敏健脾益腎丸的指紋圖譜研究

健脾益腎丸的指紋圖譜研究【摘要】目的：建立健脾益腎丸高效液相(HPLC)指紋圖譜的方法，為健脾益腎丸的質量控制提供科學依據(jù)。方法：采用WatersXSelectHSST3(4.6×250mm，5μm)色譜柱，以乙腈-0.1%磷酸水溶液為流動相，梯度洗脫，流速為1.0ml/min，檢測波長為220nm，柱溫為25℃。采用國家藥典委員會推薦使用的“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”軟件對10批健脾益腎丸樣品的色譜圖進行相似度評價并建立健脾益腎丸指紋圖譜。通過與單味藥材對照溶液、混合對照品溶液所得色譜峰的保留時間和紫外吸收對比，對健脾益腎丸指紋圖譜共有峰進行歸屬與指認。結果：經(jīng)過精密度、重復性、穩(wěn)定性考察，健脾益腎丸指紋圖譜標定的24個共有峰的相對保留時間RSD均小于2%。10批次的健脾益腎丸樣品的相似度均在0.9~1.0之間，符合中藥指紋圖譜的要求。對標定的24個共有峰進行歸屬，其中2、5號峰歸屬于黃芪，1、10、11、13、14號峰歸屬于丹參，3、7、8、12、15、16、18、20、21、23號峰歸屬于大黃，6、17、19、22、24號峰歸屬于炙甘草，4、9號峰歸屬于酒蓯蓉。通過對照品的指認，5號峰為毛蕊異黃酮葡萄糖苷、6號峰為甘草苷、11號峰為丹酚酸B、13號峰為丹酚酸A、15號峰為蘆薈大黃素、16號峰為大黃酸、20號峰為大黃素、21號峰為大黃酚、23號峰為大黃素甲醚。結論：本研究建立的健脾益腎丸HPLC指紋圖譜方法穩(wěn)定性佳、重復性好、可操作性強，可為健脾益腎丸的質量控制提供參考?！娟P鍵詞】健脾益腎丸；指紋圖譜；質量控制；高效液相色譜法STUDYONFINGERPRINTOFJIANPIYISHENPILLS[Abstract]Objective:ToestablishaHPLCfingerprintmethodforJianpiYishenPillsandprovidescientificbasisforthequalitycontrolofJianpiYishenPills.Method:UsingWatersXSelectHSST3(4.6×250mm,5μm)chromatographiccolumn,withacetonitrile0.1%phosphoricacidaqueoussolutionasmobilephase,gradientelution,flowspeedof1.0ml/min,detectionwavelengthof220nm,columntemperatureof25℃.ThesimilarityevaluationsystemfortraditionalChinesemedicinechromatographicfingerprintsbeingusedasaguidelinebytheNationalPharmacopoeiaCommissionwasusedtoconcludethesimilarityofthechromatogramsof10batchesofJianpiYishenPillssamplesandestablishthefingerprintofJianpiYishenPills.BycomparingtheretentiontimeandUVabsorptionofthechromatographicpeaksobtainedfromthesoleherbreferencesolutionandthemixedreferencesolution,thequotidianpeaksinthefingerprintofJianpiYishenPillswereassignedandidentified.Result:Afterinspectionofprecision,repeatability,andstability,therelativeretentiontime(RSD)ofthe24commonpeakscalibratedbythefingerprintofJianpiYishenPillswerealllessthan2%.Thesimilarityof10batchesofJianpiYishenPillssamplesisbetween0.9and1.0,whichmeetstherequirementsoftraditionalChinesemedicinefingerprint.Assignthe24commonpeakscalibrated,amongwhichpeaks2and5belongtoAstragalusmembranaceus,peaks1,10,11,13,and14belongtoSalviamiltiorrhiza,peaks3,7,8,12,15,16,18,20,21,and23belongtoRhubarb,peaks6,17,19,22,and24belongtoroastedlicorice,andpeaks4and9belongtoCistanchedeserticola.Accordingtotheidentificationofthereferencesubstance,the5thpeakisFructusAureolarisisoflavoneglucoside,the6thpeakisglycyrrhizin,the11thpeakissalvianolicacidB,the13thpeakissalvianolicacidA,the15thpeakisaloeemodin,the16thpeakisrhein,the20thpeakisemodin,the21stpeakisemodin,andthe23rdpeakisemodinmethylether.Conclusion:TheHPLCfingerprintmethodcreatedinthisstudyhasexcellentstability,repeatability,andoperability,whichcanprovidereferenceforthequalitycontrolofJianpiYishenPills.[Keywords]JianpiYishenPillsfingerprintsqualitycontrolhigh-performanceliquidchromatography目錄TOC\o"1-3"\h\u1前言 [14]，通過該系統(tǒng)不難看出10批健脾益腎丸的相似度均在中藥指紋圖譜所規(guī)定的指標0.9~1.0，符合標準，因此可以得知這10批樣品相似度很高，這10批樣品具有較高的一致性，生產(chǎn)該制劑的的工藝操作良好穩(wěn)定，生產(chǎn)質量控制穩(wěn)定，無明顯的生產(chǎn)問題。本次實驗研究在于指紋圖譜的建立，側重于鑒定和定性實驗，未進行含量測定相關實驗，之后的實驗可著重于定量問題，對健脾益腎丸進行含量測定的實驗，可以為該制劑的質量控制提供更全面的標準參考。由于該研究有對色譜圖中的24個共有色譜峰進行歸屬，并得出這24個共有色譜峰歸屬于黃芪、丹參、大黃、炙甘草、酒蓯蓉的結論，所以本研究所建立的方法還可以用于黃芪、丹參、大黃、炙甘草、酒蓯蓉五味中藥的鑒定，或可以為其他含有這五味中藥的中藥制劑的鑒定提供一定的參考數(shù)據(jù)，具有一定的參考價值。結論本研究建立了健脾益腎丸高效液相指紋圖譜的方法，經(jīng)過多重條件篩選實驗，確定具體色譜條件及溶液制備的方法，經(jīng)過方法學考察（精密度、穩(wěn)定性、重復性實驗），確認該方法穩(wěn)定性佳、重復性強、可操作性好，可以為健脾益腎丸在生產(chǎn)上的質量標準提供一定參考價值，為該制劑的質量控制提供一定科學依據(jù)。利用相似度評價軟件對10批健脾益腎丸進行相似度評價，所選取的10批健脾益腎丸相似度符合標準要求，側面反映出該制劑的生產(chǎn)工藝穩(wěn)定良好均一。參考文獻李雨彥,林韋翰,李順民.李順民治療慢性腎衰處方用藥分析[J].世界中醫(yī)藥,2020,15(02):296-300.]楊棟,李順民,李雨彥.李順民教授運用腎衰1號方治療慢性腎衰思路及驗案[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(12):3038-3040.KimYeonBoketal.AccumulationofflavonoidsandrelatedgeneexpressionsindifferentorgansofAstragalusmembranaceusBge.[J].Appliedbiochemistryandbiotechnology,2014,173(8):2076-85.姚娜,黃燕明,李雪銀等.HPLC同時測定炙黃芪配方顆粒特征圖譜及毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量[J].中國現(xiàn)藥,2019,21(06):814-816+825.GuanJiaoetal.UHPLC-MS/MSMethodforQuantifyingFangchinoline,TetrandrineandCalycosin-7-O-β-D-GlucosideofFangjiHuangqiDecoctioninRatPlasmaandItsApplicationtoaPharmacokineticStudy.[J].Journalofchromatographicscience,2022,60(5):458-464.YaoLanetal.EffectsofsalvianolicacidAandsalvianolicacidBinrenalinterstitialfibrosisviaPDGF-C/PDGFR-αsignalingpathway[J].Phytomedicine,2022,106:154414-154414.原景,杜韓,萬梅緒等.丹參有效成分及丹參類制劑抗炎藥理作用的研究進展[J].藥物評價研究,2021,44(11):2322-2332.李娜,張晨,鐘贛生等.不同品種甘草化學成分、藥理作用的研究進展及質量標志物（Q-Marker）預測分析[J].中草藥,2021,52(24):7680-7692.賈志鑫,劉力榕,張銀環(huán)等.UHPLC-FLD法測定不同產(chǎn)地大黃中6種大黃蒽醌[J].藥物評價研究,2022,45(05):926-931.李鑫,莊晨穎,董雪容等.大黃蒽醌物質研究與應用概述[J].青海草業(yè),2018,27(04):49-53.聶燕,汪瀅,趙璐等.