積的部位稱為貯存庫。常見的貯存庫有血漿蛋白、脂肪組織、肝臟、腎臟及骨骼?；瘜W(xué)物的貯存形式有：母體、結(jié)合態(tài)、轉(zhuǎn)化態(tài)。第43頁,共83頁，2024年2月25日，星期天■蓄積作用是發(fā)生慢性中毒的物質(zhì)基礎(chǔ)■耐受性是蓄積性的另一種表現(xiàn)形式之一，甚至可能隱藏著潛在的慢性中毒■一種外源化學(xué)物有無蓄積作用是評定該化學(xué)物是否可能引起潛在慢性中毒的論據(jù)之一，也是制定衛(wèi)生限量標(biāo)準(zhǔn)時安全系數(shù)的一種依據(jù)第44頁,共83頁，2024年2月25日，星期天

蓄積作用實(shí)際上有二個含義：

物質(zhì)蓄積(materialaccumulation)

功能蓄積(functionalaccumulation)第45頁,共83頁，2024年2月25日，星期天?物質(zhì)蓄積：實(shí)驗(yàn)動物反復(fù)多次接觸化學(xué)物后，用化學(xué)分析方法能夠測得機(jī)體內(nèi)存在該化學(xué)物或其代謝產(chǎn)物第46頁,共83頁，2024年2月25日，星期天?

功能(機(jī)能)蓄積：有的化學(xué)物在長期接觸后，機(jī)體內(nèi)雖不能測出其原型或代謝產(chǎn)物，卻出現(xiàn)了慢性毒性作用第47頁,共83頁，2024年2月25日，星期天功能蓄積可能是

?由于貯存體內(nèi)的化學(xué)物或其代謝產(chǎn)物的數(shù)量極微，不能檢出物質(zhì)的蓄積?或者是由于每次機(jī)體接觸化學(xué)物之后所引起的損害累積所致第48頁,共83頁，2024年2月25日，星期天二、蓄積毒性試驗(yàn)方法及其評價化學(xué)毒物的蓄積作用是發(fā)生慢性中毒的物質(zhì)基礎(chǔ)，因此研究化學(xué)毒物在機(jī)體內(nèi)的蓄積性是評價化學(xué)毒物能否引起潛在慢性毒性的依據(jù)之一，也是衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)制訂過程選擇安全系數(shù)的主要依據(jù)。第49頁,共83頁，2024年2月25日，星期天蓄積毒性試驗(yàn)是研究化學(xué)毒物基礎(chǔ)毒性的重要內(nèi)容之一，目的是通過試驗(yàn)求出蓄積系數(shù)K，了解化學(xué)毒物蓄積毒性的強(qiáng)弱，并為慢性毒性試驗(yàn)及其他有關(guān)毒性試驗(yàn)的劑量選擇提供參考。第50頁,共83頁，2024年2月25日，星期天二、蓄積毒性試驗(yàn)方法及其評價(一)蓄積系數(shù)法

蓄積系數(shù)(accumulationcoefficient)是多次染毒使半數(shù)動物出現(xiàn)效應(yīng)(或死亡)的累積劑量[ED50(n)]與一次染毒使半數(shù)動物出現(xiàn)相同效應(yīng)(或死亡)的劑量[ED50(1)]的比值，即：K＝ED50(n)/ED50(1)K＝LD50(n)/LD50(1)第51頁,共83頁，2024年2月25日，星期天1．固定劑量法：一般常選用大、小鼠灌胃或腹腔注射方法進(jìn)行染毒。先求出LD50，然后選取相同條件的40只(或更多)實(shí)驗(yàn)動物，分為兩組，一為染毒組，一為對照組，每組至少20只，雌雄各半。試驗(yàn)組在1／20～l／50LD50的范圍內(nèi)選定一個劑量，每日以固定劑量、定時和相同途徑進(jìn)行染毒,試驗(yàn)期間觀察記錄每組動物死亡數(shù)。第52頁,共83頁，2024年2月25日，星期天當(dāng)試驗(yàn)組累積發(fā)生一半動物死亡即可終止試驗(yàn)。此時，計算累積總接觸劑量[LD50(n)]，根據(jù)公式計算K值，然后依表6—5進(jìn)行評價。但若接觸劑量已累積達(dá)到5個LD50劑量，也可終止試驗(yàn)。第53頁,共83頁，2024年2月25日，星期天2．劑量遞增法：

第54頁,共83頁，2024年2月25日，星期天

在試驗(yàn)期間，當(dāng)化學(xué)毒物引起動物累積死亡一半時即可終止試驗(yàn)，計算K值進(jìn)行評價。一般來說，在試驗(yàn)第2l天也可結(jié)束試驗(yàn)，因?yàn)檫@之前如果動物沒有死亡或死亡數(shù)不足一半，說明其累積劑量已達(dá)5.26LD50，即K＞5。使用本方法時要注意染毒期間定期(每4天一次)給動物稱重，按實(shí)測體重，調(diào)整化學(xué)毒物的染毒絕對量。第55頁,共83頁，2024年2月25日，星期天3．劑量固定的20天蓄積法：

它通常采用經(jīng)口灌胃染毒方式，將動物隨機(jī)分為5個組，包括陰性對照組和1/20LD50、l/10LD50、1/5LD50和1/2LD50四個劑量組，每組動物數(shù)10只，雌雄各半。每日染毒一次，連續(xù)染毒20天。觀察每組雌雄合計的死亡動物數(shù)量。第56頁,共83頁，2024年2月25日，星期天試驗(yàn)結(jié)束時根據(jù)下列標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評定：①各劑量組均無死亡，即為蓄積性不明顯；②如僅1/2LD50劑量組有死亡，其他組均無死亡，則為弱蓄積性；③如1/20LD50劑量組無死亡，其他各組間死亡數(shù)有劑量反應(yīng)關(guān)系時，則為中等蓄積性；④如1/20LD50劑量組有死亡，且有劑量反應(yīng)關(guān)系，則為強(qiáng)蓄積性。第57頁,共83頁，2024年2月25日，星期天(二)生物半減期法：生物半減期(biologicalhalf-life，t1/2)是指進(jìn)入機(jī)體的外源化合物由機(jī)體消除一半所需的時間。用毒物動力學(xué)原理描述化學(xué)毒物在機(jī)體內(nèi)的蓄積作用。t1/2以化合物在體內(nèi)的數(shù)量為基礎(chǔ)來表示蓄積性，是表示外來化合物的蓄積性的重要指標(biāo)。

第58頁,共83頁，2024年2月25日，星期天根據(jù)攝入量、攝入時間間隔（t)和t1/2

，可以估計蓄積情況。如果t>t1/2,則蓄積可能減少；反之則可能蓄積。如果t=t1/2

，也蓄積。無論化學(xué)物t1/2長短,在與它等時間間隔接觸化學(xué)物條件下，化學(xué)物都會蓄積，并且經(jīng)過6個t1/2時，蓄積達(dá)到最大值。化學(xué)物繼續(xù)進(jìn)入機(jī)體，蓄積增加幾乎為零。蓄積與清除達(dá)到平衡。蓄積極限值L(mg)=1.44×化學(xué)物吸收量（mg/d）×t1/2（d）。第59頁,共83頁，2024年2月25日，星期天t1/2測定方法：將被檢測物由靜脈注入，然后按一定時間間隔連續(xù)多次測定機(jī)體接觸受試物后試驗(yàn)動物血漿中該物質(zhì)的濃度，以時間為橫坐標(biāo)，以血漿中物質(zhì)濃度的對數(shù)值為縱坐標(biāo)繪圖，依圖求出直線的斜率ke(即速率常數(shù)），生物半減期t1/2

＝0.693/ke。生物半減期較短的物質(zhì)達(dá)到蓄積極限所需時間短，機(jī)體一旦停止接觸該物質(zhì)，也易于很快從機(jī)體消除。反之則不易消除。第60頁,共83頁，2024年2月25日，星期天（三）蓄積率及其測定蓄積率：在一定時間內(nèi)，外來化學(xué)物在體內(nèi)的蓄積量與同一期間進(jìn)入機(jī)體總量的百分比。測定方法：用兩組條件一致的動物，試驗(yàn)組先每日給予一定劑量被檢化學(xué)物，但動物不能發(fā)生死亡，以一定時間給予一定劑量后再與對照組同時分別測定該被檢物的LD50。第61頁,共83頁，2024年2月25日，星期天如果被檢化學(xué)物在體內(nèi)有蓄積性（蓄積率＞1），則由于蓄積試驗(yàn)組動物在進(jìn)行LD50測定前，體內(nèi)已蓄積一定數(shù)量，所以其LD50必定較對照組小。兩組動物之間測得的LD50之差認(rèn)為是前一時期蓄積試驗(yàn)組動物體內(nèi)的蓄積量。第62頁,共83頁，2024年2月25日，星期天計算方法：蓄積率（%）＝[（對照組LD50-蓄積試驗(yàn)組LD50）/蓄積期間給予蓄積試驗(yàn)組動物被檢物質(zhì)總量］×100%第63頁,共83頁，2024年2月25日，星期天現(xiàn)有蓄積試驗(yàn)都是以死亡為觀察毒效應(yīng)的指標(biāo)，不引起死亡的可能得出弱蓄積性的錯誤結(jié)論。如氯丁二烯。如果在蓄積毒性試驗(yàn)時選用其它指標(biāo)（如靶器官的損傷），求取ED50（n）和ED50（l），計算蓄積系數(shù)易得正確結(jié)論。第64頁,共83頁，2024年2月25日，星期天關(guān)于機(jī)體耐受性機(jī)體的耐受性：某一外來化學(xué)物反復(fù)作用于機(jī)體后，有時一些本來可以引起機(jī)體呈現(xiàn)一定劑量的效應(yīng)，卻沒有引起反應(yīng)，必須加大劑量才能使機(jī)體呈現(xiàn)預(yù)期效應(yīng)。第65頁,共83頁，2024年2月25日，星期天在蓄積試驗(yàn)結(jié)束時，將存活的動物給予一次沖擊劑量（一般用一次LD50的劑量）后統(tǒng)計動物死亡率與預(yù)先未經(jīng)化學(xué)物處理的對照組的死亡率進(jìn)行比較，以觀察動物在小劑量長期染毒情況下是否出現(xiàn)對毒物的耐受性。耐受性是蓄積性的另一種表現(xiàn)形式。蓄積、耐受性與慢性中毒之間的關(guān)系是常要進(jìn)一步研究的問題。第66頁,共83頁，2024年2月25日，星期天§3亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)一

亞慢性毒性作用：

亞慢性毒性的概念

亞慢性毒性試驗(yàn)的目的

亞慢性毒性試驗(yàn)的設(shè)計

二慢性毒性作用：

慢性毒性的概念

慢性毒性試驗(yàn)的目的

慢性毒性試驗(yàn)設(shè)計

第67頁,共83頁，2024年2月25日，星期天一、亞慢性和慢性毒性試驗(yàn)的概念、目的(一)概念：

亞慢性毒性(subchronictoxicity)是指人或?qū)嶒?yàn)動物連續(xù)接觸較長時間、較大劑量的外源化合物所引起的毒性效應(yīng)。慢性毒性(chronictoxicity)是指人或?qū)嶒?yàn)動物長期(甚至終生)反復(fù)接觸低劑量的化學(xué)毒物所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)。第68頁,共83頁，2024年2月25日，星期天（二）試驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1.確定受試物亞慢性和慢性毒性的效應(yīng)譜，對在急性及亞急性毒性試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的毒作用提供新的信息，并發(fā)現(xiàn)在急性及亞急性毒性試驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)的毒作用；

2.研究受試物亞慢性和慢性毒作用的靶器官；

第69頁,共83頁，2024年2月25日，星期天3.研究受試物亞慢性和慢性毒性劑量—反應(yīng)(效應(yīng))關(guān)系，以確定外來化合物的毒性下限，即其觀察到有害作用的最低劑量(LOAEL)和未觀察到有害作用的劑量（NOAEL），提出此受試物的安全限量參考值;第70頁,共83頁，2024年2月25日，星期天4.研究受試物亞慢性和慢性毒性損害的可逆性;5.亞慢性毒性試驗(yàn)為慢性毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計及觀察指標(biāo)選擇提供依據(jù);6.確定不同動物物種對受試物亞慢性和慢性毒效應(yīng)的差異，為將毒性研究結(jié)果外推到人提供依據(jù)。第71頁,共83頁，2024年2月25日，星期天

（一）實(shí)驗(yàn)動物選擇

亞慢性毒性試驗(yàn)

年齡：大鼠80~100g

狗8~12月小鼠10~15g數(shù)量：小動物≥20

大動物≥6性別：雌雄各半

慢性毒性試驗(yàn)?zāi)挲g：大鼠50~70g

狗<8月小鼠初斷乳數(shù)量：小動物≥40

大動物≥8性別：雌雄各半第72頁,共83頁，2024年2月25日，星期天（二）實(shí)驗(yàn)動物染毒期限：工業(yè)毒理學(xué)——3－6個月食品毒理學(xué)——6個月－1年環(huán)境毒理學(xué)——6個月－1年致癌試驗(yàn)——接近或等于動物的預(yù)期壽命第73頁,共83頁，2024年2月25日，星期天（二）實(shí)驗(yàn)動物染毒期限第74頁,共83頁，2024年2月25日，星期天

經(jīng)消化道經(jīng)呼吸道經(jīng)皮膚（三）實(shí)驗(yàn)動物染毒方式第75頁,共83頁，2024年