T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座

第十二章T淋巴細胞

TLymphocyteT淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第1頁T細胞在胸腺中發(fā)育分化為兩種類型細胞TcThHSC骨髓淋巴樣干細胞胸腺T成熟T細胞外周淋巴器官從淋巴樣干細胞發(fā)育為成熟T細胞過程中伴隨有T細胞表面標(biāo)志一系列改變。第一節(jié)T淋巴細胞分化和發(fā)育T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第2頁胸腺骨髓淋巴樣干細胞T成熟T細胞TCR外周淋巴器官胸腺微環(huán)境1、胸腺基質(zhì)細胞（ThymicStromalCell,TSC）2、胸腺基質(zhì)細胞分泌細胞因子3、胸腺基質(zhì)細胞分泌胸腺激素T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第3頁胸腺組織結(jié)構(gòu)模式圖：皮質(zhì):大量未成熟胸腺細胞，少許胸腺上皮細胞、Mφ和DC；髓質(zhì):大量胸腺上皮細胞和疏散分布較成熟胸腺細胞及Mφ。胸腺（thymus）是T細胞分化、發(fā)育、成熟場所胸腺基質(zhì)細胞（胸腺上皮細胞、Mφ、DC及成纖維細胞）細胞外基質(zhì)、細胞因子組成，決定了T細胞分化、增殖和選擇性發(fā)育胸腺微環(huán)境。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第4頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第5頁T細胞受體（TCR）發(fā)育αβT細胞(TCR由α、β鏈組成)占Ｔ細胞總數(shù)95-99%,γδT細胞占Ｔ細胞總數(shù)1-5%,T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第6頁TCR基因結(jié)構(gòu)TCR包含兩類，分別由α、β或γ、δ鏈組成，所以與TCR相關(guān)基因群有4組，位于相同或不一樣染色體上。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第7頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第8頁基因片段TCR基因VDJCTCRα42050~701TCRβ642132TCRγ8022TCRδ4331人TCR基因片段T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第9頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第10頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第11頁T細胞在胸腺中發(fā)育胸腺中T細胞按輔助受體CD4/CD8表示分為三個階段：雙陰性階段、雙陽性階段、單陽性階段。發(fā)生事件：陽性選擇、陰性選擇發(fā)育結(jié)果：取得功效性TCR表示、本身MHC限制、本身免疫耐受。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第12頁過程

雙陰性細胞（DN）

雙陽性細胞（DP）

陽性選擇

陰性選擇

成熟單陽性細胞（SP）在此過程中，TCRβ鏈（VDJ)和α鏈(VJ)

經(jīng)過重排，表示功效性TCRαβ.取得MHC限制性取得本身免疫耐受T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第13頁

T細胞在胸腺內(nèi)陰性選擇和陽性選擇CD4+CD8+凋亡MHCIⅠ/ⅡMHCⅠ/Ⅱ不能結(jié)合中等結(jié)協(xié)力抗原肽--DC、Ф表面本身抗原肽MHCⅠ/Ⅱ初始TAgT亞群調(diào)整T記憶TT淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第14頁陽性選擇

在胸腺皮質(zhì)，CD4+CD8+（DP）TCRαβ能與胸腺上皮細胞表面MHC-I和MHC-II類分子以適當(dāng)親和力結(jié)合，被選擇繼續(xù)發(fā)育增殖。不結(jié)合或以較高親和力結(jié)合克隆去除（凋亡）。與MHC-I類分子結(jié)合，發(fā)育為CD8＋細胞；與MHC-II類分子結(jié)合，發(fā)育為CD4+細胞（SP）。陽性選擇結(jié)果使T細胞取得本身MHC限制性。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第15頁MHC-ⅠMHC-ⅡDPSP陽性選擇1.陽性選擇（positiveselection）高親和力或不能結(jié)合T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第16頁

前T細胞或胸腺細胞(DP)

結(jié)果：單陽性細胞（SP）、取得MHC限制性*與胸腺上皮細胞MHCⅠ分子結(jié)合，發(fā)育為CD8+T*不能與胸腺上皮細胞MHCⅠ/Ⅱ分子結(jié)合者發(fā)生凋亡

*與胸腺上皮細胞

MHCⅡ分子結(jié)合，發(fā)育為CD4+T5％95％T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第17頁陰性選擇

在胸腺皮髓質(zhì)交界處,DC和Mφ表面有本身抗原肽-MHC-I和本身抗原肽MHC-II類分子復(fù)合物，T細胞(SP)如能以高親和力結(jié)合本身抗原肽-MHC復(fù)合物，即發(fā)生凋亡。不結(jié)合則繼續(xù)發(fā)育成熟。陰性選擇結(jié)果使T細胞取得本身耐受性。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第18頁SP2.陰性選擇（negativeselection）(95%)5%T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第19頁

T細胞(SP)結(jié)果：

成熟SP、取得本身免疫耐受*與胸腺DC/Mφ上本身抗原肽：MHCⅠ/Ⅱ高親和力結(jié)合，被去除或誘導(dǎo)處于無能狀態(tài)*非本身反應(yīng)T繼續(xù)發(fā)育成熟T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第20頁上皮細胞DC、Mφ細胞T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第21頁在RAGs等細胞因子作用下T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第22頁

第二節(jié)T細胞表面分子T細胞表面受體：TCR-CD3復(fù)合物、細胞因子受體、病毒受體、絲裂原受體

(植物凝集素PHA受體、刀豆素ConA受體)T細胞表面抗原：CD3、CD4、CD8、CD28/CTLA-4、CD40L、LFA-1、

CD45、協(xié)同刺激分子、LFA-2（CD2）T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第23頁一、T細胞抗原受體復(fù)合物（TCR-CD3復(fù)合物）

----T細胞活化第一信號

功效：特異性識別抗原表位TCR(Tcellreceptor):T細胞抗原受體,是T細胞結(jié)合特異性抗原膜分子,由異源二聚體組成，可分為αβTCR和γδTCR兩型。屬于Ig超家族

T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第24頁TCR每條肽鏈膜外區(qū)包含一個可變區(qū)（V區(qū)）和一個恒定區(qū)（C區(qū)），其中V區(qū)識別MHC結(jié)合抗原肽表位，同時也識別本身MHC分子多態(tài)性部位。其胞漿區(qū)肽鏈很短，不能轉(zhuǎn)導(dǎo)活化信號；兩條肽鏈經(jīng)過鹽橋與CD3分子連接，形成TCR/CD3復(fù)合物?；罨盘栍蒀D3分子傳導(dǎo)至T細胞內(nèi)。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第25頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第26頁CD3分子CD3分子為五聚體跨膜分子，其肽鏈分γδεζη五種，胞內(nèi)區(qū)均含有免疫受體酪氨酸活化基序(immunoreceptortyrosine-basedactivationmotif,ITAM)-YxxL/V，能轉(zhuǎn)導(dǎo)TCR識別抗原所產(chǎn)生活化信號。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第27頁ITAM：免疫受體酪氨酸活化基序其酪氨酸殘基(Y)被PTK(蛋白酪氨酸激酶)作用后，發(fā)生磷酸化，招募并結(jié)合ZAP-70，傳遞活化信號ITIM：免疫受體酪氨酸抑制基序

酪氨酸殘基被去磷酸化后傳遞抑制信號T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第28頁CDR1CDR2CDR3T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第29頁

BCR

TCR

BCR：Igα/Igβ

TCR：CD3配體－受體相互作用（抗原－BCR）三分子復(fù)合物（MHC－抗原肽－TCR復(fù)合物）直接結(jié)合游離抗原不能與游離抗原結(jié)合可與任何蛋白質(zhì)抗原發(fā)生應(yīng)答只能與MHC－抗原肽復(fù)合物發(fā)生應(yīng)答識別構(gòu)象表位識別線性表位

BCR與TCR識別抗原比較T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第30頁CD4分子是單鏈跨膜蛋白，胞外區(qū)含有4個Ig樣結(jié)構(gòu)域，其中遠膜端2個結(jié)構(gòu)域能夠與MHCⅡ類分子β2結(jié)構(gòu)域結(jié)合。CD4分子還是HIV殼囊膜糖蛋白gp120受體，與CD4分子結(jié)合是HIV侵入并感染CD4＋T細胞或巨噬細胞機制之一。CD8分子由α和β肽鏈組成，2條肽鏈均為跨膜蛋白，由二硫鍵連接。CD8分子α和β肽鏈細胞外區(qū)各含一個Ig樣結(jié)構(gòu)域，能夠與MHCⅠ類分子α3結(jié)構(gòu)域結(jié)合。

二、TCR輔助受體：T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第31頁

二、TCR輔助受體：CD4----與APC表面MHC-II類分子結(jié)合CD8----與靶細胞表面MHC-I類分子結(jié)合功效：輔助T細胞識別抗原；參加T細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)將T細胞分為兩大類：CD4+T細胞和CD8+T細胞T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第32頁P56P56T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第33頁HIVCD4還是HIV囊膜糖蛋白gp120受體T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第34頁三、協(xié)同刺激分子第二信號（或稱協(xié)同刺激信號）由抗原提呈細胞（APC）或靶細胞表面協(xié)同刺激分子與T細胞表面對應(yīng)受體相互作用而產(chǎn)生。在協(xié)同刺激信號作用下，活化抗原特異性T細胞發(fā)生克隆擴增，并分化為效應(yīng)T細胞。協(xié)同刺激信號性質(zhì)因T細胞所處分化階段以及接觸細胞不一樣而有所不一樣。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第35頁協(xié)同刺激分子(CD58)(LFA-2)APC(B7.1/B7.2)CD40LCD40協(xié)同刺激分子T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第36頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第37頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第38頁CD28分布：成熟T細胞配體:B7分子[CD80（B7.1）/CD86（B7.2）]，表示在活化B細胞和其它APC功效：為T細胞活化提供主要第二信號

21T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第39頁CTLA-4(CD152)配體為B7；表示于活化T細胞表面；含有ITIM基序，產(chǎn)生抑制信號，終止T細胞活化T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第40頁7-3T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第41頁CD2（LFA2）：是綿羊紅細胞SRBC受體，或稱E玫瑰花環(huán)形成細胞受體。

E花環(huán)試驗可用于分離和計數(shù)T細胞。分布：大多數(shù)成熟T細胞功效：與配體LFA3（CD58）結(jié)合，增強T細胞與其它細胞粘附，促進信號傳導(dǎo)。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第42頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第43頁CD40L（CD154）:

活化T細胞表示，與B細胞CD40結(jié)合，為B細胞活化提供主要第二信號。

T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第44頁LFA-1（CD11）：

配體是ICAM-1（細胞間黏附分子）T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第45頁或CTLA-4(B7)T細胞APC12T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第46頁初始T細胞活化需要兩個細胞外信號。信號1：TCR被MHC-抗原肽觸發(fā)后產(chǎn)生；信號2：由協(xié)同刺激分子傳遞。假如缺乏：T細胞反應(yīng)下降、耐受、T細胞無能。雙信號學(xué)說T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第47頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第48頁絲裂原結(jié)合分子非特異性誘導(dǎo)靜息T細胞活化、增殖和分化，如：

植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)等是慣用T細胞絲裂原;

商陸絲裂原（PWM）可誘導(dǎo)T,B細胞活化其它表面分子細胞因子受體；FasL；MHC-抗原等絲裂原結(jié)合分子T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第49頁Section3TCellSubsets第三節(jié)T淋巴細胞亞群T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第50頁初始T細胞效應(yīng)T細胞記憶性T細胞分類γδT細胞αβT細胞依據(jù)表示TCR類型依據(jù)表示CD分子CD8+T細胞亞群CD4+T細胞依據(jù)其功效不一樣輔助性T細胞(Th)細胞毒性T細胞(CTL或Tc)調(diào)整性T細胞(Tr或treg)依據(jù)所處活化階段T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第51頁一、依據(jù)所處活化階段

1、初始T細胞：未受抗原刺激成熟T細胞。表示CD45RA和L-選凝素。參加淋巴細胞再循環(huán)，功效：識別抗原。初始T細胞效應(yīng)性T細胞+記憶T細胞2、效應(yīng)性T細胞：初始T細胞在抗原刺激下增殖、分化而成。不參加再循環(huán)，但向炎癥組織遷移，表示CD45RO。3、記憶性T細胞：介導(dǎo)再次免疫應(yīng)答。存活期長，表示CD45RO。記憶性T細胞效應(yīng)性T細胞+記憶性T細胞T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第52頁

二、依據(jù)表示TCR類型αβ+T細胞(占T細胞總數(shù)95-99%）γδ+T細胞（1-5%）T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第53頁依據(jù)表示TCR類型無γδ殺傷性活性T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第54頁

三、依據(jù)是否表示CD4或CD8分子

CD4+T細胞

CD8+T細胞

T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第55頁CD4+T細胞與CD8+T細胞比較

CD4+T細胞CD8+T細胞表型

CD2+CD3+CD4+CD8-CD2+CD3+CD8+CD4-MHC限制性

MHC-II類分子MHC-I類分子識別抗原肽

13-17AA8-10AA

Th+++-

Tc++++T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第56頁四、依據(jù)其免疫效應(yīng)功效

輔助性T細胞(helpTcell，Th)

細胞毒性T細胞(cytotoxicTcell，CTL)

調(diào)整性T細胞(regulatoryTcell，Treg)T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第57頁能與MHCII

類分子結(jié)合依據(jù)所分泌細胞因子不一樣，分為

Th1、Th2和Th17等細胞。

Th1：調(diào)整細胞免疫應(yīng)答Th2：調(diào)整體液免疫應(yīng)答Th17：參加固有免疫、炎癥反應(yīng)Th細胞(CD4+T細胞)T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第58頁能與MHC-I

類分子結(jié)合，又稱TC依據(jù)所分泌細胞因子不一樣可分為：Tc1和Tc2

CTL細胞(CD8+T細胞)（分泌CK與Th1類似）IL-4、IL-10IFN-

、IL-2Tc1Tc2（分泌CK與Th2類似）T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第59頁Section4FunctionofTCells第四節(jié)T淋巴細胞功效T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第60頁

分布：大部分分布于粘膜及粘膜下淋巴組織；

生物學(xué)功效細胞毒作用：介導(dǎo)粘膜局部細胞性免疫應(yīng)答；免疫調(diào)整作用：釋放細胞因子（IL-2、IL-3、IL-4、INF-γ、GM-CSF和TNF

促B細胞分化、產(chǎn)生抗體；活化單核-巨噬細胞；損傷粘膜修復(fù)作用：

γδT細胞表面標(biāo)志TCRγδ、多數(shù)為CD4-CD8-、少數(shù)CD8+T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第61頁

γδT細胞

1.功效特點

受非經(jīng)典MHCⅠ類分子限制

2.臨床意義

①抗感染②參加變態(tài)反應(yīng)③參加本身免疫?、芸鼓[瘤T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第62頁αβT細胞（一）CD4+T細胞、CD8+T細胞

1.CD4+T細胞

（二）調(diào)整性T細胞

2.CD8+T細胞

T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第63頁初始CD4+T細胞受到抗原刺激后，首先分化為Th0,Th0繼續(xù)分化為Th1、Th2、Th3和Th17。Th0分化：

巨噬細胞分泌IL-12、NK細胞分泌IFN-γ促進Th0向Th1方向分化.

NKT細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞分泌IL-4促進Th0向Th2方向分化。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第64頁T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第65頁CounterregulationofThcellsubsetsBalancedresponseTh2IFN-

IL-10--Th1Th2DominantTh1IL-10Th2-Th1DominantTh2Th1IFN-

-HumoralimmunityCellmediatedimmunityT淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第66頁CD4+效應(yīng)T細胞亞群功效Th1：分泌IL-2,TNF,IFN-γ，增強吞噬細胞介導(dǎo)抗感染免疫，尤其是胞內(nèi)病原體感染，引發(fā)以單個核細胞浸潤為主炎癥反應(yīng)。還可增強NK細胞、CTL細胞殺傷功效。Th2：產(chǎn)生IL-4,5,10,13。促進B細胞增殖、分化和抗體生成，所以Th2介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答，并參加超敏反應(yīng)和抗寄生蟲免疫。T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第67頁巨噬細胞趨化因子T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第68頁Th2細胞在體液免疫應(yīng)答中作用T淋巴細胞專題培訓(xùn)專家講座第69頁經(jīng)過兩種機制發(fā)揮細胞毒作用釋放穿孔素和顆粒酶（caspase10)FasL/Fa