普威綜合癥模型Snord116基因敲除小鼠中Snord115超量表達(dá)的機(jī)制初探的開題報(bào)告

普威綜合癥模型Snord116基因敲除小鼠中Snord115超量表達(dá)的機(jī)制初探的開題報(bào)告一、研究背景普威綜合癥（Prader-WilliSyndrome,PWS）是一種常見的遺傳性疾病，其主要表現(xiàn)為嬰兒期低肌張力、吃奶困難等，以及后期的強(qiáng)迫性進(jìn)食、肥胖等。隨著基因研究的深入，研究發(fā)現(xiàn)PWS是由于某些基因的表達(dá)缺陷或缺失導(dǎo)致的，其中Snord116基因?yàn)镻WS患者表型特征的關(guān)鍵基因之一。然而，研究表明Snord116基因敲除小鼠中，Snord115的表達(dá)量明顯升高，這與PWS的原因以及PWS患者的表型特征之間的關(guān)系尚不清楚。二、研究目的為了探究Snord115超量表達(dá)與PWS的發(fā)生機(jī)制之間的關(guān)系，本研究旨在通過建立Snord116敲除小鼠模型，檢測Snord115在不同時(shí)間和組織中的表達(dá)水平，并分析其可能的調(diào)控機(jī)制。三、研究內(nèi)容和方法1.建立Snord116敲除小鼠模型：采用基因編輯技術(shù)通過crispr/cas9系統(tǒng)來敲除小鼠Snord116基因。2.檢測Snord115表達(dá)水平：通過RT-qPCR技術(shù)檢測Snord115在Snord116敲除小鼠不同時(shí)間和組織中的表達(dá)水平，并與野生型小鼠進(jìn)行比較。3.分析調(diào)控機(jī)制：通過RNA-Seq技術(shù)對(duì)敲除小鼠和野生型小鼠的基因表達(dá)譜進(jìn)行比較，挖掘可能的調(diào)控機(jī)制。四、研究意義本研究旨在探究Snord115超量表達(dá)與PWS的發(fā)生機(jī)制之間的關(guān)系，有望為PWS的病理機(jī)制提供新的理解，并為其治療提供新的靶點(diǎn)和思路。此外，本研究還有助于深入了解ncRNA在基因表達(dá)調(diào)控中的作用，為未來相關(guān)研究提供參考。五、預(yù)期結(jié)果本研究預(yù)期能夠揭示Snord115超量表達(dá)與PWS的關(guān)系及其可能的調(diào)控機(jī)制。具體表現(xiàn)為：在Snord116敲除小鼠模型中，Snord115的表達(dá)量是否隨著時(shí)間和組織的變化而變化；Snord115的表達(dá)水平是否通過miRNA、lncRNA等細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制發(fā)生改變。六、研究計(jì)劃第一年：1.確定Snord116敲除小鼠模型建立方法；2.對(duì)Snord116敲除小鼠和野生型小鼠進(jìn)行基因表達(dá)譜測序；3.分析RNA-Seq數(shù)據(jù)，篩選出與Snord115表達(dá)調(diào)控相關(guān)的差異表達(dá)基因；4.通過RT-qPCR檢測Snord115的表達(dá)水平，并與RNA-Seq的數(shù)據(jù)進(jìn)行驗(yàn)證。第二年：1.采用組織病理學(xué)技術(shù)對(duì)敲除小鼠模型進(jìn)行組織學(xué)觀察，并與野生型小鼠進(jìn)行比較；2.檢測Snord115在敲除小鼠不同組織中的表達(dá)水平。3.進(jìn)一步挖掘Snord115表達(dá)調(diào)控的機(jī)制，包括轉(zhuǎn)錄因子、miRNA、lncRNA等。第三年：1.分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，總結(jié)出結(jié)論；2.撰寫學(xué)位論文并進(jìn)行答辯。七