實驗一小液流法測定植物細胞水勢

關(guān)于實驗一小液流法測定植物細胞水勢植物生理學實驗室規(guī)則1、認真預習實驗。明確目的，掌握原理，列出步驟，提出問題。2、認真操作，仔細觀察，從實記錄。3、正確操作儀器，不亂開儀器。4、注意安全和清潔衛(wèi)生（包括值日）。5、正確處理廢物。第2頁,共33頁，2024年2月25日，星期天實驗報告要求實驗目的：簡明扼要實驗原理：簡明扼要材料：用什么？方法：實際操作過程（文字或圖示，簡潔）數(shù)據(jù)計算：原始數(shù)據(jù)，計算公式，結(jié)果。討論和分析：針對自己的結(jié)果進行，分析錯誤原因。實驗報告下周二上交。第3頁,共33頁，2024年2月25日，星期天植物生理學實驗評分標準課上：1、預習報告2、認真實驗，操作規(guī)范，實驗結(jié)果符合要求3、不遲到，不早退，積極參與衛(wèi)生清掃第4頁,共33頁，2024年2月25日，星期天課下：實驗報告評分標準l、卷面清潔，字跡工整2、語句通暢，簡明扼要，邏輯性強，表達準確，無概念錯誤3、預習報告、實驗原始記錄、實驗報告齊全4、實驗報告格式規(guī)范，重點突出5、實驗原始記錄要如實認真記錄實際操作、觀察及測定結(jié)果6、對實驗結(jié)果的討論要充分有據(jù)，論點要正確，與該實驗無關(guān)的內(nèi)容不要寫入報告中7、抄襲別人報告者0分第5頁,共33頁，2024年2月25日，星期天本學期實驗內(nèi)容與安排1、植物組織水勢的測定2、植物體內(nèi)硝酸還原酶活力的測定3、溶液培養(yǎng)與礦質(zhì)元素缺乏癥***4、光合作用的Hill反應5、凈光合速率的測定與葉綠素的提取和測定6、植物生長物質(zhì)的生理效應7、激動素對離體小麥葉片中超氧化物歧化酶活性的影響***第6頁,共33頁，2024年2月25日，星期天實驗一植物組織水勢的測定

（小液流法）第7頁,共33頁，2024年2月25日，星期天

【實驗目的】

掌握一種植物組織中水勢的測定方法。第8頁,共33頁，2024年2月25日，星期天植物細胞的水勢1.水勢（waterpotential）的概念：指每偏摩爾體積水的化學勢，是水可以用來作功的能量大小的度量，用ψw表示。ψw＝＝

：水的偏摩爾體積μw：水溶液的化學勢μw0：純水的化學勢ΔμwVwμw-μw0VwVw第9頁,共33頁，2024年2月25日，星期天偏摩爾體積溶液中水的偏摩爾體積：即在一定溫度、壓力和濃度下，1mol水在混合物（均勻體系）中所占的有效體積。1個大氣壓和25℃，1mol的水體積18ml，但在相同條件下，將1mol的水加入到大量的水和酒精等摩爾的混合物中時，這種混合物增加的體積不是18ml而是16.5ml，16.5ml就是水的偏摩爾體積。第10頁,共33頁，2024年2月25日，星期天純水的水勢(ψw0)最大ψw0=0，植物細胞的水勢都為負值。水勢的單位：帕（Pa）、巴(bar)、大氣壓(atm)。1巴=0.987大氣壓=105Pa＝0.1MPa第11頁,共33頁，2024年2月25日，星期天植物細胞水勢的組分通常認為植物細胞的水勢由3部分組成：水勢=滲透勢+襯質(zhì)勢+壓力勢

第12頁,共33頁，2024年2月25日，星期天小液流法

【實驗原理】

植物材料浸入不同濃度溶液中植物材料水勢低于溶液水勢植物材料水勢等于溶液水勢植物材料水勢高于溶液水勢材料吸水外界溶液濃度變大比重變大外界溶液濃度不變比重不變材料失水外界溶液濃度變小比重變小第13頁,共33頁，2024年2月25日，星期天浸過材料的溶液滴回同一濃度而未浸過材料的溶液中比重小的液流上浮比重不變的液流靜止比重大的液流下沉此溶液的水勢即等于所測材料的水勢第14頁,共33頁，2024年2月25日，星期天

【器材與試劑】

實驗儀器：試管、離心管、直角彎頭的毛細吸管、鑷子、打孔器（直徑0.7cm）、解剖針、移液管實驗試劑：1mol/L蔗糖溶液、甲基藍實驗材料：馬鈴薯第15頁,共33頁，2024年2月25日，星期天

【實驗步驟】

取8只試管編號，配制0.1~0.8M梯度蔗糖溶液第16頁,共33頁，2024年2月25日，星期天另取8只試管編號為實驗組，分別吸取上述溶液4ml。用打孔器打取馬鈴薯圓柱，切片，放入實驗組試管中（每管5片），放置30min，其間搖動數(shù)次；每個離心管中挑入少許甲基藍，搖勻，使溶液呈藍色。第17頁,共33頁，2024年2月25日，星期天5.用毛細吸管從實驗組離心管中吸取少量溶液，小心插入裝有相同濃度蔗糖的對照組試管的中部，緩慢從毛細吸管尖端放出一滴藍色溶液，輕輕取出滴管，觀察藍色液滴的移動方向并記錄。6.計算葉片細胞的水勢：

ψcell＝ψout＝－IcRT

第18頁,共33頁，2024年2月25日，星期天【注意事項】試管、移液管和毛細管等要洗凈烘干，移液管與毛細移液管要各個濃度專用。如只用一支則應從低濃度到高濃度依次吸取溶液。

甲基藍不宜加得過多（溶液呈稍深的藍色即可），否則將使實驗組各管中溶液的比重均加大。蔗糖溶液用前一定要搖勻，時間放久了的蔗糖溶液會分層，影響結(jié)果。釋放藍色液滴時要緩慢，防止過急擠壓沖力影響液滴移動。

第19頁,共33頁，2024年2月25日，星期天

【思考題】

如果小液滴在各對照溶液中全部上升（或下降），說明什么問題？應如何改進實驗設置？

第20頁,共33頁，2024年2月25日，星期天實驗二

植物組織滲透勢的測定（質(zhì)壁分離法）

第21頁,共33頁，2024年2月25日，星期天

一、實驗目的

觀察植物組織在不同濃度溶液中細胞質(zhì)壁分離的產(chǎn)生過程及測定植物組織滲透勢的方法。第22頁,共33頁，2024年2月25日，星期天二、實驗原理當植物組織細胞內(nèi)的汁液與其周圍的某種溶液處于滲透平衡狀態(tài)，植物細胞內(nèi)的壓力勢為零時，細胞汁液的滲透勢就等于該溶液的滲透勢。這種滲透勢相等的溶液稱為等滲溶液。該溶液的濃度稱為等滲濃度。第23頁,共33頁，2024年2月25日，星期天當用一系列梯度濃度溶液觀察細胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象時，細胞的等滲濃度將介于剛剛引起初始質(zhì)壁分離的濃度和尚不能引起質(zhì)壁分離的濃度之間的溶液濃度。代入公式即可計算出其滲透勢。第24頁,共33頁，2024年2月25日，星期天三、實驗材料洋蔥表皮第25頁,共33頁，2024年2月25日，星期天四、實驗用具顯微鏡濾紙載玻片蓋玻片鑷子刀片解剖針第26頁,共33頁，2024年2月25日，星期天五、實驗步驟切取洋蔥表皮，投入1~8號對照組試管中使之完全浸沒5~10分鐘。依次從試管中取出洋蔥表皮放載玻片上（事先滴上同樣濃度蔗糖溶液），蓋上蓋玻片于顯微鏡下觀察。確定一個引起半數(shù)以上細胞原生質(zhì)剛剛從細胞壁的角隅上分離的濃度，和不引起質(zhì)壁分離的最高濃度。第27頁,共33頁，2024年2月25日，星期天六、實驗結(jié)果第28頁,共33頁，2024年2月25日，星期天未發(fā)生質(zhì)壁分離第29頁,共33頁，2024年2月25日，星期天箭頭所示角隅處發(fā)生初始質(zhì)壁分離第30頁,共33頁，2024年2月25日，星期